พลาสมิดของแบคทีเรีย หน้าที่และคุณสมบัติ การใช้พลาสมิดในพันธุวิศวกรรม

พบว่าในแบคทีเรียหลายชนิด นอกเหนือจากปริมาณ DNA ที่อยู่ใน "โครโมโซมของแบคทีเรีย" (หลายล้านคู่เบส) แล้ว ยังมีโมเลกุล DNA ทรงกลม "เล็ก" แบบเกลียวคู่และเกลียวซุปเปอร์คอยล์อีกด้วย พวกมันถูกเรียกว่าพลาสมิดเนื่องจากตำแหน่งของมันอยู่ในโปรโตพลาสซึมของเซลล์ จำนวนคู่เบสในพลาสมิดถูกจำกัดให้อยู่ในช่วงตั้งแต่ 2 ถึง 20,000 แบคทีเรียบางชนิดมีพลาสมิดเพียงอันเดียว ในที่อื่นมีหลายร้อยคน

โดยปกติพลาสมิดจะถูกทำซ้ำในระหว่างการแบ่งเซลล์แบคทีเรียพร้อมกับ DNA หลักของโครโมโซม สำหรับการสืบพันธุ์ พวกเขาใช้ DNA polymerases I, III และเอนไซม์อื่น ๆ "โฮสต์" พลาสมิดสังเคราะห์โปรตีนจำเพาะของพวกมันโดยใช้ RNA polymerase และไรโบโซม ซึ่งเป็นของแบคทีเรียเจ้าบ้านด้วย ในบรรดา "ผลงาน" ของพลาสมิดเหล่านี้บางครั้งอาจเป็นสารที่ทำลายยาปฏิชีวนะ (แอมพิมัยซิน, เตตราไซคลิน, นีโอมัยซินและอื่น ๆ ) อะไรทำให้แบคทีเรียที่เป็นโฮสต์สามารถต้านทานผลกระทบของยาปฏิชีวนะเหล่านี้ได้หากตัวมันเองไม่มีความต้านทานดังกล่าว ไม่เพียงแค่นั้น “ความเป็นอิสระ” ของพลาสมิดบางชนิดขยายไปจนถึงจุดที่พวกมันสามารถสืบพันธุ์ในเซลล์แบคทีเรียได้ แม้ว่าการสังเคราะห์โปรตีนในพลาสมิดนั้น (และด้วยเหตุนี้ การแบ่งตัวของมัน) จะถูกขัดขวางโดยการกระทำของสารยับยั้งที่จำเพาะก็ตาม ในกรณีนี้สามารถสะสมพลาสมิดได้มากถึง 2-3,000 ตัวในแบคทีเรีย

พลาสมิดที่บริสุทธิ์สามารถแทรกซึมจากสารอาหารเข้าสู่เซลล์ของแบคทีเรียแปลกปลอม จับตัวอยู่ที่นั่นและแพร่พันธุ์ได้ตามปกติ จริงอยู่ด้วยเหตุนี้จึงจำเป็นต้องเพิ่มการซึมผ่านของเยื่อหุ้มแบคทีเรียเหล่านี้ก่อนโดยการบำบัดด้วยสารละลายแคลเซียมคลอไรด์

การบูรณาการพลาสมิดจากต่างประเทศที่ประสบความสำเร็จนั้นเป็นไปได้เฉพาะกับเซลล์ส่วนน้อยในประชากรที่ได้รับการรักษาเท่านั้น อย่างไรก็ตามหากแบคทีเรียผู้รับไม่มีความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะชนิดใดชนิดหนึ่งและพลาสมิดที่ "สร้างขึ้น" ทำให้เกิดการต้านทานนี้แม้กระทั่งจากแบคทีเรีย "เปลี่ยนรูป" ที่ประสบความสำเร็จเพียงตัวเดียวบนอาหารเลี้ยงเชื้อด้วยการเติมยาปฏิชีวนะก็เป็นไปได้ เพื่อขยายอาณานิคมที่เต็มเปี่ยมไปด้วยพลาสมิดในตัว

สุดท้ายสิ่งที่สำคัญที่สุด หากชิ้นส่วนของ DNA ที่แปลกแยกโดยสิ้นเชิง (เช่น ยีนที่มาจากสัตว์) สามารถ "ฝัง" ลงใน DNA ของพลาสมิดได้ (ก่อนเริ่มการเปลี่ยนแปลง) จากนั้นชิ้นส่วนนี้ร่วมกับพลาสมิดจะ เข้าไปในเซลล์ผู้รับ คูณเข้าด้วยกัน และควบคุมการสังเคราะห์ "พลาสมิดเทียม" ภายในโปรตีนของแบคทีเรียที่เข้ารหัสในยีนนี้!

ยังคงแก้ปัญหาการใส่ยีนที่เลือกเข้าไปในพลาสมิด และยังรับในเบื้องต้นอีกด้วย ปริมาณที่ต้องการยีนนี้เองถ้าจุดเริ่มต้นคือโครงสร้างของโปรตีนที่เราสนใจ (อย่างน้อยบางส่วน) ที่รู้จัก นี่คือจุดที่ความเป็นไปได้เฉพาะตัวของการใช้เอนไซม์จำกัดจะเปิดเผยออกมา

แต่ก่อนอื่น คำสองสามคำเกี่ยวกับการแยกพลาสมิดออกจากเซลล์ของโฮสต์แบคทีเรียปกติ DNA ทั้งหมดสามารถชำระให้บริสุทธิ์ได้จากแบคทีเรียตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ แล้วหนึ่งใน วิธีการทางกายภาพแยก DNA น้ำหนักโมเลกุลต่ำของพลาสมิดออกจาก DNA น้ำหนักโมเลกุลที่ค่อนข้างสูงของโครโมโซมแบคทีเรีย คุณเพียงแค่ต้องแน่ใจว่าเมื่อเปิดเซลล์ ชิ้นส่วนเล็กๆ ของ DNA หลักจะไม่ปรากฏขึ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งไม่ควรใช้อัลตราซาวนด์เพื่อทำลายเยื่อหุ้มแบคทีเรีย

มันอาจจะง่ายกว่า รักษาสฟีโรพลาสต์ของแบคทีเรียด้วยด่างอ่อน + DDC-Na หรือต้มเป็นเวลา 1 นาที DNA ของโครโมโซมของแบคทีเรียพร้อมกับโปรตีนที่เกี่ยวข้องนั้นจะถูกทำให้เสียสภาพและตกตะกอนเป็นสะเก็ด สามารถถอดออกได้ง่ายด้วยการหมุนเหวี่ยง DNA ของพลาสมิดแบบวงกลมก็ถูกทำให้เสียสภาพเป็นครั้งแรกเช่นกัน แต่เนื่องจากวงแหวนเกลียวเดี่ยวของมันถูกเชื่อมต่อแบบทอพอโลยี พวกมันจึงไม่สามารถแยกออกจากกันได้ หลังจากพักฟื้นแล้ว สภาวะปกติสิ่งแวดล้อม โครงสร้างดั้งเดิมของพลาสมิดจะถูกเปลี่ยนสภาพใหม่ พวกเขายังคงอยู่ในสารละลาย

สำหรับ ปีที่ผ่านมาพลาสมิดหลายร้อยตัวถูกแยกและทำให้บริสุทธิ์ คำอธิบายตามธรรมชาติเริ่มต้นด้วยการนำเสนอลำดับนิวคลีโอไทด์ที่สมบูรณ์ของพลาสมิดดีเอ็นเอ "ซีเควนเซอร์" อัตโนมัติสมัยใหม่ทำให้สามารถถอดรหัสลำดับของคู่เบส 4-5,000 คู่ในหนึ่งสัปดาห์ได้ ในช่วงทศวรรษ 1980 เมื่อการจัดลำดับดีเอ็นเอด้วยตนเอง งานนี้ใช้เวลาหลายเดือน

ชีววิทยาและพันธุศาสตร์

พลาสมิดของเซลล์แบคทีเรีย ในกรณีส่วนใหญ่ พลาสมิดของแบคทีเรียนั้นเป็นโมเลกุล DNA ทรงกลม supercoiled ที่มีโควาเลนต์ปิดด้วยโควาเลนต์สองชั้น เอนไซม์เหล่านี้จดจำตำแหน่งลำดับนิวคลีโอไทด์สั้นที่จำเพาะเหมือนกันใน DNA

