วิธีการสมัยใหม่ในการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวี การวินิจฉัยของ ELISA: สาระสำคัญคืออะไร, การกำหนดแอนติบอดี, ดำเนินการอย่างไรและมีผลกับโรคใดบ้าง? ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส

การวินิจฉัยทันเวลาการติดเชื้อเอชไอวีกลายเป็นมาตรการที่สำคัญอย่างยิ่ง เนื่องจากการเริ่มการรักษาตั้งแต่เนิ่นๆ สามารถกำหนดได้เป็นส่วนใหญ่ การพัฒนาต่อไปโรคและยืดอายุของผู้ป่วย ใน ปีที่ผ่านมามีความก้าวหน้าที่สำคัญในการระบุสิ่งนี้ โรคร้าย: ระบบการทดสอบแบบเก่าถูกแทนที่ด้วยระบบที่ก้าวหน้ากว่า วิธีการทดสอบก็เข้าถึงได้มากขึ้น และความแม่นยำก็เพิ่มขึ้นอย่างมาก

ในบทความนี้เราจะพูดถึงวิธีการสมัยใหม่ในการวินิจฉัยการติดเชื้อ HIV ซึ่งความรู้ที่เป็นประโยชน์ การรักษาทันเวลาปัญหานี้และการรักษาคุณภาพชีวิตตามปกติของผู้ป่วย

วิธีการวินิจฉัยเอชไอวี

ในรัสเซีย มีการดำเนินการตามขั้นตอนมาตรฐานเพื่อวินิจฉัยการติดเชื้อ HIV ซึ่งประกอบด้วยสองระดับ:

• เอลิซา ระบบทดสอบ(การวิเคราะห์แบบคัดกรอง);
• อิมมูโนล็อตติง (IB)

สามารถใช้วิธีอื่นในการวินิจฉัยได้:

• การทดสอบอย่างรวดเร็ว

ระบบทดสอบ ELISA

ในระยะแรกของการวินิจฉัย การตรวจคัดกรอง (ELISA) ใช้เพื่อตรวจหาการติดเชื้อ HIV ซึ่งใช้โปรตีนของ HIV ที่สร้างขึ้นในห้องปฏิบัติการที่จับแอนติบอดีจำเพาะที่ผลิตในร่างกายเพื่อตอบสนองต่อการติดเชื้อ หลังจากทำปฏิกิริยากับรีเอเจนต์ (เอนไซม์) ของระบบทดสอบ สีของตัวบ่งชี้จะเปลี่ยนไป จากนั้น การเปลี่ยนสีเหล่านี้จะถูกประมวลผลโดยใช้อุปกรณ์พิเศษ ซึ่งเป็นตัวกำหนดผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ที่ดำเนินการ

การทดสอบ ELISA ดังกล่าวสามารถแสดงผลลัพธ์ได้ภายในไม่กี่สัปดาห์หลังจากมีการติดเชื้อ HIV การทดสอบนี้ไม่ได้ระบุการมีอยู่ของไวรัส แต่ตรวจจับการผลิตแอนติบอดีต่อไวรัส บางครั้งในร่างกายมนุษย์ การผลิตแอนติบอดีต่อเอชไอวีจะเริ่มขึ้นหลังจากผ่านไป 2 สัปดาห์ของการติดเชื้อ แต่ในคนส่วนใหญ่ แอนติบอดีต่อเอชไอวีจะเกิดขึ้นมากกว่านั้น ภายหลังหลังจากผ่านไป 3-6 สัปดาห์

การทดสอบ ELISA มีทั้งหมดสี่รุ่นซึ่งมีความไวที่แตกต่างกัน ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา มีการใช้ระบบการทดสอบรุ่นที่สามและสี่มากขึ้น ซึ่งใช้เปปไทด์สังเคราะห์หรือโปรตีนรีคอมบิแนนท์ และมีความจำเพาะและความแม่นยำมากขึ้น สามารถใช้เพื่อวินิจฉัยการติดเชื้อ HIV ติดตามความชุกของ HIV และรับรองความปลอดภัยในระหว่างการทดสอบ บริจาคเลือด- ความแม่นยำของระบบทดสอบ ELISA เจนเนอเรชั่นที่ 3 และ IV คือ 93-99% (การทดสอบที่ผลิตในยุโรปตะวันตกมีความละเอียดอ่อนมากกว่า - 99%)

ในการทำการทดสอบ ELISA จะต้องนำเลือด 5 มล. จากหลอดเลือดดำของผู้ป่วย ต้องผ่านไปอย่างน้อย 8 ชั่วโมงระหว่างมื้อสุดท้ายและการวิเคราะห์ (โดยปกติจะดำเนินการในตอนเช้าขณะท้องว่าง) ขอแนะนำให้ทำการทดสอบดังกล่าวไม่ช้ากว่า 3 สัปดาห์หลังการติดเชื้อที่ต้องสงสัย (เช่น หลังจากการมีเพศสัมพันธ์โดยไม่มีการป้องกันกับคู่นอนใหม่)

ผลการตรวจ ELISA จะได้รับภายใน 2-10 วัน:

• ผลลัพธ์เชิงลบ: บ่งชี้ว่าไม่มีการติดเชื้อ HIV และไม่จำเป็นต้องติดต่อผู้เชี่ยวชาญ
• ผลลบลวง: อาจสังเกตได้บน ระยะแรกการติดเชื้อ (นานถึง 3 สัปดาห์) ด้วย ช่วงปลายโรคเอดส์ที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องอย่างรุนแรงและการเตรียมเลือดที่ไม่เหมาะสม
• ผลบวกลวง: สามารถสังเกตได้ในบางโรคและในกรณีที่เตรียมเลือดไม่เหมาะสม
• ผลลัพธ์ที่เป็นบวก: บ่งบอกถึงการติดเชื้อ HIV ต้องทำ IB และผู้ป่วยติดต่อผู้เชี่ยวชาญที่ศูนย์เอดส์

เหตุใดการทดสอบ ELISA จึงให้ผลบวกลวงได้

ผลการตรวจ HIV ELISA ที่เป็นเท็จอาจเกิดขึ้นได้เนื่องจากการประมวลผลของเลือดที่ไม่เหมาะสม หรือในผู้ป่วยที่มีภาวะและโรคต่อไปนี้:

• มัลติเพิล มัยอิโลมา;
• โรคติดเชื้อที่เกิดจากไวรัส Epstein-Barr;
• สถานะหลังจาก;
• โรคแพ้ภูมิตัวเอง
• กับภูมิหลังของการตั้งครรภ์
• สภาพหลังการฉีดวัคซีน

ด้วยเหตุผลที่อธิบายไว้ข้างต้น อาจมีแอนติบอดีที่ทำปฏิกิริยาข้ามที่ไม่จำเพาะเจาะจงในเลือด ซึ่งการผลิตไม่ได้ถูกกระตุ้นโดยการติดเชื้อเอชไอวี

ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา ความถี่ของผลลัพธ์บวกลวงลดลงอย่างมีนัยสำคัญเนื่องจากการใช้ระบบการทดสอบเจนเนอเรชั่นที่ 3 และ 4 ซึ่งมีเปปไทด์และโปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่ไวกว่า (สังเคราะห์โดยใช้ พันธุวิศวกรรมในหลอดทดลอง) หลังจากเริ่มใช้การทดสอบ ELISA ดังกล่าว ความถี่ของผลบวกลวงลดลงอย่างมีนัยสำคัญคือประมาณ 0.02-0.5%

ผลบวกลวงไม่ได้หมายความว่าบุคคลนั้นติดเชื้อเอชไอวี ในกรณีเช่นนี้ WHO แนะนำให้ทำการทดสอบ ELISA อีกครั้ง (จำเป็นต้องมีการสร้าง IV)

เลือดของผู้ป่วยจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการอ้างอิงหรือห้องปฏิบัติการอนุญาโตตุลาการที่มีเครื่องหมาย "ทำซ้ำ" และทดสอบโดยใช้ระบบการทดสอบ ELISA รุ่น IV หากผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ใหม่เป็นลบ ผลลัพธ์แรกจะถือว่าผิดพลาด (ผลบวกลวง) และจะไม่ดำเนินการ IS หากผลเป็นบวกหรือน่าสงสัยในระหว่างการทดสอบครั้งที่สอง ผู้ป่วยจะต้องเข้ารับการตรวจ IB หลังจากผ่านไป 4-6 สัปดาห์เพื่อยืนยันหรือปฏิเสธการติดเชื้อ HIV

ซับภูมิคุ้มกัน

การวินิจฉัยขั้นสุดท้ายของการติดเชื้อเอชไอวีสามารถทำได้หลังจากผลบวกเท่านั้น ภูมิคุ้มกันบกพร่อง(ไอบี). ในการดำเนินการนี้จะใช้แถบไนโตรเซลลูโลสซึ่งใช้โปรตีนของไวรัส

การเก็บตัวอย่างเลือดสำหรับ IB ดำเนินการจากหลอดเลือดดำ จากนั้นจะผ่านกระบวนการพิเศษและโปรตีนที่มีอยู่ในซีรั่มจะถูกแยกออกเป็นเจลพิเศษตามประจุและน้ำหนักโมเลกุล (การจัดการจะดำเนินการโดยใช้อุปกรณ์พิเศษภายใต้อิทธิพลของสนามไฟฟ้า) แถบไนโตรเซลลูโลสถูกนำไปใช้กับเจลเซรั่มในเลือดและทำการซับ (“การซับ”) ในห้องพิเศษ แถบดังกล่าวได้รับการประมวลผล และหากวัสดุที่ใช้มีแอนติบอดีต่อเชื้อ HIV แถบเหล่านั้นจะจับกับแถบแอนติเจนบน IB และปรากฏเป็นเส้น

IB จะถูกพิจารณาว่าเป็นบวกหาก:

• ตามเกณฑ์ของ American CDC - มีสองหรือสามบรรทัด gp41, p24, gp120/gp160 บนแถบ;
• ตามเกณฑ์ของ American FDA แถบนี้มีสองบรรทัด p24, p31 และบรรทัด gp41 หรือ gp120/gp160

ใน 99.9% ของกรณี ผล IB เป็นบวกบ่งชี้ว่ามีการติดเชื้อ HIV

หากไม่มีเส้น IB จะเป็นลบ

เมื่อระบุบรรทัดด้วย gr160, gr120 และ gr41 IB จะเป็นที่น่าสงสัย ผลลัพธ์นี้อาจเกิดขึ้นเมื่อ:

• โรคมะเร็ง
• การตั้งครรภ์;
• การถ่ายเลือดบ่อยครั้ง

ในกรณีเช่นนี้ ขอแนะนำให้ทำการศึกษาซ้ำโดยใช้ชุดอุปกรณ์จากบริษัทอื่น หากหลังจาก IB เพิ่มเติมแล้ว แต่ผลลัพธ์ยังคงเป็นที่น่าสงสัย จำเป็นต้องมีการสังเกตเป็นเวลาหกเดือน (IB จะดำเนินการทุกๆ 3 เดือน)

ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส

การทดสอบ PCR สามารถตรวจจับ RNA ของไวรัสได้ ความไวของมันค่อนข้างสูงและสามารถตรวจพบการติดเชื้อ HIV ได้ภายใน 10 วันหลังการติดเชื้อ ในบางกรณี PCR อาจให้ผลบวกลวง เนื่องจากความไวสูงอาจตอบสนองต่อแอนติบอดีต่อการติดเชื้ออื่นๆ ด้วยเช่นกัน

เทคนิคการวินิจฉัยนี้มีราคาแพงและต้องใช้อุปกรณ์พิเศษและผู้เชี่ยวชาญที่มีคุณสมบัติสูง เหตุผลเหล่านี้ไม่สามารถทำการทดสอบประชากรจำนวนมากได้

PCR ใช้ในกรณีต่อไปนี้:

