Diagnosticum erythrocyte vi antigenik suyuqlik. Diagnostika. Luminescent tulyaremiya sarumi

Yaxshi o'tkazilgan qon tekshiruvi turli xil patogenlarni aniqlashga yordam beradi murakkab kasalliklar organizmda rivojlanishning dastlabki bosqichlarida, ba'zan esa namoyon bo'lgunga qadar klinik belgilari kasalliklar. Ko'pincha shifokorlar bemorlarga aglutinatsiya reaktsiyasi testini buyuradilar. Keyinchalik bu nima ekanligini aniqlaymiz - RPGA qon testi, u qachon qo'llaniladi va u bizga nimani ayta oladi?

Ishlash printsipi

Bilvosita gemagglyutinatsiya reaktsiyasi (shuningdek, deb ataladi passiv gemagglyutinatsiya RPGA, RNGA nomi bilan ham tanilgan) antigenni adsorbsiya qilgan eritrotsitlar berilgan antigenga mos keladigan immun zardobiga ta'sir qilganda paydo bo'ladi.

Tadqiqotlar o'ziga xoslik va sezgirlik nuqtai nazaridan isbotlangan bu usul boshqalardan sezilarli darajada ustundir serologik testlar. Shuning uchun u ko'pincha bakteriyalar yoki rikketsiyalardan kelib chiqqan kasalliklarni aniqlash uchun ishlatiladi. Bunday tahlil qilish uchun antijenler bakterial ekstraktlar, turli mikroblarning tozalangan antijenleri va bakterial vaktsinalarning tarkibiy qismlari bo'lishi mumkin.

Patogen bakteriya inson tanasiga kirgandan so'ng, u o'ziga xos va o'ziga xos bo'lmagan antikorlarni ishlab chiqarishni boshlaydi va o'ziga xos immun reaktsiyasini hosil qiladi. Qo'zg'atuvchisi gram-manfiy spiroketalarga mansub Treponema pallidum bo'lgan sifilisda odam qonida treponemal bo'lmagan yoki treponemal antikorlar hosil bo'ladi. Laboratoriya tekshiruvlari ularning identifikatsiyasiga asoslanadi. diagnostik tadqiqotlar, bu tanadagi virusning sababchi agenti mavjudligini tasdiqlashi yoki rad etishi kerak.

RPHA bilan, yuzasida adsorbsiyalangan treponema pallidum antijeni bo'lgan qizil qon tanachalari, sifilis bilan kasallangan odamdan olingan treponemaga antikorlari bo'lgan zardob qo'shilganda, ular bir-biriga yopishadi, ya'ni ular aglutinatsiyalanadi.

Tadqiqotning ishonchliligi

Shuni esda tutish kerakki, rangpar spiroxetaga antikorlar tanada paydo bo'la boshlaydi kasallanganlar Infektsiyadan 2-4 hafta o'tgach, ba'zi hollarda bu muddat 6 haftagacha cho'zilishi mumkin.

Shu sababli, RPHA tahlilining sezgirligi asosiy bosqich kasallikning rivojlanishi taxminan 86% ni tashkil qiladi, bu keyingi ikki bosqichda bemorlarga tashxis qo'yishning aniqligidan sezilarli darajada past. Bunday bemorlar uchun, shuningdek, yashirin sifilis tashuvchilar uchun tahlilning sezgirligi 99-100% ga etadi.

Shu bilan birga, passiv gemagglyutinatsiya reaktsiyasi juda yuqori o'ziga xoslikka ega bo'lib, u 96-100% darajaga etadi.

Bu foydalanish imkonini beradi bu imtihon dastlabki treponemal bo'lmagan tadqiqotdan ijobiy reaktsiya bo'lsa, tashxisni tasdiqlash uchun, masalan, qovuq saratonining mikropresipitatsiya reaktsiyasi.

Treponemal testlarning, shu jumladan RPGAning sezgirligi treponemal bo'lmagan usullarning sezgirligidan sezilarli darajada oshib ketishini hisobga olsak, bunday tekshiruvlar sifilis uchun skrining testlarini o'tkazishda tobora ko'proq buyuriladi. Biroq, agar skrining testidan ijobiy reaktsiya olingan bo'lsa, tashxisni aniqlashtirish uchun RPGA emas, balki boshqa maxsus (treponemal) tahlil talab qilinadi.

