Diagnosticum erythrocyte vi ของเหลวแอนติเจน การวินิจฉัย เซรั่มทิวลาเรเมียเรืองแสง

การตรวจเลือดอย่างดีจะช่วยตรวจหาเชื้อโรคต่างๆ โรคที่ซับซ้อนในร่างกายในช่วงแรกของการพัฒนาและบางครั้งก็ก่อนการสำแดงด้วยซ้ำ อาการทางคลินิกโรคต่างๆ บ่อยครั้งที่แพทย์กำหนดให้ผู้ป่วยทำการทดสอบปฏิกิริยาการเกาะติดกัน ต่อไปเราจะมาดูกันว่ามันคืออะไร - การตรวจเลือด RPGA ใช้เมื่อใด และบอกอะไรเราได้บ้าง

หลักการทำงาน

ปฏิกิริยาการเกิดเม็ดเลือดแดงทางอ้อม (เรียกอีกอย่างว่า การเกิดเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟหรือที่เรียกว่า RPGA, RNGA) เกิดขึ้นเมื่อเม็ดเลือดแดงที่ดูดซับแอนติเจนสัมผัสกับซีรั่มภูมิคุ้มกันที่ตรงกับแอนติเจนที่กำหนด

การศึกษาได้พิสูจน์แล้วว่าในแง่ของความจำเพาะและความอ่อนไหว วิธีนี้เหนือกว่าคนอื่นอย่างเห็นได้ชัด การทดสอบทางซีรั่มวิทยา- ดังนั้นจึงมักใช้เพื่อตรวจหาโรคที่เกิดจากแบคทีเรียหรือโรคริกเก็ตเซีย แอนติเจนสำหรับการวิเคราะห์ดังกล่าวอาจเป็นสารสกัดจากแบคทีเรีย แอนติเจนบริสุทธิ์ของจุลินทรีย์ต่างๆ และส่วนประกอบของวัคซีนจากแบคทีเรีย

หลังจากที่แบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรคเข้าสู่ร่างกายมนุษย์ แบคทีเรียจะเริ่มผลิตแอนติบอดีจำเพาะและไม่จำเพาะเจาะจง ก่อให้เกิดการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันจำเพาะ ในกรณีของซิฟิลิสสาเหตุเชิงสาเหตุคือ Treponema pallidum ซึ่งเป็นของ spirochetes แกรมลบแอนติบอดีที่ไม่ใช่ treponemal หรือ treponemal จะถูกผลิตในเลือดของมนุษย์ การทดสอบในห้องปฏิบัติการขึ้นอยู่กับการระบุตัวตน การศึกษาวินิจฉัยซึ่งควรยืนยันหรือปฏิเสธการมีอยู่ของเชื้อโรคในร่างกาย

ด้วย RPHA เซลล์เม็ดเลือดแดงซึ่งพื้นผิวดูดซับแอนติเจนของ Treponema pallidum เมื่อเพิ่มซีรั่มที่มีแอนติบอดีต่อ Treponema จากวัสดุจากบุคคลที่ติดเชื้อซิฟิลิสจะเกาะติดกันนั่นคือพวกมันเกาะติดกัน

ความน่าเชื่อถือของการศึกษา

สิ่งสำคัญคือต้องจำไว้ว่าแอนติบอดีต่อสไปโรเชตสีซีดเริ่มปรากฏในร่างกาย คนที่ติดเชื้อ 2-4 สัปดาห์หลังการติดเชื้อ และในบางกรณีอาจขยายไปถึง 6 สัปดาห์

ด้วยเหตุนี้ ความไวของการสอบวิเคราะห์ RPHA จึงอยู่ที่ ขั้นแรกการพัฒนาของโรคอยู่ที่ประมาณ 86% ซึ่งต่ำกว่าความแม่นยำในการวินิจฉัยผู้ป่วยในอีกสองขั้นตอนถัดไปอย่างมาก ความไวของการวิเคราะห์สำหรับผู้ป่วยดังกล่าวตลอดจนผู้ให้บริการซิฟิลิสที่แฝงอยู่นั้นสูงถึง 99-100%

อย่างไรก็ตาม ปฏิกิริยาฮีแมกกลูติเนชันแบบพาสซีฟมีความจำเพาะสูงมากซึ่งสูงถึงระดับ 96-100%

ทำให้สามารถใช้งานได้ การสอบครั้งนี้เพื่อยืนยันการวินิจฉัยในกรณีมีปฏิกิริยาเชิงบวกจากการศึกษาเบื้องต้นแบบ non-treponemal เช่น ปฏิกิริยา microprecipitation ของมะเร็งกระเพาะปัสสาวะ

เมื่อพิจารณาว่าความไวของการทดสอบ Treponemal รวมถึง RPGA นั้นสูงกว่าความไวของวิธีที่ไม่ใช่ Treponemal อย่างมีนัยสำคัญ การตรวจดังกล่าวจึงมีการกำหนดมากขึ้นเมื่อทำการตรวจคัดกรองซิฟิลิส อย่างไรก็ตาม หากได้รับปฏิกิริยาเชิงบวกจากการตรวจคัดกรอง จำเป็นต้องมีการวิเคราะห์เฉพาะ (ทรีโพนีมัล) อื่น แต่ไม่ใช่ RPGA เพื่อชี้แจงการวินิจฉัย

ใบรับรองผลการวิเคราะห์

เมื่อซีรั่มที่มีแอนติบอดีต่อ Treponema จากวัสดุของบุคคลที่ติดเชื้อซิฟิลิสถูกเพิ่มเข้าไปในรีเอเจนต์ที่ทำการศึกษาเซลล์เม็ดเลือดแดงจะเกาะติดกันซึ่งเป็นผลมาจากการที่พวกมันตกตะกอน

จำนวนเซลล์เม็ดเลือดแดงเหนียวนั้นได้รับอิทธิพลจากระดับแอนติบอดีในซีรั่ม ดังนั้นการเกิดเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟไม่เพียงแต่แสดงการมีอยู่ของแอนติบอดีเท่านั้น แต่ยังช่วยให้คุณสามารถกำหนดปริมาณของแอนติบอดีเหล่านั้นได้อีกด้วย ผลการศึกษานำเสนอโดยระดับไทเทอร์ของแอนติบอดี

ปฏิกิริยาเชิงบวกบ่งชี้ว่ามีเชื้อโรคอยู่ในร่างกายของผู้ป่วย อย่างไรก็ตามในระหว่างกระบวนการวินิจฉัยอาจเกิดปฏิกิริยาบวกลวงซึ่งจำนวนดังกล่าวไม่เกินระดับทางสถิติที่ 0.05-2.5% ของ จำนวนทั้งหมดวิจัย.