• เพื่อตรวจหาเชื้อเอชไอวีในทารกแรกเกิดที่เกิดจากมารดาที่ติดเชื้อเอชไอวี
• เพื่อตรวจหาเชื้อเอชไอวีในช่วง "หน้าต่าง" หรือในกรณีที่สงสัย IB
• เพื่อควบคุมความเข้มข้นของเอชไอวีในเลือด
• เพื่อศึกษาผู้บริจาคโลหิต

การตรวจ PCR เพียงอย่างเดียวไม่ได้วินิจฉัยเอชไอวี แต่ดำเนินการในลักษณะ a วิธีการเพิ่มเติมการวินิจฉัยเพื่อแก้ไขสถานการณ์ที่ขัดแย้ง

วิธีการด่วน

นวัตกรรมอย่างหนึ่งในการวินิจฉัยเอชไอวีคือการตรวจแบบรวดเร็วซึ่งสามารถประเมินผลได้ภายใน 10-15 นาที ผลลัพธ์ที่มีประสิทธิภาพและแม่นยำที่สุดได้มาจากการทดสอบอิมมูโนโครมาโตกราฟีตามหลักการไหลของเส้นเลือดฝอย เป็นแถบพิเศษที่ใช้กับเลือดหรือของเหลวทดสอบอื่นๆ (น้ำลาย ปัสสาวะ) หากมีแอนติบอดีต่อเอชไอวีหลังจากผ่านไป 10-15 นาทีการทดสอบจะมีแถบสีและแถบควบคุมปรากฏขึ้น - ให้ผลลัพธ์ที่เป็นบวก หากผลลัพธ์เป็นลบ จะแสดงเฉพาะแถบควบคุมเท่านั้น

เช่นเดียวกับการทดสอบ ELISA ผลลัพธ์ของการทดสอบอย่างรวดเร็วจะต้องได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์ของ IB หลังจากนี้ก็สามารถวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีได้

มีชุดทดสอบที่บ้านแบบด่วนจำหน่าย การทดสอบ OraSure Technologies1 (สหรัฐอเมริกา) ได้รับการอนุมัติจาก FDA มีวางจำหน่ายที่เคาน์เตอร์ และสามารถใช้เพื่อตรวจหาเชื้อ HIV หลังการทดสอบหากผลเป็นบวกแนะนำให้ผู้ป่วยเข้ารับการตรวจที่ศูนย์เฉพาะทางเพื่อยืนยันการวินิจฉัย

การทดสอบอื่น ๆ สำหรับ ใช้ในบ้านยังไม่ได้รับการอนุมัติจาก FDA และผลลัพธ์อาจเป็นที่น่าสงสัยมาก

แม้ว่าการทดสอบอย่างรวดเร็วจะมีความแม่นยำต่ำกว่าการทดสอบ ELISA รุ่น IV แต่ก็มีการใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการทดสอบเพิ่มเติมของประชากร

การทดสอบเพื่อตรวจหาการติดเชื้อเอชไอวีสามารถทำได้ที่คลินิก โรงพยาบาลเขตกลาง หรือศูนย์โรคเอดส์เฉพาะทาง ในดินแดนของรัสเซีย จะดำเนินการอย่างเป็นความลับหรือไม่เปิดเผยตัวตน ผู้ป่วยแต่ละรายสามารถวางใจในการรับการรักษาพยาบาลหรือ การให้คำปรึกษาทางจิตวิทยาก่อนหรือหลังการวิเคราะห์ คุณจะต้องจ่ายค่าตรวจเอชไอวีในเชิงพาณิชย์เท่านั้น สถาบันการแพทย์, และใน คลินิกของรัฐและโรงพยาบาลที่ให้บริการโดยไม่คิดค่าใช้จ่าย

อ่านเกี่ยวกับวิธีการติดเชื้อ HIV และความเชื่อผิดๆ เกี่ยวกับความเป็นไปได้ในการติดเชื้อ

คำอธิบาย

การตระเตรียม

ข้อบ่งชี้

การตีความผลลัพธ์

คำอธิบาย

วิธีการกำหนด การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA)

วัสดุที่อยู่ระหว่างการศึกษาเซรั่มเลือด

สามารถเยี่ยมชมบ้านได้

การตรวจหาแอนติบอดีต่อเอชไอวีประเภท 1 และ 2 และแอนติเจน HIV p24 การทดสอบเชิงคุณภาพ

ความสนใจ. ในกรณีที่เกิดปฏิกิริยาเชิงบวกและน่าสงสัย ระยะเวลาในการออกผลสามารถขยายได้เป็น 10 วันทำการ HIV (ไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์) ซึ่งเป็นสาเหตุของโรคเอดส์ (กลุ่มอาการภูมิคุ้มกันบกพร่องที่ได้มา) อยู่ในตระกูลรีโทรไวรัส ติดต่อจากคนสู่คนโดยใช้เข็มและกระบอกฉีดยาที่ปนเปื้อน การบริหารทางหลอดเลือดดำยาเสพติดหรือ ขั้นตอนการรักษา, ที่ การติดต่อทางเพศทั้งรักต่างเพศและรักร่วมเพศ การแพร่กระจายของไวรัสสามารถเกิดขึ้นได้ผ่านการถ่ายเลือด เลือดที่ติดเชื้อและผลิตภัณฑ์ การบริจาคอวัยวะหรือน้ำอสุจิ บุคลากรทางการแพทย์- เมื่อได้รับบาดเจ็บจากเข็มหรือเครื่องมือที่ติดเชื้อ การติดเชื้อเอชไอวีสามารถเกิดขึ้นได้จากการแพร่เชื้อจากแม่ที่ติดเชื้อสู่ลูก ( เส้นทางแนวตั้ง) แม้ว่าวิธีการป้องกันสมัยใหม่โดยใช้การรักษาด้วยยาต้านไวรัส แต่หากปฏิบัติตามคำแนะนำทั้งหมด ก็สามารถลดความเสี่ยงนี้ให้เหลือน้อยที่สุดได้

กระบวนการปฏิสัมพันธ์ของไวรัสกับเซลล์ประกอบด้วยหลายขั้นตอน: การจับของไวรัสกับเซลล์, การปล่อยไวรัสออกจากซอง, การแทรกซึมเข้าไปในไซโตพลาสซึม, การสังเคราะห์ DNA โดยใช้ RNA ของไวรัส, การรวม DNA ของไวรัสเข้ากับจีโนมของ เซลล์เจ้าบ้าน หลังจากนี้จะเริ่มแล้ว ระยะแฝงการติดเชื้อ ในสถานะนี้ DNA ของไวรัสสามารถดำรงอยู่ได้ระยะหนึ่งโดยไม่แสดงกิจกรรมและไม่ส่งผลกระทบต่อชีวิตของเซลล์เจ้าบ้าน แม้ว่าจะไม่มีการแสดงออกของโปรตีนของไวรัส แต่ก็ไม่มีการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อไวรัส แอนติบอดีต่อเอชไอวีซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกาย จะปรากฏขึ้นหลังจากการกระตุ้น DNA ของไวรัสและจุดเริ่มต้นของการแพร่พันธุ์ของไวรัส ระยะเวลาของระยะแฝงขึ้นอยู่กับปัจจัยหลายประการ รวมถึงลักษณะทางพันธุกรรมของแต่ละบุคคลของสิ่งมีชีวิตด้วย

แอนติบอดีต่อเอชไอวีอาจปรากฏขึ้นตั้งแต่สัปดาห์ที่สองหลังการติดเชื้อ เนื้อหาจะเพิ่มขึ้นภายใน 2-4 สัปดาห์และยังคงอยู่เป็นเวลาหลายปี ผู้ติดเชื้อ 90-95% จะปรากฏในช่วงสามเดือนแรกหลังการติดเชื้อ 5-9% ในช่วง 3-6 เดือน 0.5-1% ในภายหลัง

ในช่วงสัปดาห์แรกของการติดเชื้อ แม้กระทั่งก่อนการปรากฏตัวของแอนติบอดีต่อไวรัส (เช่น ก่อนการเปลี่ยนแปลงของซีโรคอนเวอร์ชัน) สามารถตรวจพบแอนติเจนของ HIV รวมถึงโปรตีน p24 capsid ในตัวอย่างซีรัมหรือพลาสมาได้ ต่อมาหลังจาก seroconversion ก็มักจะตรวจไม่พบ

ระบบการทดสอบแบบรวมรุ่นที่ 4 ซึ่งรวมถึงการทดสอบ HIV Ag/Ab Combo (สถาปนิก, Abbott) ตรวจจับทั้งแอนติบอดีต่อ HIV ประเภท 1 และ 2 และแอนติเจน HIV p24 ซึ่งช่วยให้ตรวจพบการติดเชื้อได้ตั้งแต่เนิ่นๆ ลักษณะพิเศษของการทดสอบคัดกรองที่ใช้ในห้องปฏิบัติการ INVITRO เพื่อตรวจหาการติดเชื้อเอชไอวี ได้แก่ ความจำเพาะสูงของการศึกษา (> 99.5%); การทดสอบมีความไว 100% ต่อลักษณะเฉพาะของแอนติบอดีในช่วงเวลาของการเปลี่ยนซีโรคอนเวอร์ชัน และความไวของการทดสอบต่อแอนติเจน p24 คือประมาณ 18 พิโกกรัม/มิลลิลิตร

ขั้นตอนการดำเนินการตรวจทางห้องปฏิบัติการสำหรับเอชไอวีได้รับการควบคุมอย่างเข้มงวดโดยคำสั่งของกระทรวงสาธารณสุขของสหพันธรัฐรัสเซียและรวมถึงขั้นตอนของการศึกษาแบบคัดกรอง (คัดเลือก) ของการมีอยู่ของแอนติบอดีต่อเอชไอวีโดยใช้การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) วิธีการที่ได้รับการอนุมัติให้ใช้และขั้นตอนการตรวจสอบ (ยืนยัน) การศึกษาโดยละเอียดเพิ่มเติมในห้องปฏิบัติการของศูนย์เอดส์ประจำเมือง ควรสังเกตว่าแม้แต่ระบบ ELISA คัดกรองที่ดีที่สุดก็ไม่รับประกันความจำเพาะ 100% นั่นคือมีความเป็นไปได้ที่จะได้รับผลลัพธ์ที่ไม่เฉพาะเจาะจงและเป็นผลบวกลวงที่เกี่ยวข้องกับลักษณะของซีรั่มในเลือดของผู้ป่วย ดังนั้นผลบวกของการตรวจคัดกรอง ELISA อาจไม่ได้รับการยืนยันในการตรวจยืนยัน หลังจากนั้นผู้ป่วยจะได้รับผลลบหรือไม่ทราบแน่ชัด หากผลการศึกษาเพื่อยืนยันไม่แน่นอน ควรทำการทดสอบซ้ำเมื่อเวลาผ่านไป 2-3 สัปดาห์

การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ การติดเชื้อเอชไอวีเด็กที่เกิดจากมารดาที่ติดเชื้อ HIV มีลักษณะเฉพาะของตนเอง แอนติบอดีของมารดาต่อเอชไอวี (ระดับ IgG) สามารถไหลเวียนในเลือดได้นานถึง 18 เดือนนับตั้งแต่เกิด การไม่มีแอนติบอดีต่อเอชไอวีในทารกแรกเกิดไม่ได้หมายความว่าไวรัสไม่สามารถทะลุผ่านอุปสรรคของรกได้ เด็กของมารดาที่ติดเชื้อ HIV จะต้องได้รับการตรวจวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการภายใน 36 เดือนหลังคลอด

