ต้านเชื้อเอชไอวี 1 2 อะไร. การวินิจฉัยของ ELISA: สาระสำคัญคืออะไร, การกำหนดแอนติบอดี, ดำเนินการอย่างไรและมีผลกับโรคใดบ้าง? ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส

การติดเชื้อเอชไอวีจัดเป็นโรคที่ไม่สามารถควบคุมได้เนื่องจากขาดวิธีการ การป้องกันเฉพาะและประสิทธิผลของการบำบัดไม่เพียงพอ ดังนั้นเพื่อการควบคุม สถานการณ์ทางระบาดวิทยาสำหรับการติดเชื้อเอชไอวีจะใช้การตรวจคัดกรองเป็นหลัก การศึกษาวินิจฉัย. สถานที่ชั้นนำในบรรดาวิธีการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีนั้น การจัดอันดับของ enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) ซึ่งทำให้สามารถระบุเครื่องหมายทางซีรั่มวิทยาของเชื้อโรคในบุคคลที่ตรวจได้ ของโรคนี้.

รายงานฉบับนี้นำเสนอผลการตรวจแอนติบอดีต่อเชื้อ HIV ในเลือด จำนวน 40,823 ราย ซึ่งรวมผู้ป่วยด้วย คลินิกฝากครรภ์,คลินิก,โรงพยาบาลในเมืองอีกด้วย ศูนย์การแพทย์เชี่ยวชาญการตรวจและรักษาผู้ป่วยที่มีความเสี่ยง (ผู้ติดยา ผู้ป่วยไวรัสตับอักเสบบี ซี และ กามโรค- การศึกษาดำเนินการในปี 2548 ในห้องปฏิบัติการภูมิคุ้มกันวิทยาของสถาบันวิจัยสูติศาสตร์และนรีเวชวิทยาซึ่งตั้งชื่อตาม ถึง. Ott RAMS ซึ่งมีประสบการณ์มากกว่า 15 ปี ในการใช้วิธีการ ELISA ในการวินิจฉัยต่างๆ โรคติดเชื้อ.

สำหรับการตรวจตัวอย่างซีรั่มในเลือดเบื้องต้น เราใช้ระบบการทดสอบ “CombiBest anti-HIV-1+2” (ZAO “Vector-Best”, Novosibirsk) ซึ่งตรวจจับแอนติบอดีจำเพาะรวมต่อ HIV-1 และ HIV-1 ใน ตรวจสอบตัวอย่างซีรัมหรือพลาสมาของมนุษย์ 2 (อิมมูโนโกลบูลินคลาส A, G และ M) ในชุดตรวจวินิจฉัยนี้ โปรตีนรีคอมบิแนนท์เอชไอวีถูกนำมาใช้ทั้งในการตรึงในหลุมของแผ่นเปลือกโลกและในรูปแบบของคอนจูเกตที่มีมะรุมเปอร์ออกซิเดส ประเมินผลการวิเคราะห์ซีรัมตามคำแนะนำของคำแนะนำสำหรับระบบทดสอบ: ตัวอย่างที่ทดสอบถือว่าเป็นลบ (ไม่มีแอนติบอดีต่อ HIV-1 และ HIV-2) ความหนาแน่นของแสง(OD) ซึ่งใน ELISA ไม่เกินค่า OPcrit

เมื่อคัดกรองในห้องปฏิบัติการ ผลลัพธ์ ELISA เป็นลบสำหรับตัวอย่างซีรั่ม 40,222 (98.5%) จากตัวอย่างซีรั่ม 40,823 ตัวอย่าง และตัวอย่างที่ทดสอบ 601 (1.5%) ถือว่าเป็นบวกในช่วงแรก จากผลการวิเคราะห์ซ้ำของซีรั่ม 601 แต่ละซีราที่ซ้ำกัน (สองหลุมของเพลต) ในวันถัดไป ตัวอย่าง 440 รายการ (73.2%) ถูกกำหนดว่าเป็นบวก และ 161 รายการ (26.8%) ถูกกำหนดให้เป็นลบ ตามคำแนะนำของกระทรวงสาธารณสุขและ การพัฒนาสังคมซีรั่มที่มีผลคัดกรองเป็นบวกจำนวน 440 ตัวถูกแช่แข็งและถ่ายโอนสำหรับการศึกษาเพื่อยืนยันเพิ่มเติมไปยังสำนักงานให้คำปรึกษาและวินิจฉัยของห้องปฏิบัติการอ้างอิงของโรงพยาบาลหมายเลข 30 ที่ตั้งชื่อตาม เอส.พี. บอตคิน่า. การศึกษาเหล่านี้ดำเนินการโดยใช้ระบบทดสอบอิมมูโนเอ็นไซม์ “EKOlab-Vironostika HIV 1.2 Ag/Ab” (“EKOlab”, Elektrogorsk), “Genscreen Plus” เอชไอวี Ag-Ab” (“BioRad”, USA) รวมถึงชุดอุปกรณ์สำหรับการสร้างภูมิคุ้มกันบกพร่อง ผลการวิเคราะห์ 440 ซีรั่มในการทดสอบเพื่อยืนยันนำไปสู่ข้อสรุปว่าตัวอย่าง 323 (73.4%) เป็นบวก และ 102 (23.2%) เป็นลบ สำหรับตัวอย่างที่ทดสอบ 15 ตัวอย่าง (3.4%) ได้ผลลัพธ์การวิเคราะห์ที่ไม่แน่นอน

ควรสังเกตว่าค่า OD ที่ได้รับในห้องปฏิบัติการของเราในระหว่างการทดสอบครั้งแรกโดยใช้ระบบทดสอบ CombiBest anti-HIV-1+2 สำหรับ 314 (97.2%) ของซีรั่มบวก 323 เหล่านี้อยู่ในช่วง 0.900 ถึง 1.780 และสำหรับ 9 ตัวอย่าง (2.8%) – 0.500–0.900 ค่า OD ที่ได้รับจากการคัดกรอง 102 ซีรั่มลบสำหรับ 52 ตัวอย่าง (51%) อยู่ในช่วง 0.195 ถึง 0.400; สำหรับตัวอย่าง 40 (39.2%) – 0.401–0.800; 10 ตัวอย่าง (9.8%) – มากกว่า 0.800

ดังนั้นจากการดำเนินงานพบว่าการตรวจเบื้องต้นของซีรั่มในเลือดเพื่อหาเครื่องหมายทางซีรัมวิทยาของการติดเชื้อ HIV โดยใช้ระบบทดสอบ CombiBest anti-HIV-1+2 นั้นมีประสิทธิภาพสูง ผลการตรวจคัดกรองเป็นบวกได้รับการยืนยันในระหว่าง การวิจัยเพิ่มเติมในห้องปฏิบัติการอ้างอิงในกรณี 73% และผลบวกลวงถูกบันทึกเพียง 0.25% ของซีรั่ม 40,823 ที่วิเคราะห์

คำอธิบาย

การตระเตรียม

ข้อบ่งชี้

การตีความผลลัพธ์

คำอธิบาย

วิธีการกำหนด การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA)

วัสดุที่อยู่ระหว่างการศึกษาเซรั่มเลือด

สามารถเยี่ยมชมบ้านได้

การตรวจหาแอนติบอดีต่อเอชไอวีประเภท 1 และ 2 และแอนติเจน HIV p24 การทดสอบเชิงคุณภาพ

ความสนใจ. ในกรณีที่เกิดปฏิกิริยาเชิงบวกและน่าสงสัย ระยะเวลาในการออกผลสามารถขยายได้เป็น 10 วันทำการ HIV (ไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์) ซึ่งเป็นสาเหตุของโรคเอดส์ (กลุ่มอาการภูมิคุ้มกันบกพร่องที่ได้มา) อยู่ในตระกูลรีโทรไวรัส ติดต่อจากคนสู่คนโดยใช้เข็มและกระบอกฉีดยาที่ปนเปื้อน การบริหารทางหลอดเลือดดำยาเสพติดหรือ ขั้นตอนการรักษา, ที่ การติดต่อทางเพศทั้งรักต่างเพศและรักร่วมเพศ การแพร่เชื้อไวรัสสามารถเกิดขึ้นได้จากการถ่ายเลือดและผลิตภัณฑ์จากเลือดที่ติดเชื้อ การบริจาคอวัยวะหรือน้ำอสุจิ บุคลากรทางการแพทย์- เมื่อได้รับบาดเจ็บจากเข็มหรือเครื่องมือที่ติดเชื้อ การติดเชื้อเอชไอวีสามารถเกิดขึ้นได้จากการแพร่เชื้อจากแม่ที่ติดเชื้อสู่ลูก ( เส้นทางแนวตั้ง) แม้ว่าวิธีการป้องกันสมัยใหม่โดยใช้การรักษาด้วยยาต้านไวรัส แต่หากปฏิบัติตามคำแนะนำทั้งหมด ก็สามารถลดความเสี่ยงนี้ให้เหลือน้อยที่สุดได้