ปฏิกิริยา RPGA เชิงบวกในผู้ที่ไม่ติดเชื้อซิฟิลิสอาจเกิดขึ้นได้หาก:

• โรคเนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่เป็นระบบ
• ในแอนติบอดีในเลือดของผู้ป่วยต่อเชื้อโรคที่คล้ายกับ Treponema pallidum
• พยาธิสภาพทางสรีรวิทยา เช่น กล้ามเนื้อหัวใจตาย
• ไวรัสตับอักเสบบีหรือซี
• โรคมะเร็ง
• ไข้รากสาดใหญ่, โรคฉี่หนู, วัณโรค,
• การติดเชื้อเอชไอวี
• borreliosis ของสาเหตุที่เกิดจากเห็บ
• การบาดเจ็บหรือกระดูกหักอย่างกว้างขวาง
• การตั้งครรภ์,
• กรณีฉีดยาเสพติด

ในกรณีส่วนใหญ่ ปฏิกิริยาบวกลวงจะมาพร้อมกับไทเทอร์ต่ำ ประสิทธิภาพสูงการไตเตรทเป็นเรื่องปกติสำหรับระยะที่สองของโรคและซิฟิลิสที่แฝงอยู่ก่อนหน้านี้ อย่างไรก็ตามยังสามารถเกิดขึ้นได้ในระหว่างปฏิกิริยาบวกลวงในผู้ป่วยเนื้องอกมะเร็ง

ในผู้ที่เป็นโรคซิฟิลิสอย่างน้อยหนึ่งครั้ง ปฏิกิริยา RPHA จะยังคงเป็นบวกไปตลอดชีวิต

ข้อยกเว้นที่หายากอาจเป็นสถานการณ์ที่ตรวจพบโรค ระยะเริ่มต้นการพัฒนาหลังจากนั้นอย่างเข้มข้นและ การบำบัดที่มีประสิทธิภาพ- ดังนั้น การวิเคราะห์ RPGA จึงไม่สามารถใช้เพื่อประเมินพลวัตของการฟื้นตัวหรือการวินิจฉัยเปรียบเทียบในระยะเริ่มต้นหรือ ช่วงปลายโรคต่างๆ

หากได้รับปฏิกิริยาเชิงบวกจำเป็นต้องตรวจสอบสมาชิกในครอบครัวของผู้ป่วยและผู้ที่มีเพศสัมพันธ์กับเขา

ปฏิกิริยาเชิงลบอาจเกิดขึ้นได้ในกรณีต่อไปนี้:

• บุคคลนั้นไม่มีซิฟิลิส
• ถ่ายเลือดไม่ถูกต้องเพื่อการทดสอบ
• นับตั้งแต่ติดเชื้อผ่านไป 2-4 สัปดาห์ และการผลิตแอนติบอดียังไม่เริ่ม

ไม่ว่าในกรณีใด ผลการศึกษาจะต้องได้รับการประเมินร่วมกับตัวบ่งชี้ทางห้องปฏิบัติการและการตรวจวินิจฉัยเพิ่มเติม

การวิเคราะห์ระบุเพื่อใคร?

แพทย์อาจส่งผู้ป่วยมาบริจาคโลหิตเพื่อ RPHA ในกรณีดังต่อไปนี้

• ถ้ามี อาการทางคลินิกซิฟิลิส: ผื่นเป็นแผล, ต่อมน้ำเหลืองโต, ผมร่วงกระจายและอื่น ๆ
• หากคุณสงสัยว่าอาจติดเชื้อได้ในกรณีที่สัมผัสกับผู้ป่วยแล้ว
• ผู้บริจาคที่มีความประสงค์จะบริจาคโลหิต
• บุคคลที่ดำเนินการประจำปี การตรวจสอบเชิงป้องกันหรือการออกใบรับรองสุขภาพ
• ผู้ป่วยด้วย ปฏิกิริยาเชิงบวกการทดสอบคัดกรอง
• ก่อนเข้ารับการรักษาในโรงพยาบาลผู้ป่วยใน
• ในระหว่างการตรวจก่อนการผ่าตัด
• เพื่อระบุเชื้อโรคของเชื้อ Salmonellosis, คอตีบ, โรคบิดโดยใช้วิธี RPGA พร้อมการวินิจฉัยที่เหมาะสม

ขั้นตอนการดำเนินการศึกษา

ตัวอย่างที่ผู้ป่วยส่งมาจะถูกส่งไปทดสอบ เลือดดำ- เพื่อไม่ให้ได้ข้อสรุปที่ผิดพลาด ผู้ป่วยควรรับผิดชอบในการเตรียมการวิเคราะห์ เพื่อให้ผลการทดสอบเชื่อถือได้ คุณควรปฏิบัติตามคำแนะนำต่อไปนี้:

• ควรทำการทดสอบในขณะท้องว่างเท่านั้น
• คุณสามารถดื่มได้ในวันที่ทำการทดสอบ น้ำแร่โดยไม่ต้องใช้แก๊สในปริมาณน้อยที่สุด
• คุณไม่ควรสูบบุหรี่เป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาทีก่อนการวิเคราะห์ แต่ควรเพิ่มเวลานี้เป็นหลายชั่วโมงจะดีกว่า
• มีการห้ามดื่มเครื่องดื่มแอลกอฮอล์โดยตรง
• ผู้ป่วยที่จำเป็นต้องใช้เป็นประจำใดๆ ยาคุณต้องแจ้งแพทย์ที่ส่งคุณเข้ารับการตรวจเรื่องนี้
• หากรู้สึกไม่สบายหรือไม่สบายต้องแจ้งพยาบาลที่จะเจาะเลือดหรือแพทย์ประจำคลินิกผู้ป่วยนอกที่ต้องการตรวจ

รับผิดชอบไม่เพียงแต่เกี่ยวกับคำถามว่าจะสอบที่ไหนเท่านั้น แต่ยังรวมถึงการเตรียมตัวสำหรับการสอบด้วย

การวินิจฉัยโรคติดเชื้ออื่นๆ

เราไม่ควรคิดว่าการศึกษาเช่น RPGA สามารถทำได้เพียงเพื่อระบุสาเหตุของซิฟิลิสในร่างกายเท่านั้น

วิเคราะห์ด้วย. การวินิจฉัยเชื้อ Salmonellaช่วยให้คุณตรวจพบการติดเชื้อใน ระบบย่อยอาหาร– ซัลโมเนลลา นับตั้งแต่วันที่สี่หลังการติดเชื้อ ร่างกายจะผลิตแอนติบอดีต่อแอนติเจนของเชื้อ Salmonella ซึ่งวิธี RPGA ช่วยในการระบุ ผลลัพธ์ที่เป็นลบบ่งชี้ว่าไม่มีการติดเชื้อ และค่า titer ที่เป็นบวกซึ่งเพิ่มขึ้นจาก 1:200 เป็น 1:800 ในระยะเฉียบพลัน จะบ่งบอกถึงการมีอยู่ของมัน

วิธีดำเนินการ RPGA ด้วยเครื่องหมายโรคคอตีบทำให้สามารถวินิจฉัยโรคคอตีบและประเมินภูมิคุ้มกันหลังการฉีดวัคซีนได้ แอนติบอดี้เริ่มถูกผลิตขึ้น ระบบภูมิคุ้มกันในวันรุ่งขึ้นหลังการติดเชื้อ และยังคงอยู่ในร่างกายเป็นเวลาหลายสัปดาห์ ความไวของการวิเคราะห์นี้เหนือกว่าวิธีการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา ค่าไทเตอร์ที่ 1:80 ยืนยันว่ามีโรคคอตีบในร่างกาย

เครื่องหมายโรคบิดสำหรับ RPHA ระบุโรคบิด (โรคบิดจากแบคทีเรีย) ได้แม่นยำที่สุด แม้เมื่อเปรียบเทียบกับวิธีการ การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการผ่าน วัฒนธรรมแบคทีเรีย- หากผู้ป่วยไม่ได้รับ การรักษาที่มีคุณภาพจากนั้นโรคจะพัฒนาเป็นกระบวนการเรื้อรังซึ่งมักเกิดอาการกำเริบอีก การวิเคราะห์ช่วยให้คุณสามารถวินิจฉัยระยะเฉียบพลันและเรื้อรังของโรคท้องร่วงระบุสาเหตุของโรคบิดแยกแยะความแตกต่างของแบคทีเรีย shigellosis จาก มะเร็งลำไส้ใหญ่, ความผิดปกติของต่อมไร้ท่อหรือการอักเสบของลำไส้ ปฏิกิริยาเชิงลบบ่งชี้ว่าไม่มีบาซิลลัส แต่ยืนยันการมีอยู่ด้วยระดับไทเทอร์ 1:80 สำหรับเด็ก หรือ 1:320 สำหรับผู้ใหญ่

