วิธี Ifa หมายถึงอะไร? การตรวจเลือดด้วยเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ ปกเกล้าเจ้าอยู่หัว การวัดความหนาแน่นของแสง

มีความก้าวหน้า ยาสมัยใหม่มีความเป็นไปได้ที่จะทำการวินิจฉัยเชิงลึกมากขึ้นหากสงสัยว่ามีโรคบางอย่างในผู้ป่วย หนึ่งใน วิธีการให้ข้อมูลการวิจัยในห้องปฏิบัติการได้กลายเป็นการวิเคราะห์แบบ ELISA ซึ่งดำเนินการโดยการรวบรวมเลือดดำ นั่นคือโดยทั่วไปแล้วไม่มีอะไรเปลี่ยนแปลงสำหรับผู้ป่วย แต่ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการเครื่องวิเคราะห์ ELISA ดำเนินการ เทคโนโลยีที่ซับซ้อนการวิจัยวัสดุชีวภาพที่รวบรวมไว้ เราจะเข้าใจว่าการทดสอบ ELISA คืออะไร และอะไรคือรายละเอียดปลีกย่อยของการใช้วิธีการ ELISA เป็นวิธีการวินิจฉัยในเนื้อหาด้านล่าง

เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์คืออะไร?

การผลิตแอนติบอดีถูกกระตุ้นโดยแอนติเจนเองที่แทรกซึมเข้าไปในร่างกายมนุษย์ เมื่อเข้าสู่ “การต่อสู้” เพื่อสุขภาพร่างกาย แอนติบอดีดูเหมือนจะบ่งบอกถึงแอนติเจน ซึ่งเป็นสิ่งที่ช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการมองเห็นเมื่อตรวจเลือด นั่นคือในวัสดุชีวภาพที่เก็บรวบรวมนั้น ไม่เพียงแต่สามารถติดตามการมีอยู่ของการติดเชื้อเท่านั้น แต่ยังติดตามร่องรอยของมันได้หลังจากที่ร่างกายฟื้นตัวเต็มที่แล้ว

ดังนั้น โดยการกำหนดให้ผู้ป่วยทำการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ แพทย์ที่เข้ารับการรักษาจึงสามารถติดตามระยะเวลาของการติดเชื้อ ระดับการลุกลามของการติดเชื้อ หรือระบุการมีอยู่ของภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อนั้นๆ ได้

กระบวนการวินิจฉัยของ ELISA มีลักษณะดังนี้:

• ถ่าย เลือดที่ไม่มีออกซิเจนลดลงในห้องปฏิบัติการจนถึงสถานะของเลือด;
• จากนั้นช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการจะใช้ถาดพิเศษพร้อมเซลล์ซึ่งแต่ละเซลล์มีแอนติเจนที่จำเป็นทั้งหมดอยู่แล้ว เพียงหยดซีรั่มในเลือดลงในแต่ละเซลล์และติดตามปฏิกิริยาของอิมมูโนโกลบูลิน (แอนติบอดี) ต่อแอนติเจนก็เพียงพอแล้ว การมีอยู่ของปฏิกิริยา "ที่ต้องการ" จะแสดงโดยการเปลี่ยนสีของวัสดุที่กำลังทดสอบ ต่อจากนั้นผู้ช่วยห้องปฏิบัติการจะศึกษาความหนาแน่นของแสงของตัวกลางที่กำลังศึกษา

• Ascariasis และ enterobiasis (พยาธิตัวกลมและพยาธิเข็มหมุด);
• ไตรชิโนซิส;
• Opisthorchiasis ในรูปแบบเฉียบพลันและเรื้อรัง
• โรคเชื้อรา;
• อะมีบา;
• ท็อกโซพลาสโมซิส;
• โรคลิชมาเนียในทุกรูปแบบ

สิ่งสำคัญ: เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์สามารถเป็นได้ทั้งเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณ ในกรณีแรกผู้ช่วยห้องปฏิบัติการจะยืนยันหรือปฏิเสธการมีอยู่ของสารที่ต้องการในเลือดเท่านั้น ในกรณีที่สอง ผลการวิเคราะห์บ่งชี้ถึงความเข้มข้นในร่างกายของผู้ป่วย

ข้อเสียของวิธีการ

ด้วยข้อดีทั้งหมดของวิธีการวินิจฉัยนี้ จึงควรเข้าใจว่าการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ไม่ใช่วิธีการค้นหาสาเหตุของการเจ็บป่วยของผู้ป่วย แต่เป็นเพียงวิธีการยืนยันการวินิจฉัยที่เสนอโดยแพทย์ที่เข้ารับการรักษาเท่านั้น และเนื่องจากการวิจัยมีราคาค่อนข้างแพงจึงต้องใช้อย่างชาญฉลาด ในกรณีนี้ ผลการศึกษาควรตีความโดยผู้เชี่ยวชาญที่มีคุณสมบัติเหมาะสมเท่านั้น

ถอดรหัสผลลัพธ์

หลังจากที่เราแยกคำย่อ ELISA ออกมาได้แล้วว่ามันคืออะไร ─ พบว่าคุ้มค่าที่จะตีความผลลัพธ์ต่อไป สิ่งสำคัญคือต้องเข้าใจในที่นี้ว่าหากการวิเคราะห์ดำเนินการในเชิงคุณภาพ ผลลัพธ์จะเป็นค่าบวกหรือลบเท่านั้น นั่นคือการวินิจฉัยยืนยันความสงสัยของแพทย์เกี่ยวกับการวินิจฉัยบางอย่างหรือปฏิเสธพวกเขา ในกรณีนี้แบบฟอร์มจะมีสัญลักษณ์ “+” หรือ “-” ตามลำดับ