Tahlil transkripti

Tadqiqot o'tkaziladigan reaktivga sifilis bilan kasallangan odamning materialidan treponemaga antikorlari bo'lgan sarum qo'shilsa, qizil qon tanachalari aglutinatsiyalanadi, natijada ular cho'kadi.

Yopishqoq qizil qon hujayralari soniga qon zardobidagi antikorlar darajasi ta'sir qiladi. Shuning uchun passiv gemagglyutinatsiya nafaqat antikorlarning mavjudligini ko'rsatadi, balki ularning miqdorini aniqlashga imkon beradi. Tadqiqot natijasi antikor titrining darajasi bilan taqdim etiladi.

Ijobiy reaktsiya bemorning tanasida patogenning mavjudligini ko'rsatadi. Shu bilan birga, diagnostika jarayonida noto'g'ri-ijobiy reaktsiyalar paydo bo'lishi mumkin, ularning soni statistik jihatdan 0,05-2,5% darajasidan oshmaydi. umumiy soni tadqiqot.

Sifilis bilan kasallanmagan odamlarda ijobiy RPHA reaktsiyasi, agar:

• tizimli biriktiruvchi to'qimalar kasalliklari,
• bemorning qonida treponema pallidumga o'xshash patogenlarga antikorlar,
• fiziologik patologiyalar, masalan, miyokard infarkti,
• gepatit B yoki C,
• onkologik kasalliklar,
• tif, leptospiroz, sil,
• OIV infektsiyalari,
• Shomil etiologiyasining borreliozi,
• keng jarohatlar yoki sinishlar,
• homiladorlik,
• giyohvand moddalarni in'ektsiya qilishda.

Ko'pgina hollarda, noto'g'ri ijobiy reaktsiyalar past titr bilan birga keladi. Yuqori samaradorlik titrlar kasallikning ikkilamchi bosqichiga va ilgari yashirin sifilisga xosdir. Shu bilan birga, ular malign neoplazmalar bilan og'rigan bemorlarda noto'g'ri ijobiy reaktsiya paytida ham paydo bo'lishi mumkin.

Kamida bir marta sifilis bilan kasallangan odamlarda RPHA reaktsiyasi butun umri davomida ijobiy bo'lib qoladi.

Kamdan-kam holatlar kasallik aniqlangan holatlar bo'lishi mumkin erta bosqich rivojlanish, undan keyin intensiv va samarali terapiya. Shu sababli, RPGA tahlilidan tiklanish dinamikasini yoki erta yoki qiyosiy tashxisni baholash uchun foydalanish mumkin emas kech bosqichlar kasalliklar.

Agar ijobiy reaktsiya olinsa, bemorning oila a'zolarini va u bilan jinsiy aloqada bo'lgan odamlarni tekshirish kerak.

Salbiy reaktsiyani quyidagi hollarda olish mumkin:

• odamda sifilis yo'q,
• tekshirish uchun qon noto'g'ri olingan;
• Infektsiyadan keyin 2-4 hafta o'tdi va antikorlarni ishlab chiqarish hali boshlanmagan.

Qanday bo'lmasin, tadqiqot natijasi qo'shimcha laboratoriya va anamnestik ko'rsatkichlar bilan birgalikda baholanishi kerak.

Tahlil kimga ko'rsatiladi?

Shifokor quyidagi hollarda bemorlarni RPHA uchun qon topshirishga yuborishi mumkin:

• ishtirokida klinik ko'rinishlari sifiliz: yarali toshmalar, kengaygan limfa tugunlari, diffuz alopesiya va boshqalar,
• Agar siz allaqachon kasal odamlar bilan aloqada bo'lganingizda mumkin bo'lgan infektsiyaga shubha qilsangiz,
• qon topshirishni istagan donorlar,
• yillik o'tkazadigan odamlar profilaktik tekshiruvlar yoki sog'liq to'g'risida guvohnoma berish,
• bo'lgan bemorlar ijobiy reaktsiya skrining testi
• statsionar kasalxonaga yotqizishdan oldin,
• operatsiyadan oldingi tekshiruv paytida,
• tegishli diagnostika bilan RPGA usuli yordamida salmonellyoz, difteriya, dizenteriya patogenlarini aniqlash.