การตระเตรียม

การฝึกอบรมพิเศษไม่จำเป็นต้องใช้. ขอแนะนำให้เจาะเลือดไม่ช้ากว่า 4 ชั่วโมงหลังจากนั้น นัดสุดท้ายอาหาร. คำแนะนำทั่วไปในการเตรียมตัวสำหรับการวิจัยสามารถพบได้ ขอแนะนำให้ทำการทดสอบเพื่อตรวจหาแอนติเจนและแอนติบอดีต่อเอชไอวีไม่ช้ากว่าสองสัปดาห์หลังจากการติดเชื้อที่เป็นไปได้ โดยมีการทดสอบซ้ำหลังจากสามถึงหกสัปดาห์ในกรณีที่ผลลบ การสมัครเพื่อการวิจัยที่ INVITRO LLC นั้นกรอกโดยใช้หนังสือเดินทางหรือเอกสารแทนที่ (บัตรตรวจคนเข้าเมือง, การลงทะเบียนชั่วคราว ณ สถานที่อยู่อาศัย, บัตรประจำตัวเจ้าหน้าที่ทหาร, ใบรับรองจากสำนักงานหนังสือเดินทางในกรณีที่หนังสือเดินทางสูญหาย, บัตรลงทะเบียนจาก โรงแรม). เอกสารที่นำเสนอจะต้องมีข้อมูลเกี่ยวกับการลงทะเบียนชั่วคราวหรือถาวรในสหพันธรัฐรัสเซียและรูปถ่าย ในกรณีที่ไม่มีหนังสือเดินทาง (เอกสารแทนที่) ผู้ป่วยมีสิทธิ์กรอกใบสมัครโดยไม่ระบุชื่อเพื่อบริจาควัสดุชีวภาพ ในระหว่างการตรวจสอบโดยไม่ระบุชื่อ ใบสมัคร และตัวอย่างวัสดุชีวภาพที่ได้รับจากลูกค้า จะมีการกำหนดหมายเลขให้เฉพาะผู้ป่วยและเจ้าหน้าที่ทางการแพทย์ที่สั่งซื้อเท่านั้นที่ทราบ - ผลการศึกษาที่ดำเนินการโดยไม่เปิดเผยตัวตนไม่สามารถส่งเข้ารับการรักษาในโรงพยาบาล การตรวจทางวิชาชีพ และไม่ต้องลงทะเบียนใน ORUIB

บ่งชี้ในการใช้งาน

• ต่อมน้ำเหลืองโตมากกว่าสองบริเวณ
• เม็ดเลือดขาวกับ lymphopenia
• เหงื่อออกตอนกลางคืน
• น้ำหนักลดกะทันหันโดยไม่ทราบสาเหตุ
• ท้องเสียนานกว่าสามสัปดาห์โดยไม่ทราบสาเหตุ
• ไข้ไม่ทราบสาเหตุ
• การวางแผนการตั้งครรภ์
• การเตรียมตัวก่อนการผ่าตัด การพักรักษาตัวในโรงพยาบาล
• การตรวจพบการติดเชื้อต่อไปนี้หรือการรวมกัน: วัณโรค, ทอกโซพลาสโมซิสอย่างชัดแจ้ง, การติดเชื้อเริมบ่อยครั้ง, เชื้อราแคนดิดา อวัยวะภายใน, โรคงูสวัดโรคประสาทซ้ำที่เกิดจาก mycoplasmas, pneumocystis หรือโรคปอดบวม Legionella.
• Kaposi's sarcoma ในวัยเด็ก
• การติดต่อทางเพศแบบไม่เป็นทางการ

การตีความผลลัพธ์

การตีความผลการวิจัยประกอบด้วยข้อมูลของแพทย์ที่เข้ารับการรักษาและไม่ใช่การวินิจฉัย ข้อมูลในส่วนนี้ไม่ควรใช้เพื่อการวินิจฉัยตนเองหรือการรักษาตนเอง การวินิจฉัยที่แม่นยำแพทย์จะเป็นผู้กำหนดโดยใช้ทั้งผลการตรวจนี้และข้อมูลที่จำเป็นจากแหล่งอื่น เช่น ประวัติการรักษา ผลการตรวจอื่นๆ เป็นต้น

หน่วยการวัดในห้องปฏิบัติการอิสระ INVITRO: การทดสอบเชิงคุณภาพ รูปแบบการนำเสนอผลลัพธ์: ในกรณีที่ไม่มีแอนติบอดีต่อแอนติเจน HIV 1 และ 2 และ p24 คำตอบคือ "ลบ" หากตรวจพบแอนติบอดีต่อเอชไอวีหรือแอนติเจนในการตรวจคัดกรองการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ตัวอย่างซีรัมจะถูกส่งไปเพื่อยืนยันโดยอิมมูโนบลูตไปยังศูนย์เอดส์ในเมือง ซึ่งจะตรวจสอบผลลัพธ์ที่เป็นบวกและไม่แน่นอน

ผลลัพธ์ที่เป็นบวก:

1. การติดเชื้อเอชไอวี
2. ผลบวกลวงที่ต้องทำซ้ำหรือ การวิจัยเพิ่มเติม*);
3. การศึกษานี้ไม่ได้ให้ข้อมูลในเด็กอายุต่ำกว่า 18 เดือนที่เกิดจากมารดาที่ติดเชื้อ HIV

*ความจำเพาะของระบบการทดสอบคัดกรอง แอนติบอดีต่อ HIV 1 และ 2 และแอนติเจนของ HIV 1 และ 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott) ตามการประมาณการของผู้ผลิตรีเอเจนต์ คือประมาณ 99.6% ทั้งในประชากรทั่วไปและ ผู้ป่วยกลุ่มที่อาจเกิดการรบกวน (การติดเชื้อ HBV, HCV, หัดเยอรมัน, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E.coli, Chl.trach. ฯลฯ , โรคภูมิต้านตนเอง (รวมถึง โรคข้ออักเสบรูมาตอยด์, การมีอยู่ของแอนติบอดีต่อต้านนิวเคลียร์), การตั้งครรภ์, ระดับที่เพิ่มขึ้น IgG, IgM, โมโนโคลนอลแกมโมพาธี, การฟอกเลือดด้วยเครื่องไตเทียม, การถ่ายเลือดหลายครั้ง)

การติดเชื้อเอชไอวีจัดเป็นโรคที่ไม่สามารถควบคุมได้เนื่องจากขาดวิธีการ การป้องกันเฉพาะและประสิทธิผลของการบำบัดไม่เพียงพอ ดังนั้นเพื่อการควบคุม สถานการณ์ทางระบาดวิทยาสำหรับการติดเชื้อเอชไอวีจะใช้การตรวจคัดกรองเป็นหลัก การศึกษาวินิจฉัย- สถานที่ชั้นนำในบรรดาวิธีการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีนั้นถูกครอบครองโดยการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) ซึ่งทำให้สามารถระบุเครื่องหมายทางซีรั่มวิทยาของเชื้อโรคในบุคคลที่ตรวจได้ ของโรคนี้.

รายงานฉบับนี้นำเสนอผลการตรวจแอนติบอดีต่อเชื้อ HIV ในเลือด จำนวน 40,823 ราย ได้แก่ ผู้ป่วยในคลินิกฝากครรภ์ คลินิก โรงพยาบาลในเมือง ตลอดจน ศูนย์การแพทย์เชี่ยวชาญการตรวจและรักษาผู้ป่วยที่มีความเสี่ยง (ผู้ติดยา ผู้ป่วยไวรัสตับอักเสบบี ซี และ กามโรค- การศึกษาดำเนินการในปี 2548 ในห้องปฏิบัติการภูมิคุ้มกันวิทยาของสถาบันวิจัยสูติศาสตร์และนรีเวชวิทยาซึ่งตั้งชื่อตาม ก่อน. Ott RAMS ซึ่งมีประสบการณ์มากกว่า 15 ปีในการใช้วิธีการ ELISA ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อต่างๆ

สำหรับการตรวจตัวอย่างซีรั่มในเลือดเบื้องต้น เราใช้ระบบการทดสอบ “CombiBest anti-HIV-1+2” (ZAO “Vector-Best”, Novosibirsk) ซึ่งตรวจจับแอนติบอดีจำเพาะรวมต่อ HIV-1 และ HIV-1 ใน ตรวจสอบตัวอย่างซีรัมหรือพลาสมาของมนุษย์ 2 (อิมมูโนโกลบูลินคลาส A, G และ M) ในชุดตรวจวินิจฉัยนี้ โปรตีนรีคอมบิแนนท์เอชไอวีถูกนำมาใช้ทั้งในการตรึงในหลุมของแผ่นเปลือกโลกและในรูปแบบของคอนจูเกตที่มีมะรุมเปอร์ออกซิเดส ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ซีรั่มได้รับการประเมินตามคำแนะนำของคำแนะนำสำหรับระบบทดสอบ: ตัวอย่างที่ทดสอบถือว่ามีค่าเป็นลบ (ไม่มีแอนติบอดีต่อ HIV-1 และ HIV-2) ความหนาแน่นของแสง (OD) ซึ่งอยู่ใน ELISA ไม่เกินค่า OPcrit

เมื่อตรวจคัดกรองในห้องปฏิบัติการ ผล ELISA เป็นลบสำหรับตัวอย่างซีรั่ม 40,222 (98.5%) จากตัวอย่างซีรั่ม 40,823 ตัวอย่าง และตัวอย่างที่ทดสอบ 601 (1.5%) ถือว่าเป็นบวกในช่วงแรก จากผลการวิเคราะห์ซ้ำของซีรั่ม 601 แต่ละซีราที่ซ้ำกัน (สองหลุมของเพลต) ในวันถัดไป ตัวอย่าง 440 รายการ (73.2%) ถูกกำหนดว่าเป็นบวก และ 161 รายการ (26.8%) ถูกกำหนดให้เป็นลบ ตามคำแนะนำของกระทรวงสาธารณสุขและการพัฒนาสังคม ซีรั่มที่มีผลการตรวจคัดกรองเชิงบวก 440 รายการถูกแช่แข็งและถ่ายโอนสำหรับการศึกษาเพื่อยืนยันเพิ่มเติมไปยังสำนักงานให้คำปรึกษาและวินิจฉัยของห้องปฏิบัติการอ้างอิงของโรงพยาบาลหมายเลข 30 ที่ตั้งชื่อตาม เอส.พี. บอตคิน่า. การศึกษาเหล่านี้ดำเนินการโดยใช้ระบบทดสอบอิมมูโนเอ็นไซม์ “EKOlab-Vironostika HIV 1.2 Ag/Ab” (“EKOlab”, Elektrogorsk), “Genscreen Plus” เอชไอวี Ag-Ab” (“BioRad”, USA) รวมถึงชุดอุปกรณ์สำหรับการสร้างภูมิคุ้มกันบกพร่อง ผลการวิเคราะห์ 440 ซีรั่มในการทดสอบเพื่อยืนยันนำไปสู่ข้อสรุปว่าตัวอย่าง 323 (73.4%) เป็นบวก และ 102 (23.2%) เป็นลบ สำหรับตัวอย่างที่ทดสอบ 15 ตัวอย่าง (3.4%) ได้ผลลัพธ์การวิเคราะห์ที่ไม่แน่นอน

ควรสังเกตว่าค่า OD ที่ได้รับในห้องปฏิบัติการของเราในระหว่างการทดสอบครั้งแรกโดยใช้ระบบทดสอบ CombiBest anti-HIV-1+2 สำหรับ 314 (97.2%) ของซีรั่มบวก 323 เหล่านี้อยู่ในช่วง 0.900 ถึง 1.780 และสำหรับ 9 ตัวอย่าง (2.8%) – 0.500–0.900 ค่า OD ที่ได้รับจากการคัดกรอง 102 ซีรั่มลบสำหรับ 52 ตัวอย่าง (51%) อยู่ในช่วง 0.195 ถึง 0.400; สำหรับตัวอย่าง 40 (39.2%) – 0.401–0.800; 10 ตัวอย่าง (9.8%) – มากกว่า 0.800