หัวข้อที่ 22 พันธุวิศวกรรมพลาสมิด

1. พลาสมิดของเซลล์แบคทีเรีย

  • ในกรณีส่วนใหญ่พลาสมิดของแบคทีเรียเป็นเกลียวคู่ชม. โมเลกุล DNA ทรงกลมที่ปิดด้วยโควาเลนต์แบบซุปเปอร์คอยล์ เนื่องจากโครงสร้างนี้ พวกมันจึงไม่ได้สัมผัสกับนิวคลีเอสของเซลล์ มีเส้นด้วยไทย nal plasmids ซึ่งนิวเคลียสไม่ทำหน้าที่ เนื่องจากส่วนปลายของพวกมันอยู่ด้านในพวกเขามีการคุ้มครองเป็นพิเศษและโปรตีนทางกายภาพ (เทโลเมอเรส)
  • ขนาดของพลาสมิดมีความแปรปรวนสูง ตัวอย่างเช่น น้ำหนักโมเลกุลของพลาสมิดที่เล็กที่สุดชนิดหนึ่งที่พบในสายพันธุ์แบคทีเรียอี. โคไล คือ 1.5 MD เซลล์ Pseudomonas อาจมีพลาสมิดโมเลกุลที่ ซึ่งมีมวลขั้วโลกใกล้เคียงกับ 500 MD ซึ่งเป็นประมาณ 20% ของมวลโมเลกุลของโครโมโซมโอ เราคือแบคทีเรียเหล่านี้
  • คุณสมบัติของพลาสมิด:

1) ด้วย ความสามารถในการจำลองแบบอัตโนมัติ

2) การส่งผ่าน ( หมายถึงความสามารถในการปลาชม. กลางถูกถ่ายโอนจากเซลล์หนึ่งไปอีกเซลล์ระหว่างการผันคำกริยา);

3) ด้วย ความสามารถของพลาสมิดหลายชนิดการบูรณาการเข้ากับแบคทีเรีย chหรือโมโซมุ;

4) ความไม่เข้ากัน;

5) ทรัพย์สิน การยกเว้นผิวเผินมีอยู่ในพลาสมิดคอนจูกาทีฟ

6) พลาสมิดทำให้เซลล์แตกต่างลักษณะฟีโนไทป์

  • พลาสมิดทุกประเภทจำเป็นสำหรับเซลล์แบคทีเรียด้วยเหตุผลดังต่อไปนี้:และสำหรับเรา:

1) กำหนดคุณสมบัติฟีโนไทป์จำนวนหนึ่ง, pโอ ช่วยให้คุณตอบสนองต่อการเปลี่ยนแปลงสภาพแวดล้อมได้อย่างยืดหยุ่นและรวดเร็วยิ่งขึ้นสภาพแวดล้อมปัจจุบัน

2) พลาสมิดของแบคทีเรียมีการใช้กันอย่างแพร่หลายทั้งในทางทฤษฎีและปฏิบัติจ การวิจัยทางวิทยาศาสตร์ (เช่น ใช้ใน พันธุวิศวกรรม).

3) มีบทบาทสำคัญในการวิวัฒนาการของแบคทีเรีย

ข้าว. 1 - เอฟ -พลาสมิดของแบคทีเรียอี. โคไล

2. ระบบจำกัดและดัดแปลงเซลล์แบคทีเรีย

  • ปรากฏการณ์แห่งข้อจำกัดและโหมดและนิยาย ถูกค้นพบโดยนายเบอร์ตานี เจ. ไวเกิลในปี พ.ศ. 2496 มีการศึกษาเพิ่มเติมในรายละเอียดในช่วงปลายทศวรรษปี พ.ศ. 2503 V. Arber เมื่อศึกษาการพัฒนาและ การเกิดแบคทีริโอฟาจ แลง ในสายพันธุ์ต่างๆ โคไล- พวกเขาค้นพบคโอ กลไกเพิ่มเติมที่ควบคุมความสัมพันธ์ระหว่างแบคทีเรียและฟาจ เกี่ยวกับพื้นฐานการวิจัยกลไกแบบเปิด ผู้เขียนเสนอรุ่น “ข้อจำกัดและการแก้ไขและแคตไอออน” - ข้อจำกัด แปลตรงตัวว่า “ข้อจำกัด”)นี่คือทฤษฎีที่อธิบายฉัน มีกลไกในการจำกัดความสามารถของแบคทีริโอฟาจในการเจริญเติบโตในแบคทีเรียโฮสต์โดยการกำหนดและสายพันธุ์ใหม่

ต่อมาได้มีการค้นพบเอนไซม์จำกัดและการประยุกต์ในพันธุศาสตร์ระดับโมเลกุล V. Arber, H. Smith และ D. Nathans ได้รับรางวัลโนเบลในปี 1978

  • ทำงานในเซลล์แบคทีเรียระบบจำกัดและแก้ไข (มันถูกกำหนดให้เป็น ระบบอาร์-เอ็ม ) เกิดจากจุลินทรีย์ 2 สายพันธุ์ที่จำเพาะต่อสายพันธุ์โอ เอนไซม์ในร่างกายเมทิเลสและเอนไซม์จำกัดเอนไซม์เหล่านี้จดจำลำดับสั้น ๆ ที่เหมือนกันใน DNAคุณสมบัติของนิวคลีโอไทด์เว็บไซต์ - เมทิลเลสโดยการปรับเปลี่ยนฐานบางส่วนของ DNA ในเซลล์โอ ปกป้องเธอจากการทำงานของเซลล์ของเธอเองชม. ไม่มีเอนไซม์จำกัด

การปรับเปลี่ยนก็คือ กระบวนการเปลี่ยนแปลงหลังการจำลองโครงสร้างดีเอ็นเอ, เช่น. จำเป็นต้องทำให้กระบวนการจำลองดีเอ็นเอเสร็จสมบูรณ์ ส่วนใหญ่มักจะระบุการปรับเปลี่ยนอาจเกิดขึ้นเมื่อเมทิลเลสเปลี่ยน DNA ด้วยเมทิลเลชั่นหรือไกลเคชั่นโอ การรวมตัวกันของอะดีนีนหรือไซโตซีน

  • ชื่อของเอนไซม์จำกัด:

เอนไซม์จำกัดถูกกำหนดโดยตัวอักษร R - ตัวอย่างเช่น RBsu, REco

ชื่อของเอนไซม์จำกัดถูกกำหนดโดยชื่อทั่วไปและชื่อสปีชีส์ของแบคทีเรียที่ใช้แยกเอนไซม์นั้น การกำหนดตัวเลขเพิ่มเติม (เลขโรมัน) สะท้อนถึงลำดับเหตุการณ์ของการค้นพบเอนไซม์: Bacillus subtilis Bsu, Escherichia coli อีโค

  • เอนไซม์จำกัดมีสามประเภท:ฉัน ครั้งที่สอง III
  • เว็บไซต์ข้อจำกัดเอนไซม์จำกัดประเภท IIแสดงโดยปาลินทรา โอ มามิ

พาลินโดรม นี่คือตอนที่ลำดับในสาย DNA สองเส้นเหมือนกัน แต่ไปในทิศทางตรงกันข้าม.