กระบวนการปฏิสัมพันธ์ของไวรัสกับเซลล์ประกอบด้วยหลายขั้นตอน: การจับของไวรัสกับเซลล์, การปล่อยไวรัสออกจากซอง, การแทรกซึมเข้าไปในไซโตพลาสซึม, การสังเคราะห์ DNA โดยใช้ RNA ของไวรัส, การรวม DNA ของไวรัสเข้ากับจีโนมของ เซลล์เจ้าบ้าน หลังจากนี้ ระยะแฝงของการติดเชื้อจะเริ่มขึ้น ในสถานะนี้ DNA ของไวรัสสามารถดำรงอยู่ได้ระยะหนึ่งโดยไม่แสดงกิจกรรมและไม่ส่งผลกระทบต่อชีวิตของเซลล์เจ้าบ้าน แม้ว่าจะไม่มีการแสดงออกของโปรตีนของไวรัส แต่ก็ไม่มีการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อไวรัส แอนติบอดีต่อเอชไอวีซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกาย จะปรากฏขึ้นหลังจากการกระตุ้น DNA ของไวรัสและจุดเริ่มต้นของการแพร่พันธุ์ของไวรัส ระยะเวลาของระยะแฝงขึ้นอยู่กับปัจจัยหลายประการ รวมถึงลักษณะทางพันธุกรรมของแต่ละบุคคลของสิ่งมีชีวิตด้วย

แอนติบอดีต่อเอชไอวีอาจปรากฏขึ้นตั้งแต่สัปดาห์ที่สองหลังการติดเชื้อ เนื้อหาจะเพิ่มขึ้นภายใน 2-4 สัปดาห์และยังคงอยู่เป็นเวลาหลายปี ผู้ติดเชื้อ 90-95% จะปรากฏในช่วงสามเดือนแรกหลังการติดเชื้อ 5-9% ในช่วง 3-6 เดือน 0.5-1% ในภายหลัง

ในช่วงสัปดาห์แรกของการติดเชื้อ แม้กระทั่งก่อนการปรากฏตัวของแอนติบอดีต่อไวรัส (เช่น ก่อนการเปลี่ยนแปลงของซีโรคอนเวอร์ชัน) สามารถตรวจพบแอนติเจนของ HIV รวมถึงโปรตีน p24 capsid ในตัวอย่างซีรัมหรือพลาสมาได้ ต่อมาหลังจาก seroconversion ก็มักจะตรวจไม่พบ

ระบบการทดสอบแบบรวมรุ่นที่ 4 ซึ่งรวมถึงการทดสอบ HIV Ag/Ab Combo (สถาปนิก, Abbott) ตรวจจับทั้งแอนติบอดีต่อ HIV ประเภท 1 และ 2 และแอนติเจน HIV p24 ซึ่งช่วยให้ตรวจพบการติดเชื้อได้ตั้งแต่เนิ่นๆ ถึง ลักษณะพิเศษการทดสอบคัดกรองที่ใช้ในห้องปฏิบัติการ INVITRO เพื่อตรวจหาการติดเชื้อ HIV เนื่องมาจากการศึกษาวิจัยมีความจำเพาะสูง (> 99.5%); การทดสอบมีความไว 100% ต่อลักษณะเฉพาะของแอนติบอดีในช่วงเวลาของการเปลี่ยนซีโรคอนเวอร์ชัน และความไวของการทดสอบต่อแอนติเจน p24 คือประมาณ 18 พิโกกรัม/มิลลิลิตร

ขั้นตอน การตรวจทางห้องปฏิบัติการสำหรับเอชไอวีได้รับการควบคุมอย่างเข้มงวดโดยคำสั่งของกระทรวงสาธารณสุขของสหพันธรัฐรัสเซีย และรวมถึงขั้นตอนของการศึกษาคัดกรอง (คัดเลือก) ของการมีอยู่ของแอนติบอดีต่อเอชไอวีโดยใช้วิธีการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) ที่ได้รับการอนุมัติให้ใช้และขั้นตอน ของการตรวจสอบ (ยืนยัน) การศึกษารายละเอียดเพิ่มเติมในห้องปฏิบัติการของศูนย์เอดส์ประจำเมือง ควรสังเกตว่าแม้แต่ระบบ ELISA คัดกรองที่ดีที่สุดก็ไม่รับประกันความจำเพาะ 100% นั่นคือมีความเป็นไปได้ที่จะได้รับผลลัพธ์ที่ไม่เฉพาะเจาะจงและเป็นผลบวกลวงที่เกี่ยวข้องกับลักษณะของซีรั่มในเลือดของผู้ป่วย ดังนั้นผลบวกของการตรวจคัดกรอง ELISA อาจไม่ได้รับการยืนยันในการตรวจยืนยัน หลังจากนั้นผู้ป่วยจะได้รับผลลบหรือไม่ทราบแน่ชัด หากผลการศึกษาเพื่อยืนยันไม่แน่นอน ควรทดสอบซ้ำเมื่อเวลาผ่านไป 2-3 สัปดาห์

การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการเกี่ยวกับการติดเชื้อเอชไอวีในเด็กที่เกิดจากมารดาที่ติดเชื้อเอชไอวีมีลักษณะเฉพาะของตัวเอง แอนติบอดีของมารดาต่อเอชไอวี (ระดับ IgG) สามารถไหลเวียนในเลือดได้นานถึง 18 เดือนนับตั้งแต่เกิด การไม่มีแอนติบอดีต่อเอชไอวีในทารกแรกเกิดไม่ได้หมายความว่าไวรัสไม่สามารถทะลุผ่านอุปสรรคของรกได้ เด็กของมารดาที่ติดเชื้อ HIV จะต้องได้รับการตรวจวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการภายใน 36 เดือนหลังคลอด

การตระเตรียม

การฝึกอบรมพิเศษไม่จำเป็น. ขอแนะนำให้เจาะเลือดไม่ช้ากว่า 4 ชั่วโมงหลังมื้อสุดท้าย กับ คำแนะนำทั่วไปเพื่อเตรียมพร้อมสำหรับการวิจัยคุณสามารถอ่านได้ ขอแนะนำให้ทำการทดสอบเพื่อตรวจหาแอนติเจนและแอนติบอดีต่อเอชไอวีไม่ช้ากว่าสองสัปดาห์หลังจากการติดเชื้อที่เป็นไปได้ โดยมีการทดสอบซ้ำหลังจากสามถึงหกสัปดาห์ในกรณีที่ผลลบ การสมัครเพื่อทำการวิจัยที่ INVITRO LLC จะต้องกรอกโดยใช้หนังสือเดินทางหรือเอกสารแทนที่ (บัตรตรวจคนเข้าเมือง, การลงทะเบียนชั่วคราว ณ สถานที่อยู่อาศัย, บัตรประจำตัวเจ้าหน้าที่ทหาร, ใบรับรองจากสำนักงานหนังสือเดินทางในกรณีที่หนังสือเดินทางสูญหาย, บัตรลงทะเบียนจาก โรงแรม). เอกสารที่นำเสนอจะต้องมีข้อมูลเกี่ยวกับการลงทะเบียนชั่วคราวหรือถาวรในสหพันธรัฐรัสเซียและรูปถ่าย ในกรณีที่ไม่มีหนังสือเดินทาง (เอกสารแทนที่) ผู้ป่วยมีสิทธิ์กรอกใบสมัครโดยไม่ระบุชื่อเพื่อบริจาควัสดุชีวภาพ ในระหว่างการตรวจสอบโดยไม่ระบุชื่อ ใบสมัคร และตัวอย่างวัสดุชีวภาพที่ได้รับจากลูกค้า จะมีการกำหนดหมายเลขให้เฉพาะผู้ป่วยและเจ้าหน้าที่ทางการแพทย์ที่สั่งซื้อเท่านั้นที่ทราบ - ผลการศึกษาที่ดำเนินการโดยไม่เปิดเผยตัวตนไม่สามารถส่งเข้ารับการรักษาในโรงพยาบาล การตรวจทางวิชาชีพ และไม่ต้องลงทะเบียนใน ORUIB