การทดสอบด้วยเครื่องหมายโรคหัดช่วยให้คุณสามารถระบุโรคหัดได้ การตรวจดังกล่าวอาจเป็นทางเลือกแทนการวิเคราะห์ RTGA ที่มักใช้ในการวินิจฉัยโรคหัด

ดังนั้นการตรวจเลือด RPGA - มันคืออะไร? โดยสรุป เราสามารถพูดได้อย่างปลอดภัยว่านี่เป็นวิธีการวินิจฉัยที่ทันสมัย ​​มีความไวสูงและเชื่อถือได้ โรคต่างๆสาเหตุทางแบคทีเรีย

ใบรับรองการลงทะเบียนเลขที่ RZN 2016/3905 ลงวันที่ 04.04.2016

วัตถุประสงค์

ชุดรีเอเจนต์ "Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigen สำหรับ RPGA" (SED-Vi) มีไว้สำหรับการตรวจหาแอนติบอดีต่อ Vi-antigen ของเชื้อโรค ไข้ไทฟอยด์ในซีรัมเลือดของมนุษย์โดยปฏิกิริยาเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟ (RPHA)

ลักษณะของชุด

หลักการทำงาน

ในการปรากฏตัวของแอนติบอดีต่อสาเหตุของไข้ไทฟอยด์จะสังเกตการเกิดเม็ดเลือดแดงของเม็ดเลือดแดงไก่ที่ไวต่อแอนติเจน Vi ซึ่งนำไปสู่การก่อตัวของ "ร่ม" ของเม็ดเลือดแดงที่ตกลงที่ด้านล่างของแผ่นรูปตัวยู . ในกรณีที่ไม่มีแอนติบอดีต่อสาเหตุของไข้ไทฟอยด์ เซลล์เม็ดเลือดแดงที่เกาะอยู่จะก่อตัวเป็น "จุด"

ตั้งค่าเนื้อหา

ชื่อรีเอเจนต์	คำอธิบาย	จำนวนในชุด
Diagnosticum เม็ดเลือดแดง Salmonella Vi-antigen, แห้ง 6% (EDS)	เม็ดเลือดแดงไก่ที่ถูกทำให้ไวต่อแอนติเจน S. typhi Vi มวลดูดความชื้นแบบแห้ง สีน้ำตาล- หลังจากละลายแล้ว สารแขวนลอยจะมีสีน้ำตาลแดง	ชั้น 1 เริ่ม 0.6 มล
ดูดซับเซรั่มวินิจฉัยเชื้อ Salmonella, ตัวรับ Vi, แห้ง (เจือจาง 1:20, (K+))	เซรั่มกระต่าย ดูดซับ Salmonella, ตัวรับ Vi, เจือจาง 1:20 มวลที่มีรูพรุนดูดความชื้นแบบแห้ง สีขาว- หลังจากการละลายจะเป็นของเหลวสีเหลืองใสหรือไม่มีสี	ชั้น 1 เริ่ม 0.3 มล
สารเจือจางตัวอย่างทดสอบ (RSD)	ของเหลวใสสีฟ้าม่วง	1 ชั้น 10 มล
สารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS)	ของเหลวใสไม่มีสี	1 ชั้น 10 มล
เม็ดโพลีเมอร์แบบใช้ครั้งเดียวสำหรับปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกัน	เม็ดโพลีเมอร์แบบใช้ครั้งเดียวสำหรับปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกันที่ทำจากโพลีสไตรีนโปร่งใสและไม่มีสี	1 ชิ้น

ลักษณะการวินิจฉัย

การวินิจฉัยจะต้องเกาะติดกันใน RPHA โดยดูดซับซีรัมเชื้อ Salmonella ในการวินิจฉัย, ตัวรับ Vi, แห้ง (เจือจาง 1:20) จนถึงระดับไตเตอร์ที่ระบุบนฉลากซีรั่ม ระดับลักษณะการวินิจฉัยของซีรั่มในเลือดตามเงื่อนไข คนที่มีสุขภาพดีการเจือจางเซรั่มควรพิจารณาไม่สูงกว่า 1:20 เวลาในการวิเคราะห์คือ 3040 นาที ชุดอุปกรณ์นี้ออกแบบมาเพื่อทดสอบซีรั่มในเลือด 42 ซีรั่มในตัวเลือกการตรวจคัดกรอง หรือ 10 ซีรั่มในเลือดในตัวเลือกการไตเตรท

ข้อควรระวัง

ชุดนี้มีไว้สำหรับใช้ในการวินิจฉัยภายนอกร่างกายเท่านั้น สารที่รวมอยู่ในชุดอุปกรณ์จะถูกปิดใช้งานและปลอดภัย เมื่อใช้งานชุดอุปกรณ์ คุณควรปฏิบัติตาม SP 1.3.2322-08 และ SanPiN 2.1.7.2790-10

อุปกรณ์และวัสดุเพิ่มเติม

อุปกรณ์ วัสดุ โซลูชั่น:

• เครื่องจ่ายปิเปตแบบ 1 ช่องพร้อมปริมาตรการจ่ายที่หลากหลาย 5 - 40 µl; 40 - 200 ไมโครลิตร; 200 - 1,000 ไมโครลิตร และ 1,000 - 5,000 ไมโครลิตร;
• เครื่องจ่ายปิเปตแบบ 8 หรือ 12 ช่องพร้อมปริมาตรการจ่ายแบบแปรผันระหว่าง 5 - 40 µl และ 40 - 200 µl;
• น้ำกลั่น (GOST 6709-72)

ตัวอย่างที่วิเคราะห์แล้ว

ตัวอย่างซีรัมเลือดภายใต้การศึกษาจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2 ถึง 8 °C เป็นเวลาไม่เกิน 3 วันนับจากช่วงเวลาที่เจาะเลือด เวย์สามารถเก็บแช่แข็งที่อุณหภูมิไม่เกินลบ 18 °C ได้นานไม่เกิน 1 ปี ก่อนใช้งาน ตัวอย่างจะถูกละลายที่อุณหภูมิ 16 ถึง 25 °C และผสมโดยการเขย่า ไม่อนุญาตให้แช่แข็งซ้ำ ไม่ควรใช้ตัวอย่างที่มีการเจริญเติบโตของแบคทีเรียและภาวะเม็ดเลือดแดงแตก ก่อนทำปฏิกิริยา ซีรั่มทดสอบจะถูกให้ความร้อนที่ 56 °C เป็นเวลา 30 นาที

ดำเนินการวิเคราะห์

การเตรียมซีรั่มควบคุมการวินิจฉัย (K+)

เตรียมสารละลายที่ใช้วินิจฉัยเชื้อ Salmonella ในซีรั่มที่ถูกดูดซับ, ตัวรับ Vi, แห้ง (เจือจาง 1:20) จาก 0.3 มล. (K+) ในการดำเนินการนี้ ให้เติมสารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS) 0.3 มล. ลงในขวดที่มี K+ ปริมาณเซรั่มที่เหลือสามารถแบ่งส่วนและเก็บแช่แข็งที่อุณหภูมิไม่เกินลบ 18°C ​​ได้นานไม่เกิน 6 เดือน

การเตรียมเชื้อ Salmonella erythrocyte Diagnosticum (SED)