ข้าว. 2 - ตัวอย่างของพาลินโดรม (หรือไซต์จำกัด)

  • ตัวอย่างการทำงานของเอนไซม์จำกัดประเภทที่ 2:

1) เป็นผลจากการทำงานของเอนไซม์จำกัดครั้งที่สอง ชิ้นส่วน DNA ประเภทที่มีปลายทื่อ (เรียบ) เกิดขึ้น ตัวอย่างของเอนไซม์จำกัดดังกล่าวคือ เอนไซม์ Bal I:

2) เป็นผลจากการทำงานของเอนไซม์จำกัดครั้งที่สอง เกิดชิ้นส่วน DNA ชนิดที่มีปลายเหนียว (ไม่สม่ำเสมอ) เกิดขึ้น ตัวอย่างของเอนไซม์จำกัดดังกล่าวคือเอนโดนิวคลีเอส EcoR1:

3. พันธุวิศวกรรม การโคลนยีนในเซลล์จุลินทรีย์

  • พันธุวิศวกรรมชุดวิธีการที่ช่วยให้คุณสร้างได้ในหลอดทดลอง โมเลกุลดีเอ็นเอลูกผสม ตามมาด้วยการถ่ายโอนโครงสร้างทางพันธุกรรมใหม่เหล่านี้จากสิ่งมีชีวิตหนึ่งไปยังอีกสิ่งมีชีวิตหนึ่ง เป้าหมายของพันธุวิศวกรรมคือการได้รับเซลล์ (ส่วนใหญ่เป็นแบคทีเรีย) ที่สามารถผลิตโปรตีน "มนุษย์" บางชนิดในระดับอุตสาหกรรม ในความสามารถในการเอาชนะอุปสรรคระหว่างสายพันธุ์และถ่ายโอนลักษณะทางพันธุกรรมส่วนบุคคลของสิ่งมีชีวิตหนึ่งไปยังอีกสิ่งมีชีวิตหนึ่ง (ใช้ในการปรับปรุงพันธุ์พืชและสัตว์)
  • แผนภาพการทดลองสำหรับการสร้าง DNA รีคอมบิแนนท์และยีนโคลนนิ่งในเซลล์แบคทีเรียแสดงไว้ในรูปที่ 1 2.

DNA ต่างประเทศและ DNA พลาสมิดถูกตัดออกในหลอดทดลอง โดยใช้เอนไซม์จำกัดเดียวกัน สิ่งนี้จะสร้างชิ้นส่วนที่มีปลาย "เหนียว" (ส่วนขั้วต่อแบบเกลียวเดี่ยวพร้อมฐานเสริม) อันเป็นผลมาจากการผสมชิ้นส่วนดังกล่าวและการรักษาด้วย ligase พลาสมิดจะถูกสร้างขึ้นโดยมี DNA ยูคาริโอตรวมอยู่ในนั้น DNA ลูกผสมเหล่านี้สามารถนำไปเป็นแบคทีเรียที่เหมาะสมได้โดยการเปลี่ยนรูปและแพร่กระจายเพื่อสร้างโคลนหลายตัว

ข้าว. 2 - การรับและการโคลน pDNA รวมกัน

4. ความก้าวหน้าและปัญหาของเทคโนโลยีชีวภาพ

  • เทคโนโลยีชีวภาพ โดยพื้นฐานแล้ว ไม่มีอะไรมากไปกว่าการสร้างซุปเปอร์โปรดิวเซอร์โดยใช้จุลินทรีย์และเซลล์พืชหรือสัตว์ที่สามารถสังเคราะห์สารโปรตีนใดๆ ที่มีความสำคัญในทางปฏิบัติได้ ตามคำจำกัดความของสหพันธ์เทคโนโลยีชีวภาพแห่งยุโรปซึ่งก่อตั้งขึ้นเมื่อปี พ.ศ. 2521 ระบุว่าเทคโนโลยีชีวภาพ โดยอาศัยการประยุกต์ใช้ความรู้และวิธีการทางชีวเคมี จุลชีววิทยา พันธุศาสตร์ เทคโนโลยีเคมี,คณิตศาสตร์,เศรษฐศาสตร์ ช่วยให้คุณได้รับประโยชน์จาก กระบวนการทางเทคโนโลยีจากคุณสมบัติของจุลินทรีย์และโครงสร้างเซลล์
  • ปัญหาด้านเทคโนโลยีชีวภาพสามารถแบ่งออกได้เป็น 3 กลุ่ม คือ

1) ระเบียบวิธี - มีปัญหาด้านระเบียบวิธีมากมาย

2) เศรษฐกิจ - วิธีการทางพันธุวิศวกรรมเป็นขั้นตอนที่มีราคาแพงมากตัวอย่างเช่น โดยเฉลี่ยแล้ว การสร้าง GMP (พืชดัดแปลงพันธุกรรม) สายพันธุ์ใหม่หนึ่งสายพันธุ์มีค่าใช้จ่าย 50 ถึง 300 ล้านดอลลาร์ และใช้เวลา 6 ถึง 12 ปี

3) จริยธรรมและการเมือง

ขึ้นอยู่กับความคิดเห็นสาธารณะเชิงลบในปี 1998 ประเทศสมาชิกสหภาพยุโรปเสนอการเลื่อนการชำระหนี้ชั่วคราวห้าปีสำหรับการผลิตอาหารจากสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรมและการนำเข้าผลิตภัณฑ์ดัดแปลงพันธุกรรม การเลื่อนการชำระหนี้ตามกฎหมายถูกยกเลิกในปี 2546 แต่พืชดัดแปรพันธุกรรมยังไม่มีการผลิตในเชิงพาณิชย์ในยุโรป

ใน พ.ศ. 2543 พิธีสารคาร์ตาเฮนาได้รับการลงนามในเรื่องความปลอดภัยทางชีวภาพ การจำกัดการแพร่กระจายของสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรม จนถึงปัจจุบันมี 180 ประเทศได้เข้าร่วมแล้ว

ใน พ.ศ. 2547 สหภาพอนุรักษ์โลกยอมรับสิ่งมีชีวิต GM ว่าเป็น "มนุษย์ต่างดาวที่คุกคามเสถียรภาพของระบบนิเวศ" และยื่นอุทธรณ์ต่อรัฐบาล ประเทศต่างๆเรียกร้องให้มีการห้ามใช้ในเชิงพาณิชย์

ข้าว. 3 - พื้นที่ปลูก (ล้านเฮกตาร์) ในปี 2545 สัดส่วนของพืชดัดแปรพันธุกรรมในนั้น

รายชื่อบริษัท
ผลิตภัณฑ์ที่มีส่วนประกอบดัดแปรพันธุกรรม

  • เคลล็อกส์ (Kelloggs) ผลิตอาหารเช้าสำเร็จรูปได้แก่ ข้าวเกรียบ
  • เนสท์เล่ ผลิตช็อคโกแลต กาแฟ เครื่องดื่มกาแฟ อาหารทารก
  • ไฮนซ์ฟู้ดส์ผลิตซอสมะเขือเทศซอส
  • เฮอร์ชีย์ ผลิตช็อกโกแลต น้ำอัดลม
  • โคคา-โคลา ( Coca-Cola) โคคา-โคล่า สไปรท์ แฟนต้า คินลี่โทนิค
  • แมคโดนัลด์ (แมคโดนัลด์) เครือ "ร้านอาหาร" อาหารจานด่วน
  • ดานอน ผลิตโยเกิร์ต kefir คอทเทจชีส อาหารเด็ก
  • ซิมิแลค (Similac) ผลิตอาหารสำหรับทารก
  • แคดเบอรี ผลิตช็อคโกแลตโกโก้
  • ดาวอังคาร ผลิตช็อกโกแลต Mars, Snickers, Twix
  • เป๊ปซี่โค (เป๊ปซี่-โคล่า) เป๊ปซี่ มิรินด้า เซเว่นอัพ