บ่งชี้ในการใช้งาน

• เพิ่มขึ้น ต่อมน้ำเหลืองมากกว่าสองพื้นที่
• เม็ดเลือดขาวกับ lymphopenia
• เหงื่อออกตอนกลางคืน
• น้ำหนักลดกะทันหันโดยไม่ทราบสาเหตุ
• ท้องเสียนานกว่าสามสัปดาห์โดยไม่ทราบสาเหตุ
• ไข้ไม่ทราบสาเหตุ
• การวางแผนการตั้งครรภ์
• การเตรียมตัวก่อนการผ่าตัด การเข้ารับการรักษาในโรงพยาบาล
• เปิดเผย การติดเชื้อดังต่อไปนี้หรือการรวมกัน: วัณโรค, toxoplasmosis อย่างชัดแจ้ง, การติดเชื้อไวรัสเริมบ่อยครั้ง, เชื้อราแคนดิดา อวัยวะภายในซ้ำโรคงูสวัดประสาทที่เกิดจาก mycoplasmas, pneumocystis หรือโรคปอดบวม Legionella.
• Kaposi's sarcoma ในวัยเด็ก
• การติดต่อทางเพศแบบไม่เป็นทางการ

การตีความผลลัพธ์

การตีความผลการวิจัยประกอบด้วยข้อมูลของแพทย์ที่เข้ารับการรักษาและไม่ใช่การวินิจฉัย ข้อมูลในส่วนนี้ไม่ควรใช้เพื่อการวินิจฉัยตนเองหรือการรักษาตนเอง การวินิจฉัยที่แม่นยำคุณหมอก็ใช้ผลตรวจค่ะ แบบสำรวจนี้ตลอดจนข้อมูลที่จำเป็นจากแหล่งอื่น เช่น ประวัติการรักษา ผลการตรวจอื่นๆ เป็นต้น

หน่วยการวัดในห้องปฏิบัติการอิสระ INVITRO: การทดสอบเชิงคุณภาพ รูปแบบการนำเสนอผลลัพธ์: ในกรณีที่ไม่มีแอนติบอดีต่อแอนติเจน HIV 1 และ 2 และ p24 คำตอบคือ "ลบ" หากตรวจพบแอนติบอดีต่อเอชไอวีหรือแอนติเจนในการตรวจคัดกรองการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ตัวอย่างซีรัมจะถูกส่งไปเพื่อยืนยันโดยอิมมูโนบลูตไปยังศูนย์เอดส์ในเมือง ซึ่งจะตรวจสอบผลลัพธ์ที่เป็นบวกและไม่แน่นอน

ผลลัพธ์ที่เป็นบวก:

1. เอชไอวี - การติดเชื้อ;
2. ผลบวกลวงที่ต้องมีการศึกษาซ้ำหรือเพิ่มเติม *);
3. การศึกษานี้ไม่ได้ให้ข้อมูลในเด็กอายุต่ำกว่า 18 เดือนที่เกิดจากมารดาที่ติดเชื้อ HIV

*ความจำเพาะของระบบการทดสอบคัดกรอง แอนติบอดีต่อ HIV 1 และ 2 และแอนติเจนของ HIV 1 และ 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott) ตามการประมาณการของผู้ผลิตรีเอเจนต์ คือประมาณ 99.6% ทั้งในประชากรทั่วไปและ ผู้ป่วยกลุ่มที่อาจเกิดการรบกวน (การติดเชื้อ HBV, HCV, หัดเยอรมัน, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E.coli, Chl.trach. ฯลฯ , โรคภูมิต้านตนเอง (รวมถึง โรคข้ออักเสบรูมาตอยด์, การมีอยู่ของแอนติบอดีต่อต้านนิวเคลียร์), การตั้งครรภ์, ระดับที่เพิ่มขึ้น IgG, IgM, โมโนโคลนอลแกมโมพาธี, การฟอกเลือดด้วยเครื่องไตเทียม, การถ่ายเลือดหลายครั้ง)

ข้อมูลทั่วไปเกี่ยวกับการศึกษา

HIV (ไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์) เป็นไวรัสในตระกูล retrovirus ที่ติดเชื้อในเซลล์ ระบบภูมิคุ้มกันมนุษย์ (เซลล์ CD4, ทีเฮลเปอร์) ทำให้เกิดโรคเอดส์

HIV-1 เป็นไวรัสประเภทที่พบบ่อยที่สุด ซึ่งมักพบในรัสเซีย สหรัฐอเมริกา ยุโรป ญี่ปุ่น และออสเตรเลีย (โดยปกติจะเป็นชนิดย่อย B)

HIV-2 เป็นประเภทที่หายาก พบได้ทั่วไปในแอฟริกาตะวันตก

ในการวินิจฉัยไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องในมนุษย์ จะใช้ระบบการทดสอบรวมรุ่นที่ 4 ซึ่งสามารถตรวจจับการติดเชื้อเอชไอวีได้ภายใน 2 สัปดาห์หลังจากไวรัสเข้าสู่กระแสเลือด ในขณะที่ระบบการทดสอบรุ่นแรกทำได้เพียง 6-12 สัปดาห์หลังการติดเชื้อ

ข้อดีของการทดสอบ HIV แบบรวมนี้คือการตรวจหาแอนติเจน p24 (โปรตีนแคปซิดของไวรัส) ที่จำเพาะเจาะจง ซึ่งสามารถตรวจพบได้ด้วยการทดสอบนี้ภายใน 1-4 สัปดาห์นับจากวันที่ตรวจพบโดยใช้แอนติบอดีต่อ HIV-1 p24 เป็นตัวทำปฏิกิริยา ช่วงเวลาของการติดเชื้อ เช่น ก่อน seroconversion ซึ่งจะทำให้ "ระยะเวลาหน้าต่าง" สั้นลงอย่างมาก

นอกจากนี้ การทดสอบ HIV นี้จะตรวจหาแอนติบอดีต่อ HIV-1 และ HIV-2 ในเลือด (โดยใช้ปฏิกิริยาแอนติเจน-แอนติบอดี) ซึ่งผลิตออกมาในปริมาณเพียงพอที่จะให้ระบบตรวจตรวจพบได้ใน 2-8 สัปดาห์หลังการติดเชื้อ

หลังจากการแปลงซีโรคอนเวอร์ชัน แอนติบอดีจะเริ่มจับกับแอนติเจน p24 ส่งผลให้การทดสอบแอนติบอดีต่อ HIV เป็นบวกและการทดสอบ p24 เป็นลบ อย่างไรก็ตามหลังจากผ่านไปสักระยะ ทั้งแอนติบอดีและแอนติเจนจะถูกตรวจพบในเลือดพร้อมกัน บน เวทีเทอร์มินัลการตรวจเอดส์เพื่อหาแอนติบอดีต่อเอชไอวีอาจให้ผลลบ เนื่องจากกลไกในการผลิตแอนติบอดีถูกรบกวน

ระยะของการติดเชื้อเอชไอวี

1. ระยะฟักตัวหรือ “ระยะซีโรเนกาทีฟวินโดว์” คือเวลาตั้งแต่เกิดการติดเชื้อจนถึงการพัฒนาแอนติบอดีที่ป้องกันไวรัสในเลือด เมื่อการตรวจหาแอนติบอดีต่อเอชไอวีเป็นลบ แต่บุคคลนั้นสามารถแพร่เชื้อไวรัสได้แล้ว ถึงคนอื่น ระยะเวลาของช่วงเวลานี้คือตั้งแต่ 2 สัปดาห์ถึง 6 เดือน
2. ระยะเวลาของการติดเชื้อเอชไอวีเฉียบพลันเริ่มต้นโดยเฉลี่ย 2-4 สัปดาห์นับจากวันที่ติดเชื้อ และคงอยู่ประมาณ 2-3 สัปดาห์ บน ในขั้นตอนนี้บางคนอาจจะพัฒนา อาการที่ไม่เฉพาะเจาะจงคล้ายกับอาการไข้หวัดใหญ่ซึ่งสัมพันธ์กับการจำลองแบบของไวรัส
3. ระยะแฝงไม่มีอาการ แต่ในระหว่างนั้นเกิดขึ้น ลดลงทีละน้อยภูมิคุ้มกันและเพิ่มปริมาณไวรัสในเลือด
4. โรคเอดส์ (กลุ่มอาการภูมิคุ้มกันบกพร่องที่ได้มา) เป็นระยะสุดท้ายของการพัฒนาของการติดเชื้อเอชไอวีซึ่งมีลักษณะของการปราบปรามอย่างรุนแรงของระบบภูมิคุ้มกันเช่นเดียวกับ โรคที่เกิดร่วมกัน, โรคไข้สมองอักเสบ หรือมะเร็ง.