สิ่งสำคัญ: ผลการทดสอบที่เป็นลบไม่ได้บ่งชี้ว่าไม่มีการติดเชื้อเสมอไป ความจริงก็คือแอนติบอดีต่อแอนติเจนสามารถเกิดขึ้นได้ภายใน 14 วันหลังการติดเชื้อ และมีแนวโน้มว่าจะยังไม่เกิดขึ้น

หากทำการวิเคราะห์เชิงปริมาณจะมีการกำหนดประเภทของแอนติบอดีปริมาณและระยะของกิจกรรม โดยเฉพาะอย่างยิ่งในระหว่างการวินิจฉัยจะมีการกำหนดแอนติบอดี (อิมมูโนโกลบูลิน) IgG และ IgM ซึ่งเกิดขึ้นใน ช่วงเวลาที่แตกต่างกันความก้าวหน้าของการติดเชื้อ ผลลัพธ์ที่พบบ่อยที่สุดในกรณีนี้คือ:

• IgM สูงและ การขาดงานโดยสมบูรณ์ไอจีจี ภาพนี้บ่งบอกถึงการติดเชื้อล่าสุดและระยะเฉียบพลันของพยาธิวิทยา
• เพิ่มกิจกรรมของอิมมูโนโกลบูลินทั้งสองประเภท (IgM และ IgG) มันพูดถึงกระบวนการติดเชื้อที่ดำเนินมายาวนานและเรื้อรัง
• กิจกรรม IgG และการขาด IgM โดยสมบูรณ์ การติดเชื้อเกิดขึ้นอย่างน้อยหกเดือนก่อน และตอนนี้ไวรัสอยู่ในระยะเรื้อรังที่ยืดเยื้อ
• ขาดแอนติบอดี IgG และ IgA ผลลัพธ์คือบึกบึน
• ขาดแอนติบอดี IgM, IgA และ IgG บ่งบอกถึงการขาดภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อบางอย่าง
• กิจกรรมของแอนติบอดี IgG, IgM และ IgA บ่งบอกถึงการกำเริบของกระบวนการเรื้อรัง

นอกเหนือจากการระบุประเภทของแอนติบอดีแล้วผู้ช่วยห้องปฏิบัติการยังระบุปริมาณในคอลัมน์พิเศษของแบบฟอร์มที่เกี่ยวข้องกับปริมาตรของเลือด โปรดจำไว้ว่า เมื่อคุณเข้าใจว่าวิธี ELISA คืออะไรแล้ว อย่าตีความผลลัพธ์ด้วยตนเอง ผลลัพธ์ที่ได้สามารถตีความได้อย่างแม่นยำโดยแพทย์ที่เข้ารับการรักษาเท่านั้น ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับการวินิจฉัยที่คาดไว้ ภาพทางคลินิกที่ผู้ป่วย

เทคนิคการวินิจฉัยสมัยใหม่ทำให้สามารถระบุโรคเฉพาะในห้องปฏิบัติการได้ การวิเคราะห์พิเศษ- หนึ่งในนั้นคือการตรวจเลือดด้วยเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับอิมมูโนซอร์เบนท์ ซึ่งสามารถยืนยันการวินิจฉัยที่ทำไว้ก่อนหน้านี้ได้

การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยง ELISA เป็นหนึ่งในวิธีที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดและ วิธีการที่ทันสมัยช่วยให้สามารถระบุความผิดปกติที่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกันและ ความไม่สมดุลของฮอร์โมนเช่นเดียวกับกระบวนการทางเนื้องอกวิทยา ในระหว่างการทดสอบ แอนติบอดีที่ผลิตขึ้นเมื่อมีการติดเชื้อในร่างกายสามารถตรวจพบได้ในเลือด เมื่อคำนึงถึงความแตกต่างนี้แล้ว จึงสามารถตรวจพบโรคได้แม้กระทั่งใน ระยะเริ่มต้นการพัฒนาของมัน

พื้นฐานของเทคนิคคืออะไร?

ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ ELISA จะขึ้นอยู่กับการได้รับ ปฏิกริยาเคมีบนเอนไซม์ที่ทำหน้าที่เป็นเครื่องหมายพิเศษในการจดจำแอนติบอดี ด้วยเหตุนี้ในระหว่างปฏิกิริยาอิมมูโนเคมี แอนติบอดีจึงเริ่มมีปฏิกิริยากับแอนติเจนบางชนิด ทั้งหมดนี้ให้เหตุผลในการยืนยันว่าผลการบริจาคเลือดให้กับ ELISA นั้นมีน้อยมาก

การศึกษานี้ช่วยให้คุณทราบจำนวนเซลล์ภูมิคุ้มกัน คุณสมบัติของเซลล์ ตลอดจนการมีอยู่ของแอนติบอดีที่จำเป็น

ผลลัพธ์จะถือว่าเป็นบวกเมื่อตรวจพบสีของสารละลาย สีบ่งบอกว่าแอนติเจนกำลังทำปฏิกิริยากับแอนติบอดี หากไม่มีอะไรเช่นนี้เกิดขึ้น ผลลัพธ์จะเป็นลบ

เนื้อหา

การวินิจฉัยสมัยใหม่ไม่สามารถทำได้หากไม่มีการทดสอบในห้องปฏิบัติการที่มีความไวสูง ก่อนหน้านี้ แพทย์ได้ทำการศึกษาหลายขั้นตอนด้วยกล้องจุลทรรศน์หลายขั้นตอนเพื่อหาสาเหตุของโรคและตรวจหาสาเหตุของการติดเชื้อ ในปัจจุบัน เพื่อที่จะหักล้างหรือยืนยันการวินิจฉัยเบื้องต้น คุณต้องทำการทดสอบเพียงครั้งเดียว - การทดสอบเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับอิมมูโนซอร์เบนท์ (ELISA) ที่ให้ไว้ การทดสอบในห้องปฏิบัติการช่วยประเมินสถานะสุขภาพของบุคคลและวินิจฉัยโรคทางโลหิตวิทยา มะเร็ง ภูมิต้านตนเอง และโรคติดเชื้อ

การตรวจเลือดด้วยเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์คืออะไร?

วิธีเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์เป็นการตรวจเลือดในห้องปฏิบัติการสมัยใหม่เพื่อหาแอนติเจน แอนติบอดีต่อเชื้อโรคและไวรัสของโรค วิธี ELISA ช่วยให้แพทย์ระบุสาเหตุของโรค ระบุระยะของโรค อายุเท่าไร ระดับอันตรายต่อมนุษย์ และทำการปรับเปลี่ยนการรักษาที่จำเป็น บ่อยกว่าคนอื่น ๆ เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์จะตรวจสอบการมีอยู่ของแอนติบอดีของกลุ่ม M และ G พวกมันคืออะไร?

เมื่อจุลินทรีย์ก่อโรคเข้าสู่กระแสเลือด ระบบภูมิคุ้มกันรวมถึงปฏิกิริยาป้องกันในรูปแบบของการปล่อยแอนติบอดี (อิมมูโนโกลบูลิน) สารเหล่านี้จะจับกับเซลล์และเผยให้เห็นว่าเป็นส่วนหนึ่งของร่างกายหรือมาจากภายนอก หากระบบตรวจพบว่าจุลินทรีย์นั้นเป็นสิ่งแปลกปลอม จำนวนแอนติบอดีจะเพิ่มขึ้นเพื่อต่อสู้กับไวรัสที่ทำให้เกิดโรค อิมมูโนโกลบูลิน (Ig) มีหลายประเภท: บางชนิดปรากฏขึ้นระหว่างการติดเชื้อ บางชนิดยังคงอยู่ตลอดชีวิต ทำให้เกิดภูมิคุ้มกันที่ยั่งยืน แอนติบอดีในยาถูกกำหนดไว้: A, D, E, M, G.

วิธี ELISA ตรวจเลือด แม้ว่าจะมีการตรวจอิมมูโนแอสเสย์ของเอนไซม์ประเภทอื่นๆ ก็ตาม ตามกฎแล้วพวกเขาจะแตกต่างกันในประเภทของของเหลวที่นำมาโดยพิจารณาจากองค์ประกอบที่ได้รับการศึกษาเพิ่มเติมและพิจารณาการมีอยู่ของแอนติเจน ในกรณีนี้ จะใช้ทั้งเลือดมนุษย์และของเหลวอื่นๆ เพื่อการวิจัย:

• เนื้อหาน้ำเลี้ยง;
• น้ำมูกจาก คลองปากมดลูกและท่อปัสสาวะ
• น้ำคร่ำ;
• จังหวะ;
• น้ำไขสันหลัง

• อาการแพ้;
• ภูมิคุ้มกันบกพร่อง;
• ความเจ็บป่วยจากไวรัส (ตับอักเสบ, เริม, ไวรัสเอพสเตน-บาร์, ไซโตเมกาโลไวรัส);
• กามโรค, โรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ (ureaplasma, ซิฟิลิส, ไตรโคโมแนส, หนองในเทียม, มัยโคพลาสมา);
• โรคตับ
• โรคประสาทซิฟิลิส ( แผลติดเชื้อระบบประสาทส่วนกลาง (ระบบประสาทส่วนกลาง))

มักทำการตรวจเลือดด้วย ELISA ในระหว่างก่อนการผ่าตัด การสอบที่ครอบคลุมเพื่อกำหนดระดับฮอร์โมนและประเมินคุณภาพการรักษา ข้อมูลที่ได้รับมีความแม่นยำสูงช่วยให้แพทย์มีภาพภาวะสุขภาพที่สมบูรณ์ ในเวลาเดียวกันผลลัพธ์จะได้รับในช่วงเวลาสั้น ๆ ซึ่งช่วยให้คุณสามารถติดตามการเปลี่ยนแปลงของการพัฒนาของโรคได้

ข้อดีของวิธีการ

ข้อดีที่ปฏิเสธไม่ได้ของวิธี ELISA ในเลือดคือความไวสูง เช่น ความสามารถในการกำหนดสารที่ต้องการแม้ที่ความเข้มข้นต่ำ และความจำเพาะ บ่งบอกถึงการวินิจฉัยที่ปราศจากข้อผิดพลาด นอกจากนี้ การศึกษาซีรั่มในเลือดโดย ELISA ยังมีข้อดีดังนี้

ข้อบกพร่อง

ข้อเสียเปรียบหลักของการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์คือเมื่อทำการศึกษาแพทย์จะต้องมีสมมติฐานเกี่ยวกับธรรมชาติของโรคล่วงหน้า เมื่อวินิจฉัย โรคติดเชื้อเป็นไปไม่ได้ที่จะค้นหาเชื้อโรคโดยไม่ได้ตั้งใจและสร้างคุณสมบัติของอิมมูโนเอ็นไซม์ การทดสอบสามารถระบุการมีอยู่ของแอนติบอดีในเลือดของผู้ป่วยเท่านั้น ซึ่งบ่งชี้โดยอ้อมว่ามีจุลินทรีย์ที่เป็นอันตราย

นอกจากนี้ หากเทคนิคถูกละเมิดหรือการเตรียมการไม่ถูกต้อง การวิเคราะห์อาจแสดงผลบวกลวงหรือลบลวง การทดสอบ ELISA ในเลือดเป็นวิธีการที่แม่นยำ แต่มีราคาแพง ดังนั้นจึงควรใช้ในกรณีที่รุนแรง การตีความผลลัพธ์ควรเชื่อถือได้โดยผู้เชี่ยวชาญที่ผ่านการรับรองเท่านั้น

การตระเตรียม

ต้องทำเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ตามคำแนะนำของแพทย์เพราะว่า ผลการวิจัยมักจะได้รับอิทธิพลจากความแตกต่าง ปัจจัยภายนอก- กฎพื้นฐานสำหรับการเตรียมตัวสำหรับ ELISA:

• ต้องบริจาคเลือดดำขณะท้องว่างอย่างเคร่งครัด (ปกติ นัดสุดท้ายอาหารควรเป็นเวลา 12 ชั่วโมงก่อนการทดสอบ)
• ก่อนทำการวิเคราะห์จำเป็นต้องหลีกเลี่ยงการทำสิ่งใด ๆ ยา(หากผู้ป่วยกำลังใช้ยาแก้แพ้ (ป้องกันอาการแพ้) คุณควรปรึกษาแพทย์ของคุณว่าควรหยุดใช้ยา ELISA นานเท่าใด)
• ห้ามสูบบุหรี่หรือดื่มเครื่องดื่มก่อนการตรวจ เครื่องดื่มแอลกอฮอล์, เพราะ สิ่งนี้จะส่งผลเสียต่อผลลัพธ์
• คุณควรนอนหลับให้เพียงพอก่อนการวิเคราะห์
• ใดๆ การออกกำลังกายปัจจัยความเครียด
• การวินิจฉัยฮอร์โมนส่วนใหญ่ในระบบสืบพันธุ์เพศหญิงจะต้องมีการเก็บตัวอย่างเลือดในบางวันของรอบประจำเดือน

มีการดำเนินการอย่างไร?

ในการทำเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ เลือดจะถูกพรากจากหลอดเลือดดำฝากครรภ์ของผู้ป่วยอย่างเคร่งครัดในขณะท้องว่าง ผู้ป่วยจะต้องแจ้งให้แพทย์ทราบล่วงหน้าเกี่ยวกับโรคและยาที่ใช้ เพื่อไม่ให้ผลการศึกษาผิดเพี้ยน ตามกฎแล้ว ควรหยุดยาทั้งหมด 16 วันก่อนการตรวจ ELISA ความรู้สึกระหว่างขั้นตอนจะคล้ายกับการรับเลือดระหว่างการวิเคราะห์ทางชีวเคมี

วัสดุจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการ โดยจะแยกซีรั่มที่มีแอนติบอดีออกจากเลือด องค์ประกอบที่ได้จะถูกวางไว้ในหลอดทดลองที่มีแอนติเจน สารก่อภูมิแพ้เหล่านี้อาจเป็นสารก่อภูมิแพ้หลายชนิด (นม ขนสัตว์ เกสร ผลไม้รสเปรี้ยว) เชื้อโรคที่เกิดจากไวรัสและโรคติดเชื้อ และอื่นๆ หลังจากได้รับปฏิกิริยาแล้ว หางนมที่เหลือทั้งหมดจะถูกทิ้งไป ผู้เชี่ยวชาญจะกำหนดปริมาณแอนติบอดีโดยใช้ตัวบ่งชี้พิเศษ ระยะเวลาดำเนินการของ ELISA ขึ้นอยู่กับห้องปฏิบัติการ ตามกฎแล้วสามารถแจ้งผลการวิจัยได้ภายในสองวันถึงหนึ่งสัปดาห์.

การถอดรหัส ELISA

การตรวจเลือดด้วยเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ช่วยตรวจสอบการมีอยู่ของแอนติบอดีในร่างกาย อิมมูโนโกลบูลินมีหลายประเภท:

1. ไอจีเอ็ม สิ่งแรกสุดจะปรากฏขึ้นหลังการติดเชื้อ การปรากฏตัวของแอนติบอดีเหล่านี้บ่งชี้ถึงการเกิดโรคไม่ว่าในกรณีใดเพราะว่า ที่ คนที่มีสุขภาพดีชั้นเรียนนี้หายไป โดยปกติ, IgM อิมมูโนโกลบูลินในเลือดประมาณ 6 สัปดาห์
2. ไอจีเอ แอนติบอดีจะพบได้ใน ปริมาณมากในเยื่อเมือกปกป้องร่างกายจากการแทรกซึมของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค หากคนไข้มีคลาสนี้ก็ต้องต่อสู้กับโรคให้เข้มข้นขึ้น ท้ายที่สุดแล้วอิมมูโนโกลบูลิน A จะปรากฏก็ต่อเมื่อเท่านั้น โรคเรื้อรัง- การหายไปของ IgA บ่งชี้ถึงการทำลายของการติดเชื้อ
3. ไอจีจี อิมมูโนโกลบูลินในคลาสนี้บ่งชี้ว่าบุคคลนั้นเป็นพาหะของการติดเชื้อหรือเป็นโรคนี้แล้ว แอนติบอดีเหล่านี้ผลิตขึ้นหลังจาก IgM หนึ่งเดือนหลังการติดเชื้อ อิมมูโนโกลบูลินคลาส G สามารถอยู่ในร่างกายได้นาน 5-6 ปี เพื่อป้องกันการกำเริบของโรค และเมื่อมีซิฟิลิส แอนติบอดีดังกล่าวก็จะคงอยู่ไปตลอดชีวิต

เมื่อทำการวิเคราะห์ ELISA ใน วัยเด็ก(ไม่เกิน 1.5 ปี) ควรคำนึงถึงเลือดของเด็กด้วย แอนติบอดีต่อ IgGมารดาถึงการติดเชื้อ แม้ว่านี่จะไม่ได้หมายความว่าทารกป่วย แต่ความจริงข้อนี้ถือเป็นเรื่องปกติ การปรากฏตัวของคลาส M บ่งบอกถึงมดลูกหรือการติดเชื้อที่ได้มาหลังคลอดเพราะว่า แอนติบอดี IgM ของมารดาไม่สามารถเจาะเข้าไปได้ ร่างกายของเด็กผ่านรก รายละเอียดของการผสมผสานที่เป็นไปได้ของการมีอยู่หรือไม่มีแอนติบอดีของ 3 คลาสแสดงไว้ในตาราง:

ผล ELISA จะต้องได้รับการตีความโดยแพทย์ผู้ทรงคุณวุฒิ- ตามกฎแล้ว (+) บ่งบอกถึงผลลัพธ์ที่เป็นบวกของการวิเคราะห์ และ (-) บ่งบอกถึงผลลัพธ์ที่เป็นลบ ผลลัพธ์ที่แสดงการไม่มีหรือมีอยู่ของสารเรียกว่าเชิงคุณภาพ บางครั้งก็เสริมด้วยปริมาณซึ่งแสดงจำนวนสารต่างๆในร่างกาย บ่อยครั้งที่ระบบทดสอบมีค่าอ้างอิง (สัมพันธ์กัน) ของตัวเอง การเกินตัวชี้วัดดังกล่าวหมายถึงการมีอยู่ของโรคในผู้ป่วย

ข้อห้าม

ไม่พบข้อห้ามที่สำคัญสำหรับเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ บางครั้งในระหว่างตั้งครรภ์ เมื่อผู้ป่วยประสบกับการเปลี่ยนแปลงของฮอร์โมนในเลือดอย่างต่อเนื่อง อาจจำเป็นต้องทำการทดสอบซ้ำเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือมากขึ้น วิธีการวินิจฉัยไม่แนะนำให้ใช้หลังจาก:

• การแทรกแซงการผ่าตัด
• ภาวะเม็ดเลือดแดงแตก (การทำลายเซลล์เม็ดเลือดแดง);
• การถ่ายเลือด
• การเจาะหรือตรวจชิ้นเนื้อของวัสดุชีวภาพ

ราคาการตรวจเลือดเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์

ค่าใช้จ่ายในการทดสอบ ELISA ขึ้นอยู่กับนโยบาย สถาบันการแพทย์ประเภทของการวิเคราะห์และแอนติเจนที่ถูกกำหนดเพราะว่า จากปัจจัยเหล่านี้ จะมีการคำนวณราคาของชุดรีเอเจนต์และพิจารณาความซับซ้อนของการศึกษา ตามกฎแล้ว การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์เป็นขั้นตอนที่เปิดเผยต่อสาธารณะ ต้นทุนเฉลี่ยวิธีการแตกต่างกันไปตั้งแต่ 300 ถึง 2,000 รูเบิล ราคาโดยประมาณสำหรับการตรวจเลือดด้วยเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ในมอสโกแสดงอยู่ในตาราง:

พบข้อผิดพลาดในข้อความ?
เลือกมันกด Ctrl + Enter แล้วเราจะแก้ไขทุกอย่าง!

เพื่อที่จะกำหนดระดับทางชีววิทยาดังกล่าว สารออกฤทธิ์เนื่องจากคอมเพล็กซ์ทางภูมิคุ้มกันจึงจำเป็นต้องมีการทดสอบในห้องปฏิบัติการพิเศษ หากสงสัยว่าเป็นโรคทางโลหิตวิทยา ติดเชื้อ หรือภูมิต้านตนเอง ผู้เชี่ยวชาญจะกำหนดให้มีการตรวจเลือดเพื่อหา ELISA เมื่อบทความดำเนินไป เราจะดูว่ามันคืออะไร วิธีเตรียมตัว สิ่งที่แสดง และวิธีถอดรหัสด้วยตัวเอง

นี่เป็นการศึกษาประเภทใด - การตรวจเลือด ELISA? ตัวย่อย่อมาจากเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ในเลือดในระหว่างนั้นจะมีการกำหนดเนื้อหาเชิงปริมาณและคุณภาพของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพต่าง ๆ รวมถึงแอนติบอดีและแอนติเจนในวัสดุทางชีวภาพ

สิ่งที่ใช้ในเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ของเลือด:

• น้ำไขสันหลัง;
• เมือกของท่อปัสสาวะ, คลองปากมดลูก;
• น้ำคร่ำ;
• เนื้อหาในร่างกายแก้วตา

เอนไซม์อิมมูโนแอสเซย์ถูกกำหนดไว้เพื่อวัตถุประสงค์ในการวินิจฉัยโรคที่ติดต่อทางเพศสัมพันธ์กระบวนการติดเชื้อและมะเร็งปฏิกิริยาการแพ้ความผิดปกติในการทำงานของต่อมไร้ท่อและ ระบบสืบพันธุ์โรคภูมิต้านตนเองและโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องตลอดจนเพื่อประเมินความเสี่ยงในการเกิดโรคไตบางชนิด

มีการกำหนดการตรวจเลือดสำหรับ ELISA ในระหว่างตั้งครรภ์เพื่อวัตถุประสงค์ในการ การตรวจพบตั้งแต่เนิ่นๆ, ความผิดปกติของพัฒนาการเกี่ยวกับ ระยะเริ่มแรกและควบคุมไดนามิกของพวกเขา นอกจากนี้การวิเคราะห์ ELISA ยังช่วยให้คุณควบคุมระดับของแอนติบอดีที่สามารถกระตุ้นให้เกิดความผิดปกติทางระบบประสาทที่รุนแรงในเด็กได้ จึงช่วยป้องกันการเกิดภาวะแทรกซ้อนไม่เพียงแต่ในระหว่างตั้งครรภ์ แต่ยังรวมถึงระหว่างการคลอดบุตรด้วย

ทำให้สามารถตอบสนองต่อปัญหาที่ระบุล่วงหน้าและปรับปรุงสุขภาพของทั้งแม่และลูกได้อย่างมาก

ข้อดีของการตรวจ ELISA ในเลือด ได้แก่

• ระดับความไวสูง (สูงถึง 90%);
• ความเป็นไปได้ของการวินิจฉัยโรคตั้งแต่เนิ่น ๆ ในขณะเดียวกันก็กำหนดระยะของโรคไปพร้อม ๆ กัน
• รีเอเจนต์ที่มีต้นทุนต่ำ และส่งผลให้มีความพร้อมใช้งาน
• จำนวนวัสดุขั้นต่ำสำหรับการวิจัย
• เงื่อนไขการรับขั้นต่ำ
• โอกาส การจัดเก็บข้อมูลระยะยาวรีเอเจนต์;
• ความสามารถในการควบคุมพลวัตการพัฒนา กระบวนการทางพยาธิวิทยา.