หน้า 5


รวมไปถึงผลงานอื่นๆที่คุณอาจสนใจ

52495. เกมการสอนสำหรับการสอนวิชาเคมี 429.41 KB
อิทธิพลของเกมการสอนต่อประสิทธิผลของการเรียนรู้อัลกอริทึมสำหรับการพัฒนาและดำเนินเกมการสอน เกมการสอนในบทเรียนเคมี ในระหว่างเกม นักเรียนจะได้รับความรู้และทักษะใหม่ๆ และขยายขอบเขตอันไกลโพ้นของพวกเขา
52499. วิธีจำคำผิดโดยไม่ต้องใช้ความพยายาม 32 กิโลไบต์
แมวต่อหนูเล่าว่า: ฉันจะให้แซนด์วิชของฉันแก่คุณ แม่จะไม่โทรหา Vanya เพื่อทานอาหารเย็น ฉันกำลังฝึกฝนจิตใจของนักเรียน: แม่ของ Kolya เล่าว่า: ของหวานทำให้ฉันปวดท้อง
52500. ประสิทธิภาพของการฝึกอบรม 116.5 กิโลไบต์
ในขณะที่ทำงานที่โรงเรียน ฉันตระหนักว่าการพัฒนาโดยตรงโดยเฉพาะอย่างยิ่งในการทำความเข้าใจการดำเนินงานหลักบางอย่างของโรงเรียนนั้นเป็นไปไม่ได้หากไม่มีการสอนที่แตกต่าง Golovna Zavdannya ชัดเจนถึงลังกาที่ซับซ้อน ไม่ใช่ Zaboti Ditini Datini Dati นั้นเจ็บปวดมากกว่าการวางธรรมชาติของโรงเรียน Simyu สำหรับแพทย์ ระดับความพร้อมของนักศึกษาก่อนเริ่มทำกิจกรรมเป็นสิ่งสำคัญมาก...
52502. หลักฐานในการดำเนินคดีอนุญาโตตุลาการ 341.04 KB
สถาบันหลักฐานตุลาการเป็นหนึ่งในสถาบันที่สำคัญที่สุดในสาขากฎหมายรัสเซียที่ควบคุมการบริหารกระบวนการยุติธรรมในคดีแพ่ง อนุญาโตตุลาการ และอาญา เอกสาร บทความ ข้อคิดเห็น และวิทยานิพนธ์จำนวนนับไม่ถ้วนได้อุทิศให้กับสถาบันแห่งนี้โดยรวมและในแง่มุมต่างๆ ของสถาบันแห่งนี้ นี่เป็นที่เข้าใจได้เนื่องจาก การใช้งานที่ถูกต้องหลักฐานใน การพิจารณาคดีรับประกันการสถาปนาความจริงตามวัตถุประสงค์:
52503. ความแตกต่าง - จิตใจแห่งความพยายามที่ประสบความสำเร็จ 95.5 กิโลไบต์
การรักษาที่แตกต่างกันของ Vikonuvati อย่างเป็นระบบโดยพิจารณาจากระดับผิวให้ได้มาตรฐานอันเป็นเอกลักษณ์ รับงานมอบหมายที่มีความยากลำบากเพิ่มขึ้นสำหรับผู้แข็งแกร่งขึ้นและเปลี่ยนโลกแห่งการช่วยเหลือสำหรับนักเรียนที่อ่อนแอกว่า ความแตกต่างจะต้องหยุดนิ่งภายใต้ชั่วโมงการทำงานส่วนหน้า หากนักวิทยาศาสตร์แก้ภารกิจเริ่มแรกที่ซ่อนอยู่ เลือกการมอบหมายตัวแปรเพื่อให้ครูและนักเรียนแก้ไขงานเหล่านี้ได้ง่ายขึ้น
  • III. คำแนะนำโดยย่อเกี่ยวกับฮอร์โมน โดยคำนึงถึงตำแหน่งของการผลิตและการทำงานของฮอร์โมน
  • III. อวัยวะที่รวมการทำงานของต่อมไร้ท่อและไม่ใช่ต่อมไร้ท่อ
  • พลาสมิด- โครงสร้างทางพันธุกรรมเคลื่อนที่นอกโครโมโซมของแบคทีเรียซึ่งเป็นวงแหวนปิดของ DNA ที่มีเกลียวคู่ พลาสมิดสามารถคัดลอก (จำลอง) ได้โดยอัตโนมัติและมีอยู่ในไซโตพลาสซึมของเซลล์ ดังนั้นจึงสามารถมีพลาสมิดได้หลายสำเนาในเซลล์ พลาสมิดสามารถรวม (รวม) ไว้ในโครโมโซมและทำซ้ำร่วมกับมันได้ แยกแยะ การแพร่เชื้อ และ ไม่สามารถถ่ายทอดได้พลาสมิด- พลาสมิดที่ถ่ายทอดได้ (คอนจูกาทีฟ) สามารถถ่ายโอนจากแบคทีเรียหนึ่งไปยังอีกแบคทีเรียหนึ่งได้

    ในบรรดาลักษณะฟีโนไทป์ที่พลาสมิดมอบให้กับเซลล์แบคทีเรีย สามารถแยกแยะได้ดังต่อไปนี้::

    1) ความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะ

    2) การก่อตัวของโคลิซิน;

    3) การผลิตปัจจัยการทำให้เกิดโรค;

    4) ความสามารถในการสังเคราะห์สารปฏิชีวนะ

    5) การสลายสารอินทรีย์ที่ซับซ้อน

    6) การก่อตัวของเอนไซม์จำกัดและดัดแปลง

    คำว่า "พลาสมิด" ถูกนำมาใช้ครั้งแรกโดยนักวิทยาศาสตร์ชาวอเมริกัน J. Lederberg (1952) เพื่ออ้างถึงปัจจัยทางเพศของแบคทีเรีย พลาสมิดนำยีนที่ไม่จำเป็นสำหรับเซลล์เจ้าบ้านและให้แบคทีเรีย คุณสมบัติเพิ่มเติมซึ่งภายใต้สภาพแวดล้อมบางประการทำให้พวกเขาได้เปรียบชั่วคราวเหนือแบคทีเรียที่ปราศจากพลาสมิด

    พลาสมิดบางชนิดอยู่ภายใต้ การควบคุมอย่างเข้มงวดซึ่งหมายความว่าการจำลองแบบของพวกมันจะควบคู่ไปกับการจำลองโครโมโซมเพื่อให้เซลล์แบคทีเรียแต่ละเซลล์มีพลาสมิดหนึ่งหรืออย่างน้อยหลายสำเนา

    จำนวนสำเนาของพลาสมิดที่อยู่ด้านล่าง การควบคุมที่อ่อนแอสามารถเข้าถึงได้ตั้งแต่ 10 ถึง 200 ต่อเซลล์แบคทีเรีย

    เพื่อจำแนกลักษณะของพลาสมิดจำลอง พวกมันมักจะถูกแบ่งออกเป็นกลุ่มที่เข้ากันได้ ความไม่เข้ากันพลาสมิดมีความเกี่ยวข้องกับการที่พลาสมิดสองตัวไม่สามารถคงอยู่ในเซลล์แบคทีเรียเดียวกันได้อย่างเสถียร พลาสมิดบางชนิดสามารถรวมเข้ากับโครโมโซมของแบคทีเรียแบบย้อนกลับได้และทำหน้าที่เป็นแบบจำลองเดียว พลาสมิดดังกล่าวเรียกว่า บูรณาการ หรือ เรื่องราวดีๆ .

    ในแบคทีเรีย ประเภทต่างๆค้นพบ R-พลาสมิด, แบกยีนที่รับผิดชอบในการต่อต้านหลายอย่าง ยา- ยาปฏิชีวนะ ซัลโฟนาไมด์ ฯลฯ เอฟ พลาสมิด, หรือปัจจัยทางเพศของแบคทีเรียซึ่งกำหนดความสามารถในการผันและสร้างพิลิทางเพศ เอนท์พลาสมิด, กำหนดการผลิตเอนเทอโรทอกซิน

    พลาสมิดสามารถตรวจสอบความรุนแรงของแบคทีเรียได้เช่นเชื้อโรคของโรคระบาดและบาดทะยักความสามารถของแบคทีเรียในดินในการใช้แหล่งคาร์บอนที่ผิดปกติควบคุมการสังเคราะห์โปรตีนของสารคล้ายยาปฏิชีวนะ - แบคทีเรียแบคเทอริโอซินซึ่งกำหนดโดยพลาสมิดของแบคทีเรีย ฯลฯ การดำรงอยู่ของ พลาสมิดอื่นๆ จำนวนมากในจุลินทรีย์แสดงให้เห็นว่าโครงสร้างที่คล้ายกันนั้นพบได้ทั่วไปในจุลินทรีย์หลากหลายชนิด

    พลาสมิดอาจเกิดการรวมตัวกันอีกครั้ง การกลายพันธุ์ และสามารถกำจัด (กำจัด) ออกจากแบคทีเรียได้ ซึ่งจะไม่ส่งผลกระทบต่อคุณสมบัติพื้นฐานของพวกมัน พลาสมิดเป็นแบบจำลองที่สะดวกสำหรับการทดลองเกี่ยวกับการสร้างสารพันธุกรรมขึ้นใหม่ และมีการใช้กันอย่างแพร่หลายในพันธุวิศวกรรมเพื่อให้ได้สายพันธุ์รีคอมบิแนนท์ เนื่องจากการคัดลอกตัวเองอย่างรวดเร็วและความเป็นไปได้ของการถ่ายโอนพลาสมิดแบบผันแปรภายในสปีชีส์ ระหว่างสปีชีส์หรือแม้แต่จำพวก พลาสมิดจึงเล่น บทบาทที่สำคัญในการวิวัฒนาการของแบคทีเรีย