แม้ว่าการติดเชื้อเอชไอวีจะรักษาไม่หาย แต่ปัจจุบันมีการรักษาด้วยยาต้านไวรัส (ART) ที่มีฤทธิ์สูง ซึ่งสามารถยืดอายุของผู้ติดเชื้อเอชไอวีและปรับปรุงคุณภาพได้อย่างมาก

การทดสอบนี้มีค่าการวินิจฉัยสูงเป็นพิเศษ หากการติดเชื้อ HIV เกิดขึ้นก่อนเวลาทดสอบไม่นาน (2-4 สัปดาห์)

ใช้วิจัยเพื่ออะไร?

การวิเคราะห์ใช้สำหรับ การวินิจฉัยเบื้องต้นเอชไอวีซึ่งช่วยให้คุณป้องกันการแพร่เชื้อไวรัสไปยังผู้อื่นอีกรวมทั้งเริ่มต้นได้ทันท่วงที การรักษาด้วยยาต้านไวรัสและการรักษาโรคที่มีส่วนทำให้เกิดการลุกลามของการติดเชื้อเอชไอวี

กำหนดการศึกษาเมื่อใด?

• สำหรับอาการเรื้อรัง (เป็นเวลา 2-3 สัปดาห์) สาเหตุที่ไม่ทราบ: ไข้ต่ำ,ท้องร่วง,เหงื่อออกตอนกลางคืน,น้ำหนักลดกะทันหัน,ต่อมน้ำเหลืองบวม
• สำหรับการกำเริบ การติดเชื้อเริม, ไวรัสตับอักเสบ, โรคปอดบวม, วัณโรค, ท็อกโซพลาสโมซิส
• หากผู้ป่วยทนทุกข์ทรมานจากโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ (ซิฟิลิส, หนองในเทียม, โรคหนองใน, เริมที่อวัยวะเพศ, ภาวะช่องคลอดอักเสบจากเชื้อแบคทีเรีย)
• หากผู้ป่วยมีช่องคลอด ทวารหนัก หรือที่ไม่มีการป้องกัน ออรัลเซ็กซ์มีคู่นอนหลายคน คู่ครองใหม่ หรือคู่ครองที่ผู้ป่วยไม่แน่ใจสถานะเอชไอวี
• เมื่อผู้ป่วยได้รับการถ่ายเลือดจากผู้บริจาค (แม้ว่าจะไม่รวมกรณีของการติดเชื้อในลักษณะนี้ เนื่องจากเลือดได้รับการทดสอบอย่างรอบคอบเพื่อดูว่ามีอนุภาคไวรัสอยู่หรือไม่ และต้องได้รับการบำบัดด้วยความร้อนเป็นพิเศษ)
• หากผู้ป่วยฉีดยาโดยใช้เครื่องมือที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อ
• ในระหว่างตั้งครรภ์/วางแผนตั้งครรภ์ (รับประทานอะซิโดไทมิดีนในระหว่างตั้งครรภ์ ส่วน Cเพื่อไม่ให้แพร่เชื้อไวรัสสู่ตัวเด็กขณะเดินทางผ่าน ช่องคลอดและการไม่เลี้ยงลูกด้วยนมแม่ช่วยลดความเสี่ยงในการแพร่เชื้อเอชไอวีจากแม่สู่ลูกจาก 30% เหลือ 1%)
• การฉีดเข็มฉีดยาหรือวัตถุอื่น ๆ (เช่น เครื่องมือแพทย์) โดยไม่ได้ตั้งใจ เลือดที่ติดเชื้อ(ในกรณีเช่นนี้ ความน่าจะเป็นของการติดเชื้อต่ำมาก)

ELISA (การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์, ELISA) เข้าสู่ชีวิตของการแพทย์เชิงปฏิบัติที่ไหนสักแห่งในช่วงทศวรรษที่ 60 ของศตวรรษที่ผ่านมา งานเริ่มแรกของเขาคือ การศึกษาทางเนื้อเยื่อวิทยาเพื่อวัตถุประสงค์ทางวิทยาศาสตร์ซึ่งครอบคลุมถึงการค้นหาและจำแนกโครงสร้างแอนติเจนของเซลล์ของสิ่งมีชีวิต

วิธี ELISA ขึ้นอยู่กับปฏิสัมพันธ์ของแอนติเจนจำเพาะ (AT) และแอนติเจนที่เกี่ยวข้อง (AG) กับการก่อตัวของสารเชิงซ้อน "แอนติเจน-แอนติบอดี" ซึ่งตรวจพบโดยใช้เอนไซม์ ข้อเท็จจริงนี้กระตุ้นให้นักวิทยาศาสตร์คิดว่าวิธีนี้สามารถใช้เพื่อวัตถุประสงค์ในการวินิจฉัยเพื่อระบุอิมมูโนโกลบูลินจำเพาะของคลาสต่างๆ ที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อโดยเฉพาะ และถือเป็นความก้าวหน้าในการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการทางคลินิก!

วิธีการนี้เริ่มมีการใช้อย่างแข็งขันในช่วงต้นทศวรรษที่ 80 เท่านั้นและส่วนใหญ่ในสถาบันเฉพาะทาง เครื่องวิเคราะห์อิมมูโนเอ็นไซม์เครื่องแรกมีศูนย์และสถานีถ่ายเลือด โรคติดเชื้อ และโรงพยาบาลกามโรค เนื่องจากโรคเอดส์ที่น่าเกรงขามซึ่งเกิดในทวีปแอฟริกา ปรากฏบนขอบฟ้าของเราและเข้าร่วมกับการติดเชื้อ "เก่า" ในทันที จำเป็นต้องมีมาตรการวินิจฉัยและค้นหาทันที ยารักษาโรคส่งผลกระทบต่อเขา

ขอบเขตการประยุกต์ใช้วิธี ELISA

ความเป็นไปได้ เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์กว้างใหญ่อย่างแท้จริงตอนนี้เป็นการยากที่จะจินตนาการว่าจะทำได้อย่างไรหากไม่มีการวิจัยซึ่งใช้ในยาทุกสาขาอย่างแท้จริง ดูเหมือนว่า ELISA สามารถทำอะไรในด้านเนื้องอกวิทยาได้บ้าง? ปรากฎว่ามันทำได้ และเยอะมาก ความสามารถในการวิเคราะห์เพื่อค้นหาลักษณะเครื่องหมายของบางชนิด เนื้องอกมะเร็งเป็นพื้นฐาน การตรวจพบตั้งแต่เนิ่นๆเนื้องอก เมื่อยังไม่ได้ระบุด้วยวิธีอื่นเนื่องจากมีขนาดเล็ก

การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการทางคลินิกสมัยใหม่ (CDL) นอกเหนือจากตัวบ่งชี้มะเร็งแล้ว ยังมีคลังแสงที่สำคัญของแผง ELISA และใช้แผงเหล่านี้เพื่อวินิจฉัยสภาวะทางพยาธิวิทยาต่างๆ (กระบวนการติดเชื้อ ความผิดปกติของฮอร์โมน) และการติดตามยาทางเภสัชกรรมเพื่อระบุผลกระทบต่อร่างกายของผู้ป่วยและไม่เพียงแต่ต่อมนุษย์เท่านั้น ปัจจุบันมีการใช้เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์กันอย่างแพร่หลาย บริการสัตวแพทย์เพราะ “น้องชายของเรา” ก็เป็นโรคต่างๆ ได้ง่าย ซึ่งบางครั้งก็ต้องทนทุกข์ทรมานอย่างมาก