ดังนั้นจากการดำเนินงานพบว่าการตรวจซีรั่มในเลือดเบื้องต้นเพื่อดูเครื่องหมายทางซีรัมวิทยาของการติดเชื้อ HIV โดยใช้ระบบทดสอบ CombiBest anti-HIV-1+2 นั้นมีประสิทธิภาพสูง ผลการคัดกรองที่เป็นบวกได้รับการยืนยันโดยการทดสอบเพิ่มเติมในห้องปฏิบัติการอ้างอิงในกรณี 73% และผลบวกลวงได้รับการบันทึกเพียง 0.25% ของซีรั่มที่วิเคราะห์ 40,823 รายการ

เจ้าของสิทธิบัตร RU 2283497:

สิ่งประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับสาขาเทคโนโลยีชีวภาพและการแพทย์ ระบบทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์เพื่อระบุสเปกตรัมของแอนติบอดีต่อไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ (HIV) ประเภทที่หนึ่งและสอง กลุ่ม O ประเภทที่หนึ่ง และระบุแอนติเจนต่อไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ประเภทแรก p24 รวมถึง อิมมูโนซอร์เบนท์ขึ้นอยู่กับแอนติเจนของไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ซึ่งเป็นตัวแทนของ gp41 (env HIV-1 และ HIV-2 กลุ่ม O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env HIV-2), แอนติบอดีต่อ HIV แอนติเจน 1 p24 และรีเอเจนต์การตรวจจับ แอนติเจนของ HIV และแอนติบอดีของ HIV ข้างต้นถูกดูดซับในหลุมต่างๆ ของเพลตสำหรับการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ และใช้โพลีสไตรีน 96 หลุมที่ยุบได้หรือเพลตที่แยกไม่ได้ถูกนำมาใช้สำหรับการดูดซับ การประดิษฐ์นี้เพิ่มความไว ลดความซับซ้อน และการขจัดความรู้สึกส่วนตัวในการประเมินผลลัพธ์ 1 เงินเดือน ไฟล์ 10 โต๊ะ 1 ป่วย

สิ่งประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับสาขาเทคโนโลยีชีวภาพและการแพทย์ การใช้งาน: การตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะทุกประเภทที่แตกต่างกันต่อโปรตีนไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ 1 และ 2, HIV 1 กลุ่ม O และแอนติเจน HIV 1 p24

แก่นแท้: การได้รับระบบทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์เพื่อระบุสเปกตรัมของแอนติบอดีของทุกคลาสต่อโปรตีนแต่ละตัวและ HIV 1 และ 2, HIV 1 กลุ่ม O และแอนติเจน HIV 1 p24 ในซีรั่มเลือด (พลาสมา), อิมมูโนโกลบูลินและผลิตภัณฑ์จากเลือดมนุษย์ใน เพื่อระบุสเปกตรัมของแอนติบอดีต่อเอชไอวี 1 และ 2, เอชไอวี 1 กลุ่ม O, การตรวจหาแอนติเจนของเอชไอวี 1 p24 และการยืนยันผลการตรวจคัดกรองเชิงบวกหรือที่น่าสงสัยสำหรับแอนติบอดีต่อเอชไอวี 1 และ 2, เอชไอวี 1 กลุ่ม O และแอนติเจนของเอชไอวี 1 p24

คำอธิบายของการประดิษฐ์

การวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีทางห้องปฏิบัติการขึ้นอยู่กับสามด้าน: ก) ข้อบ่งชี้ของเอชไอวีและส่วนประกอบ; b) การตรวจหาแอนติบอดีต่อเอชไอวี c) การกำหนดการเปลี่ยนแปลงของระบบภูมิคุ้มกัน ท่ามกลาง วิธีการที่มีอยู่ การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการที่พบมากที่สุดคือเซรุ่มวิทยา - การตรวจหาแอนติบอดีต่อแอนติเจนของไวรัส

ในการตรวจหาแอนติบอดีในการติดเชื้อเอชไอวี จะใช้การทดสอบเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับอิมมูโนซอร์เบนท์ (ELISA) และอิมมูโนล็อตติง (IB) เป็นหลัก ELISA ขึ้นอยู่กับการตรึงแอนติเจนของไวรัสบนจานซึ่งแอนติบอดีของผู้ป่วยจับกัน และตรวจพบสารเชิงซ้อนของแอนติเจน-แอนติบอดีโดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีของเมาส์ที่ควบด้วยฮอสแรดิชเปอร์ออกซิเดสกับอิมมูโนโกลบูลิน G และ M ของมนุษย์ วิธีการนี้ค่อนข้างเฉพาะเจาะจงและละเอียดอ่อน ทำให้สามารถตรวจพบแอนติบอดีจำเพาะไวรัสในผู้ป่วย 95% กรณีที่เหลืออีก 5% เกิดขึ้นในระยะแรกของการติดเชื้อ เมื่อยังมีแอนติบอดีในเลือดน้อย หรือในระยะสุดท้ายของโรค เมื่อร่างกายไม่สามารถสังเคราะห์แอนติบอดีได้อีกต่อไปเนื่องจากการสูญเสียอย่างรุนแรง ระบบภูมิคุ้มกัน- ผลลัพธ์ที่เป็นบวกลวงของ ELISA ก็เป็นไปได้เช่นกัน โดยส่วนใหญ่ในผู้ป่วยที่แพ้ภูมิตัวเองและ โรคมะเร็งรวมถึงการติดเชื้อที่เกิดจากไวรัส Ashtein-Barr ในกรณีนี้เป็นปฏิกิริยาข้ามของแอนติบอดีต่อ ปัจจัยไขข้ออักเสบ, ไวรัสเอพสเตน-บาร์หรือปัจจัยกำหนดแอนติเจนที่คล้ายกับโปรตีนของ Major histocompatibility complex class 1 และ 2 (HLA-4 และ DQW3) และมีความสามารถในการจับกับแอนติเจนของ HIV ผลบวกลวงพบได้บ่อยในสตรีมีครรภ์และผู้สูงอายุ ภาวะเม็ดเลือดแดงแตก ไขมันในเลือด และการปนเปื้อนของแบคทีเรียในซีรั่มอาจทำให้เกิดผลลัพธ์ที่ไม่น่าเชื่อถือ

ในเรื่องนี้ มีการเสนอและใช้วิธีการจำนวนหนึ่งเพื่อทดสอบความจำเพาะของผลการตรวจจับแอนติบอดี วิธีการเหล่านี้ ปฏิกิริยาที่ใช้กันมากที่สุดคือ "การซับภูมิคุ้มกัน" ในการดัดแปลง "Western Blot" สาระสำคัญของวิธีการมีดังนี้: ในระยะแรกโปรตีน HIV จะถูกแยกด้วยน้ำหนักโมเลกุลโดยใช้โพลีอะคริลาไมด์เจลอิเล็กโตรโฟรีซิส จากนั้นจึงถ่ายโอนอิเล็กโทรโฟเรติกจากเจลโพลีอะคริลาไมด์ไปยังพื้นผิวของเมมเบรนไนโตรเซลลูโลส แอนติเจนที่ถ่ายโอนในลักษณะนี้จะถูกตรวจพบบนเมมเบรนโดยใช้ การวิเคราะห์ทางอ้อม: เมมเบรนถูกบ่มด้วยวัสดุทดสอบ แอนติบอดีที่มีอยู่จะจับกับแอนติเจนของ HIV ที่ถ่ายโอนไปยังเยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลสจากนั้นแถบเมมเบรนจะถูกบ่มด้วยคอนจูเกต เมื่อสารเชิงซ้อนของแอนติเจน-แอนติบอดีถูกสร้างขึ้น คอนจูเกตจะเกาะติดกับมัน หลังจากการล้างจากคอนจูเกตและการบ่มด้วยสารตั้งต้น การย้อมสีจะเกิดขึ้นในบริเวณของไนโตรเซลลูโลสซึ่งมีการก่อตัวของสารเชิงซ้อนของแอนติเจน-แอนติบอดี-คอนจูเกตเกิดขึ้น ภาพวาดแสดงตัวอย่างผลลัพธ์ของอิมมูโนล็อตที่เป็นบวก บวกเล็กน้อย และลบ

ตรวจพบแอนติบอดีต่อโปรตีน (p) และไกลโคโปรตีน (gp) ต่อไปนี้ในซีรั่มของผู้ติดเชื้อ HIV-1 และ HIV-2: ตาราง A.

ตาราง B นำเสนอเกณฑ์ในการประเมินผลลัพธ์ของการกระตุ้นภูมิคุ้มกันที่แนะนำโดย WHO และ ศูนย์รัสเซียเรื่องการป้องกันและควบคุมโรคเอดส์

ตามเกณฑ์ของ WHO ซีรั่มที่แอนติบอดีต่อโปรตีนในซอง HIV-1 สองชนิดใดๆ ถูกตรวจพบโดยวิธี IB จะถือว่าเป็นผลบวก หากมีปฏิกิริยากับโปรตีนซองจดหมายเพียงชนิดเดียว (gp160, gp120, gp41) ร่วมกับหรือไม่ทำปฏิกิริยากับโปรตีนอื่น ๆ ผลลัพธ์จะถือว่าน่าสงสัย ตามที่ศูนย์วิทยาศาสตร์และระเบียบวิธีของรัฐบาลกลางกระทรวงสาธารณสุขแห่งสหพันธรัฐรัสเซียเพื่อการป้องกันและควบคุมโรคเอดส์มีความเป็นไปได้ที่จะตีความซีรั่มว่าเป็นบวกแม้ในที่ที่มีแอนติบอดีต่อโปรตีนเมมเบรนเพียงตัวเดียว

การตรวจหาแอนติบอดีต่อแอนติเจน p24 อาจบ่งบอกถึงระยะเวลาที่เริ่มมี seroconversion เนื่องจากแอนติบอดีต่อโปรตีนนี้จะปรากฏขึ้นก่อน ปฏิกิริยาเชิงบวกกับโปรตีน gag และ pol โดยไม่มีปฏิกิริยากับโปรตีน env อาจสะท้อนถึงระยะของการเปลี่ยนแปลงของซีโรคอนเวอร์ชันในระยะเริ่มต้น และยังบ่งชี้ว่ามีการติดเชื้อ HIV-2 หรือปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะเจาะจง

การใช้ปฏิกิริยาอิมมูโนลอตต์เป็นวิธีการผู้เชี่ยวชาญในการวินิจฉัยเอชไอวีมีข้อเสียที่สำคัญหลายประการ:

1. ความเป็นไปไม่ได้ที่จะยืนยันการตรวจพบ HIV p24 แอนติเจน 1 ในกรณีที่ใช้การทดสอบที่ตรวจพบแอนติเจนและแอนติบอดีต่อเอชไอวีพร้อมกันซึ่งทำให้ไม่เหมาะสม (ไม่มีความหมาย) ในการใช้การตรวจคัดกรองเพื่อตรวจหาแอนติเจนและแอนติบอดีต่อเอชไอวีพร้อมกัน ( คำสั่งของกระทรวงสาธารณสุขแห่งสหพันธรัฐรัสเซียหมายเลข 292 ลงวันที่ 30 กรกฎาคม 2544: "ในการตรวจสอบผู้บริจาคที่สถานีถ่ายเลือดจำเป็นต้องใช้ระบบทดสอบที่ตรวจจับแอนติเจนและแอนติบอดีต่อเอชไอวีไปพร้อม ๆ กัน")

2. การตรวจหาแอนติบอดีประเภท IgG เท่านั้น ไม่สามารถยืนยันผลลัพธ์เชิงบวกที่ได้รับจากการทดสอบรุ่นที่ 3 และ 4 ได้อย่างสมบูรณ์ (การตรวจจับ แอนติบอดีต่อ IgGและ IgM)