เพื่อเตรียมการเจือจางการทำงานของสารแขวนลอย Salmonella erythrocyte Diagnosticum ให้เติมน้ำกลั่น 0.6 มล. ลงในขวดด้วย SED แห้ง 6% และปล่อยให้ไฮเดรตเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 16 ถึง 25 °C จากนั้นเติมสารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS) 2.4 มิลลิลิตรลงในสารละลาย สารละลายในการทำงานจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2 ถึง 8 °C เป็นเวลาไม่เกิน 1 เดือน ไม่อนุญาตให้แช่แข็ง

คำแถลงของ RPGA ระหว่างการตรวจคัดกรองซีรั่มในเลือด

ซีรั่มเลือดสำหรับการศึกษาแบบคัดกรองจะเจือจางในหลุมของแท็บเล็ตดังนี้:

• การเจือจางเบื้องต้นที่ 1:20 จะถูกเตรียมในหลุมแรกของแผ่น โดยเติมสารละลาย RIP 190 μl ลงไปก่อน จากนั้นจึงเติมซีรั่มทดสอบ 10 μl เซรั่มแต่ละตัวจะถูกเติมด้วยทิปแยกกันและปิเปตอย่างระมัดระวัง (สีของสารละลายในหลุมหลังจากเติมเซรั่มควรเปลี่ยนจากสีน้ำเงินม่วงเป็นสีเขียว)
• การกรองการเจือจางที่ 1:40 จะถูกเตรียมในหลุมที่สองโดยเติมสารละลาย PBS 25 μl ลงไปก่อน จากนั้นจึงเติมซีรั่มที่เจือจางไว้ล่วงหน้า 25 μl แล้วทำการปิเปตอย่างระมัดระวัง

แต่ละครั้งที่ดำเนินการ RPGA จำเป็นต้องดำเนินการกำหนดการควบคุมไทเทอร์ K+ ในการดำเนินการนี้ ให้เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงใน 8 หลุมติดต่อกันเป็นแถวยาว จากนั้นเติมสารละลายทำงาน K+ 50 ไมโครลิตร (1:20) ลงในหลุมแรก ปิเปตอย่างระมัดระวังแล้วถ่าย 50 ไมโครลิตรไปยังหลุมถัดไป โดยได้รับการเจือจาง 2 เท่าจาก 1:40 ถึง 1:5120 เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงในอีก 4 หลุมเพื่อตรวจสอบ EDS หากไม่มีการเกิดเม็ดเลือดแดงเกิดขึ้นเอง

เติม SED 25 ไมโครลิตรลงในหลุมทั้งหมดของเพลตพร้อมการคัดกรองเจือจางของซีรั่มทดสอบ (ยกเว้นอันแรกที่มี RIP) และส่วนควบคุม คนสารแขวนลอย SED ในขวดหรืออ่างอาบน้ำก่อนใช้งาน!เขย่าแท็บเล็ตอย่างทั่วถึงและปล่อยทิ้งไว้ที่อุณหภูมิ 16 ถึง 25 ° C เป็นเวลา 30 - 40 นาทีจนกระทั่งเม็ดเลือดแดงในส่วนควบคุมตกตะกอนอย่างสมบูรณ์

คำแถลงของ RPGA ในระหว่างการไตเตรทของซีรั่มเลือดทดสอบ

การไตเตรทซีรั่มทดสอบและสารละลายการทำงานของ K+ จะดำเนินการในแถวสั้นๆ ของเพลต แถวสั้นๆ อีกแถวหนึ่งใช้เพื่อติดตามการไม่มีภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเกิดขึ้นเองของ EDS

เติมสารละลาย RIP 180 ไมโครลิตรลงในหลุมแรกของแถวสั้นเพื่อไตเตรทซีรั่มทดสอบ เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงในหลุมอื่นๆ ทั้งหมด

ซีรั่มทดสอบ 20 ไมโครลิตรถูกเติมลงในหลุมด้วยสารละลาย RIP (ได้เจือจาง 1:10) ซีรั่มแต่ละตัวจะถูกเติมด้วยปลายของตัวเองและปิเปตอย่างระมัดระวัง (สีของสารละลายในบ่อควรเปลี่ยนจากสีน้ำเงินม่วงเป็นสีเขียว) จากนั้น 50 μl จะถูกถ่ายโอนจากหลุมแรกไปยังหลุมถัดไปในแถว โดยได้รับการเจือจางสองเท่าตั้งแต่ 1:20 ถึง 1:1280 เมื่อสิ้นสุดการไตเตรท สารละลายในปริมาตร 50 ไมโครลิตรจะถูกเอาออกจากหลุมสุดท้าย

แต่ละครั้งที่ดำเนินการ RPGA จำเป็นต้องดำเนินการกำหนดการควบคุมไทเทอร์ K+ ในการดำเนินการนี้ ให้เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงใน 8 หลุมติดต่อกันเป็นแถวยาว จากนั้นเติมสารละลายทำงาน K+ (1:20) 50 ไมโครลิตรลงในหลุมแรก ปิเปตอย่างระมัดระวังแล้วถ่าย 50 ไมโครลิตรไปยังหลุมถัดไป โดยได้รับการเจือจาง 2 เท่าจาก 1:40 ถึง 1:5120

เพื่อควบคุมการทดสอบวินิจฉัยการขาดเม็ดเลือดแดงที่เกิดขึ้นเอง ให้เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงในหลุมทั้งหมดของแถวสั้นๆ

เพิ่ม SED 25 ไมโครลิตรลงในหลุมทั้งหมด (ยกเว้นหลุมแรกของแต่ละแถวสำหรับซีรั่มทดสอบที่มี RIP) คนสารแขวนลอย SED ในขวดหรืออ่างน้ำก่อนใช้งาน! เขย่าแท็บเล็ตอย่างทั่วถึงและปล่อยทิ้งไว้ที่อุณหภูมิ 16 ถึง 25 ° C เป็นเวลา 30 - 40 นาทีจนกระทั่งเม็ดเลือดแดงในส่วนควบคุมตกตะกอนอย่างสมบูรณ์

การบัญชีและการตีความผลลัพธ์

การบัญชีผลการตรวจคัดกรองซีรั่มในเลือด

ผลลัพธ์จะถูกนำมาพิจารณาในระดับปกติของไม้กางเขนสี่อัน ซีรั่มไทเตอร์ถือเป็นการเจือจางซึ่งให้ hemagglutination อย่างน้อย 3 (+++) ข้าม

• ++++ (4+) - เม็ดเลือดแดงที่เกาะติดกันก่อให้เกิด "ร่ม" คว่ำที่ด้านล่างของหลุมขอบของมันหลุดออก
• +++ (3+) - เม็ดเลือดแดงที่เกาะติดกันก่อให้เกิด "ร่ม" คว่ำที่ด้านล่างของรูขอบเรียบ
• ++ (2+) - พร้อมกับเม็ดเลือดแดงเกาะติดกันที่ด้านล่างของบ่อจะมีตะกอนในรูปแบบของ "วงแหวน" เล็ก ๆ ของเม็ดเลือดแดงที่ไม่เกาะติดกัน
• + (1+) - เซลล์เม็ดเลือดแดงส่วนใหญ่ไม่เกาะติดกันและอยู่ในรูปแบบของ "วงแหวน" เล็ก ๆ
• (-) - เซลล์เม็ดเลือดแดงที่ไม่เกาะกลุ่มกันก่อตัวเป็น "จุด" ที่ด้านล่างของบ่อ

ผลลัพธ์ที่เป็นบวกถือเป็นการสร้างเม็ดเลือดแดงของเม็ดเลือดแดงที่เต็มไปด้วย Vi-antigen อย่างน้อย 3 กากบาท (+++)