    วันที่เพิ่ม: 2015-09-03 | ยอดดู: 323 | การละเมิดลิขสิทธิ์


    | | | | | | | | | | | | | | |

    พลาสมิด- โครงสร้างทางพันธุกรรมเคลื่อนที่นอกโครโมโซมของแบคทีเรียซึ่งเป็นวงแหวนปิดของ DNA ที่มีเกลียวคู่ ขนาดต่างๆได้แก่

    0.1-5% ของโครโมโซม DNA พลาสมิดสามารถคัดลอก (จำลอง) ได้โดยอัตโนมัติและมีอยู่ในไซโตพลาสซึมของเซลล์ ดังนั้นจึงสามารถมีพลาสมิดได้หลายสำเนาในเซลล์ พลาสมิดสามารถรวม (รวม) ไว้ในโครโมโซมและทำซ้ำร่วมกับมันได้ แยกแยะ การแพร่เชื้อ และ ไม่สามารถถ่ายทอดได้พลาสมิด- พลาสมิดที่ถ่ายทอดได้ (คอนจูกาทีฟ) สามารถถ่ายโอนจากแบคทีเรียหนึ่งไปยังอีกแบคทีเรียหนึ่งได้

    ในบรรดาลักษณะฟีโนไทป์ที่พลาสมิดมอบให้กับเซลล์แบคทีเรีย สามารถแยกแยะได้ดังต่อไปนี้::

    1) ความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะ

    2) การก่อตัวของโคลิซิน;

    3) การผลิตปัจจัยการทำให้เกิดโรค;

    4) ความสามารถในการสังเคราะห์สารปฏิชีวนะ

    5) การสลายสารอินทรีย์ที่ซับซ้อน

    6) การก่อตัวของเอนไซม์จำกัดและดัดแปลง

    คำว่า "พลาสมิด" ถูกนำมาใช้ครั้งแรกโดยนักวิทยาศาสตร์ชาวอเมริกัน J. Lederberg (1952) เพื่ออ้างถึงปัจจัยทางเพศของแบคทีเรีย พลาสมิดมียีนที่ไม่จำเป็นสำหรับเซลล์เจ้าบ้านและให้คุณสมบัติเพิ่มเติมแก่แบคทีเรีย ซึ่งให้ข้อได้เปรียบชั่วคราวเหนือแบคทีเรียที่ปราศจากพลาสมิดภายใต้สภาพแวดล้อมบางประการ

    พลาสมิดบางชนิดอยู่ภายใต้ การควบคุมอย่างเข้มงวดซึ่งหมายความว่าการจำลองแบบของพวกมันจะควบคู่ไปกับการจำลองโครโมโซมเพื่อให้เซลล์แบคทีเรียแต่ละเซลล์มีพลาสมิดหนึ่งหรืออย่างน้อยหลายสำเนา

    จำนวนสำเนาของพลาสมิดที่อยู่ด้านล่าง การควบคุมที่อ่อนแอสามารถเข้าถึงได้ตั้งแต่ 10 ถึง 200 ต่อเซลล์แบคทีเรีย

    เพื่อจำแนกลักษณะของพลาสมิดจำลอง พวกมันมักจะถูกแบ่งออกเป็นกลุ่มที่เข้ากันได้ ความไม่เข้ากันพลาสมิดมีความเกี่ยวข้องกับการที่พลาสมิดสองตัวไม่สามารถคงอยู่ในเซลล์แบคทีเรียเดียวกันได้อย่างเสถียร ความไม่เข้ากันเป็นลักษณะของพลาสมิดที่มีความคล้ายคลึงกันสูงของการจำลองซึ่งการบำรุงรักษาในเซลล์ถูกควบคุมโดยกลไกเดียวกัน

    พลาสมิดบางชนิดสามารถรวมเข้ากับโครโมโซมของแบคทีเรียแบบย้อนกลับได้และทำหน้าที่เป็นแบบจำลองเดียว พลาสมิดดังกล่าวเรียกว่า บูรณาการ หรือ เรื่องราวดีๆ .

    พบในแบคทีเรียหลายชนิด R-พลาสมิด, แบกยีนที่รับผิดชอบในการดื้อยาหลายชนิด - ยาปฏิชีวนะ, ซัลโฟนาไมด์ ฯลฯ เอฟ พลาสมิด, หรือปัจจัยทางเพศของแบคทีเรียซึ่งกำหนดความสามารถในการผันและสร้างพิลิทางเพศ เอนท์พลาสมิด, กำหนดการผลิตเอนเทอโรทอกซิน

    พลาสมิดสามารถตรวจสอบความรุนแรงของแบคทีเรียได้เช่นเชื้อโรคของโรคระบาดและบาดทะยักความสามารถของแบคทีเรียในดินในการใช้แหล่งคาร์บอนที่ผิดปกติควบคุมการสังเคราะห์โปรตีนของสารคล้ายยาปฏิชีวนะ - แบคทีเรียแบคเทอริโอซินซึ่งกำหนดโดยพลาสมิดของแบคทีเรีย ฯลฯ การดำรงอยู่ของ พลาสมิดอื่นๆ จำนวนมากในจุลินทรีย์แสดงให้เห็นว่าโครงสร้างที่คล้ายกันนั้นพบได้ทั่วไปในจุลินทรีย์หลากหลายชนิด

    พลาสมิดอาจเกิดการรวมตัวกันอีกครั้ง การกลายพันธุ์ และสามารถกำจัด (กำจัด) ออกจากแบคทีเรียได้ ซึ่งจะไม่ส่งผลกระทบต่อคุณสมบัติพื้นฐานของพวกมัน พลาสมิดเป็นแบบจำลองที่สะดวกสำหรับการทดลองเกี่ยวกับการสร้างสารพันธุกรรมขึ้นใหม่ และมีการใช้กันอย่างแพร่หลายในพันธุวิศวกรรมเพื่อให้ได้สายพันธุ์รีคอมบิแนนท์ เนื่องจากการคัดลอกตัวเองอย่างรวดเร็วและความเป็นไปได้ของการถ่ายโอนพลาสมิดแบบผันภายในสปีชีส์ ระหว่างสปีชีส์หรือแม้แต่จำพวก พลาสมิดมีบทบาทสำคัญในการวิวัฒนาการของแบคทีเรีย

    20. พลาสมิดของแบคทีเรีย หน้าที่และคุณสมบัติ

    พลาสมิดเป็นโครงสร้างทางพันธุกรรมเคลื่อนที่นอกโครโมโซมของแบคทีเรีย ซึ่งเป็นวงแหวนปิดของ DNA ที่มีเกลียวคู่ พลาสมิดสามารถคัดลอก (จำลอง) ได้โดยอัตโนมัติและมีอยู่ในไซโตพลาสซึมของเซลล์ ดังนั้นจึงสามารถมีพลาสมิดได้หลายสำเนาในเซลล์ พลาสมิดสามารถรวม (รวม) ไว้ในโครโมโซมและทำซ้ำร่วมกับมันได้ มีพลาสมิดที่ถ่ายทอดได้และไม่สามารถถ่ายทอดได้ พลาสมิดที่ถ่ายทอดได้ (คอนจูกาทีฟ) สามารถถ่ายโอนจากแบคทีเรียหนึ่งไปยังอีกแบคทีเรียหนึ่งได้

    ในบรรดาลักษณะฟีโนไทป์ที่ให้พลาสมิดแก่เซลล์แบคทีเรียมีดังต่อไปนี้:

    1) ความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะ

    2) การก่อตัวของโคลิซิน;

    3) การผลิตปัจจัยการทำให้เกิดโรค;