ดังนั้น, เนื่องจากความไวและความจำเพาะของ ELISA สามารถตรวจได้จากตัวอย่างเลือดที่นำมาจากหลอดเลือดดำ:

• สถานะของฮอร์โมน (ฮอร์โมน ต่อมไทรอยด์และต่อมหมวกไต ฮอร์โมนเพศ)
• การปรากฏตัวของไวรัสและ การติดเชื้อแบคทีเรีย(เอชไอวี บี และซี หนองในเทียม ซิฟิลิส และ และ รวมถึงโรคอื่น ๆ อีกมากมายที่เกิดจากจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค)
• ร่องรอยของกิจกรรมสำคัญของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิด กระบวนการติดเชื้อซึ่งจบลงได้สำเร็จและเคลื่อนเข้าสู่ขั้นตอนของการสร้างการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อเชื้อโรคนี้ ในหลายกรณี ร่องรอยดังกล่าว ซึ่งก็คือ แอนติบอดี ยังคงไหลเวียนอยู่ในเลือดไปตลอดชีวิต ดังนั้นจึงช่วยปกป้องบุคคลจากการติดเชื้อซ้ำได้

สาระสำคัญของ ELISA คืออะไร?

วิธีเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ช่วยให้สามารถระบุได้ไม่เพียงแต่การมีอยู่ของเชื้อโรคเท่านั้น (การวิเคราะห์เชิงคุณภาพ) แต่ยังรวมถึงเนื้อหาเชิงปริมาณในซีรัมเลือดของผู้ป่วยด้วย

ปริมาณไวรัสหรือแบคทีเรียมีอิทธิพลอย่างมากต่อกระบวนการติดเชื้อและผลลัพธ์ ดังนั้นการวิเคราะห์เชิงปริมาณจึงมีบทบาทสำคัญในการวินิจฉัยและการรักษาโรคใน รูปแบบต่างๆและขั้นตอน

อย่างไรก็ตาม เมื่อรู้ว่าการศึกษาเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์เป็นวิธี ELISA เราไม่คิดว่าจะจัดการอย่างไรให้ครอบคลุมจุลินทรีย์หลากหลายชนิดที่อาศัยอยู่ในโลกของเรา ซึ่งหลายวิธีเป็นภัยคุกคามโดยตรงต่อสุขภาพและชีวิตของมนุษย์และสัตว์ แต่ความจริงก็คือ ELISA มีตัวเลือกมากมาย (ไม่มีการแข่งขันและแข่งขัน - ทั้งทางตรงและทางอ้อม) ซึ่งแต่ละตัวเลือกสามารถแก้ไขปัญหาของตัวเองได้และทำให้สามารถค้นหาเป้าหมายได้

เพื่อระบุอิมมูโนโกลบูลินของคลาสหนึ่งหรืออีกคลาสหนึ่ง มีการใช้แผงโพลีสไตรีน (เพลต) แบบดั้งเดิม 96 หลุมในหลุมที่โปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่ถูกดูดซับนั้นเข้มข้นในเฟสของแข็ง แอนติบอดีหรือแอนติเจนที่เข้าไปในบ่อน้ำด้วยซีรั่มในเลือดพบวัตถุ "คุ้นเคย" และก่อตัวเป็นสารเชิงซ้อน (AG - AT) ซึ่งแก้ไขโดยคอนจูเกตของเอนไซม์จะปรากฏเป็นการเปลี่ยนสีของบ่อน้ำเมื่ออ่าน ผลลัพธ์

เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ดำเนินการโดยใช้ระบบทดสอบที่มีความจำเพาะเจาะจงซึ่งผลิตในห้องปฏิบัติการพิเศษและติดตั้งส่วนประกอบที่ทำปฏิกิริยาที่จำเป็นทั้งหมด การวิจัยสามารถทำได้โดยใช้เครื่องซักผ้า (“เครื่องซักผ้า”) และการอ่านค่าสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ ซึ่งส่วนใหญ่ต้องใช้แรงงานคน สำหรับเครื่องจักรอัตโนมัติเต็มรูปแบบซึ่งปลดปล่อยผู้ช่วยห้องปฏิบัติการจากการหยอดซ้ำซากการซักและงานประจำอื่น ๆ แน่นอนว่าการทำงานจะเร็วขึ้นและสะดวกกว่า แต่ไม่ใช่ว่าห้องปฏิบัติการทั้งหมดจะมีความหรูหราเช่นนี้และยังคงทำงานแบบเก่าต่อไปได้ เครื่องกึ่งอัตโนมัติ

การตีความผลลัพธ์ของ ELISA อยู่ในความสามารถของแพทย์ การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการในกรณีนี้ คุณสมบัติโดยธรรมชาติของปฏิกิริยาอิมมูโนเคมีเกือบทั้งหมดที่ให้การตอบสนองเชิงบวกลวงหรือลบลวงก็ถูกนำมาพิจารณาด้วย

วิดีโอ: เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์สมัยใหม่

ผลลัพธ์ ELISA โดยใช้ตัวอย่างของซิฟิลิส

Enzyme Immunoassay เหมาะสำหรับการตรวจจับทุกรูปแบบและนอกจากนั้นยังใช้ในการศึกษาแบบคัดกรองอีกด้วย เพื่อดำเนินการวิเคราะห์การใช้งาน เลือดดำผู้ป่วยรับประทานในขณะท้องว่าง งานนี้ใช้แท็บเล็ตที่มีความจำเพาะเจาะจง (คลาส AB A, M, G) หรือแอนติบอดีทั้งหมด

เมื่อพิจารณาว่าแอนติบอดีในซิฟิลิสถูกสร้างขึ้นในลำดับเฉพาะ ELISA จึงสามารถตอบคำถามได้อย่างง่ายดายว่าการติดเชื้อเกิดขึ้นเมื่อใดและอยู่ในขั้นตอนใด และการตีความผลลัพธ์ที่ได้สามารถนำเสนอในรูปแบบต่อไปนี้:

• IgM ระบุระยะเวลาของกระบวนการติดเชื้อ (อาจปรากฏขึ้นในช่วงที่กำเริบของโรคอักเสบเรื้อรัง)
• IgA ระบุว่าการติดเชื้อเกิดขึ้นมากกว่าหนึ่งเดือนที่ผ่านมา
• IgG บ่งชี้ว่าการติดเชื้ออยู่ในระดับสูงหรือเพิ่งได้รับการรักษา ซึ่งระบุได้ง่ายโดยการรำลึกถึง

เมื่อตรวจหาซิฟิลิส ช่องเชิงลบ (และกลุ่มควบคุมเชิงลบ) จะยังคงไม่มีสี ในขณะที่ช่องเชิงบวก (และกลุ่มควบคุมเชิงบวก) จะแสดงสีเหลืองสดใสเนื่องจากการเปลี่ยนสีของโครโมเจนที่เพิ่มเข้ามาในระหว่างการทดสอบ อย่างไรก็ตาม ความเข้มของสีไม่ตรงกับการควบคุมเสมอไป กล่าวคือ อาจมีสีซีดกว่าหรือออกเหลืองเล็กน้อย สิ่งเหล่านี้เป็นผลลัพธ์ที่น่าสงสัย ซึ่งตามกฎแล้วจะต้องได้รับการวิจัยซ้ำโดยต้องมีการพิจารณาภาคบังคับ ตัวชี้วัดเชิงปริมาณได้รับจากเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ แต่โดยทั่วไปแล้ว สีจะเป็นสัดส่วนโดยตรงกับจำนวนของคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกัน (Ags และ AT ที่เชื่อมต่อถึงกัน)