การควบคุมคุณภาพของการวินิจฉัยมีให้โดย 4 หลุมของแถวควบคุม ซึ่งมีการเพิ่มเฉพาะโซลูชัน PBS และ SED เท่านั้น ไม่ควรมีการเกิดเม็ดเลือดแดงแตกเกิดขึ้นเองในหลุมเหล่านี้ - ปฏิกิริยาจะเป็นลบ (-) มิฉะนั้นควรศึกษาซ้ำ หากการเกิด hemagglutination เกิดขึ้นระหว่างการจัดเตรียมใหม่ แสดงว่าไม่ได้ใช้ยานี้

ซีรั่มที่มีผลเป็นลบควรพิจารณาว่าไม่มีแอนติบอดีต่อแอนติเจน Vi ที่มีระดับการวินิจฉัยเท่ากับ 1:40 หรือต่ำกว่า

เซรั่มที่ให้ ผลลัพธ์ที่เป็นบวกในการเจือจาง 1:40 ควรตรวจสอบอีกครั้งในเวอร์ชันที่มีการไตเตรทซีรั่มเพื่อสร้างไทเทอร์

การบัญชีผลลัพธ์เมื่อไตเตรทซีรั่มในเลือด

ซีรั่มไทเตอร์ถือเป็นการเจือจางซึ่งให้ hemagglutination อย่างน้อย 3 (+++) ข้าม

การควบคุมคุณภาพของการวินิจฉัยมีให้โดยหลุมของแถวเพื่อควบคุม EDS ไม่ควรมีการเกิดเม็ดเลือดแดงแตกเกิดขึ้นเองในหลุมเหล่านี้ - ปฏิกิริยาจะเป็นลบ (-) มิฉะนั้นควรศึกษาซ้ำ หากการเกิด hemagglutination เกิดขึ้นระหว่างการทดสอบซ้ำ ๆ แสดงว่าไม่ได้ใช้ยานี้

2.การวินิจฉัย

4.จากจุลินทรีย์ที่ถูกทำลาย (การแยก Ag เฉพาะ)

การวินิจฉัย HBs ของเม็ดเลือดแดง

2.การวินิจฉัย

4. สารแขวนลอยของ air-sheep ที่บำบัดด้วยแทนนินและตกตะกอน a\g HBs

5.ตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะในเลือด

การวินิจฉัย gp120

2.การวินิจฉัย

4.แยก\g เช่น เอชไอวี

5. สำหรับการตรวจหา\tเอชไอวี

การวินิจฉัยโรคบาดทะยักของเม็ดเลือดแดง

2.การวินิจฉัย

4. สารแขวนลอย er.ram รักษาด้วยแทนนินและบาดทะยัก a\g

5.ตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะในเลือด (ต่อบาดทะยัก

แอนติเจน Cardiolipin สำหรับ microprecipitation

2.การวินิจฉัย

4.สกัดส่วนไขมันจากหัวใจวัวที่แข็งแรง

5.ตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะในเลือด

แอนติเจน Treponemal ล้ำเสียง

2.การวินิจฉัย

4. ของผู้เสียชีวิตยกเว้น ซิฟิลิส

5.ตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะในเลือด

การวินิจฉัยโรคทิวลาเรเมียจากคอร์ปัสคูลาร์

2.การวินิจฉัย

4.จากแต่ละอนุภาคของเชื้อโรค

5.ตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะในเลือด

การวินิจฉัยโรคบิด

2.การวินิจฉัย

4.ระงับจากสัตว์ที่ถูกฆ่า

5.เพื่อตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะในเลือดของผู้ป่วย

การวินิจฉัยเม็ดเลือดแดงจาก Shigella Sonne

2.การวินิจฉัย

4.การระงับ er.ram รักษาด้วยโทนิน

5.ตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะในเลือด

การวินิจฉัยจากเชื้อ Salmonella typhimurium

2.การวินิจฉัย

4. ของผู้เสียชีวิตยกเว้น เชื้อซัลโมเนลลา

5.ตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะในเลือด

เซรั่ม

เซรั่มม้าต่อต้านเนื้อร้าย 5000 IU

2.เซรั่ม

4.จากซีรั่มในเลือดของม้าภาวะไขมันในเลือดสูงที่มีสารพิษจากก๊าซเนื้อตายเน่าแบบกระตุ้น

6.ทางหลอดเลือด หลังจากการทดสอบกับโกลบูลิน 1:100

อิมมูโนโกลบูลินของมนุษย์ปกติ

2.เซรั่ม

4.จากเซรั่มเลือดผู้บริจาค

5. ฟอร์มอีพาส เฉพาะเจาะจง ซื้อแล้ว ศิลปะ ฉัน

6.ทางหลอดเลือด

เซรั่มแอนแทรกซ์ที่ตกตะกอน

2.เซรั่ม

4. จากซีรั่มในเลือดของสัตว์ที่มีภูมิต้านทานเกิน a\g exc.sib แผลพุพอง

6.ปฏิกิริยาตกตะกอน (RP)

ประเภทเซรั่มโบทูลินั่ม – A 400 IU

2.เซรั่ม

5.เพื่อตรวจหาแอนติเจนจำเพาะในวัสดุทดสอบ

6.ปฏิกิริยาการทำให้เป็นกลาง (RN)

โกลบูลินต่อต้านแอนแทรกซ์

2.เซรั่ม

4.จากซีรั่มในเลือดของสัตว์ที่มีภูมิต้านทานเกินและ/หรือไม่รวมโรคแอนแทรกซ์

5. ฟอร์มอีพาส เฉพาะเจาะจง ซื้อแล้ว ศิลปะ ฉัน

6.ทางหลอดเลือด

เซรั่มเม็ดเลือดแดงแตก

2.เซรั่ม

4.จากซีรั่มของสัตว์ที่มีภูมิต้านทานเกินที่มีเม็ดเลือดแดงของสัตว์ประเภทอื่น

5.เพื่อตรวจหาแอนติเจนจำเพาะในวัสดุทดสอบ

Ogawa อหิวาตกโรค agglutinating เซรั่ม

2.เซรั่ม

4.จากเลือดของสัตว์ที่มีภูมิต้านทานเกิน

5.เพื่อตรวจหาแอนติเจนจำเพาะในวัสดุทดสอบ

เซรั่มทิวลาเรเมียเรืองแสง

2.เซรั่ม

4.จากซีรั่มในเลือดของสัตว์ที่มีภูมิต้านทานเกิน a\g exc.tular

5.เพื่อตรวจหาแอนติเจนจำเพาะในวัสดุทดสอบ

อิมมูโนโกลบูลินต่อต้าน โรคไข้สมองอักเสบจากเห็บบุคคล

2.เซรั่ม

4.จากเซรั่มเลือดผู้บริจาค

5. ฟอร์มอีพาส เฉพาะเจาะจง ซื้อแล้ว ศิลปะ ฉัน

6.ทางหลอดเลือด

เซรั่มวินิจฉัย ESNO

2.เซรั่ม

4.จากซีรั่มในเลือดของสัตว์ที่ได้รับการกระตุ้นภูมิคุ้มกันด้วยไวรัส ESNO

5.เพื่อตรวจหาแอนติเจนจำเพาะในวัสดุทดสอบ

อิมมูโนโกลบูลินของมนุษย์ต่อโรคตับอักเสบบี

2.เซรั่ม

4.จากเลือดของผู้บริจาคที่ได้รับการฉีดวัคซีนป้องกันไวรัสตับอักเสบบี

5. ฟอร์มอีพาส เฉพาะเจาะจง ซื้อแล้ว ศิลปะ ฉัน

6.ทางหลอดเลือด

เซรั่มแอนติโกลบูลินที่มีป้ายกำกับเปอร์ออกซิเดส

2.เซรั่ม

4.จากเลือดของสัตว์ที่มีภูมิต้านทานเกิน

5.เพื่อตรวจหาแอนติเจนจำเพาะในสารทดสอบ (HIV)