3. อัตวิสัยในการตีความคะแนนสอบ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีที่ผลลัพธ์ “สงสัย” และ “ไม่แน่นอน” และใน ระยะเริ่มแรก seroconversion (แถบที่ตรวจพบบนเยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลสในกรณีนี้ไม่ชัดเจน แทบมองไม่เห็นด้วยตาเปล่าและเมื่อทำการประเมิน โดยบุคคลอื่นมักมีความขัดแย้งกัน)

4. ความเป็นไปไม่ได้ของการประเมินผลการวิเคราะห์เชิงปริมาณอัตโนมัติ

5. ความไวต่ำกว่าเมื่อเทียบกับ ELISA

6. อายุการเก็บรักษาสั้น (ในระหว่างการเก็บรักษา แถบของเยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลสจะจางลง และไม่สามารถยืนยันวัตถุประสงค์ของการตรวจพบหรือไม่ตรวจพบเอชไอวีในกรณีที่มีข้อโต้แย้ง)

7. ความยากในการตั้งค่าปฏิกิริยาและการเก็บรักษา (แถบเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสเปราะบางมากและมักจะแตกหัก)

8. ชุดรักษาความปลอดภัยข้อมูลราคาสูง

รีเอเจนต์ที่รู้จักคือชุดอุปกรณ์สำหรับการตรวจหาแอนติเจนและแอนติบอดีต่อเชื้อโรคชนิดเดียวกันพร้อมกัน รวมถึง HIV (DE 4236189 F1, 28/04/1994) อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีการเปิดเผยระบบทดสอบที่สามารถวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีในระยะต่างๆ ได้

วัตถุประสงค์ของการประดิษฐ์นี้คือเพื่อให้ได้ระบบการทดสอบซึ่งสามารถยืนยันผลลัพธ์ที่เป็นบวกหรือน่าสงสัยของการตรวจคัดกรองแอนติบอดีต่อ HIV 1 และ 2, HIV 1 กลุ่ม O และแอนติเจน HIV 1 p24 เมื่อใช้การทดสอบสำหรับการตรวจหาพร้อมกัน ของแอนติเจนและแอนติบอดี

วิธีแก้ปัญหาทางเทคนิคที่นำเสนอสามารถทำได้โดยระบบทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์เพื่อระบุสเปกตรัมของแอนติบอดีต่อไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องในมนุษย์ (HIV) ประเภทที่หนึ่งและสอง ประเภทแรกของกลุ่ม O และระบุแอนติเจน p24 ต่อโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ ไวรัสประเภทแรก p24 โดยมีลักษณะเฉพาะคือรวมอิมมูโนซอร์เบนท์ตามแอนติเจน ไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ซึ่งเป็นตัวแทนของ gp41 (env HIV-1 และ HIV-2 กลุ่ม O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol) , gp36 (env HIV-2), แอนติบอดีต่อ HIV 1 แอนติเจน p24 และรีเอเจนต์การตรวจจับ ในขณะที่แอนติเจนของ HIV ดังกล่าวข้างต้นและแอนติบอดีของ HIV จะถูกดูดซับในหลุมต่างๆ ของแผ่นทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์

นอกจากนี้ เพลตโพลีสไตรีนแบบยุบได้หรือถอดไม่ได้ขนาด 96 หลุมสำหรับเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ยังใช้ในการดูดซับอีกด้วย

ผลลัพธ์ทางเทคนิคที่ได้จากการประดิษฐ์นี้คือความเป็นไปได้ในการยืนยันผลลัพธ์เชิงบวกสำหรับแอนติบอดีต่อ HIV 1 และ 2, HIV 1 กลุ่ม O และแอนติเจน HIV 1 p24, ความไวสูง, ความเป็นไปได้ของการตีความผลลัพธ์โดยอัตโนมัติ ซึ่งกำจัดความเป็นตัวตนของ การประเมินความง่ายในการดำเนินการทดสอบน้อยกว่าชุดความปลอดภัยของข้อมูลต้นทุนที่มีอยู่

โซลูชันทางเทคนิคนี้แตกต่างจากโซลูชันที่รู้จัก:

1. การใช้เพลตสำหรับปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกันเป็นตัวพาโซลิดเฟส

2. การใช้งานพร้อมกันเป็นตัวดูดซับแอนติบอดีต่อ HIV p 24 และชุดแอนติเจนของ HIV

การประดิษฐ์แสดงตัวอย่างไว้ตามตัวอย่างต่อไปนี้

หลักการที่ใช้งานของระบบการทดสอบที่พัฒนาขึ้น "DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM + AG p24 HIV 1" คือ:

อิมมูโนซอร์เบนท์ - แอนติเจนรีคอมบิแนนท์คล้ายกับโปรตีนโครงสร้างของ HIV-1: gp41 (env HIV-1 และ HIV 1 กลุ่ม O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), HIV-2: gp36 (env) และโมโนโคลนอลแอนติบอดีของเมาส์ต่อแอนติเจน HIV 1(p24) ซึ่งดูดซับแยกกันบนแถบของแผ่นโพลีสไตรีนที่ยุบได้

เพื่อเตรียมการใช้อิมมูโนซอร์เบนท์:

1. HIV-1 gp41 เป็นโปรตีนที่ผลิตโดย E. Coli สายพันธุ์ No. AHIV 103

2. HIV-1 gp120 เป็นโปรตีนที่ผลิตโดย E. Coli สายพันธุ์ No. AHIV 109

3. HIV-1 p24 เป็นโปรตีนที่ผลิตโดย E. Coli สายพันธุ์ No. AHIV 105

4. HIV-1 p31 เป็นโปรตีนที่ผลิตโดย E. Coli สายพันธุ์ No. AHIV 108

5. HIV-2 p36 เป็นโปรตีนที่ผลิตโดย E. Coli สายพันธุ์ No. AHIV 106

คอนจูเกต 1 ซึ่งถูกไลโอฟิไลซ์หรือของเหลวคือโมโนโคลนอลแอนติบอดีของหนูต่อแอนติเจน HIV1 p24 ที่คอนจูเกตกับไบโอติน

1. คอนจูเกต 2 ไลโอฟิไลซ์หรือของเหลวเป็นส่วนผสมของแอนติเจนรีคอมบิแนนท์คล้ายกับโปรตีนโครงสร้างของ HIV-1: gp41 (env HIV-1 และ HIV 1 กลุ่ม O), gp120 (env), p24 (gag), p31( po1); HIV-2: gp36 (env) รวมกับไบโอติน;

2. คอนจูเกต 3, 4 - ไลโอฟิไลซ์หรือของเหลว - สเตรปตะวิดินซึ่งมีป้ายกำกับด้วยมะรุมเปอร์ออกซิเดส

ในระหว่างการศึกษาเบื้องต้น มีการเลือกการออกแบบระบบทดสอบ เทคโนโลยีในการเตรียมส่วนประกอบได้รับการพัฒนา และเงื่อนไขในการทำปฏิกิริยาของเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ได้รับการปรับปรุงให้เหมาะสมที่สุด

เมื่อทำ ELISA ในระบบทดสอบ "DS - ELISA - ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM + Ag p24 HIV 1" คอนจูเกต -1 25 μlจะถูกเพิ่มลงในหลุมของแผ่นด้วยแอนติบอดีที่ถูกดูดซับถึง p24 และ 25 μl ของคอนจูเกต-1 ถูกเติมลงในหลุมด้วยแอนติเจนที่ถูกดูดซับ 25 ไมโครลิตร รูปแบบปฏิกิริยาแสดงไว้ด้านล่าง จากนั้น ให้เติมตัวอย่างทดสอบ 25 ไมโครลิตรลงในแต่ละหลุม ในเวลาเดียวกันในบ่อที่มีแอนติเจนสีจะเปลี่ยนจากสีส้มเป็นสีชมพูและในบ่อที่มีแอนติบอดีจากสีเขียวเป็นสีเทา ส่วนผสมถูกบ่มเป็นเวลา 45 นาทีที่ 37°C บนเชคเกอร์ (หรือ 1 ชั่วโมงที่ 37°C ในเทอร์โมสตัท) จากนั้นโดยไม่ต้องล้าง ให้เติมคอนจูเกต-3 50 ไมโครลิตรลงในหลุมของแผ่นเพื่อตรวจหาแอนติเจน p24 และเติมคอนจูเกต-4 50 ไมโครลิตรลงในหลุมเพื่อตรวจหาแอนติบอดี หลังจากการบ่มเป็นเวลา 20 นาทีที่อุณหภูมิ 37°C บนเชคเกอร์ (หรือ 30 นาทีที่ 37°C ในเทอร์โมสตัท) จานจะถูกล้างและพัฒนาด้วยส่วนผสมของสารตั้งต้น เวลารวมปฏิกิริยา 1 ชั่วโมง 25 นาที (หรือ 1 ชั่วโมง 50 นาที) แอนติเจน p24 ที่มีอยู่ในตัวอย่างทดสอบจับกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีกับ p24 และแอนติบอดีจำเพาะจะก่อตัวเป็นสารเชิงซ้อนโดยมีแอนติเจนชนิดลูกผสมบนจาน ตรวจพบคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกันของ anti-p24 ด้วย p24 ด้วยคอนจูเกต anti-p24-biotin จากนั้นด้วย streptavidin-peroxidase และคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกันของ Ag-HIV ด้วย At-HIV - ด้วยคอนจูเกต Ag-biotin จากนั้นด้วย streptavidin-peroxidase

แผนการตั้งค่าปฏิกิริยา

ผลลัพธ์จะถูกนำมาพิจารณาด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริกที่ความยาวคลื่นสองช่วง: 450/620-680 นาโนเมตร โดยที่อุปกรณ์กำหนดค่า "ทางอากาศ" ให้เราคำนึงถึงผลลัพธ์ที่หนึ่งความยาวคลื่น 450 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์จะถูกนำมาพิจารณาหากค่าเฉลี่ยของความหนาแน่นของแสง (OD) ในหลุมที่มี K- ไม่เกิน 0.2 ในหลุมที่มี K+ - ไม่น้อยกว่า 1.0 โอพีคริติคอล คำนวณโดยสูตร:

โอพีคริติคอล gp41 = เฉลี่ย ความหมาย โอพี เค-(gp41)+0.15

โอพีคริติคอล gp120 = เฉลี่ย ความหมาย อ๊อฟ เค-(gp120)+0.15

โอพีคริติคอล p24 = เฉลี่ย ความหมาย OP K-(р24)+0.15

โอพีคริติคอล p31 = เฉลี่ย ความหมาย OP K-(р31)+0.15

โอพีคริติคอล gp36 = เฉลี่ย ความหมาย อ๊อฟ เค-(gp36)+0.15

โอพีคริติคอล Ag p24 = เฉลี่ย ความหมาย OP k- (Ag p24)+0.04

โดยที่ 0.15 และ 0.04 เป็นค่าสัมประสิทธิ์ที่กำหนดโดยการประมวลผลทางสถิติที่ผู้ผลิต ในระหว่างการพัฒนาระบบทดสอบมีการใช้สิ่งต่อไปนี้:

1. ตัวอย่างเลือดจากผู้บริจาคที่มีสุขภาพแข็งแรง (n=610)

2.ตัวอย่างเลือดจากคนไข้ต่างๆ โรคติดเชื้อไม่เกี่ยวข้องกับเอชไอวี (การติดเชื้อทางเดินหายใจเฉียบพลัน, ปอดบวม, ต่อมทอนซิลอักเสบ, เริมและ การติดเชื้อไซโตเมกาโลไวรัส, ซิฟิลิส, หนองในเทียม, ไวรัสตับอักเสบ A, B และ C (n=224))

3. ตัวอย่างเลือดจากผู้ป่วยโรคไม่ติดเชื้อต่างๆ - การบาดเจ็บ โรคของระบบหัวใจและหลอดเลือด เนื้องอก (n=35)

4. ตัวอย่างเลือดจากหญิงตั้งครรภ์ (n=40)

5. ตัวอย่างซีรัมในเลือดมีผลบวกใน ELISA และยืนยันในอิมมูโนลอต (n=428)

6. ตัวอย่างซีรั่มที่มีผลบวกในระบบทดสอบเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์สำหรับการตรวจหาแอนติบอดี HIV 1.2 และแอนติเจน p24 พร้อมๆ กัน และผลไม่แน่นอนโดยอิมมูโนล็อต (n=123)

7. แผงภายในของซีรั่มที่มีและไม่มีแอนติบอดีต่อ HIV 1,2 ทดสอบกับระบบทดสอบเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์และอิมมูโนลอตที่ขึ้นทะเบียนโดยกระทรวงสาธารณสุขของสหพันธรัฐรัสเซีย (n=21)

8. มาตรฐาน "HIV 1 ANTIGEN STANDARD", "BIO RAD", ประเทศฝรั่งเศส, cat. หมายเลข 72217 ซึ่งเป็นแอนติเจนที่ได้จากไวรัสไลเซต

9. มาตรฐานภายในขององค์กร ตัวอย่างที่มีแอนติเจน p 24 ที่ความเข้มข้น 200 พิโกกรัม/มล. ได้มาจากไลซีนของไวรัสและไตเตรทตามบริษัท "HIV 1 ANTIGEN STANDARD" "BIO RAD" ประเทศฝรั่งเศส cat เลขที่ 72217.