Tadqiqotni o'tkazish tartibi

Bemor tomonidan taqdim etilgan namuna sinov uchun yuboriladi. venoz qon. Noto'g'ri xulosaga kelmaslik uchun bemor tahlilga tayyorgarlik ko'rishda javobgar bo'lishi kerak. Sinov natijalari ishonchli bo'lishi uchun siz quyidagi tavsiyalarga amal qilishingiz kerak:

• Sinov faqat och qoringa o'tkazilishi kerak.
• Sinov kunida ichish mumkin mineral suv minimal miqdorda gazsiz.
• Tahlil qilishdan oldin kamida 30 daqiqa chekmaslik kerak, lekin bu vaqtni bir necha soatgacha oshirish yaxshiroqdir.
• Spirtli ichimliklarni iste'mol qilishga to'g'ridan-to'g'ri taqiq qo'yiladi.
• Doimiy ravishda har qanday foydalanish kerak bemorlar dorilar, bu haqda sizni tekshiruvga yuborayotgan shifokorga xabar berishingiz kerak.
• Agar siz o'zingizni yomon his qilsangiz yoki o'zingizni yomon his qilsangiz, qon topshirayotgan hamshiraga yoki testdan o'tishingiz kerak bo'lgan ambulatoriya shifokoriga xabar berishingiz kerak.

Nafaqat imtihonni qayerda topshirish kerakligi haqidagi savolga, balki imtihonga tayyorgarlik ko'rishga ham javobgar bo'ling.

Boshqa yuqumli kasalliklar diagnostikasi

RPGA kabi tadqiqot faqat tanadagi sifilis qo'zg'atuvchisini aniqlash uchun o'tkazilishi mumkin deb o'ylamaslik kerak.

bilan tahlil qilish Salmonella diagnostikasi ichida infektsiya mavjudligini aniqlash imkonini beradi ovqat hazm qilish tizimi- salmonellalar. INFEKTSION so'ng to'rtinchi kundan boshlab tanada RPGA usuli aniqlashga yordam beradigan Salmonella antijenlariga antikorlar ishlab chiqariladi. Salbiy natija infektsiyaning yo'qligini ko'rsatadi va o'tkir bosqichda 1:200 dan 1:800 gacha ko'tarilgan ijobiy titr uning mavjudligini ko'rsatadi.

RPGA ni difteriya belgisi bilan bajarish usuli difteriya tashxisini qo'yish va emlashdan keyin immunitetni baholash imkonini beradi. Antikorlar ishlab chiqarila boshlaydi immunitet tizimi infektsiyadan keyingi kun va tanada bir necha hafta qoladi. Ushbu tahlilning sezgirligi bakteriologik tadqiqot usulidan ustundir. 1:80 titri tanadagi difteriya mavjudligini tasdiqlaydi.

RPHA uchun dizenteriya belgisi shigellozni (bakterial dizenteriya), hatto usul bilan solishtirganda ham eng aniq aniqlaydi. laboratoriya diagnostikasi orqali bakterial madaniyat. Agar bemor qabul qilmasa sifatli davolash, keyin kasallik surunkali jarayonga aylanadi, unda relapslar tez-tez sodir bo'ladi. Tahlil diareyaning o'tkir va surunkali bosqichlarini aniqlashga, dizenteriya qo'zg'atuvchisini aniqlashga, bakterial shigellozni ajratishga imkon beradi. kolorektal saraton, endokrin kasalliklar yoki yo'g'on ichakning yallig'lanishi. Salbiy reaktsiya tayoqchaning yo'qligini ko'rsatadi, lekin uning mavjudligini bolalar uchun 1:80 yoki kattalar uchun 1:320 titri bilan tasdiqlaydi.

Qizamiq belgisi bilan test o'tkazish qizamiq kasalligini aniqlash imkonini beradi. Bunday tekshiruv qizamiqqa tashxis qo'yish uchun tez-tez o'tkaziladigan RTGA tahliliga muqobil bo'lishi mumkin.

Shunday qilib, RPGA qon testi - bu nima? Xulosa qilib aytganda, bu zamonaviy, yuqori sezgir va ishonchli diagnostika usuli deb ishonch bilan aytishimiz mumkin turli kasalliklar bakteriologik etiologiya.