อิมมูโนโกลบูลินต้านโรคพิษสุนัขบ้า

2.เซรั่ม

4.จากเซรั่มเลือดผู้บริจาค

5. ฟอร์มอีพาส เฉพาะเจาะจง ซื้อแล้ว ศิลปะ ฉัน

ชุดรีเอเจนต์ของ Diagnosticum Salmonella VI-antigen มีไว้สำหรับการตรวจหาแอนติบอดีจำเพาะต่อเชื้อ Salmonella typhus VI ในซีรั่มเลือดของมนุษย์ในปฏิกิริยาการสร้างเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟ (RPHA)

1. ลักษณะเฉพาะของชุด

2.1. หลักการของวิธีการ

หลักการออกฤทธิ์ของ Diagnosticum Salmonella VI-antigen คือ Vi-antigen ที่ติดอยู่บนพื้นผิวของเซลล์เม็ดเลือดแดง เมื่อทำปฏิกิริยากับซีรั่มที่มีแอนติบอดีต่อ Vi-antigen จะสังเกตปรากฏการณ์ของการเกาะติดกันของเม็ดเลือดแดง

2.2. ตั้งค่าเนื้อหา

รีเอเจนต์	ปริมาณ
Diagnosticum เม็ดเลือดแดง Salmonella Vi-antigenic ของเหลว- เป็นสารแขวนลอย 1% ของเม็ดเลือดแดงแกะ Salmonella Typhoid ที่ถูกฟอร์มาลินและไวต่อการกระตุ้นด้วย B-antigen ในสารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (pH 7.2 + 0.2; ความเข้มข้น 0.06 โมล/ลิตร) สารแขวนลอยสีน้ำตาลเป็นเนื้อเดียวกันโดยไม่มีสะเก็ด เมื่อตกตะกอนจะเกิด 2 ชั้น: ตะกอนสีน้ำตาลหนาแน่นของเม็ดเลือดแดงและของเหลวเหนือตะกอนสีเหลืองใส	1 ขวด - 6 มล
เซรั่มวินิจฉัยเชื้อ Salmonella ดูดซับตัวรับ B แห้ง -มวลที่เป็นเนื้อเดียวกันจากสีขาวมีสีน้ำตาลอ่อนถึงสีเบจ	1 ขวด – 0.1 มล
สารแขวนลอย 1% ของเม็ดเลือดแดงแกะที่ยังไม่ผ่านกระบวนการฟอร์มาลินไลซ์— สารแขวนลอยสีน้ำตาลที่เป็นเนื้อเดียวกันโดยไม่มีสะเก็ด เมื่อตกตะกอนจะเกิด 2 ชั้น: ตะกอนสีน้ำตาลหนาแน่นของเม็ดเลือดแดงและของเหลวเหนือตะกอนสีเหลืองใส	1 ขวด –
สารละลายสำหรับการเจือจางเซรั่มและระยะ RPGA -สารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.9% - ของเหลวไม่มีสีโปร่งใส pH 6.5 ถึง 7.5	2 ขวด - ขวดละ 8 มล
แผ่นก้นกลมแบบใช้ครั้งเดียวสำหรับปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกัน -ประกอบด้วย 8 แถว แต่ละแถวมี 12 รู ก้นกลมใส ไม่มีสี	1 ชิ้น

1. ลักษณะการวิเคราะห์และการวินิจฉัย

3.1. การวินิจฉัยจะต้องเกาะติดกันใน RPGA ด้วยเซรั่ม Salmonella สำหรับการวินิจฉัยซึ่งถูกดูดซับโดยตัวรับ B แบบแห้งโดยเจือจางไม่น้อยกว่า 1:160

ระดับเงื่อนไขของลักษณะการวินิจฉัยของซีรั่มในเลือดจากคนที่มีสุขภาพดีควรพิจารณาการเจือจางของซีรั่มไม่สูงกว่า 1:20

3.2. เวลาในการวิเคราะห์: 2 ชั่วโมง

3.3. ในชุดประกอบด้วย 8 คำจำกัดความ

1. ข้อควรระวัง

เมื่อทำงานกับชุดอุปกรณ์นี้คุณควรปฏิบัติตาม "กฎการออกแบบ ข้อควรระวังด้านความปลอดภัย สุขาภิบาลอุตสาหกรรม ระบอบการป้องกันการแพร่ระบาด และสุขอนามัยส่วนบุคคล เมื่อทำงานในห้องปฏิบัติการ (แผนก แผนก) ของสถาบันสุขาภิบาลและระบาดวิทยาของกระทรวงสาธารณสุขของสหภาพโซเวียต ( ม., 1981)

ซีรั่มที่วิเคราะห์แล้วรวมถึงรีเอเจนต์ที่สัมผัสกับซีรั่มควรได้รับการพิจารณาว่าอาจติดเชื้อได้ เวลานานรักษาหรือแพร่เชื้อเอชไอวี ไวรัสตับอักเสบ หรือเชื้อโรคอื่น ๆ การติดเชื้อไวรัส- ควรจัดการด้วยความระมัดระวัง:

• ทำงานกับถุงมือยาง
• เมื่อทำการปิเปตจำเป็นต้องใช้เครื่องจ่ายอัตโนมัติ
• เมื่อเสร็จสิ้นงาน ให้บำบัดซีรั่มและรีเอเจนต์ที่วิเคราะห์แล้วและเครื่องมือที่สัมผัสกับพวกมันด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อ
• เช็ดอุปกรณ์ด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ 70% ก่อนและหลังการใช้งาน

ซีรั่มที่วิเคราะห์จะต้องปิดการใช้งานที่อุณหภูมิ 56 0 C เป็นเวลา 30 นาที

เซรั่ม Salmonella สำหรับการวินิจฉัยที่ถูกดูดซับโดยตัวรับ B ซึ่งรวมอยู่ในชุดอุปกรณ์จะแห้งและไม่ทำงาน

รับประกันผลการวิเคราะห์ตามวัตถุประสงค์หากตรงตามเงื่อนไขต่อไปนี้:

• ชุดรีเอเจนต์ทั้งหมดควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2 ถึง 8 0 C;
• อย่าใช้รีเอเจนต์ที่หมดอายุ
• อย่าใช้ชุดรีเอเจนต์หากไม่มีเครื่องหมายที่เหมาะสมบนบรรจุภัณฑ์
• หากต้องการดำเนินการ RPHA ให้ใช้รีเอเจนต์ที่รวมอยู่ในชุดอุปกรณ์นี้เท่านั้น

Vi-วินิจฉัย

การวินิจฉัย Vi

Vi-แอนติเจน

ใบรับรองการลงทะเบียนเลขที่ RZN 2016/3905 ลงวันที่ 04.04.2016

วัตถุประสงค์

ชุดรีเอเจนต์ "Diagnosticum erythrocyte salmonella Vi-antigen for RPHA" (ED-Vi) มีไว้สำหรับการตรวจหาแอนติบอดีต่อ Vi-antigen ของสาเหตุที่ทำให้เกิดไข้ไทฟอยด์ในซีรั่มเลือดของมนุษย์โดยปฏิกิริยาของ hemagglutination แบบพาสซีฟ (RPHA ).