    4) ความสามารถในการสังเคราะห์สารปฏิชีวนะ

    5) การสลายสารอินทรีย์ที่ซับซ้อน

    6) การก่อตัวของเอนไซม์จำกัดและดัดแปลง

    คำว่า "พลาสมิด" ถูกนำมาใช้ครั้งแรกโดยนักวิทยาศาสตร์ชาวอเมริกัน เจ. เลเดอร์เบิร์ก (1952) เพื่ออ้างถึงปัจจัยทางเพศของแบคทีเรีย พลาสมิดมียีนที่ไม่จำเป็นสำหรับเซลล์เจ้าบ้านและให้คุณสมบัติเพิ่มเติมแก่แบคทีเรีย ซึ่งให้ข้อได้เปรียบชั่วคราวเหนือแบคทีเรียที่ปราศจากพลาสมิดภายใต้สภาพแวดล้อมบางประการ

    พลาสมิดบางชนิดอยู่ภายใต้การควบคุมอย่างเข้มงวด ซึ่งหมายความว่าการจำลองแบบของพวกมันจะควบคู่ไปกับการจำลองโครโมโซมเพื่อให้เซลล์แบคทีเรียแต่ละเซลล์มีพลาสมิดหนึ่งหรืออย่างน้อยหลายสำเนา

    จำนวนสำเนาของพลาสมิดภายใต้การควบคุมที่อ่อนแอสามารถเข้าถึงได้ตั้งแต่ 10 ถึง 200 ต่อเซลล์แบคทีเรีย

    เพื่อจำแนกลักษณะของพลาสมิดจำลอง พวกมันมักจะถูกแบ่งออกเป็นกลุ่มที่เข้ากันได้ ความไม่เข้ากันของพลาสมิดนั้นสัมพันธ์กับการที่พลาสมิดสองตัวไม่สามารถคงอยู่ในเซลล์แบคทีเรียเดียวกันได้อย่างเสถียร พลาสมิดบางชนิดสามารถรวมเข้ากับโครโมโซมของแบคทีเรียแบบย้อนกลับได้และทำหน้าที่เป็นแบบจำลองเดียว พลาสมิดดังกล่าวเรียกว่าอินทิเกรตหรือเอพิโซม

    ในแบคทีเรียหลากหลายสายพันธุ์พบว่า R-plasmids มียีนที่รับผิดชอบต่อการดื้อยาหลายชนิด - ยาปฏิชีวนะ, ซัลโฟนาไมด์ ฯลฯ , F-plasmids หรือปัจจัยทางเพศของแบคทีเรียซึ่งกำหนดความสามารถในการผันและสร้างพิลีทางเพศ Ent-plasmids กำหนดการผลิตเอนเทอโรทอกซิน

    พลาสมิดสามารถตรวจสอบความรุนแรงของแบคทีเรียได้เช่นเชื้อโรคของโรคระบาดและบาดทะยักความสามารถของแบคทีเรียในดินในการใช้แหล่งคาร์บอนที่ผิดปกติควบคุมการสังเคราะห์โปรตีนของสารคล้ายยาปฏิชีวนะ - แบคทีเรียแบคเทอริโอซินซึ่งกำหนดโดยพลาสมิดของแบคทีเรีย ฯลฯ การดำรงอยู่ของ พลาสมิดอื่นๆ จำนวนมากในจุลินทรีย์แสดงให้เห็นว่าโครงสร้างที่คล้ายกันนั้นพบได้ทั่วไปในจุลินทรีย์หลากหลายชนิด

    พลาสมิดอาจเกิดการรวมตัวกันอีกครั้ง การกลายพันธุ์ และสามารถกำจัด (กำจัด) ออกจากแบคทีเรียได้ ซึ่งจะไม่ส่งผลกระทบต่อคุณสมบัติพื้นฐานของพวกมัน พลาสมิดเป็นแบบจำลองที่สะดวกสำหรับการทดลองในการสร้างสารพันธุกรรมขึ้นมาใหม่ และมีการใช้กันอย่างแพร่หลาย พันธุวิศวกรรมเพื่อให้ได้สายพันธุ์รีคอมบิแนนท์ เนื่องจากการคัดลอกตัวเองอย่างรวดเร็วและความเป็นไปได้ของการถ่ายโอนพลาสมิดแบบผันภายในสปีชีส์ ระหว่างสปีชีส์หรือแม้แต่จำพวก พลาสมิดมีบทบาทสำคัญในการวิวัฒนาการของแบคทีเรีย 51.ปฏิกิริยาการเกาะติดกัน.

    ปฏิกิริยาการเกาะติดกันเป็นปฏิกิริยาง่าย ๆ ซึ่งแอนติบอดีจับแอนติเจนของคอร์ปัส (แบคทีเรีย เม็ดเลือดแดง หรือเซลล์อื่น ๆ อนุภาคที่ไม่ละลายน้ำโดยมีแอนติเจนดูดซับอยู่ เช่นเดียวกับมวลรวมโมเลกุลขนาดใหญ่) มันเกิดขึ้นเมื่อมีอิเล็กโทรไลต์อยู่ ตัวอย่างเช่น เมื่อเติมสารละลายไอโซโทนิกโซเดียมคลอไรด์

    นำมาใช้ ตัวเลือกต่างๆปฏิกิริยาการเกาะติดกัน: กว้างขวางบ่งชี้ทางอ้อม ฯลฯ ปฏิกิริยาการเกาะติดกันนั้นเกิดจากการก่อตัวของสะเก็ดหรือตะกอน (เซลล์ "ติดกาว" ด้วยแอนติบอดีที่มีศูนย์จับแอนติเจนตั้งแต่สองแห่งขึ้นไป - รูปที่ 13.1) RA ใช้สำหรับ:

    1) การกำหนดแอนติบอดีในเลือดของผู้ป่วยเช่นโรคบรูเซลโลซิส (ปฏิกิริยาไรท์, เฮดเดลสัน) ไข้ไทฟอยด์และไข้รากสาดเทียม (Vidal reaction) และอื่นๆ โรคติดเชื้อ;

    2) การกำหนดเชื้อโรคที่แยกได้จากผู้ป่วย

    3) การกำหนดกลุ่มเลือดโดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีต่ออัลโลแอนติเจนของเม็ดเลือดแดง

    เพื่อตรวจสอบแอนติบอดีของผู้ป่วย ปฏิกิริยาการเกาะติดกันโดยละเอียดจะดำเนินการ: การวินิจฉัย (การแขวนลอยของจุลินทรีย์ที่ถูกฆ่า) จะถูกเพิ่มในการเจือจางของซีรั่มในเลือดของผู้ป่วย และหลังจากการฟักตัวเป็นเวลาหลายชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 °C การเจือจางของซีรั่มสูงสุด (ซีรั่มไทเตอร์) ที่มีการเกาะติดกันเกิดขึ้นคือ มีการตกตะกอนเกิดขึ้น

    ธรรมชาติและความเร็วของการเกาะติดกันขึ้นอยู่กับชนิดของแอนติเจนและแอนติบอดี ตัวอย่างคือลักษณะเฉพาะของปฏิสัมพันธ์ของการวินิจฉัย (O- และ H-antigens) กับแอนติบอดีจำเพาะ ปฏิกิริยาการเกาะติดกันกับ O-diagnosticum (แบคทีเรียที่ถูกฆ่าด้วยความร้อน โดยคง O-แอนติเจนที่ทนความร้อนไว้ได้) เกิดขึ้นในรูปแบบของการเกาะติดกันแบบละเอียด ปฏิกิริยาการเกาะติดกันกับ H-diagnosticum (แบคทีเรียที่ถูกฆ่าโดยฟอร์มาลดีไฮด์ โดยคง H-antigen ของแฟลเจลลาบิลล์ที่ทนความร้อน) จะหยาบและดำเนินไปเร็วขึ้น