Bilan aloqada

Ro'yxatdan o'tganlik guvohnomasi No RZN 2016/3905 04/04/2016

Maqsad

"Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigen for RPGA" (SED-Vi) reaktivlar to'plami patogenning Vi-antijeniga antikorlarni aniqlash uchun mo'ljallangan. tif isitmasi passiv gemagglyutinatsiya reaktsiyasi (RPHA) orqali inson qon zardobida.

To'plamning xususiyatlari

Ishlash printsipi

Qorin tifining qo'zg'atuvchisiga antikorlar mavjud bo'lganda, Vi antijeni bilan sensibilizatsiyalangan tovuq eritrotsitlarining gemagglyutinatsiyasi kuzatiladi, bu plastinkaning U shaklidagi quduqlari tubida joylashgan eritrotsitlarning "soyabon" shakllanishiga olib keladi. . Tifo isitmasi qo'zg'atuvchisiga antikorlar bo'lmasa, o'rnashgan qizil qon tanachalari "nuqta" hosil qiladi.

Tarkibni sozlash

Reaktiv nomi	Tavsif	To'plamdagi miqdor
Diagnosticum erythrocyte salmonella Vi-antigen, quruq 6% (EDS)	S. typhi Vi antijeni bilan sensibilizatsiyalangan rasmiylashtirilgan tovuq eritrotsitlari. Quruq gigroskopik massa jigarrang. Eritishdan keyin suspenziya qizil-jigarrang rangga ega.	1 fl., 0,6 ml dan
Salmonella diagnostik sarum adsorbsiyalangan, Vi retseptorlari, quruq (1:20 suyultirilgan, (K+))	Quyon sarum Salmonella adsorbsiyalangan, Vi retseptorlari, 1:20 suyultirilgan. Quruq gigroskopik gözenekli massa oq. Eritishdan keyin shaffof sarg'ish yoki rangsiz suyuqlikdir.	1 fl., 0,3 ml dan
Sinov namunasi suyultiruvchisi (RSD)	Ko'k-binafsha rangdagi shaffof suyuqlik.	1 fl., 10 ml
Fosfat tampon eritmasi (PBS)	Rangsiz shaffof suyuqlik.	1 fl., 10 ml
Immunologik reaktsiyalar uchun bir martalik polimer tabletka	Shaffof rangsiz polistiroldan tayyorlangan immunologik reaktsiyalar uchun bir martalik polimer tabletka.	1 ta kompyuter.

Diagnostika xususiyatlari

Diagnosticum diagnostik salmonella zardobida adsorbsiyalangan, Vi retseptorlari, quruq (1:20 suyultirish), sarum yorlig'ida ko'rsatilgan titr bilan RPHAda aglutinatsiyalangan bo'lishi kerak. Qon zardobining diagnostik xususiyatlarining shartli darajasi sog'lom odamlar Sarumni suyultirish 1:20 dan oshmasligi kerak. Tahlil vaqti 3040 minut. To'plam skrining variantida 42 qon zardobini yoki titrlash variantida 10 qon zardobini tekshirish uchun mo'ljallangan.

Ehtiyot choralari

To'plam faqat in vitro diagnostika uchun mo'ljallangan. To'plamga kiritilgan moddalar faollashtirilmagan va xavfsizdir. To'plam bilan ishlashda siz SP 1.3.2322-08 va SanPiN 2.1.7.2790-10 ga rioya qilishingiz kerak.

Qo'shimcha uskunalar va materiallar

Uskunalar, materiallar, echimlar:

• O'zgaruvchan dozalash hajmi 5 - 40 µl bo‘lgan 1 kanalli pipetkali dispenserlar; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl va 1000 - 5000 µl;
• O'zgaruvchan dozalash hajmi 5 - 40 µl va 40 - 200 µl bo‘lgan 8 yoki 12 kanalli pipetkali dispenserlar;
• distillangan suv (GOST 6709-72).

Tahlil qilingan namunalar

O'rganilayotgan qon zardobi namunalari qon to'plangan paytdan boshlab 3 kundan ortiq bo'lmagan 2 dan 8 ° C gacha haroratda saqlanadi. Zardobni muzlatilgan holda minus 18 °C dan yuqori bo'lmagan haroratda 1 yildan ortiq bo'lmagan muddatda saqlash mumkin. Ishlatishdan oldin namunalar 16 dan 25 °C gacha bo'lgan haroratda eritiladi va chayqatish orqali aralashtiriladi. Qayta muzlatishga yo'l qo'yilmaydi. Bakterial o'sish va gemoliz bo'lgan namunalar ishlatilmasligi kerak. Reaksiyani amalga oshirishdan oldin, sinov sarumlari 30 daqiqa davomida 56 ° C da isitiladi.