10. แผงมาตรฐานของซีรั่มที่มีแอนติบอดีต่อไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ประเภท 1 (HIV 1) - OSO 42-28-212-93-02P, "Medico-Biological Union", Novosibirsk

11. แผงมาตรฐานของซีรั่มที่มีแอนติบอดีต่อไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ประเภท 2 (HIV 2) - OSO-42-28-216-02P, "สหภาพการแพทย์และชีววิทยา", โนโวซีบีสค์

12. แผงซีรั่มมาตรฐานที่ไม่มีแอนติบอดีต่อไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ประเภท 1 และ 2 (HIV 1, 2) - OSO-42-28-214-94-02P, "Medical and Biological Union", Novosibirsk

ความไวของระบบทดสอบสำหรับการตรวจหาแอนติเจน p24 ได้รับการประเมินโดยใช้ “มาตรฐาน HIV I ANTIGEN”, “BIO RAD” และมาตรฐานภายในขององค์กร โดยใช้มาตรฐานภายใน เตรียมการเจือจาง 2 เท่าอนุกรม 4 รายการจาก 40 พิโกกรัม/มล. ถึง 5 พิโกกรัม/มล. ตามปกติ พลาสมาของผู้บริจาคซึ่งไม่มีแอนติบอดีต่อ HIV 1, 2 เป็นตัวเจือจาง แอนติเจนที่ตรวจพบได้จำนวนน้อยที่สุดถูกใช้เป็นเกณฑ์ความไว ข้อมูลที่ได้รับแสดงไว้ในตารางที่ 1

เพื่อประเมินความไวของระบบทดสอบในการตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะ มีการใช้แผงมาตรฐานของตัวอย่างที่มีแอนติบอดีต่อไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ (HIV 1, 2) (OSO 42-28-212-93-02P p.012, OSO 42- 28-216- 02P (เอชไอวี 2) หน้า 003)

ข้อมูลที่ได้รับแสดงไว้ในตารางที่ 3, 4

เปรียบเทียบประสิทธิภาพการวินิจฉัยของระบบตรวจ "DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1" กับระบบตรวจวินิจฉัย "Jenskrin-HIV-Ag/At" (Bio-Rad), "DIA-HIV" 1/2" (Diaprof-Med), "Vironostika HIV Uni-form II Ag/At" (Biomerioux), "Recombinant-HIV1,2 DSM" (MBS), "Amercard Anti-HIV-1,2 K" (Amercard ) , "HIV-1, HIV-2-ELISA-Avicenna" (อาวิเซนนา) เพื่อจุดประสงค์นี้ ตัวอย่างซีรัมจากแผงภายในได้รับการทดสอบในการทดสอบที่ระบุทั้งหมด ผลลัพธ์ที่นำเสนอในตารางที่ 5 บ่งชี้ถึงประสิทธิภาพในการวินิจฉัยสูงของ “DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1”

การศึกษาความไวของระบบทดสอบ "DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1" ยังดำเนินการกับซีรั่มเลือดจากผู้ป่วยที่ได้รับการยืนยันโดยอิมมูโนบลูตติ้งว่าเป็นบวกกับเอชไอวี มีการทดสอบตัวอย่างซีรั่มดังกล่าวจำนวน 428 ตัวอย่าง มีตัวเลือกมากมายสำหรับการตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีน HIV ต่างๆ และแอนติเจน p24 ผลลัพธ์แสดงไว้ในตารางที่ 6

ตารางที่ 6. ผลการตรวจแอนติบอดีต่อโปรตีน HIV 1 และ p24 แอนติเจนต่างๆ เมื่อตรวจซีรั่มบวกของ HIV 1 (n=428)
การตรวจจับ %	โปรไฟล์โปรตีน
	ต่อต้าน gp41	ต่อต้าน gr120	ต่อต้าน p24	ต่อต้าน p31	หน้า 24
51,1%	+	+	+	+	-
35,3%	+	-	+	+	-
4%	+	-	+	-	-
3,3%	+	-	-	+	-
1,4%	+	-	-	+	+
1,2%	+	+	+	+	+
1,2%	+	+	-	+	+
0,9%	+	-	+	+	+
0,7%	+	-	+	-	+
0,5%	+	-	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	-
% การตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีนแต่ละตัวหรือ Ag p24	100%	53,9%	93,2%	94,4%	6,1%

เมื่อทดสอบตัวอย่างที่เป็นบวกของ HIV 1 พบว่า 3% ของซีรั่มแสดงให้เห็น ปฏิกิริยาเชิงบวกด้วย gp36 (สภาพแวดล้อม HIV 2) OP/OPcrit. ในกลุ่มตัวอย่างเหล่านี้ไม่เกิน 2.0 ข้อมูลของเราเกี่ยวกับปฏิกิริยาข้ามของโปรตีนเปลือกนอกของ HIV 1 (gp41) และ HIV 2 (gp36) ตรงกับข้อมูลวรรณกรรม

การตีความผลลัพธ์

การวิเคราะห์การทดสอบซีรั่มที่มีเชื้อ HIV และตัวอย่างจากแผงมาตรฐานและภายในใน "DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1" ช่วยให้เราสามารถพัฒนาเกณฑ์สำหรับการตีความผลการทดสอบนี้ได้ เกณฑ์ที่แนะนำแสดงไว้ในตารางที่ 7

จากเกณฑ์เหล่านี้ ตัวอย่างซีรั่มที่เป็นบวกของ HIV ทั้งหมด (n=428) ได้รับการพิจารณาว่าเป็นบวกใน “DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV1” จากตัวอย่าง 16 ตัวอย่างในแผงมาตรฐานที่มีแอนติบอดีต่อ HIV 1 มี 14 ตัวอย่างที่ตรวจพบว่าเป็นบวก และ 2 ตัวอย่างที่ระบุว่าไม่แน่นอน ตัวอย่างทั้งหมด 8 ตัวอย่างจากแผงมาตรฐานที่มีแอนติบอดีต่อ HIV 2 ได้รับการพิจารณาว่าเป็นบวก จากตัวอย่างแผงด้านใน 10 ตัวอย่างที่มีแอนติบอดีต่อเอชไอวี 1 มี 7 ตัวอย่างที่ตรวจพบว่าเป็นบวก และ 3 ตัวอย่างที่ระบุว่าไม่แน่นอน

การศึกษาความไวของระบบทดสอบ "DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1" ยังดำเนินการกับซีรั่มเลือดจากผู้ป่วยที่มีผลบวกในระบบทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ซึ่งตรวจจับแอนติบอดีและ แอนติเจน p24 และไม่แน่นอนในอิมมูโนลอต มีการทดสอบตัวอย่างดังกล่าวทั้งหมด 123 ตัวอย่าง ข้อมูลถูกนำเสนอในตารางที่ 8

เมื่อตรวจซีรั่มด้วยผลอิมมูโนลอตที่ไม่แน่นอน (n=123) ใน “DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1” พบตัวอย่าง 72 ตัวอย่าง (58.5%) ให้ผลเป็นบวก ในจำนวนนี้ 26 ซีรั่ม (21.1%) ให้ผลบวกสำหรับ p24 เท่านั้น, 20 (16.3%) - สำหรับแอนติบอดีเท่านั้น 16 (13%) - สำหรับ p24 ที่มีแอนติบอดีต่อโปรตีนตัวใดตัวหนึ่ง 10 (8.1%) - บน p24 ด้วย แอนติบอดีต่อโปรตีนตั้งแต่สองตัวขึ้นไป ดังนั้น การทดสอบเฉพาะแอนติบอดี (โดยไม่ตรวจพบ p24) จะระบุตัวอย่าง 30 ตัวอย่าง (24.4%) เป็นผลบวก การตรวจหาแอนติเจน p24 ในการทดสอบทำให้สามารถระบุตัวอย่างเพิ่มเติม 42 ตัวอย่าง (34.1%) เป็นผลบวก

เพื่อประเมินความจำเพาะของระบบการทดสอบ มีการใช้แผงซีรั่มมาตรฐานที่ไม่มีแอนติบอดีต่อ HIV 1, 2 (n=20) ตัวอย่างซีรั่มเลือดจากผู้บริจาคที่มีสุขภาพดี (n=610) ตัวอย่างซีรัมเลือดจากผู้ป่วยโรคติดเชื้อต่างๆ (n=224) ที่ไม่เกี่ยวข้องกับเอชไอวี ตัวอย่างเลือดจากผู้ป่วยโรคไม่ติดเชื้อต่างๆ - การบาดเจ็บ โรคของระบบหัวใจและหลอดเลือด เนื้องอก (n=35) ตัวอย่างเลือดจากหญิงตั้งครรภ์ (n=40) มีการทดสอบตัวอย่างทั้งหมด 929 ตัวอย่าง ตัวอย่างหนึ่งจากซีรั่มเลือดของผู้บริจาคที่มีสุขภาพดีแสดงผลบวกลวง - ตรวจพบแอนติบอดีต่อ gp41 และ p24 ซีรั่มเลือดจากผู้บริจาคที่มีสุขภาพดี 7 ตัวอย่าง และซีรั่มเลือด 2 ตัวอย่างจากผู้ป่วยโรคติดเชื้อที่ไม่เกี่ยวข้องกับเอชไอวี แสดงผลผลบวกลวงสำหรับ p24

เพื่อประเมินความจำเพาะของระบบการทดสอบ มีการใช้แผงมาตรฐานของตัวอย่างที่เป็นลบ (OSO 42-28-214-94-02p, p. 009) ความจำเพาะคือ 100%

การศึกษาจึงแสดงให้เห็นว่าความจำเพาะของระบบทดสอบ "DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1" อยู่ที่ 99% เมื่อตรวจตัวอย่างเลือดจากผู้บริจาคปกติและผู้ป่วยโรคติดเชื้อและร่างกายต่างๆ .