ทดสอบระบบ

ข้อเสียของเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์:

• ไม่สามารถระบุสาเหตุของโรคได้เฉพาะในห้องปฏิบัติการเท่านั้นที่ได้รับการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน
• ความเป็นไปได้ที่จะได้รับ ผลลัพธ์เท็จ(มาก ในกรณีที่หายากส่วนใหญ่ในระหว่างตั้งครรภ์)

การตระเตรียม

หลักการตรวจเลือดประเภทนี้ขึ้นอยู่กับการก่อตัวของแอนติบอดีจำเพาะในร่างกายมนุษย์เมื่อแอนติเจนเข้ามานั่นคือตัวแทนจากต่างประเทศ ทำให้เกิดการพัฒนาโรคใดโรคหนึ่งหรืออย่างอื่น อันเป็นผลมาจากปฏิสัมพันธ์ของพวกเขาทำให้เกิดคอมเพล็กซ์ "แอนติเจน - แอนติบอดี" ซึ่งได้รับการศึกษาระหว่างเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์

ในเรื่องนี้ เพื่อไม่ให้ส่งผลกระทบต่อสารเชิงซ้อนเหล่านี้ และดังนั้นความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์ที่ได้รับ การวิเคราะห์เลือดและวัสดุทางชีวภาพอื่น ๆ สำหรับ ELISA จำเป็นต้องมีการเตรียมการบางอย่าง

14 วันก่อนวันสอบเช่นกัน การรักษาเฉพาะทางการใช้ยาต้านเชื้อแบคทีเรียและไวรัสถูกระงับและหยุดลง

เลือดสำหรับ ELISA บริจาคจากหลอดเลือดดำ ทันทีก่อนการเก็บตัวอย่างเลือด คุณควรจำกัดการออกกำลังกาย และหลีกเลี่ยงการสูบบุหรี่และดื่มเครื่องดื่มแอลกอฮอล์

มีหลายวิธีและวิธีการในการทำเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์: วิธีทางตรงและทางอ้อม วิธีการแข่งขันและการบล็อก

พื้นฐานสำหรับการตรวจเลือด (วัสดุทางชีวภาพอื่นๆ) โดยใช้ ELISA เป็นอัลกอริทึมที่ประกอบด้วยปฏิกิริยาสองอย่าง - ภูมิคุ้มกันและเอนไซม์

ในช่วงแรก สารทางพยาธิวิทยาจะจับกับองค์ประกอบป้องกันของเซลล์ของวัสดุทางชีวภาพที่นำไปใช้ในการวิจัย เกิดคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกันแอนติเจนและแอนติบอดี มีลักษณะเช่นนี้ แอนติเจนมีอยู่บนพื้นผิวของเซลล์ทั้งหมด

เมื่อเซลล์แปลกปลอมเข้าสู่ร่างกายก็จะถูกจับ เซลล์ภูมิคุ้มกัน(ซึ่งมีแอนติบอดีอยู่บนพื้นผิว) ซึ่งเปรียบเทียบข้อมูลเกี่ยวกับแอนติเจนจากพื้นผิวของเซลล์ที่เพิ่งมาถึงกับข้อมูลที่เก็บไว้ใน "หน่วยความจำ" ของตัวเอง หากข้อมูลเหล่านี้ไม่ตรงกัน ฟังก์ชั่นการป้องกันสิ่งมีชีวิตซึ่งประกอบด้วยการก่อตัวของภูมิคุ้มกันที่ซับซ้อน

หลังจากนั้นปฏิกิริยาของเอนไซม์จะเกิดขึ้นซึ่งแสดงภาพผลลัพธ์ของปฏิกิริยาก่อนหน้า หลักการของมันขึ้นอยู่กับการเปลี่ยนแปลงของสารจากสิ่งหนึ่งไปยังอีกสารหนึ่ง สำหรับ ELISA แต่ละประเภท วัสดุที่เกิดขึ้นระหว่างปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันจะมีเอนไซม์เฉพาะ ซึ่งใช้บำบัดเพื่อกำหนดความเข้มข้นของสิ่งแปลกปลอม (ขึ้นอยู่กับความเข้มของสีของสารละลาย)

การถอดรหัส

ต้องขอบคุณการตรวจเลือดสำหรับ ELISA ช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการจึงกำหนด A, G และ M ผลลัพธ์ที่เป็นบวกเมื่อทำการทดสอบเลือด (วัตถุดิบทางชีวภาพอื่น ๆ) สำหรับ ELISA ทำให้ไม่เพียงทำการวินิจฉัยเท่านั้น แต่ยังรวมถึงระยะของโรคด้วย รวมถึงลักษณะของหลักสูตร (เฉียบพลันหรือเรื้อรัง)

อิมมูโนโกลบูลินเหล่านี้เมื่อมีกระบวนการทางพยาธิวิทยาในร่างกายของผู้ป่วยเกิดขึ้นในช่วงเวลาต่าง ๆ ของโรค:

• อิมมูโนโกลบูลิน M, IgM– เกิดขึ้นห้าวันหลังจากเริ่มเป็นโรคและยังคงอยู่ในเลือดเป็นเวลา 1.5 เดือนหลังจากนั้นก็หายไป การตรวจหา IgM บ่งชี้ว่ามีกระบวนการทางพยาธิวิทยาปฐมภูมิเฉียบพลันในร่างกาย และความจำเป็นในการแทรกแซงการรักษาขั้นสูง
• อิมมูโนโกลบูลิน G, IgG– เกิดขึ้นหลังการติดเชื้อสี่สัปดาห์ โดยสามารถตรวจพบได้ในร่างกายเป็นเวลาหลายเดือน การตรวจพบ IgG บ่งบอกถึงประวัติของบุคคล ความเจ็บป่วยที่ผ่านมา- การเพิ่มขึ้นของระดับอาจบ่งบอกถึงการติดเชื้อซ้ำ
• อิมมูโนโกลบูลิน A, IgA– ปรากฏเมื่อติดเชื้อและมีอยู่ในร่างกายเป็นเวลาสี่สัปดาห์ เนื้อหาที่ลดลงบ่งบอกถึงจุดเริ่มต้นของการฟื้นตัว การปรากฏตัวในการทดสอบอีกครั้งหลังจากที่บุคคลได้รับการรักษาและหายดีแล้วบ่งชี้ถึงการเปลี่ยนแปลงของโรค รูปแบบเรื้อรัง- การตรวจหา IgA และ IgG พร้อมกันในผลลัพธ์ของ ELISA ยังบ่งชี้ว่ามีกระบวนการเรื้อรังในร่างกาย

ควรสังเกตด้วยว่าการมีอยู่ของ IgG และ IgM พร้อมกันในการวิเคราะห์บ่งชี้ว่ากระบวนการเรื้อรังแย่ลงและผู้ป่วยจำเป็นต้องเริ่มการรักษา หากตรวจไม่พบอิมมูโนโกลบูลินใด ๆ ในระหว่างการตรวจ แสดงว่าไม่มีการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน

การติดเชื้อไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องในมนุษย์เป็นการวินิจฉัยที่ร้ายแรง ข้อผิดพลาดในการวินิจฉัยอาจนำไปสู่ผลที่ตามมาร้ายแรง การทดสอบ ELISA สำหรับเอชไอวีเป็นวิธีการวิจัยที่เข้าถึงได้มากที่สุด แต่ก็ไม่ได้ให้ข้อมูลในทุกกรณี

ELISA – การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ วัตถุประสงค์ของวิธี ELISA คือการตรวจหาแอนติบอดีต่อไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องในวัสดุชีวภาพ เมื่อใช้วิธีการนี้ คุณสามารถติดตามการมีอยู่ของของเหลวที่ไม่ใช่ของตัวไวรัสได้ แต่จะมีเฉพาะแอนติบอดีที่ผลิตขึ้นเพื่อตอบสนองต่อการปรากฏตัวของพวกมันเท่านั้น เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการวินิจฉัยโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ ช่วยในการระบุโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์

ELISA มีหลายประเภท: เวอร์ชันโดยตรง, เวอร์ชันทางอ้อม, วิธีแซนด์วิช ไม่ว่าในกรณีใดเทคนิคนี้จะขึ้นอยู่กับการพิจารณาการมีอยู่ของแอนติบอดีซึ่งทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้การแทรกซึมของสารแปลกปลอม เพื่อระบุ "แท็ก" เหล่านี้ องค์ประกอบทางชีววิทยาจะได้รับการบำบัดด้วยเอนไซม์

เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์กำหนดแอนติบอดีด้วยความแม่นยำ 96–98% ข้อผิดพลาดไม่มีนัยสำคัญ มันคือ 2 – 4%

ELISA – วิธีการวินิจฉัยเอชไอวี

การทดสอบ ELISA สำหรับเอชไอวีเป็นขั้นตอนแรกของการวินิจฉัย แอนติเจนของไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องคือโปรตีน p24, p15, p17, p31 และ glycoproteins gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160

เพื่อตรวจหาโปรตีนของไวรัส จะมีการเก็บตัวอย่างเลือดจากหลอดเลือดดำ ตัวอย่างที่ส่งไปตรวจเลือดด้วย ELISA จะได้รับการบำบัดด้วยเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์รีเอเจนต์ เซรั่มแยกได้จากเลือด หากในระหว่างการศึกษาพบว่ามีไวรัสอยู่ในเลือดแล้ว

บริจาคเลือดอย่างเคร่งครัดในขณะท้องว่าง ไม่แนะนำให้กินอาหารที่มีไขมันหรือดื่มแอลกอฮอล์ 2 วันก่อนการทดสอบ คุณควรหยุดรับประทานยาต้านไวรัสเป็นเวลา 14 วัน

ข้อดีของวิธีการ:

• ต้นทุนค่อนข้างต่ำ
• รีเอเจนต์มีความเสถียรสูง
• ความไวสูง
• ระยะเวลาสั้น;
• อิทธิพลขั้นต่ำของปัจจัยมนุษย์

ระบบทดสอบ ELISA สมัยใหม่ ผลิตตามมาตรฐานสากล สิ่งนี้จะเพิ่มความแม่นยำของวิธีการ

เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ไม่ได้ให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้เสมอไป หลังจากที่ไวรัสเข้าสู่กระแสเลือด ระยะการพัฒนาที่ซ่อนเร้น (ซ่อนเร้น) ก็เริ่มขึ้น ระยะเวลาก่อนที่ไวรัสจะเริ่มเพิ่มจำนวนและแอนติบอดียังไม่เกิดขึ้นเรียกว่า “หน้าต่างซีโรเนกาทีฟ” ไม่มีประโยชน์ที่จะทำ ELISA ในขั้นตอนนี้ หากเกิดการติดเชื้อผลที่ได้จะเป็น ความเร็วที่ไวรัสเปิดเผยตัวเองนั้นขึ้นอยู่กับจำนวนเซลล์อันตรายที่เข้าสู่ร่างกาย ในกรณีที่มีเพศสัมพันธ์โดยไม่มีการป้องกันหรือการถ่ายเลือดที่ปนเปื้อน ระยะเวลานี้จะน้อยที่สุด