    หากจำเป็นต้องระบุเชื้อโรคที่แยกได้จากผู้ป่วย การทดสอบการเกาะติดกันโดยประมาณจะดำเนินการโดยใช้แอนติบอดีในการวินิจฉัย (ซีรั่มที่เกาะติดกัน) เช่น ทำการสร้างซีโรไทป์ของเชื้อโรค ปฏิกิริยาโดยประมาณดำเนินการบนกระจกสไลด์ การเพาะเลี้ยงเชื้อบริสุทธิ์ของเชื้อโรคที่แยกได้จากผู้ป่วยจะถูกเติมลงในเซรั่มจับกลุ่มเพื่อการวินิจฉัยที่เจือจางในอัตราส่วน 1:10 หรือ 1:20 มีการวางส่วนควบคุมไว้ใกล้เคียง: แทนที่จะใช้ซีรั่ม จะใช้สารละลายโซเดียมคลอไรด์หยดหนึ่งแทน เมื่อตะกอนตกตะกอนปรากฏขึ้นในหยดที่มีซีรั่มและจุลินทรีย์ ปฏิกิริยาการเกาะติดกันโดยละเอียดจะดำเนินการในหลอดทดลองโดยมีการเจือจางของซีรั่มที่เกาะติดกันเพิ่มขึ้นโดยเติมสารแขวนลอยของเชื้อโรค 2-3 หยด การเกาะติดกันจะพิจารณาจากปริมาณตะกอนและระดับความใสของของเหลว ปฏิกิริยาจะถือว่าเป็นบวกหากสังเกตพบการเกาะติดกันที่การเจือจางใกล้กับไทเทอร์ เซรั่มวินิจฉัย- ในเวลาเดียวกันต้องคำนึงถึงการควบคุม: ซีรั่มที่เจือจางด้วยสารละลายไอโซโทนิกโซเดียมคลอไรด์ควรมีความโปร่งใสการแขวนลอยของจุลินทรีย์ในสารละลายเดียวกันควรมีเมฆมากสม่ำเสมอโดยไม่มีตะกอน

    แบคทีเรียที่เกี่ยวข้องกันสามารถจับกลุ่มกันโดยใช้ซีรั่มตรวจจับกลุ่มเดียวกันในการวินิจฉัย ซึ่งทำให้จำแนกได้ยาก ดังนั้น พวกเขาจึงใช้ซีรั่มที่เกาะติดกันที่ถูกดูดซับ ซึ่งแอนติบอดีที่ทำปฏิกิริยาข้ามจะถูกกำจัดออกโดยการดูดซับไปยังแบคทีเรียที่เกี่ยวข้อง ซีรั่มดังกล่าวจะคงแอนติบอดีจำเพาะต่อแบคทีเรียชนิดนี้เท่านั้น

    75. สตาฟิโลคอคคัส

    สกุล Staphylococcus สกุลนี้ประกอบด้วย 3 สปีชีส์: S.aureus, S.epidermidis และ S.saprophyticus Staphylococci ทุกประเภทเป็นเซลล์กลม ในสเมียร์จะอยู่ในกระจุกที่ไม่สมมาตร กรัมบวก พวกมันไม่สร้างสปอร์และไม่มีแฟลเจลลา

    Staphylococci เป็นเชื้อแบบไม่ใช้ออกซิเจน เติบโตได้ดีบนสื่อธรรมดา Staphylococci มีความยืดหยุ่นและต้านทานได้อย่างรวดเร็ว ยาต้านเชื้อแบคทีเรีย- ทำให้เกิดโรคตามเงื่อนไข.. ความต้านทานเข้า สิ่งแวดล้อมและความไวต่อยาฆ่าเชื้อเป็นเรื่องปกติ แหล่งที่มาของการติดเชื้อสตาฟิโลคอคคัสคือมนุษย์และสัตว์บางชนิด (ผู้ป่วยหรือพาหะ) กลไกการแพร่เชื้อ: ระบบทางเดินหายใจ, การสัมผัสในครัวเรือน, ทางโภชนาการ

    ภูมิคุ้มกัน: ไม่เสถียร,

    คลินิก. ประมาณ 120 รูปแบบทางคลินิกอาการที่เป็นท้องถิ่น เป็นระบบ หรือทั่วไป เหล่านี้รวมถึงโรคหนองอักเสบของผิวหนังและเนื้อเยื่ออ่อน (ฝี, ฝี), แผลที่ตา, หู, ช่องจมูก, ทางเดินปัสสาวะ, ระบบย่อยอาหาร(ความมึนเมา).

    การวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา วัสดุที่ใช้ในการวิจัย ได้แก่ หนอง เลือด ปัสสาวะ เสมหะ อุจจาระ

    วิธีการตรวจแบคทีเรีย: เตรียมสเมียร์จากวัสดุทดสอบ (ยกเว้นเลือด) แล้วย้อมด้วยแกรม การมีอยู่ของ cocci รูปทรงกระจุกกรัม “+” ซึ่งอยู่ในรูปแบบของกระจุก

    วิธีการทางแบคทีเรีย วัสดุบนแผ่นวุ้นเลือดและเกลือไข่แดงเพื่อให้ได้โคโลนีที่แยกได้ การมีหรือไม่มีภาวะเม็ดเลือดแดงแตกจะสังเกตได้บนวุ้นเลือด บน FSA S. aureus จะก่อตัวเป็นโคโลนีสีทอง กลม นูน และทึบแสง รอบโคโลนีของเชื้อ Staphylococci ที่มีฤทธิ์เลซิติเนสจะเกิดโซนความขุ่นที่มีสีมุก การหมัก: glk, minnita, การก่อตัวของสารพิษ

    การรักษาและการป้องกัน ยาปฏิชีวนะ หลากหลายการกระทำ (ทนต่อβ-lactamase) ในกรณีที่มีอาการรุนแรง การติดเชื้อ Staphylococcalที่ไม่สามารถรักษาด้วยยาปฏิชีวนะได้ สามารถใช้พลาสมาต้านสตาฟิโลคอคคัสที่มีฤทธิ์ต้านพิษหรืออิมมูโนโกลบูลินที่สร้างภูมิคุ้มกันด้วยมานาทอกซินจากเชื้อสตาฟิโลคอคคัสที่ดูดซับได้ 6.ประเภทและกลไกของสารอาหารจากแบคทีเรีย

    ประเภทของอาหาร จุลินทรีย์ต้องการคาร์โบไฮเดรต ไนโตรเจน ซัลเฟอร์ ฟอสฟอรัส โพแทสเซียม และองค์ประกอบอื่นๆ แบคทีเรียแบ่งออกเป็นออโตโทรฟซึ่งใช้คาร์บอนไดออกไซด์ CO2 และสารประกอบอนินทรีย์อื่น ๆ เพื่อสร้างเซลล์ ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับแหล่งที่มาของคาร์บอนเพื่อเป็นสารอาหาร และเฮเทอโรโทรฟซึ่งกินสารประกอบอินทรีย์สำเร็จรูป เฮเทอโรโทรฟที่ใช้ซากอินทรีย์ของสิ่งมีชีวิตที่ตายแล้วในสิ่งแวดล้อมเรียกว่าซาโปรไฟต์ เฮเทอโรโทรฟ ก่อให้เกิดโรคต่างๆในมนุษย์หรือสัตว์จัดอยู่ในกลุ่มที่ทำให้เกิดโรคและฉวยโอกาส

    ขึ้นอยู่กับสารตั้งต้นที่สามารถออกซิไดซ์ได้ ซึ่งเรียกว่าผู้บริจาคอิเล็กตรอนหรือไฮโดรเจน จุลินทรีย์จะถูกแบ่งออกเป็นสองกลุ่ม จุลินทรีย์ที่ใช้สารประกอบอนินทรีย์เป็นผู้บริจาคไฮโดรเจนเรียกว่า ลิโธโทรฟิค (จากภาษากรีก ลิโทส - หิน) และจุลินทรีย์ที่ใช้สารประกอบอินทรีย์เป็นผู้บริจาคไฮโดรเจนเรียกว่าออร์กาโนโทรฟ

    เมื่อพิจารณาถึงแหล่งที่มาของพลังงาน โฟโตโทรฟจะมีความโดดเด่นในหมู่แบคทีเรีย เช่น การสังเคราะห์แสง (เช่น สาหร่ายสีน้ำเงินแกมเขียวซึ่งใช้พลังงานแสง) และเคมีบำบัดซึ่งต้องใช้แหล่งพลังงานทางเคมี

    ตัวควบคุมหลักของการเข้าสู่เซลล์คือเยื่อหุ้มเซลล์ไซโตพลาสซึม ตามอัตภาพ สามารถแยกแยะกลไกการเจาะได้สี่แบบ สารอาหารเข้าสู่เซลล์แบคทีเรีย: สิ่งเหล่านี้คือการแพร่กระจายอย่างง่าย, การแพร่กระจายแบบอำนวยความสะดวก, การขนส่งแบบแอคทีฟ, การโยกย้ายกลุ่ม