สิ่งที่น่าตื่นเต้นที่สุดของการตรวจอิมมูโนแอสเสย์ของเอนไซม์คือ HIV ELISA

บทวิเคราะห์อาจจะน่าสนใจมากกว่าบทอื่นๆ สู่วงกว้างประชากรเพราะยังไม่สามารถบอกได้อย่างแน่นอนว่ามีคนจำนวนมากหายไป ปัญหาสังคม(การค้าประเวณี การติดยาเสพติด ฯลฯ) น่าเสียดายที่เอชไอวีไม่เพียงส่งผลกระทบต่อสังคมมนุษย์หลายระดับเท่านั้น แต่คุณยังสามารถติดเชื้อได้ภายใต้สถานการณ์ต่างๆ ที่ไม่เกี่ยวข้องกับการผิดศีลธรรมทางเพศหรือการใช้ยาเสพติด แต่หากจำเป็นต้องตรวจ HIV ก็ไม่ต้องกลัวว่าคนรอบข้างจะรู้เกี่ยวกับการไปเยี่ยมชมห้องปฏิบัติการดังกล่าว ตอนนี้ ผู้ติดเชื้อเอชไอวีได้รับการคุ้มครองตามกฎหมาย และผู้ที่มีข้อสงสัยสามารถหันไปหาสำนักงานที่ไม่เปิดเผยตัวตนซึ่งพวกเขาสามารถแก้ไขปัญหาได้โดยไม่ต้องกลัวว่าจะถูกเผยแพร่และประณาม

วิธีอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ที่ใช้ในการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีเป็นหนึ่งในการทดสอบมาตรฐานที่สำคัญที่สุด ซึ่งอย่างไรก็ตาม เงื่อนไขพิเศษเนื่องจากหัวข้อมีความอ่อนไหวมาก

การดำเนินการ HIV ELISA หลังจากการมีเพศสัมพันธ์ การถ่ายเลือด ฯลฯ เป็นเรื่องที่สมเหตุสมผล การจัดการทางการแพทย์บ่งบอกถึงการติดเชื้อและเมื่อสิ้นสุดระยะฟักตัว (“หน้าต่างซีโรเนกาทีฟ”) แต่ควรคำนึงว่าช่วงเวลานี้ไม่คงที่ อาจสิ้นสุดใน 14-30 วัน หรืออาจนานถึง 6 เดือน ดังนั้นค่าเฉลี่ยจึงถือเป็นช่วงตั้งแต่ 45 ถึง 90 วัน บน เลือดเอชไอวีพวกเขาจะได้รับในลักษณะเดียวกับการติดเชื้ออื่น ๆ - จากหลอดเลือดดำในขณะท้องว่าง ผลลัพธ์จะพร้อมขึ้นอยู่กับการสะสมของวัสดุในห้องปฏิบัติการและปริมาณงาน (ตั้งแต่ 2 ถึง 10 วัน) แม้ว่าห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่มักจะให้คำตอบในวันเดียวกันหรือวันถัดไปก็ตาม

คุณคาดหวังอะไรจากผลการตรวจ HIV ของคุณ?

ELISA สำหรับการติดเชื้อ HIV ตรวจพบแอนติบอดีต่อไวรัสสองประเภท: HIV-1 (พบมากในรัสเซียและประเทศอื่นๆ ของยุโรปและเอเชีย) และ HIV-2 (พบมากในแอฟริกาตะวันตก)

หน้าที่ของ HIV ELISA คือการค้นหาแอนติบอดีคลาส G ซึ่งตรวจพบในระบบการทดสอบทั้งหมด แต่ในระยะต่อมา และแอนติบอดีคลาส A และ M ที่ตรวจพบในชุดทดสอบรีคอมบิแนนต์รุ่นใหม่ซึ่งทำให้สามารถค้นหาแอนติบอดีได้ มากที่สุด ระยะแรก (ระยะฟักตัว– “หน้าต่างซีโรเนกาทีฟ”) คุณสามารถคาดหวังคำตอบต่อไปนี้จาก ELISA:

1. ผลลัพธ์หลักที่เป็นบวก: จะต้องตรวจเลือดซ้ำโดยใช้ระบบการทดสอบประเภทเดียวกัน แต่ถ้าเป็นไปได้ในซีรีส์ที่แตกต่างกันและโดยบุคคลอื่น (ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการ)
2. ซ้ำ (+) เกี่ยวข้องกับการเจาะเลือดใหม่จากผู้ป่วยโดยมีการตรวจคล้ายกับการวิเคราะห์เบื้องต้น
3. ผลลัพธ์เชิงบวกอีกประการหนึ่งขึ้นอยู่กับการวิเคราะห์อ้างอิง ซึ่งใช้ชุดทดสอบที่มีความจำเพาะสูง (2-3 ชิ้น)
4. ผลลัพธ์ที่เป็นบวกในทั้งสอง (หรือสามระบบ) จะถูกส่งไปตรวจภูมิคุ้มกันบกพร่อง (ELISA เดียวกัน แต่ดำเนินการแยกกันโดยใช้ชุดทดสอบที่มีความจำเพาะสูงเป็นพิเศษ)

บทสรุปเกี่ยวกับ การติดเชื้อเอชไอวีพิจารณาจากพื้นฐานของอิมมูโนล็อตติงเท่านั้น การสนทนาจะดำเนินการกับผู้ติดเชื้อโดยเป็นความลับอย่างสมบูรณ์ การเปิดเผยความลับทางการแพทย์ในรัสเซียและในประเทศอื่น ๆ อาจมีโทษทางอาญา

การทดสอบ Chlamydia และ Cytomegalovirus โดยใช้วิธีเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ก็ได้รับความนิยมเป็นพิเศษเช่นกันเนื่องจากทำให้สามารถกำหนดเวลาของการติดเชื้อระยะของโรคและประสิทธิผลของมาตรการการรักษาได้

ในระหว่างการใช้งาน เรายังสามารถสังเกตลักษณะของแอนติบอดี้ประเภทต่างๆ ได้ในระยะต่างๆ สภาพทางพยาธิวิทยาเกิดจากเชื้อโรค:

• IgM สามารถตรวจพบได้เร็วที่สุดเจ็ดวันหลังการติดเชื้อ
• IgA บ่งชี้ว่าการติดเชื้ออยู่ในร่างกายมานานกว่าหนึ่งเดือนแล้ว
• IgG ยืนยันการวินิจฉัยโรคหนองในเทียมและช่วยติดตามการรักษาและตรวจสอบประสิทธิผล ควรสังเกตว่าแอนติบอดีคลาส G ยังคงอยู่และไหลเวียนอยู่ในร่างกายโดยไม่คำนึงถึงระยะเวลาของโรค ดังนั้นสำหรับ การถอดรหัสที่ถูกต้องการวิเคราะห์จำเป็นต้องคำนึงถึงค่าอ้างอิง (บรรทัดฐาน) ซึ่งโดยวิธีการที่แตกต่างกันสำหรับแต่ละ CDL: โดยคำนึงถึงแบรนด์ของระบบทดสอบและความจำเพาะของรีเอเจนต์ที่รวมอยู่ในชุดอุปกรณ์ ค่าปกติจะถูกป้อนในแบบฟอร์มถัดจากผลลัพธ์ ELISA

สำหรับ มันแตกต่างเล็กน้อยที่นี่:แอนติบอดีคลาส M จะปรากฏขึ้นหลังจากผ่านไปประมาณหนึ่งเดือนครึ่ง นั่นคือผลลัพธ์ (IgM+) จะกลายเป็นค่าบวกในระยะของการติดเชื้อขั้นต้นหรือระหว่างการเปิดใช้งานอีกครั้ง การติดเชื้อที่ซ่อนอยู่และยังคงอยู่ตั้งแต่ 4 เดือนถึงหกเดือน

การมีอยู่ของคลาส G AT เป็นลักษณะของการโจมตีระดับปฐมภูมิ การติดเชื้อเฉียบพลันหรือการติดเชื้อซ้ำ การวิเคราะห์ระบุว่ามีไวรัสอยู่ แต่ไม่ได้ให้ข้อมูลว่ากระบวนการติดเชื้ออยู่ในระยะใด ในขณะเดียวกันการกำหนดระดับ IgG titer ปกติก็ทำให้เกิดปัญหาเช่นกันเนื่องจากมันขึ้นอยู่กับทั้งหมด สถานะภูมิคุ้มกันบุคคลเฉพาะซึ่งถูกกำหนดโดยการระบุอิมมูโนโกลบูลินคลาส G เมื่อพิจารณาจากพฤติกรรมของแอนติบอดีนี้ เมื่อวินิจฉัย CMV จำเป็นต้องประเมินความสามารถของแอนติบอดีคลาส G ในการโต้ตอบกับ CMV เพื่อที่จะ "ทำให้เป็นกลาง" (ที่ ความโลภ). บน ระยะเริ่มแรก โรคไอจีจีผูกกับแอนติเจนของไวรัสได้ไม่ดีนัก (ความโลภต่ำ) จากนั้นจึงเริ่มแสดงกิจกรรมดังนั้นเราสามารถพูดคุยเกี่ยวกับการเพิ่มขึ้นของความโลภของแอนติบอดีได้