Tahlil o'tkazish

Nazorat diagnostikasi sarumini tayyorlash (K+)

0,3 ml (K+) dan quruq (1:20 suyultirish) diagnostik Salmonella zardobidan adsorbsiyalangan Vi retseptorining ishchi eritmasini tayyorlang. Buning uchun K+ bilan shishaning tarkibiga 0,3 ml fosfat bufer eritmasi (PBS) qo'shing. Qolgan sarum miqdorini qismlarga ajratish va muzlatilgan holda minus 18 ° C dan yuqori bo'lmagan haroratda 6 oydan ko'p bo'lmagan muddatda saqlanishi mumkin.

Salmonella eritrotsit diagnostikumini (SED) tayyorlash

Salmonella erythrocyte diagnosticum suspenziyasining ishchi suyultirilishini tayyorlash uchun quruq 6% SED bilan shisha tarkibiga 0,6 ml distillangan suv qo'shiladi va 16 dan 25 ° C gacha bo'lgan haroratda 2 soat davomida namlash uchun qoldiriladi. Keyin eritmaga 2,4 ml fosfat bufer eritmasi (PBS) qo'shiladi. Ishchi eritma 2 dan 8 ° C gacha bo'lgan haroratda 1 oydan ko'p bo'lmagan muddatda saqlanadi. Muzlatish mumkin emas.

Qon zardobini tekshirish paytida RPGA bayonoti

Skrining tekshiruvi uchun qon zardobi tabletka quduqlarida quyidagicha suyultiriladi:

• Plastinkaning birinchi quduqlarida 1:20 lik dastlabki suyultirishlar tayyorlanadi, avval ularga 190 mkl RIP eritmasi, so'ngra 10 mkl sinov zardobi qo'shiladi. Har bir sarum alohida uchi bilan qo'shiladi va ehtiyotkorlik bilan pipetlanadi (zardoblar qo'shilgandan keyin quduqlardagi eritmaning rangi ko'k-binafsha rangdan yashil rangga o'zgarishi kerak);
• 1:40 lik skrining suyultirishlari ikkinchi quduqlarda avval ularga 25 mkl PBS eritmasi, so'ngra 25 mkl oldindan suyultirilgan sarum qo'shib, ehtiyotkorlik bilan pipetlash orqali tayyorlanadi.

Har safar RPGA bajarilganda, K+ titrini nazorat aniqlashni amalga oshirish kerak. Buning uchun 8 ta chuqurchaga uzun qatorga 50 mkl PBS eritmasidan solinadi. Keyin birinchi quduqqa 50 mkl K+ ishchi eritmasidan (1:20) soling, ehtiyotkorlik bilan pipetlang va keyingi quduqlarga 50 mkl o'tkazing, 1:40 dan 1:5120 gacha 2 marta suyultiring. O'z-o'zidan gemagglyutinatsiyaning yo'qligi uchun EDSni kuzatish uchun yana 4 ta quduqqa 50 mkl PBS eritmasi qo'shiladi.

25 mkl SED sinov zardobining skrining suyultirishlari (RIP ni o'z ichiga olgan birinchilardan tashqari) va boshqaruv elementlari bilan plastinkaning barcha quduqlariga qo'shiladi. Ishlatishdan oldin SED suspenziyasini shisha yoki vannada aralashtiring! Tabletka yaxshilab chayqatiladi va 16 dan 25 ° C gacha bo'lgan haroratda 30 - 40 daqiqa davomida nazoratdagi eritrotsitlar to'liq joylashguncha qoldiriladi.

Sinov qon zardobini titrlashda RPGA bayonoti

Sinov zardobi va K+ ishchi eritmasini titrlash plastinkaning qisqa qatorlarida amalga oshiriladi. Yana bir qisqa seriya EDS ning spontan gemagglyutinatsiyasining yo'qligini kuzatish uchun ishlatiladi.

Sinov zardobini titrlash uchun qisqa qatorlarning birinchi quduqlariga 180 mkl RIP eritmasi qo'shiladi. Boshqa barcha quduqlarga 50 mkl PBS eritmasi qo'shing.