ข้อมูลที่ได้รับแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพในการวินิจฉัยสูงของระบบการทดสอบที่พัฒนาขึ้น "DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1" ระบบทดสอบสามารถใช้ตรวจหาแอนติบอดีต่อโปรตีนแต่ละชนิดของเอชไอวีประเภท 1 และ 2 และแอนติเจน HIV1 p24 เพื่อยืนยันผลการตรวจคัดกรองเชิงบวกด้วยระบบทดสอบที่ตรวจจับแอนติบอดีหรือระบบทดสอบที่ตรวจจับแอนติบอดีและแอนติเจน HIV1 p24 ไปพร้อมๆ กัน ระบบการทดสอบนี้สามารถใช้เป็นการทดสอบอิมมูโนลอตทางเลือกเพื่อยืนยันผลลัพธ์ที่เป็นบวก ตลอดจนเพื่อศึกษาพลวัตของแอนติบอดีต่อเอชไอวีและแอนติเจน p24 บน ขั้นตอนที่แตกต่างกันการติดเชื้อ

ข้อดีของการทดสอบ

1. ผู้ยืนยัน การทดสอบเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์รูปแบบแท็บเล็ต

2. การทดสอบยืนยันที่รวมการตรวจสเปกตรัมของแอนติบอดี HIV 1, 2 และแอนติเจนของ HIV 1 p24

3. การตรวจหาแอนติบอดีของคลาส Ig ทั้งหมด

4. ความไวในการตรวจจับ p24 มีค่าอย่างน้อย 5 pg/ml

5. ลดผลลัพธ์ที่ไม่แน่นอนเมื่อเทียบกับ Immunoblotting

6. เวลาในการวิเคราะห์ - 1 ชั่วโมง 25 นาที (immunoblot - ตั้งแต่ 3 ถึง 20 ชั่วโมง)

7. การประเมินด้วยสายตาของการเติมส่วนประกอบและตัวอย่างทั้งหมด

1. ระบบทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์เพื่อระบุสเปกตรัมของแอนติบอดีต่อไวรัสเอชไอวีประเภทที่หนึ่งและสองประเภทที่หนึ่งของกลุ่ม O และระบุแอนติเจน p24 ต่อไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ประเภทที่หนึ่ง p24 โดยมีลักษณะเฉพาะคือประกอบด้วยอิมมูโนซอร์เบนท์ตามแอนติเจนของไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องในมนุษย์ เป็นตัวแทนของ gp41 (env HIV-1 และ HIV-2 กลุ่ม O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env HIV -2) แอนติบอดีต่อ HIV 1 แอนติเจน p24 และการตรวจจับรีเอเจนต์ ในขณะที่แอนติเจนของ HIV ดังกล่าวข้างต้นและแอนติบอดีของ HIV จะถูกดูดซับในแผ่นเพลตที่แตกต่างกันสำหรับการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์

2. ระบบการทดสอบเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ตามข้อถือสิทธิข้อที่ 1 มีลักษณะเฉพาะคือเพลตโพลีสไตรีน 96 หลุมที่ยุบได้หรือแยกไม่ได้สำหรับเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ถูกนำมาใช้ในการดูดซับ

ELISA (การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์, ELISA) เข้าสู่ชีวิตของการแพทย์เชิงปฏิบัติที่ไหนสักแห่งในช่วงทศวรรษที่ 60 ของศตวรรษที่ผ่านมา ภารกิจเริ่มแรกคือการวิจัยทางเนื้อเยื่อวิทยาเพื่อจุดประสงค์ทางวิทยาศาสตร์ ซึ่งครอบคลุมการค้นหาและจำแนกโครงสร้างแอนติเจนของเซลล์ของสิ่งมีชีวิต

วิธี ELISA ขึ้นอยู่กับปฏิสัมพันธ์ของแอนติเจนจำเพาะ (AT) และแอนติเจนที่เกี่ยวข้อง (AG) กับการก่อตัวของสารเชิงซ้อน "แอนติเจน-แอนติบอดี" ซึ่งตรวจพบโดยใช้เอนไซม์ ข้อเท็จจริงนี้กระตุ้นให้นักวิทยาศาสตร์คิดว่าวิธีนี้สามารถใช้เพื่อวัตถุประสงค์ในการวินิจฉัยเพื่อระบุอิมมูโนโกลบูลินจำเพาะของคลาสต่างๆ ที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อโดยเฉพาะ และถือเป็นความก้าวหน้าในการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการทางคลินิก!

วิธีการนี้เริ่มมีการใช้อย่างแข็งขันในช่วงต้นทศวรรษที่ 80 เท่านั้นและส่วนใหญ่ในสถาบันเฉพาะทาง เครื่องวิเคราะห์อิมมูโนเอ็นไซม์เครื่องแรกมีศูนย์และสถานีถ่ายเลือด โรคติดเชื้อ และโรงพยาบาลกามโรค เนื่องจากโรคเอดส์ที่น่าเกรงขามซึ่งเกิดในทวีปแอฟริกา ปรากฏบนขอบฟ้าของเราและเข้าร่วมกับการติดเชื้อ "เก่า" ในทันที จำเป็นต้องมีมาตรการวินิจฉัยและค้นหาทันที ยารักษาโรคส่งผลกระทบต่อเขา

ขอบเขตการประยุกต์ใช้วิธี ELISA

ความเป็นไปได้ของเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์นั้นมีมากมายอย่างแท้จริงตอนนี้เป็นการยากที่จะจินตนาการว่าจะทำได้อย่างไรหากไม่มีการวิจัยซึ่งใช้ในยาทุกสาขาอย่างแท้จริง ดูเหมือนว่า ELISA จะทำอะไรด้านเนื้องอกวิทยาได้บ้าง? ปรากฎว่ามันทำได้ และเยอะมาก ความสามารถในการวิเคราะห์เพื่อค้นหาลักษณะเครื่องหมายของเนื้องอกมะเร็งบางชนิดนั้นรองรับการตรวจพบเนื้องอกในระยะเริ่มแรกเมื่อยังไม่ได้ถูกกำหนดโดยวิธีอื่นใดเนื่องจากขนาดที่เล็ก

การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการทางคลินิกสมัยใหม่ (CDL) นอกเหนือจากเครื่องบ่งชี้มะเร็งแล้ว ยังมีแผง ELISA จำนวนมาก และใช้แผงเหล่านี้เพื่อวินิจฉัยสภาวะทางพยาธิวิทยาต่างๆ (กระบวนการติดเชื้อ ความผิดปกติของฮอร์โมน) และตรวจสอบยาทางเภสัชกรรมเพื่อระบุผลกระทบที่มีต่อร่างกายของผู้ป่วย และไม่ใช่แค่มนุษย์เท่านั้น ปัจจุบันเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในบริการด้านสัตวแพทย์เพราะ "น้องชายคนเล็กของเรา" มีความเสี่ยงต่อโรคต่างๆ มากมาย ซึ่งบางครั้งพวกเขาก็ต้องทนทุกข์ทรมานอย่างมาก

ดังนั้น, เนื่องจากความไวและความจำเพาะของ ELISA สามารถตรวจได้จากตัวอย่างเลือดที่นำมาจากหลอดเลือดดำ:

• สถานะของฮอร์โมน (ฮอร์โมน ต่อมไทรอยด์และต่อมหมวกไต ฮอร์โมนเพศ)
• การปรากฏตัวของการติดเชื้อไวรัสและแบคทีเรีย (HIV, B และ C, หนองในเทียม, ซิฟิลิสและและรวมถึงโรคอื่น ๆ อีกมากมายที่เกิดจากจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค)
• ร่องรอยของกิจกรรมสำคัญของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิด กระบวนการติดเชื้อซึ่งจบลงได้สำเร็จและเคลื่อนเข้าสู่ขั้นตอนของการสร้างการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อเชื้อโรคนี้ ในหลายกรณี ร่องรอยดังกล่าว ซึ่งก็คือ แอนติบอดี ยังคงไหลเวียนอยู่ในเลือดไปตลอดชีวิต ดังนั้นจึงช่วยปกป้องบุคคลจากการติดเชื้อซ้ำได้

สาระสำคัญของ ELISA คืออะไร?

วิธีเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ช่วยให้สามารถระบุได้ไม่เพียงแต่การมีอยู่ของเชื้อโรคเท่านั้น (การวิเคราะห์เชิงคุณภาพ) แต่ยังรวมถึงเนื้อหาเชิงปริมาณในซีรัมเลือดของผู้ป่วยด้วย

ปริมาณไวรัสหรือแบคทีเรียมีอิทธิพลอย่างมากต่อกระบวนการติดเชื้อและผลลัพธ์ ดังนั้นการวิเคราะห์เชิงปริมาณจึงมีบทบาทสำคัญในการวินิจฉัยและการรักษาโรคใน รูปแบบต่างๆและขั้นตอน

อย่างไรก็ตาม เมื่อรู้ว่าการศึกษาเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์เป็นวิธี ELISA เราไม่คิดว่าจะจัดการอย่างไรให้ครอบคลุมจุลินทรีย์หลากหลายชนิดที่อาศัยอยู่ในโลกของเรา ซึ่งหลายวิธีเป็นภัยคุกคามโดยตรงต่อสุขภาพและชีวิตของมนุษย์และสัตว์ แต่ความจริงก็คือ ELISA มีตัวเลือกมากมาย (ไม่มีการแข่งขันและแข่งขัน - ทั้งทางตรงและทางอ้อม) ซึ่งแต่ละตัวเลือกสามารถแก้ไขปัญหาของตัวเองได้และทำให้สามารถค้นหาเป้าหมายได้

เพื่อระบุอิมมูโนโกลบูลินของคลาสหนึ่งหรืออีกคลาสหนึ่ง มีการใช้แผงโพลีสไตรีน (เพลต) แบบดั้งเดิม 96 หลุมในหลุมที่โปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่ถูกดูดซับนั้นเข้มข้นในเฟสของแข็ง แอนติบอดีหรือแอนติเจนที่เข้าไปในบ่อน้ำด้วยซีรั่มในเลือดจะพบวัตถุ "คุ้นเคย" และก่อตัวเป็นสารเชิงซ้อน (AG - AT) ซึ่งแก้ไขโดยคอนจูเกตของเอนไซม์จะปรากฏโดยการเปลี่ยนสีของบ่อน้ำเมื่อ อ่านผลลัพธ์

เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ดำเนินการโดยใช้ระบบทดสอบที่มีความจำเพาะเจาะจงซึ่งผลิตในห้องปฏิบัติการพิเศษและติดตั้งส่วนประกอบที่ทำปฏิกิริยาที่จำเป็นทั้งหมด การวิจัยสามารถทำได้โดยใช้เครื่องซักผ้า (“เครื่องซักผ้า”) และการอ่านค่าสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ ซึ่งส่วนใหญ่ต้องใช้แรงงานคน สำหรับเครื่องจักรอัตโนมัติเต็มรูปแบบซึ่งปลดปล่อยผู้ช่วยห้องปฏิบัติการจากการหยอดซ้ำซากการซักและงานประจำอื่น ๆ แน่นอนว่าการทำงานจะเร็วขึ้นและสะดวกกว่า แต่ไม่ใช่ว่าห้องปฏิบัติการทั้งหมดจะมีความหรูหราเช่นนี้และยังคงทำงานแบบเก่าต่อไปได้ เครื่องกึ่งอัตโนมัติ

การตีความผลลัพธ์ของ ELISA อยู่ในความสามารถของแพทย์วินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ และต้องคำนึงถึงคุณสมบัติโดยธรรมชาติของปฏิกิริยาอิมมูโนเคมีเกือบทั้งหมดในการให้คำตอบที่เป็นเท็จบวกหรือลบเท็จด้วย

วิดีโอ: เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์สมัยใหม่

ผลลัพธ์ ELISA โดยใช้ตัวอย่างของซิฟิลิส

Enzyme Immunoassay เหมาะสำหรับการตรวจจับทุกรูปแบบและนอกจากนั้นยังใช้ในการศึกษาแบบคัดกรองอีกด้วย เพื่อดำเนินการวิเคราะห์การใช้งาน เลือดดำผู้ป่วยรับประทานในขณะท้องว่าง งานนี้ใช้แท็บเล็ตที่มีความจำเพาะเจาะจง (คลาส AB A, M, G) หรือแอนติบอดีทั้งหมด