เราสามารถพูดคุยเกี่ยวกับข้อดีของเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ได้มากเพราะวิธีการนี้สามารถแก้ไขปัญหาการวินิจฉัยหลายอย่างโดยใช้เลือดดำเท่านั้น ไม่จำเป็นต้องรอนาน กังวล และปัญหาในการรวบรวมวัสดุเพื่อการวิจัย นอกจากนี้ระบบการทดสอบสำหรับ ELISA ยังคงได้รับการปรับปรุงอย่างต่อเนื่อง และอีกไม่ไกล เมื่อการทดสอบจะให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ 100%

วิดีโอ: ภาพยนตร์การศึกษาของ Moscow State Medical University ตั้งชื่อตาม Sechenov เกี่ยวกับพื้นฐานของ ELISA

การวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีอย่างทันท่วงทีกลายเป็นมาตรการที่สำคัญอย่างยิ่ง เนื่องจากการเริ่มการรักษาก่อนหน้านี้สามารถกำหนดได้เป็นส่วนใหญ่ การพัฒนาต่อไปโรคและยืดอายุของผู้ป่วย ใน ปีที่ผ่านมามีความก้าวหน้าที่สำคัญในการระบุสิ่งนี้ โรคร้าย: ระบบการทดสอบแบบเก่าถูกแทนที่ด้วยระบบที่ก้าวหน้ากว่า วิธีการทดสอบก็เข้าถึงได้มากขึ้น และความแม่นยำก็เพิ่มขึ้นอย่างมาก

ในบทความนี้เราจะพูดถึง วิธีการที่ทันสมัยการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีซึ่งเป็นประโยชน์ต่อการทราบ การรักษาทันเวลาปัญหานี้และการรักษาคุณภาพชีวิตตามปกติของผู้ป่วย

วิธีการวินิจฉัยเอชไอวี

ในรัสเซีย มีการดำเนินการตามขั้นตอนมาตรฐานเพื่อวินิจฉัยการติดเชื้อ HIV ซึ่งประกอบด้วยสองระดับ:

• เอลิซา ระบบทดสอบ(การวิเคราะห์แบบคัดกรอง);
• อิมมูโนล็อตติง (IB)

สามารถใช้วิธีอื่นในการวินิจฉัยได้:

• การทดสอบอย่างรวดเร็ว

ระบบทดสอบ ELISA

ในระยะแรกของการวินิจฉัย การตรวจคัดกรอง (ELISA) ใช้เพื่อตรวจหาการติดเชื้อ HIV ซึ่งใช้โปรตีนของ HIV ที่สร้างขึ้นในห้องปฏิบัติการที่จับแอนติบอดีจำเพาะที่ผลิตในร่างกายเพื่อตอบสนองต่อการติดเชื้อ หลังจากทำปฏิกิริยากับรีเอเจนต์ (เอนไซม์) ของระบบทดสอบ สีของตัวบ่งชี้จะเปลี่ยนไป จากนั้น การเปลี่ยนสีเหล่านี้จะถูกประมวลผลโดยใช้อุปกรณ์พิเศษ ซึ่งเป็นตัวกำหนดผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ที่ดำเนินการ

การทดสอบ ELISA ดังกล่าวสามารถแสดงผลลัพธ์ได้ภายในไม่กี่สัปดาห์หลังจากมีการติดเชื้อ HIV การทดสอบนี้ไม่ได้ระบุการมีอยู่ของไวรัส แต่ตรวจจับการผลิตแอนติบอดีต่อไวรัส บางครั้งในร่างกายมนุษย์ การผลิตแอนติบอดีต่อเอชไอวีจะเริ่มขึ้นหลังจากผ่านไป 2 สัปดาห์ของการติดเชื้อ แต่ในคนส่วนใหญ่ แอนติบอดีต่อเอชไอวีจะเกิดขึ้นมากกว่านั้น ภายหลังหลังจากผ่านไป 3-6 สัปดาห์

การทดสอบ ELISA มีทั้งหมดสี่รุ่นซึ่งมีความไวที่แตกต่างกัน ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา มีการใช้ระบบการทดสอบรุ่นที่สามและสี่มากขึ้น ซึ่งใช้เปปไทด์สังเคราะห์หรือโปรตีนรีคอมบิแนนท์ และมีความจำเพาะและความแม่นยำมากขึ้น สามารถใช้เพื่อวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวี ติดตามความชุกของเอชไอวี และรับรองความปลอดภัยเมื่อตรวจเลือดที่บริจาค ความแม่นยำของระบบทดสอบ ELISA รุ่นที่ III และ IV คือ 93-99% (การทดสอบที่ผลิตในยุโรปตะวันตกมีความละเอียดอ่อนมากกว่า - 99%)

ในการทำการทดสอบ ELISA จะต้องนำเลือด 5 มล. จากหลอดเลือดดำของผู้ป่วย ระหว่าง นัดสุดท้ายอาหารและการวิเคราะห์ควรใช้เวลาอย่างน้อย 8 ชั่วโมง (ตามกฎแล้วจะดำเนินการในตอนเช้าขณะท้องว่าง) ขอแนะนำให้ทำการทดสอบดังกล่าวไม่ช้ากว่า 3 สัปดาห์หลังการติดเชื้อที่ต้องสงสัย (เช่น หลังจากการมีเพศสัมพันธ์โดยไม่มีการป้องกันกับคู่นอนใหม่)

ผลการทดสอบ ELISA จะได้รับภายใน 2-10 วัน:

• ผลลัพธ์เชิงลบ: บ่งชี้ว่าไม่มีการติดเชื้อ HIV และไม่จำเป็นต้องติดต่อผู้เชี่ยวชาญ
• ผลลบลวง: อาจสังเกตได้บน ระยะแรกการติดเชื้อ (นานถึง 3 สัปดาห์) ด้วย ช่วงปลายโรคเอดส์ที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องอย่างรุนแรงและการเตรียมเลือดที่ไม่เหมาะสม
• ผลบวกลวง: สามารถสังเกตได้ในบางโรคและในกรณีที่เตรียมเลือดไม่เหมาะสม
• ผลลัพธ์ที่เป็นบวก: บ่งบอกถึงการติดเชื้อ HIV ต้องทำ IB และผู้ป่วยติดต่อผู้เชี่ยวชาญที่ศูนย์เอดส์

เหตุใดการทดสอบ ELISA จึงให้ผลบวกลวงได้

ผลการตรวจ HIV ELISA ที่เป็นเท็จอาจเกิดขึ้นได้เนื่องจากการประมวลผลของเลือดที่ไม่เหมาะสม หรือในผู้ป่วยที่มีภาวะและโรคต่อไปนี้:

• มัลติเพิล มัยอิโลมา;
• โรคติดเชื้อที่เกิดจากไวรัส Epstein-Barr;
• สถานะหลังจาก;
• โรคแพ้ภูมิตัวเอง
• กับภูมิหลังของการตั้งครรภ์
• สภาพหลังการฉีดวัคซีน

ด้วยเหตุผลที่อธิบายไว้ข้างต้น อาจมีแอนติบอดีที่ทำปฏิกิริยาข้ามที่ไม่จำเพาะเจาะจงในเลือด ซึ่งการผลิตไม่ได้ถูกกระตุ้นโดยการติดเชื้อเอชไอวี

ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา ความถี่ของผลบวกลวงลดลงอย่างมีนัยสำคัญเนื่องจากการใช้ระบบการทดสอบเจนเนอเรชั่นที่ 3 และ 4 ซึ่งมีเปปไทด์และโปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่ไวกว่า (สังเคราะห์โดยใช้ พันธุวิศวกรรมในหลอดทดลอง) หลังจากเริ่มใช้การทดสอบ ELISA ดังกล่าว ความถี่ของผลบวกลวงลดลงอย่างมีนัยสำคัญคือประมาณ 0.02-0.5%