RIP eritmasi bilan quduqlarga 20 mkl sinov zardobi qo'shiladi (1:10 suyultirish olinadi). Har bir sarum o'z uchi bilan qo'shiladi va ehtiyotkorlik bilan pipetlanadi (quduqlardagi eritmaning rangi ko'k-binafshadan yashil rangga o'zgarishi kerak). Keyin birinchi quduqlardan 50 mkl qatorlardagi keyingi quduqlarga o'tkaziladi va 1:20 dan 1:1280 gacha ikki marta suyultiriladi. Titrlash oxirida oxirgi quduqlardan 50 mkl hajmdagi eritmalar chiqariladi.

Har safar RPGA bajarilganda, K+ titrini nazorat aniqlashni amalga oshirish kerak. Buning uchun 8 ta chuqurchaga uzun qatorga 50 mkl PBS eritmasidan solinadi. Keyin birinchi quduqqa 50 mkl K+ ishchi eritmasidan (1:20) soling, ehtiyotkorlik bilan pipetlang va keyingi quduqlarga 50 mkl o'tkazing, 1:40 dan 1:5120 gacha 2 marta suyultiring.

O'z-o'zidan gemagglyutinatsiyaning yo'qligi uchun diagnostikani nazorat qilish uchun qisqa qatorning barcha quduqlariga 50 mkl PBS eritmasi qo'shiladi.

Barcha quduqlarga 25 mkl SED qo'shiladi (RIP ni o'z ichiga olgan sinov sarumlari uchun har bir qatorning birinchi quduqlaridan tashqari). Ishlatishdan oldin SED suspenziyasini shisha yoki vannada aralashtiring! Tabletka yaxshilab chayqatiladi va 16 dan 25 ° C gacha bo'lgan haroratda 30 - 40 daqiqa davomida nazoratdagi eritrotsitlar to'liq joylashguncha qoldiriladi.

Natijalarni hisobga olish va sharhlash

Qon zardobini tekshirishda natijalarni hisobga olish

Natijalar to'rtta xochning an'anaviy shkalasida hisobga olinadi. Sarum titri uning suyultirilishi deb hisoblanadi, bu gemagglyutinatsiyani kamida 3 (+++) xoch bilan beradi.

• ++++ (4+) - aglutinatsiyalangan eritrotsitlar teshikning pastki qismida teskari "soyabon" hosil qiladi, uning qirralari tushadi;
• +++ (3+) - aglyutinlangan eritrotsitlar teshik tubida teskari “soyabon” hosil qiladi, uning qirralari silliq;
• ++ (2+) - agglyutinlangan eritrotsitlar bilan bir qatorda quduq tubida aglyutinlanmagan eritrotsitlarning kichik “halqasi” ko'rinishidagi cho'kma mavjud;
• + (1+) - ko'pchilik qizil qon hujayralari aglyutinatsiyalanmagan va kichik "halqa" shaklida joylashadi;
• (-) - aglutinatsiyalanmagan qizil qon tanachalari quduq tubida "nuqta" hosil qiladi.

Ijobiy natija Vi-antigen bilan yuklangan eritrotsitlarning kamida 3 ta xoch (+++) bilan gemagglyutinatsiyasi hisoblanadi.

Diagnostika sifatini nazorat qilish nazorat qatorining 4 ta qudug'i bilan ta'minlanadi, ularga faqat PBS va SED eritmasi qo'shilgan. Bu quduqlarda spontan gemagglyutinatsiya bo'lmasligi kerak - reaktsiya salbiy (-). Aks holda, tadqiqotni takrorlash kerak. Qayta bosqichda gemagglyutinatsiya paydo bo'lsa, preparat qo'llanilmaydi.

Salbiy natijaga ega bo'lgan sarumlar diagnostik titri 1:40 yoki undan past bo'lgan Vi antigeniga antikorlarni o'z ichiga olmaydi.

Beradigan sarumlar ijobiy natija 1:40 nisbatda suyultirilganda, titrini aniqlash uchun sarum titrlash bilan versiyada qayta tekshirilishi kerak.

Qon zardobini titrlashda natijalarni hisobga olish

Sarum titri uning suyultirilishi hisoblanadi, bu gemagglyutinatsiyani kamida 3 (+++) xoch beradi.