เพื่อความน่าเชื่อถือสูงของ ELISA บน การวิจัยเอชไอวีดำเนินการสามครั้ง กำหนดเวลาในการทำการทดสอบ ELISA สำหรับไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องในมนุษย์:

• 6 สัปดาห์หลังจากการสัมผัสที่เป็นไปได้
• ใน 3 เดือน
• หกเดือนต่อมา

ELISA รุ่นที่ 4 สำหรับเอชไอวีเป็นวิธีการที่ให้ข้อมูลมากที่สุดสำหรับ ระยะแรกการติดเชื้อ. สามารถทำได้ภายใน 1 เดือนหลังสงสัยว่าติดเชื้อ การทดสอบมีราคาแพงเมื่อเทียบกับอะนาล็อกรุ่นที่ 3 ดังนั้นในสถาบันการแพทย์สาธารณะจึงใช้ดังนี้ วิธีการเพิ่มเติมการวินิจฉัย การทดสอบครั้งที่ 3 ดำเนินการฟรี หากไม่สามารถให้คำตอบที่ชัดเจนตามผลลัพธ์ได้ ผู้ป่วยจะถูกส่งต่อไปยัง ELISA รุ่นที่ 4

สำคัญ!ทันทีหลังการติดเชื้อบุคคลจะติดต่อได้ เขาเป็นอันตรายต่อผู้อื่น แม้ว่าเขาจะยังไม่รู้เกี่ยวกับการวินิจฉัยของเขาก็ตาม!

หาก ELISA เปิดเผยแอนติบอดีต่อแอนติเจนของ HIV ก็จำเป็นต้องทำ การวิจัยเพิ่มเติม- ซึ่งรวมถึง. ความน่าเชื่อถือของวิธีนี้คือ 80% PCR ตรวจเลือด น้ำอสุจิ และ ตกขาว. ของเหลวชีวภาพย่อยในเครื่องปฏิกรณ์ทางการแพทย์แล้วบำบัดด้วยเอนไซม์ เป็นผลให้ได้รับข้อมูลเกี่ยวกับความเข้มข้นของเซลล์เอชไอวีในตัวกลางที่เป็นของเหลว เนื่องจากเกิดข้อผิดพลาดใหญ่ (20%) เมื่อ ผลลัพธ์ที่เป็นบวกดำเนินการเพิ่มเติม ภูมิคุ้มกันบกพร่อง.

ขั้นตอนต่อไปของการวินิจฉัยคือการทดสอบ Combo (หรือ immunoblotting) นี่เป็นการทดสอบที่มีความไวสูง (ความมั่นใจ 98%) ซึ่งจะดำเนินการหากผลลัพธ์ของ ELISA ไม่ชัดเจนหลังจากผ่านไป 6 เดือน

การถอดรหัสผลลัพธ์ ELISA

เวลาในการถอดรหัสอยู่ระหว่าง 24 ถึง 48 ชั่วโมง หากต้องการข้อมูลเร่งด่วน (required การแทรกแซงการผ่าตัด) การถอดรหัสจะดำเนินการภายใน 2 ชั่วโมง ศูนย์การแพทย์ประจำจังหวัดไม่ได้มีน้ำยาที่จำเป็นเสมอไป ตัวอย่างจะถูกเก็บ ณ สถานที่สมัคร จากนั้นจึงถ่ายโอนไปยัง ศูนย์ภูมิภาค- ภายใต้สถานการณ์เช่นนี้จะทราบผลลัพธ์ได้ภายใน 1-2 สัปดาห์

ผลลัพธ์ของเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์อาจเป็นได้ทั้งเชิงบวกหรือเชิงลบ ไม่มีตัวเลือกอื่น

แม้ว่าผลลัพธ์ของ ELISA ครั้งแรกและซ้ำจะเป็นบวก แต่ผู้ป่วยก็ไม่สามารถรับรู้ได้ว่าติดเชื้อ HIV อาจเกิดข้อผิดพลาดได้ สาเหตุของผลบวกลวง:

• โรคเรื้อรัง;
• โรคติดเชื้อระยะยาว
• การตั้งครรภ์

ดังนั้นควรชี้แจงผลการวิเคราะห์ด้วยการศึกษาเพิ่มเติม

หาก immunoblotting เป็นผลบวกของ HIV (ปฏิกิริยา) บุคคลนั้นจะถือว่าติดเชื้อ HIV ซึ่งหมายความว่าเขามีสุขภาพแข็งแรง

เมื่อเวลาผ่านไป เซลล์ไวรัสจะปรับตัวเข้ากับยาที่กำหนด เพื่อควบคุม ให้ทำการทดสอบ ELISA ซ้ำเป็นระยะๆ

บางครั้งอิมมูโนล็อตติงแสดงผลลัพธ์เชิงลบที่ผิดพลาด หายากมากที่จะมีไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องเป็นเวลา 6 เดือน (หรือมากกว่า) สิ่งนี้เป็นไปได้หากเซลล์ไวรัสจำนวนเล็กน้อยเข้าสู่กระแสเลือด ที่ 0.5% ของ จำนวนทั้งหมดในกรณีของการติดเชื้อ สามารถวินิจฉัยการติดเชื้อได้หลังจากผ่านไปหนึ่งปีเท่านั้น ใน 99.5% ภายในหกเดือนหลังการติดเชื้อ ELISA จะให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้

แม้จะมีการศึกษาที่มีความแม่นยำสูง แต่ก็ยังมีโอกาสเกิดข้อผิดพลาด 2% เราไม่ควรลืมเกี่ยวกับปัจจัยมนุษย์ เพื่อขจัดโอกาสที่จะเกิดข้อผิดพลาด การทดสอบสามารถทำได้ใน 2 สถาบันที่แตกต่างกัน