เมื่อพิจารณาว่าแอนติบอดีในซิฟิลิสถูกสร้างขึ้นในลำดับเฉพาะ ELISA จึงสามารถตอบคำถามได้อย่างง่ายดายว่าการติดเชื้อเกิดขึ้นเมื่อใดและอยู่ในขั้นตอนใด และการตีความผลลัพธ์ที่ได้สามารถนำเสนอในรูปแบบต่อไปนี้:

• IgM ระบุระยะเวลาของกระบวนการติดเชื้อ (อาจปรากฏขึ้นในช่วงที่กำเริบของโรคอักเสบเรื้อรัง)
• IgA ระบุว่าการติดเชื้อเกิดขึ้นมากกว่าหนึ่งเดือนที่ผ่านมา
• IgG บ่งชี้ว่าการติดเชื้ออยู่ในระดับสูงหรือเพิ่งได้รับการรักษา ซึ่งระบุได้ง่ายโดยการรำลึกถึง

เมื่อตรวจหาซิฟิลิส ช่องเชิงลบ (และกลุ่มควบคุมเชิงลบ) จะยังคงไม่มีสี ในขณะที่ช่องเชิงบวก (และกลุ่มควบคุมเชิงบวก) จะแสดงสีเหลืองสดใสเนื่องจากการเปลี่ยนสีของโครโมเจนที่เพิ่มเข้ามาระหว่างการทดสอบ อย่างไรก็ตาม ความเข้มของสีไม่ตรงกับการควบคุมเสมอไป กล่าวคือ อาจมีสีซีดกว่าหรือออกเหลืองเล็กน้อย ผลลัพธ์เหล่านี้เป็นผลลัพธ์ที่น่าสงสัยซึ่งตามกฎแล้วจะต้องได้รับการตรวจสอบอีกครั้งโดยคำนึงถึงตัวบ่งชี้เชิงปริมาณที่ได้รับจากเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ แต่โดยทั่วไปแล้วสีจะเป็นสัดส่วนโดยตรงกับจำนวนของคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกัน (Ags และ ATs ที่เกี่ยวข้อง) .

สิ่งที่น่าตื่นเต้นที่สุดของการตรวจอิมมูโนแอสเสย์ของเอนไซม์คือ HIV ELISA

การวิเคราะห์อาจจะน่าสนใจกว่าการวิเคราะห์อื่นๆ สำหรับประชากรในวงกว้าง เนื่องจากยังเป็นไปไม่ได้ที่จะพูดได้อย่างมั่นใจว่าหลายคนหายไป ปัญหาสังคม(การค้าประเวณี การติดยาเสพติด ฯลฯ) น่าเสียดายที่เอชไอวีไม่เพียงส่งผลกระทบต่อสังคมมนุษย์หลายระดับเท่านั้น แต่คุณยังสามารถติดเชื้อได้ภายใต้สถานการณ์ต่างๆ ที่ไม่เกี่ยวข้องกับการผิดศีลธรรมทางเพศหรือการใช้ยาเสพติด แต่หากจำเป็นต้องตรวจ HIV ก็ไม่ต้องกลัวว่าคนรอบข้างจะรู้เกี่ยวกับการไปเยี่ยมชมห้องปฏิบัติการดังกล่าว ตอนนี้ ผู้ติดเชื้อเอชไอวีได้รับการคุ้มครองตามกฎหมาย และผู้ที่มีข้อสงสัยสามารถหันไปหาสำนักงานที่ไม่เปิดเผยตัวตนซึ่งพวกเขาสามารถแก้ไขปัญหาได้โดยไม่ต้องกลัวว่าจะมีการเผยแพร่ต่อสาธารณะและประณาม

วิธีเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ที่ใช้ในการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีเป็นหนึ่งในการศึกษามาตรฐานที่สำคัญที่สุดซึ่งจำเป็นต้องมี เงื่อนไขพิเศษเนื่องจากหัวข้อมีความอ่อนไหวมาก

ควรทำ HIV ELISA หลังจากการมีเพศสัมพันธ์ การถ่ายเลือด ขั้นตอนทางการแพทย์อื่น ๆ ที่แนะนำการติดเชื้อ และเมื่อสิ้นสุดระยะฟักตัว ("หน้าต่างซีโรเนกาทีฟ") แต่ควรระลึกไว้เสมอว่าช่วงเวลานี้ ไม่คงที่ อาจสิ้นสุดใน 14-30 วัน หรืออาจนานถึง 6 เดือน ดังนั้นค่าเฉลี่ยจึงถือเป็นช่วงตั้งแต่ 45 ถึง 90 วัน บน เลือดเอชไอวีพวกเขาจะได้รับในลักษณะเดียวกับการติดเชื้ออื่น ๆ - จากหลอดเลือดดำในขณะท้องว่าง ผลลัพธ์จะพร้อมขึ้นอยู่กับการสะสมของวัสดุในห้องปฏิบัติการและปริมาณงาน (ตั้งแต่ 2 ถึง 10 วัน) แม้ว่าห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่มักจะให้คำตอบในวันเดียวกันหรือวันถัดไปก็ตาม

คุณคาดหวังอะไรจากผลการตรวจ HIV ของคุณ?

ELISA สำหรับการติดเชื้อ HIV ตรวจพบแอนติบอดีต่อไวรัสสองประเภท: HIV-1 (พบมากในรัสเซียและประเทศอื่นๆ ของยุโรปและเอเชีย) และ HIV-2 (พบมากในแอฟริกาตะวันตก)

หน้าที่ของ HIV ELISA คือการค้นหาแอนติบอดีคลาส G ซึ่งตรวจพบในระบบการทดสอบทั้งหมด แต่ในระยะต่อมา และแอนติบอดีคลาส A และ M ที่ตรวจพบในชุดทดสอบรีคอมบิแนนต์รุ่นใหม่ซึ่งทำให้สามารถค้นหาแอนติบอดีได้ มากที่สุด ระยะแรก (ระยะฟักตัว– “หน้าต่างซีโรเนกาทีฟ”) คุณสามารถคาดหวังคำตอบต่อไปนี้จาก ELISA:

1. ผลลัพธ์หลักที่เป็นบวก: จะต้องตรวจเลือดซ้ำโดยใช้ระบบการทดสอบประเภทเดียวกัน แต่ถ้าเป็นไปได้ในซีรีส์ที่แตกต่างกันและโดยบุคคลอื่น (ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการ)
2. ซ้ำ (+) เกี่ยวข้องกับการเจาะเลือดใหม่จากผู้ป่วยโดยมีการตรวจคล้ายกับการวิเคราะห์เบื้องต้น
3. ผลลัพธ์เชิงบวกอีกประการหนึ่งขึ้นอยู่กับการวิเคราะห์อ้างอิง ซึ่งใช้ชุดทดสอบที่มีความจำเพาะสูง (2-3 ชิ้น)
4. ผลลัพธ์ที่เป็นบวกในทั้งสอง (หรือสามระบบ) จะถูกส่งไปตรวจภูมิคุ้มกันบกพร่อง (ELISA เดียวกัน แต่ดำเนินการแยกกันโดยใช้ชุดทดสอบที่มีความจำเพาะสูงเป็นพิเศษ)

บทสรุปเกี่ยวกับ การติดเชื้อเอชไอวีพิจารณาจากพื้นฐานของอิมมูโนล็อตติงเท่านั้น การสนทนาจะดำเนินการกับผู้ติดเชื้อโดยเป็นความลับอย่างสมบูรณ์ การเปิดเผยความลับทางการแพทย์ในรัสเซียและในประเทศอื่น ๆ อาจมีโทษทางอาญา

การทดสอบหนองในเทียมและไซโตเมกาโลไวรัส วิธีเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ยังได้รับความนิยมเป็นพิเศษเนื่องจากสามารถกำหนดเวลาของการติดเชื้อ ระยะของโรค และประสิทธิผลของมาตรการการรักษาได้

ในระหว่างการใช้งาน เรายังสามารถสังเกตลักษณะของแอนติบอดี้ประเภทต่างๆ ได้ในระยะต่างๆ สภาพทางพยาธิวิทยาเกิดจากเชื้อโรค:

• IgM สามารถตรวจพบได้เร็วที่สุดเจ็ดวันหลังการติดเชื้อ
• IgA บ่งชี้ว่าการติดเชื้ออยู่ในร่างกายมานานกว่าหนึ่งเดือนแล้ว
• IgG ยืนยันการวินิจฉัยโรคหนองในเทียมและช่วยติดตามการรักษาและตรวจสอบประสิทธิผล ควรสังเกตว่าแอนติบอดีคลาส G ยังคงอยู่และไหลเวียนอยู่ในร่างกายโดยไม่คำนึงถึงระยะเวลาของโรค ดังนั้นสำหรับ การถอดรหัสที่ถูกต้องการวิเคราะห์จำเป็นต้องคำนึงถึงค่าอ้างอิง (บรรทัดฐาน) ซึ่งโดยวิธีการที่แตกต่างกันสำหรับแต่ละ CDL: โดยคำนึงถึงแบรนด์ของระบบทดสอบและความจำเพาะของรีเอเจนต์ที่รวมอยู่ในชุดอุปกรณ์ ค่าปกติจะถูกป้อนในแบบฟอร์มถัดจากผลลัพธ์ ELISA

สำหรับ มันแตกต่างเล็กน้อยที่นี่:แอนติบอดีคลาส M จะปรากฏขึ้นหลังจากผ่านไปประมาณหนึ่งเดือนครึ่ง นั่นคือผลลัพธ์ (IgM+) จะกลายเป็นค่าบวกในระยะของการติดเชื้อขั้นต้นหรือระหว่างการเปิดใช้งานอีกครั้ง การติดเชื้อที่ซ่อนอยู่และยังคงอยู่ตั้งแต่ 4 เดือนถึงหกเดือน

การมีอยู่ของคลาส G AT เป็นลักษณะของการโจมตีระดับปฐมภูมิ การติดเชื้อเฉียบพลันหรือการติดเชื้อซ้ำ การวิเคราะห์ระบุว่ามีไวรัสอยู่ แต่ไม่ได้ให้ข้อมูลว่ากระบวนการติดเชื้ออยู่ในระยะใด ในขณะเดียวกันการกำหนดระดับ IgG titer ปกติก็ทำให้เกิดปัญหาเช่นกันเนื่องจากมันขึ้นอยู่กับทั้งหมด สถานะภูมิคุ้มกันบุคคลเฉพาะซึ่งถูกกำหนดโดยการระบุอิมมูโนโกลบูลินคลาส G เมื่อพิจารณาจากพฤติกรรมของแอนติบอดีนี้ เมื่อวินิจฉัย CMV จำเป็นต้องประเมินความสามารถของแอนติบอดีคลาส G ในการโต้ตอบกับ CMV เพื่อที่จะ "ทำให้เป็นกลาง" (ที่ ความโลภ). บน ชั้นต้นโรค IgG จับกับแอนติเจนของไวรัสได้ไม่ดีนัก (ความโลภต่ำ) และจากนั้นก็เริ่มแสดงกิจกรรมดังนั้นเราสามารถพูดคุยเกี่ยวกับการเพิ่มขึ้นของความโลภของแอนติบอดีได้

เราสามารถพูดคุยเกี่ยวกับข้อดีของเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ได้มากเพราะวิธีการนี้สามารถแก้ไขปัญหาการวินิจฉัยหลายอย่างโดยใช้เลือดดำเท่านั้น ไม่จำเป็นต้องรอนาน กังวล และปัญหาในการรวบรวมวัสดุเพื่อการวิจัย นอกจากนี้ระบบการทดสอบสำหรับ ELISA ยังคงได้รับการปรับปรุงอย่างต่อเนื่องและอีกไม่นานเมื่อการทดสอบจะให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ 100%

วิดีโอ: ภาพยนตร์การศึกษาของ Moscow State Medical University ตั้งชื่อตาม Sechenov เกี่ยวกับพื้นฐานของ ELISA