Diagnostika sifatini nazorat qilish EDS monitoringi uchun qator quduqlari tomonidan ta'minlanadi. Bu quduqlarda spontan gemagglyutinatsiya bo'lmasligi kerak - reaktsiya salbiy (-). Aks holda, tadqiqotni takrorlash kerak. Agar takroriy tekshiruv paytida gemagglyutinatsiya paydo bo'lsa, preparat qo'llanilmaydi.

2.diagnostik

4.yo'q qilingan mikroblardan (ma'lum bir Ag izolyatsiyasi)

Eritrosit HBs diagnostikasi

2.diagnostik

4. tanin va cho'kma a\g HBs bilan ishlov berilgan havo qo'ylarining suspenziyasi

5.qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash

Diagnostika gp120

2.diagnostik

4.ajratish a\g ex. OIV

5. OIV infeksiyasini aniqlash uchun

Qoqshol eritrotsit diagnostikasi

2.diagnostik

4. er.ramning suspenziyasi, tanin va a\g qoqshol bilan davolash

5. qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash (tetanozga

Mikropresipitatsiya uchun kardiolipin antijeni

2.diagnostik

4.sog'lom buqaning yuragidan olingan lipid fraksiyalari

5.qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash

Ultrasonik treponemal antigen

2.diagnostik

4. o'ldirilgandan tashqari. sifilis

5.qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash

Korpuskulyar tulyaremiya diagnostikasi

2.diagnostik

4.alohida patogen zarrachalardan

5.qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash

Dizenteriya diagnostikasi

2.diagnostik

4. o'ldirilgan hayvonlardan suspenziya

5.bemorning qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash

Shigella Sonne dan eritrotsit diagnostikasi

2.diagnostik

4.er.ramning suspenziyasi, tonin bilan ishlangan

5.qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash

Salmonella typhimurium dan diagnostik

2.diagnostik

4. o'ldirilgandan tashqari. salmonellalar

5.qon zardobida o'ziga xos antikorlarni aniqlash

Sarumlar

Gangrenga qarshi ot zardobi 5000 IU

2.zardob

4.qo'zg'atuvchi gazli gangrena toksoidi bo'lgan giperimmiya otlarining qon zardobidan.

6.parenteral, globulin 1:100 bilan testdan so'ng

Oddiy inson immunoglobulini

2.zardob

4.donor qon zardobidan

5. forma-e pass. xos sotib olingan san'at imm

6.parenteral

Kuydirgini cho'ktiruvchi sarum

2.zardob

4. giperimmunlangan hayvonlarning qon zardobidan a\g exc.sib. yaralar

6.cho'kma reaktsiyasi (RP)

Botulinum sarum turi - A 400 IU

2.zardob

5.sinov materialida o'ziga xos antigenni aniqlash

6.neytralizatsiya reaktsiyasi (RN)

Kuydirgiga qarshi globulin

2.zardob

4.giperimmunlangan hayvonlarning qon zardobidan va/yoki kuydirgidan tashqari

5. forma-e pass. xos sotib olingan san'at imm

6.parenteral

Gemolitik sarum

2.zardob

4. boshqa turdagi hayvonlarning eritrotsitlari bilan giperimmunizatsiyalangan hayvonlar zardobidan

5.sinov materialida o'ziga xos antigenni aniqlash

Ogawa vabosi aglutinatsiya qiluvchi sarum

2.zardob

4.giperimmunizatsiyalangan hayvonlarning qon zardobidan

5.sinov materialida o'ziga xos antigenni aniqlash

Luminescent tulyaremiya sarumi

2.zardob

4.giperimmunizatsiyalangan hayvonlarning qon zardobidan a\g exc.tular.

5.sinov materialida o'ziga xos antigenni aniqlash

Immunoglobulinga qarshi Shomil orqali yuqadigan ensefalit odam

2.zardob

4.donor qon zardobidan

5. forma-e pass. xos sotib olingan san'at imm

6.parenteral

ESNO diagnostik sarum

2.zardob

4.ESNO viruslari bilan giperimmunlangan hayvonlarning qon zardobidan

5.sinov materialida o'ziga xos antigenni aniqlash

Gepatit B ga qarshi inson immunoglobulini

2.zardob

4.gepatit B ga qarshi emlangan donorning qon zardobidan

5. forma-e pass. xos sotib olingan san'at imm

6.parenteral

Peroksidaza bilan belgilangan antiglobulin sarum

2.zardob

4.giperimmunizatsiyalangan hayvonlarning qon zardobidan

5.sinov materialida o'ziga xos antigenni aniqlash uchun (OIV)

Quturishga qarshi immunoglobulin

2.zardob

4.donor qon zardobidan

5. forma-e pass. xos sotib olingan san'at imm

Diagnosticum Salmonella VI-antigen reaktivi to'plami passiv gemagglyutinatsiya reaktsiyasida (RPHA) Salmonella tifus VI-antigeniga xos antikorlarni inson qon zardobida aniqlash uchun mo'ljallangan.