ลักษณะของชุด

หลักการทำงาน

ในการปรากฏตัวของแอนติบอดีต่อสาเหตุของไข้ไทฟอยด์จะสังเกตการเกิดเม็ดเลือดแดงของเม็ดเลือดแดงไก่ที่ไวต่อแอนติเจน Vi ซึ่งนำไปสู่การก่อตัวของ "ร่ม" ของเม็ดเลือดแดงที่ตกลงที่ด้านล่างของแผ่นรูปตัวยู . ในกรณีที่ไม่มีแอนติบอดีต่อสาเหตุของไข้ไทฟอยด์ เซลล์เม็ดเลือดแดงที่เกาะอยู่จะก่อตัวเป็น "จุด"

ตั้งค่าเนื้อหา

ชื่อรีเอเจนต์	คำอธิบาย	จำนวนในชุด
Diagnosticum เม็ดเลือดแดง Salmonella Vi-antigen, แห้ง 6% (EDS)	เม็ดเลือดแดงไก่ที่ถูกทำให้ไวต่อแอนติเจน S. typhi Vi มวลดูดความชื้นแห้งสีน้ำตาล หลังจากละลายแล้ว สารแขวนลอยจะมีสีน้ำตาลแดง	ชั้น 1 เริ่ม 0.6 มล
ดูดซับเซรั่มวินิจฉัยเชื้อ Salmonella, ตัวรับ Vi, แห้ง (เจือจาง 1:20, (K+))	เซรั่มกระต่าย ดูดซับ Salmonella, ตัวรับ Vi, เจือจาง 1:20 มวลรูพรุนดูดความชื้นแห้งสีขาว หลังจากการละลายจะเป็นของเหลวสีเหลืองใสหรือไม่มีสี	ชั้น 1 เริ่ม 0.3 มล
สารเจือจางตัวอย่างทดสอบ (RSD)	ของเหลวใสสีฟ้าม่วง	1 ชั้น 10 มล
สารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS)	ของเหลวใสไม่มีสี	1 ชั้น 10 มล
เม็ดโพลีเมอร์แบบใช้ครั้งเดียวสำหรับปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกัน	เม็ดโพลีเมอร์แบบใช้ครั้งเดียวสำหรับปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกันที่ทำจากโพลีสไตรีนโปร่งใสและไม่มีสี	1 ชิ้น

ลักษณะการวินิจฉัย

การวินิจฉัยจะต้องเกาะติดกันใน RPHA โดยดูดซับซีรัมเชื้อ Salmonella ในการวินิจฉัย, ตัวรับ Vi, แห้ง (เจือจาง 1:20) จนถึงระดับไตเตอร์ที่ระบุบนฉลากซีรั่ม ระดับเงื่อนไขของลักษณะการวินิจฉัยของซีรั่มในเลือดจากคนที่มีสุขภาพดีควรพิจารณาการเจือจางของซีรั่มไม่สูงกว่า 1:20 เวลาในการวิเคราะห์คือ 3040 นาที ชุดอุปกรณ์นี้ออกแบบมาเพื่อทดสอบซีรั่มในเลือด 42 ซีรั่มในตัวเลือกการตรวจคัดกรอง หรือ 10 ซีรั่มในเลือดในตัวเลือกการไตเตรท

ข้อควรระวัง

ชุดนี้มีไว้สำหรับใช้ในการวินิจฉัยภายนอกร่างกายเท่านั้น สารที่รวมอยู่ในชุดอุปกรณ์จะถูกปิดใช้งานและปลอดภัย เมื่อใช้งานชุดอุปกรณ์ คุณควรปฏิบัติตาม SP 1.3.2322-08 และ SanPiN 2.1.7.2790-10

อุปกรณ์และวัสดุเพิ่มเติม

อุปกรณ์ วัสดุ โซลูชั่น:

• เครื่องจ่ายปิเปตแบบ 1 ช่องพร้อมปริมาตรการจ่ายที่หลากหลาย 5 - 40 µl; 40 - 200 ไมโครลิตร; 200 - 1,000 ไมโครลิตร และ 1,000 - 5,000 ไมโครลิตร;
• เครื่องจ่ายปิเปตแบบ 8 หรือ 12 ช่องพร้อมปริมาตรการจ่ายแบบแปรผันระหว่าง 5 - 40 µl และ 40 - 200 µl;
• น้ำกลั่น (GOST 6709-72)

ตัวอย่างที่วิเคราะห์แล้ว

ตัวอย่างซีรัมเลือดภายใต้การศึกษาจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2 ถึง 8 °C เป็นเวลาไม่เกิน 3 วันนับจากช่วงเวลาที่เจาะเลือด เวย์สามารถเก็บแช่แข็งที่อุณหภูมิไม่เกินลบ 18 °C ได้นานไม่เกิน 1 ปี ก่อนใช้งาน ตัวอย่างจะถูกละลายที่อุณหภูมิ 16 ถึง 25 °C และผสมโดยการเขย่า ไม่อนุญาตให้แช่แข็งซ้ำ ไม่ควรใช้ตัวอย่างที่มีการเจริญเติบโตของแบคทีเรียและภาวะเม็ดเลือดแดงแตก ก่อนทำปฏิกิริยา ซีรั่มทดสอบจะถูกให้ความร้อนที่ 56 °C เป็นเวลา 30 นาที

ดำเนินการวิเคราะห์

การเตรียมซีรั่มควบคุมการวินิจฉัย (K+)

เตรียมสารละลายที่ใช้วินิจฉัยเชื้อ Salmonella ในซีรั่มที่ถูกดูดซับ, ตัวรับ Vi, แห้ง (เจือจาง 1:20) จาก 0.3 มล. (K+) ในการดำเนินการนี้ ให้เติมสารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS) 0.3 มล. ลงในขวดที่มี K+ ปริมาณเซรั่มที่เหลือสามารถแบ่งส่วนและเก็บแช่แข็งที่อุณหภูมิไม่เกินลบ 18°C ​​ได้นานไม่เกิน 6 เดือน

การเตรียมเชื้อ Salmonella erythrocyte Diagnosticum (SED)

เพื่อเตรียมการเจือจางการทำงานของสารแขวนลอย Salmonella erythrocyte Diagnosticum ให้เติมน้ำกลั่น 0.6 มล. ลงในขวดด้วย SED แห้ง 6% และปล่อยให้ไฮเดรตเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 16 ถึง 25 °C จากนั้นเติมสารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS) 2.4 มิลลิลิตรลงในสารละลาย สารละลายในการทำงานจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2 ถึง 8 °C เป็นเวลาไม่เกิน 1 เดือน ไม่อนุญาตให้แช่แข็ง

คำแถลงของ RPGA ระหว่างการตรวจคัดกรองซีรั่มในเลือด

ซีรั่มเลือดสำหรับการศึกษาแบบคัดกรองจะเจือจางในหลุมของแท็บเล็ตดังนี้:

• การเจือจางเบื้องต้นที่ 1:20 จะถูกเตรียมในหลุมแรกของแผ่น โดยเติมสารละลาย RIP 190 μl ลงไปก่อน จากนั้นจึงเติมซีรั่มทดสอบ 10 μl เซรั่มแต่ละตัวจะถูกเติมด้วยทิปแยกกันและปิเปตอย่างระมัดระวัง (สีของสารละลายในหลุมหลังจากเติมเซรั่มควรเปลี่ยนจากสีน้ำเงินม่วงเป็นสีเขียว)
• การกรองการเจือจางที่ 1:40 จะถูกเตรียมในหลุมที่สองโดยเติมสารละลาย PBS 25 μl ลงไปก่อน จากนั้นจึงเติมซีรั่มที่เจือจางไว้ล่วงหน้า 25 μl แล้วทำการปิเปตอย่างระมัดระวัง