การตรวจจับเป็นเท็จ ผลลัพธ์ที่เป็นบวกไม่ได้หมายความว่าบุคคลนั้นติดเชื้อเอชไอวี ในกรณีเช่นนี้ WHO แนะนำให้ทำการทดสอบ ELISA อีกครั้ง (จำเป็นต้องมีการสร้าง IV)

เลือดของผู้ป่วยจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการอ้างอิงหรือห้องปฏิบัติการอนุญาโตตุลาการที่มีเครื่องหมาย "ทำซ้ำ" และทดสอบโดยใช้ระบบการทดสอบ ELISA รุ่น IV หากผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ใหม่เป็นลบ ผลลัพธ์แรกจะถือว่าผิดพลาด (ผลบวกลวง) และจะไม่ดำเนินการ IS หากผลเป็นบวกหรือมีข้อสงสัยในระหว่างการทดสอบครั้งที่สอง ผู้ป่วยจะต้องเข้ารับการตรวจ IB หลังจากผ่านไป 4-6 สัปดาห์เพื่อยืนยันหรือปฏิเสธการติดเชื้อ HIV

ซับภูมิคุ้มกัน

การวินิจฉัยขั้นสุดท้ายของการติดเชื้อเอชไอวีสามารถทำได้หลังจากผลบวกเท่านั้น ภูมิคุ้มกันบกพร่อง(ไอบี). ในการดำเนินการนี้จะใช้แถบไนโตรเซลลูโลสซึ่งใช้โปรตีนของไวรัส

การเก็บตัวอย่างเลือดสำหรับ IB ดำเนินการจากหลอดเลือดดำ จากนั้นจะต้องได้รับการดูแลเป็นพิเศษและโปรตีนที่มีอยู่ในซีรั่มจะถูกแยกออกเป็นเจลพิเศษตามประจุและน้ำหนักโมเลกุล (การจัดการจะดำเนินการโดยใช้อุปกรณ์พิเศษภายใต้อิทธิพลของสนามไฟฟ้า) แถบไนโตรเซลลูโลสถูกนำไปใช้กับเจลเซรั่มในเลือดและทำการซับ (“การซับ”) ในห้องพิเศษ แถบดังกล่าวได้รับการประมวลผล และหากวัสดุที่ใช้มีแอนติบอดีต่อเอชไอวี แถบเหล่านั้นจะจับกับแถบแอนติเจนบน IB และปรากฏเป็นเส้น

IB จะถูกพิจารณาว่าเป็นบวกหาก:

• ตามเกณฑ์ของ American CDC - มีสองหรือสามบรรทัด gp41, p24, gp120/gp160 บนแถบ;
• ตามเกณฑ์ของ American FDA แถบนี้มีสองบรรทัด p24, p31 และบรรทัด gp41 หรือ gp120/gp160

ใน 99.9% ของกรณี ผล IB เป็นบวกบ่งชี้ว่ามีการติดเชื้อ HIV

หากไม่มีเส้น IB จะเป็นลบ

เมื่อระบุบรรทัดด้วย gr160, gr120 และ gr41 IB จะเป็นที่น่าสงสัย ผลลัพธ์นี้อาจเกิดขึ้นเมื่อ:

• โรคมะเร็ง
• การตั้งครรภ์;
• การถ่ายเลือดบ่อยครั้ง

ในกรณีเช่นนี้ ขอแนะนำให้ทำการศึกษาซ้ำโดยใช้ชุดอุปกรณ์จากบริษัทอื่น หากหลังจาก IB เพิ่มเติมแล้ว แต่ผลลัพธ์ยังคงเป็นที่น่าสงสัย จำเป็นต้องมีการสังเกตเป็นเวลาหกเดือน (IB จะดำเนินการทุกๆ 3 เดือน)

ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส

การทดสอบ PCR สามารถตรวจจับ RNA ของไวรัสได้ ความไวของมันค่อนข้างสูงและสามารถตรวจพบการติดเชื้อ HIV ได้ภายใน 10 วันหลังการติดเชื้อ ในบางกรณี PCR อาจให้ ผลลัพธ์บวกลวงเนื่องจากความไวสูงยังสามารถตอบสนองต่อแอนติบอดีต่อการติดเชื้ออื่นๆ ได้อีกด้วย

เทคนิคการวินิจฉัยนี้มีราคาแพงและต้องใช้อุปกรณ์พิเศษและผู้เชี่ยวชาญที่มีคุณสมบัติสูง เหตุผลเหล่านี้ไม่สามารถทำการทดสอบประชากรจำนวนมากได้

PCR ใช้ในกรณีต่อไปนี้:

• เพื่อตรวจหาเชื้อเอชไอวีในทารกแรกเกิดที่เกิดจากมารดาที่ติดเชื้อเอชไอวี
• เพื่อตรวจหาเชื้อเอชไอวีในช่วง “หน้าต่าง” หรือในกรณีที่สงสัย IB
• เพื่อควบคุมความเข้มข้นของเอชไอวีในเลือด
• เพื่อศึกษาผู้บริจาคโลหิต

การตรวจ PCR เพียงอย่างเดียวไม่ได้วินิจฉัยเชื้อ HIV แต่ดำเนินการในลักษณะ a วิธีการเพิ่มเติมการวินิจฉัยเพื่อแก้ไขสถานการณ์ที่ขัดแย้ง

วิธีการด่วน

นวัตกรรมอย่างหนึ่งในการวินิจฉัยเอชไอวีคือการตรวจแบบรวดเร็วซึ่งสามารถประเมินผลได้ภายใน 10-15 นาที ผลลัพธ์ที่มีประสิทธิภาพและแม่นยำที่สุดนั้นได้มาจากการทดสอบอิมมูโนโครมาโตกราฟีตามหลักการไหลของเส้นเลือดฝอย เป็นแถบพิเศษที่ใช้กับเลือดหรือของเหลวทดสอบอื่นๆ (น้ำลาย ปัสสาวะ) หากมีแอนติบอดีต่อเอชไอวีหลังจากผ่านไป 10-15 นาทีการทดสอบจะมีแถบสีและแถบควบคุมปรากฏขึ้น - ให้ผลลัพธ์ที่เป็นบวก หากผลลัพธ์เป็นลบ จะแสดงเฉพาะแถบควบคุมเท่านั้น

เช่นเดียวกับการทดสอบ ELISA ผลลัพธ์ของการทดสอบอย่างรวดเร็วจะต้องได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์ของ IB หลังจากนี้ก็สามารถวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีได้

มีชุดทดสอบที่บ้านแบบด่วนจำหน่าย การทดสอบ OraSure Technologies1 (สหรัฐอเมริกา) ได้รับการอนุมัติจาก FDA มีวางจำหน่ายที่เคาน์เตอร์ และสามารถใช้เพื่อตรวจหาเชื้อ HIV หลังการทดสอบหากผลเป็นบวกแนะนำให้ผู้ป่วยเข้ารับการตรวจที่ศูนย์เฉพาะทางเพื่อยืนยันการวินิจฉัย

การทดสอบอื่น ๆ สำหรับ ใช้ในบ้านยังไม่ได้รับการอนุมัติจาก FDA และผลลัพธ์อาจเป็นที่น่าสงสัยมาก

แม้ว่าการทดสอบอย่างรวดเร็วจะมีความแม่นยำต่ำกว่าการทดสอบ ELISA รุ่น IV แต่ก็มีการใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการทดสอบเพิ่มเติมของประชากร

คุณสามารถทำการทดสอบเพื่อตรวจหาการติดเชื้อเอชไอวีได้ที่คลินิก โรงพยาบาลเขตกลาง หรือศูนย์โรคเอดส์เฉพาะทาง ในดินแดนของรัสเซีย จะดำเนินการอย่างเป็นความลับหรือไม่เปิดเผยตัวตน ผู้ป่วยแต่ละรายสามารถวางใจในการรับการรักษาพยาบาลหรือ การให้คำปรึกษาทางจิตวิทยาก่อนหรือหลังการวิเคราะห์ คุณจะต้องจ่ายค่าตรวจเอชไอวีในเชิงพาณิชย์เท่านั้น สถาบันการแพทย์และใน คลินิกของรัฐและโรงพยาบาลที่ให้บริการโดยไม่คิดค่าใช้จ่าย

อ่านเกี่ยวกับวิธีการติดเชื้อ HIV และความเชื่อผิดๆ เกี่ยวกับความเป็นไปได้ในการติดเชื้อ