    กลไกที่ง่ายที่สุดในการเข้าสู่เซลล์คือการแพร่กระจายอย่างง่าย ซึ่งการเคลื่อนที่ของสารเกิดขึ้นเนื่องจากความเข้มข้นของสารทั้งสองข้างของเยื่อหุ้มเซลล์ไซโตพลาสซึมต่างกัน การแพร่กระจายแบบพาสซีฟเกิดขึ้นโดยไม่ใช้พลังงาน

    การแพร่กระจายแบบอำนวยความสะดวกยังเกิดขึ้นอันเป็นผลมาจากความแตกต่างในความเข้มข้นของสารทั้งสองด้านของเยื่อหุ้มเซลล์ไซโตพลาสซึม อย่างไรก็ตาม กระบวนการนี้ดำเนินการด้วยความช่วยเหลือของโมเลกุลพาหะ การแพร่กระจายแบบอำนวยความสะดวกเกิดขึ้นโดยไม่ใช้พลังงาน สารจะย้ายจากความเข้มข้นที่สูงขึ้นไปยังความเข้มข้นที่ลดลง

    การขนส่งแบบแอคทีฟคือการถ่ายโอนสารจากความเข้มข้นที่ต่ำกว่าไปสู่ความเข้มข้นที่สูงกว่านั่นคือ ราวกับต้านกระแสดังนั้น กระบวนการนี้จะมาพร้อมกับค่าใช้จ่ายของพลังงานเมตาบอลิซึม (ATP) ที่เกิดขึ้นจากปฏิกิริยารีดอกซ์ในเซลล์

    การถ่ายโอน (การโยกย้าย) ของกลุ่มจะคล้ายกับการขนส่งแบบแอคทีฟ ต่างกันตรงที่โมเลกุลที่ถูกถ่ายโอนถูกดัดแปลงในระหว่างกระบวนการถ่ายโอน เช่น ฟอสโฟรีเลเต็ด

    การปล่อยสารออกจากเซลล์เกิดขึ้นโดยการแพร่กระจายและการมีส่วนร่วมของระบบการขนส่ง

    52.ปฏิกิริยาของเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟ

    ปฏิกิริยา hemagglutination ทางอ้อม (พาสซีฟ) (IRHA, RPHA) ขึ้นอยู่กับการใช้เซลล์เม็ดเลือดแดง (หรือน้ำยาง) กับแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่ดูดซับบนพื้นผิวของพวกเขา ซึ่งเป็นปฏิกิริยากับแอนติบอดีหรือแอนติเจนที่สอดคล้องกันในซีรั่มเลือดของผู้ป่วย ทำให้เกิดการเกาะตัวและการตกตะกอนของเม็ดเลือดแดงที่ด้านล่างของหลอดทดลองหรือเซลล์ในลักษณะตะกอนสแกลลอป

    ส่วนประกอบ ในการทำ RNGA เม็ดเลือดแดงจากแกะ ม้า กระต่าย ไก่ หนูทดลอง คน และอื่นๆ สามารถนำมาใช้ได้ ซึ่งจะถูกเก็บไว้เพื่อใช้ในอนาคตโดยการบำบัดพวกมันด้วยฟอร์มาลดีไฮด์หรือกลูตาราลดีไฮด์ ความสามารถในการดูดซับของเม็ดเลือดแดงเพิ่มขึ้นเมื่อได้รับการบำบัดด้วยสารละลายแทนนินหรือโครเมียมคลอไรด์

    แอนติเจนใน RNGA สามารถทำหน้าที่เป็นแอนติเจนโพลีแซ็กคาไรด์ของจุลินทรีย์, สารสกัด วัคซีนแบคทีเรีย,แอนติเจนของไวรัส และริกเก็ตเซีย รวมถึงสารอื่นๆ

    เซลล์เม็ดเลือดแดงที่ไวต่อแอนติเจนเรียกว่า การวินิจฉัยเม็ดเลือดแดง- สำหรับประกอบอาหาร การวินิจฉัยเม็ดเลือดแดงมักใช้เซลล์เม็ดเลือดแดงของแกะซึ่งมีฤทธิ์ดูดซับสูง

    แอปพลิเคชัน. RNGA ใช้ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อ ฮอร์โมนโกนาโดโทรปินในปัสสาวะเมื่อตั้งครรภ์เพื่อระบุตัวตน ภูมิไวเกินยา ฮอร์โมน และในบางกรณี

    กลไก. การทดสอบการเกิดเม็ดเลือดแดงโดยอ้อม (IRHA) มีความไวและความจำเพาะสูงกว่าการทดสอบการเกาะติดกันอย่างมีนัยสำคัญ ใช้เพื่อระบุเชื้อโรคตามโครงสร้างแอนติเจนหรือเพื่อระบุและระบุผลิตภัณฑ์จากแบคทีเรีย - สารพิษในวัสดุทางพยาธิวิทยาที่กำลังศึกษา ดังนั้น การวินิจฉัยแอนติบอดีของเม็ดเลือดแดงมาตรฐาน (เชิงพาณิชย์) จึงถูกนำมาใช้ ซึ่งได้มาโดยการดูดซับแอนติบอดีจำเพาะบนพื้นผิวของเม็ดเลือดแดงที่ถูกแทนนิน (ที่ได้รับแทนนิน) การเจือจางแบบอนุกรมของวัสดุทดสอบจะถูกเตรียมในหลุมของแผ่นพลาสติก จากนั้นเติมสารแขวนลอย 3% ของเซลล์เม็ดเลือดแดงที่มีแอนติบอดีในปริมาณเท่ากันลงในแต่ละหลุม หากจำเป็น ปฏิกิริยาจะดำเนินการแบบขนานในหลุมหลายแถวที่มีเม็ดเลือดแดงที่เต็มไปด้วยแอนติบอดีที่มีความจำเพาะของกลุ่มที่แตกต่างกัน

    พวกมันถูกค้นพบเมื่อปลายศตวรรษที่ 18 แต่จุลชีววิทยาในฐานะวิทยาศาสตร์นั้นก่อตัวขึ้นเมื่อต้นศตวรรษที่ 19 เท่านั้น หลังจากการค้นพบที่ยอดเยี่ยมของนักวิทยาศาสตร์ชาวฝรั่งเศส หลุยส์ ปาสเตอร์ เนื่องจากบทบาทและงานอันมหาศาลของนักจุลชีววิทยา พวกเขาไม่สามารถรับมือกับปัญหาทั้งหมดภายในสาขาวิชาเดียวได้ และด้วยเหตุนี้ นักจุลชีววิทยาจึงถูกแบ่งออกเป็นสาขาวิชาต่างๆ

    จุลชีววิทยาทั่วไป - ศึกษาสัณฐานวิทยา สรีรวิทยา ... JgD เป็นแอนติบอดีต่อภูมิต้านทานตนเองตั้งแต่เมื่อไหร่โรคแพ้ภูมิตัวเอง (เช่น lupus erythematosus) จำนวนในซีรั่มในเลือดของผู้ป่วยเพิ่มขึ้นหลายร้อยเท่า หมวด “จุลชีววิทยาเอกชนและไวรัสวิทยา” คำถามที่ 6 สาเหตุของอหิวาตกโรค: ลักษณะทางชีวภาพ แหล่งที่อยู่อาศัย แหล่งที่มา เส้นทาง และกลไกของการติดเชื้อ ปัจจัยที่ทำให้เกิดโรค หลักการ; ...

    การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ ตรวจพบจำนวนมาก เซลล์แตกแขนงทั่วไป ดังนั้นการแตกแขนงในมัยโคแบคทีเรียจึงขึ้นอยู่กับสารอาหารในปริมาณมาก 3. คุณสมบัติทางสรีรวิทยาของจุลินทรีย์ในสกุล Mycobacterium Mycobacteria มีลักษณะเฉพาะคือเนื้อหาสูง

    ไขมัน (จาก 30.6 ถึง 38.9%) ส่งผลให้ย้อมด้วยสีอะนิลีนได้ยาก แต่ยอมรับสีได้ดี...

    คำอธิษฐานเพื่อซื้อที่อยู่อาศัย บ้าน หรืออพาร์ตเมนต์
    เกี่ยวกับแพทย์ โรงพยาบาล คลินิก โรงพยาบาลคลอดบุตร