แต่ละครั้งที่ดำเนินการ RPGA จำเป็นต้องดำเนินการกำหนดการควบคุมไทเทอร์ K+ ในการดำเนินการนี้ ให้เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงใน 8 หลุมติดต่อกันเป็นแถวยาว จากนั้นเติมสารละลายทำงาน K+ 50 ไมโครลิตร (1:20) ลงในหลุมแรก ปิเปตอย่างระมัดระวังแล้วถ่าย 50 ไมโครลิตรไปยังหลุมถัดไป โดยได้รับการเจือจาง 2 เท่าจาก 1:40 ถึง 1:5120 เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงในอีก 4 หลุมเพื่อตรวจสอบ EDS หากไม่มีการเกิดเม็ดเลือดแดงเกิดขึ้นเอง

เติม SED 25 ไมโครลิตรลงในหลุมทั้งหมดของเพลตพร้อมการคัดกรองเจือจางของซีรั่มทดสอบ (ยกเว้นอันแรกที่มี RIP) และส่วนควบคุม คนสารแขวนลอย SED ในขวดหรืออ่างอาบน้ำก่อนใช้งาน!เขย่าแท็บเล็ตอย่างทั่วถึงและปล่อยทิ้งไว้ที่อุณหภูมิ 16 ถึง 25 ° C เป็นเวลา 30 - 40 นาทีจนกระทั่งเม็ดเลือดแดงในส่วนควบคุมตกตะกอนอย่างสมบูรณ์

คำแถลงของ RPGA ในระหว่างการไตเตรทของซีรั่มเลือดทดสอบ

การไตเตรทซีรั่มทดสอบและสารละลายการทำงานของ K+ จะดำเนินการในแถวสั้นๆ ของเพลต แถวสั้นๆ อีกแถวหนึ่งใช้เพื่อติดตามการไม่มีภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเกิดขึ้นเองของ EDS

เติมสารละลาย RIP 180 ไมโครลิตรลงในหลุมแรกของแถวสั้นเพื่อไตเตรทซีรั่มทดสอบ เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงในหลุมอื่นๆ ทั้งหมด

ซีรั่มทดสอบ 20 ไมโครลิตรถูกเติมลงในหลุมด้วยสารละลาย RIP (ได้เจือจาง 1:10) ซีรั่มแต่ละตัวจะถูกเติมด้วยปลายของตัวเองและปิเปตอย่างระมัดระวัง (สีของสารละลายในบ่อควรเปลี่ยนจากสีน้ำเงินม่วงเป็นสีเขียว) จากนั้น 50 μl จะถูกถ่ายโอนจากหลุมแรกไปยังหลุมถัดไปในแถว โดยได้รับการเจือจางสองเท่าตั้งแต่ 1:20 ถึง 1:1280 เมื่อสิ้นสุดการไตเตรท สารละลายในปริมาตร 50 ไมโครลิตรจะถูกเอาออกจากหลุมสุดท้าย

แต่ละครั้งที่ดำเนินการ RPGA จำเป็นต้องดำเนินการกำหนดการควบคุมไทเทอร์ K+ ในการดำเนินการนี้ ให้เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงใน 8 หลุมติดต่อกันเป็นแถวยาว จากนั้นเติมสารละลายทำงาน K+ (1:20) 50 ไมโครลิตรลงในหลุมแรก ปิเปตอย่างระมัดระวังแล้วถ่าย 50 ไมโครลิตรไปยังหลุมถัดไป โดยได้รับการเจือจาง 2 เท่าจาก 1:40 ถึง 1:5120

เพื่อควบคุมการทดสอบวินิจฉัยการขาดเม็ดเลือดแดงที่เกิดขึ้นเอง ให้เติมสารละลาย PBS 50 ไมโครลิตรลงในหลุมทั้งหมดของแถวสั้นๆ

เพิ่ม SED 25 ไมโครลิตรลงในหลุมทั้งหมด (ยกเว้นหลุมแรกของแต่ละแถวสำหรับซีรั่มทดสอบที่มี RIP) คนสารแขวนลอย SED ในขวดหรืออ่างน้ำก่อนใช้งาน! เขย่าแท็บเล็ตอย่างทั่วถึงและปล่อยทิ้งไว้ที่อุณหภูมิ 16 ถึง 25 ° C เป็นเวลา 30 - 40 นาทีจนกระทั่งเม็ดเลือดแดงในส่วนควบคุมตกตะกอนอย่างสมบูรณ์

การบัญชีและการตีความผลลัพธ์

การบัญชีผลการตรวจคัดกรองซีรั่มในเลือด

ผลลัพธ์จะถูกนำมาพิจารณาในระดับปกติของไม้กางเขนสี่อัน ซีรั่มไทเตอร์ถือเป็นการเจือจางซึ่งให้ hemagglutination อย่างน้อย 3 (+++) ข้าม

• ++++ (4+) - เม็ดเลือดแดงที่เกาะติดกันก่อให้เกิด "ร่ม" คว่ำที่ด้านล่างของหลุมขอบของมันหลุดออก
• +++ (3+) - เม็ดเลือดแดงที่เกาะติดกันก่อให้เกิด "ร่ม" คว่ำที่ด้านล่างของรูขอบเรียบ
• ++ (2+) - พร้อมกับเม็ดเลือดแดงเกาะติดกันที่ด้านล่างของบ่อจะมีตะกอนในรูปแบบของ "วงแหวน" เล็ก ๆ ของเม็ดเลือดแดงที่ไม่เกาะติดกัน
• + (1+) - เซลล์เม็ดเลือดแดงส่วนใหญ่ไม่เกาะติดกันและอยู่ในรูปแบบของ "วงแหวน" เล็ก ๆ
• (-) - เซลล์เม็ดเลือดแดงที่ไม่เกาะกลุ่มกันก่อตัวเป็น "จุด" ที่ด้านล่างของบ่อ

ผลลัพธ์ที่เป็นบวกถือเป็นการสร้างเม็ดเลือดแดงของเม็ดเลือดแดงที่เต็มไปด้วย Vi-antigen อย่างน้อย 3 กากบาท (+++)

การควบคุมคุณภาพของการวินิจฉัยมีให้โดย 4 หลุมของแถวควบคุม ซึ่งมีการเพิ่มเฉพาะโซลูชัน PBS และ SED เท่านั้น ไม่ควรมีการเกิดเม็ดเลือดแดงแตกเกิดขึ้นเองในหลุมเหล่านี้ - ปฏิกิริยาจะเป็นลบ (-) มิฉะนั้นควรศึกษาซ้ำ หากการเกิด hemagglutination เกิดขึ้นระหว่างการจัดเตรียมใหม่ แสดงว่าไม่ได้ใช้ยานี้

ซีรั่มที่มีผลเป็นลบควรพิจารณาว่าไม่มีแอนติบอดีต่อแอนติเจน Vi ที่มีระดับการวินิจฉัยเท่ากับ 1:40 หรือต่ำกว่า

ซีรั่มที่ให้ผลบวกเมื่อเจือจางในอัตราส่วน 1:40 ควรทดสอบซ้ำด้วยการไตเตรทของซีรั่มเพื่อสร้างไทเทอร์

การบัญชีผลลัพธ์เมื่อไตเตรทซีรั่มในเลือด

ซีรั่มไทเตอร์ถือเป็นการเจือจางซึ่งให้ hemagglutination อย่างน้อย 3 (+++) ข้าม

การควบคุมคุณภาพของการวินิจฉัยมีให้โดยหลุมของแถวเพื่อควบคุม EDS ไม่ควรมีการเกิดเม็ดเลือดแดงแตกเกิดขึ้นเองในหลุมเหล่านี้ - ปฏิกิริยาจะเป็นลบ (-) มิฉะนั้นควรศึกษาซ้ำ หากการเกิด hemagglutination เกิดขึ้นระหว่างการทดสอบซ้ำ ๆ แสดงว่าไม่ได้ใช้ยานี้