1. XUSUSIYATLARNI O'rnatish

2.1. Usulning printsipi.

Diagnosticum Salmonella VI-antigenining faol printsipi qizil qon hujayralari yuzasida o'rnatilgan Vi-antigendir. Vi-antigenga antikorlarni o'z ichiga olgan sarumlar bilan o'zaro ta'sirlashganda, eritrotsitlar aglutinatsiyasi fenomeni kuzatiladi.

2.2. TARKIBINI SOZLASH

Reaktivlar	Miqdori
Diagnosticum erythrocyte salmonella Vi-antigen suyuqlik- fosfat tampon eritmasida (pH 7,2) B-antigenli formalinlashtirilgan va sensibilizatsiyalangan Salmonella tif qo'y eritrotsitlarining 1% suspenziyasi. + 0,2; konsentratsiyasi 0,06 mol/l). Jigarrang rangning yoriqlarsiz bir hil suspenziyasi; cho'kishda 2 qatlam hosil bo'ladi: eritrotsitlarning zich jigarrang cho'kmasi va shaffof sarg'ish supernatant suyuqlik	1 shisha - 6 ml
Salmonella diagnostik sarum adsorbsiyalangan B retseptorlari quruq - oqdan jigarrang ranggacha bo'lgan bir hil massa	1 shisha - 0,1 ml
Formalizatsiyalangan, sezgir bo'lmagan qo'y eritrotsitlarining 1% suspenziyasi— qo'ng'ir rangli bir hil suspenziya, parchalarsiz; cho'kishda 2 qatlam hosil bo'ladi: eritrotsitlarning zich jigarrang cho'kmasi va shaffof sarg'ish supernatant suyuqlik	1 shisha -
Sarumni suyultirish va RPGA ni aniqlash uchun eritma - 0,9% natriy xlorid eritmasi - shaffof rangsiz suyuqlik, pH 6,5 dan 7,5 gacha	2 shisha - har biri 8 ml
Immunologik reaktsiyalar uchun bir marta ishlatiladigan yumaloq pastki plastinka - 8 qatordan iborat bo'lib, ularning har biri shaffof, rangsiz, yumaloq tubli 12 teshikni o'z ichiga oladi.	1 ta kompyuter

1. ANALITIK VA DIAGNOSTIK XUSUSIYATLARI.

3.1. Diagnosticum 1:160 dan kam bo'lmagan suyultirishda quruq B retseptorlari tomonidan adsorbsiyalangan diagnostik Salmonella zardobi bilan RPHAda aglutinatsiyalangan bo'lishi kerak.

Sog'lom odamlarning qon zardobining diagnostik xususiyatlarining shartli darajasi 1:20 dan yuqori bo'lmagan sarum suyultirilishi deb hisoblanishi kerak.

3.2. Tahlil vaqti: 2 soat.

3.3. To'plam 8 ta ta'rifni o'z ichiga oladi.

1. Ehtiyot chora-tadbirlari

To'plam bilan ishlashda siz SSSR Sog'liqni saqlash vazirligining sanitariya-epidemiologiya muassasalarining laboratoriyalarida (bo'limlarida, bo'limlarida) ishlashda dizayn, xavfsizlik choralari, sanoat sanitariyasi, epidemiyaga qarshi rejim va shaxsiy gigiena qoidalariga rioya qilishingiz kerak. M., 1981).

Tahlil qilingan sarumlar, shuningdek ular bilan aloqada bo'lgan reagentlar potentsial infektsiyalangan deb hisoblanishi kerak. uzoq vaqt OIV, gepatit virusi yoki boshqa har qanday patogenni saqlash yoki uzatish virusli infektsiya- Ularga ehtiyotkorlik bilan munosabatda bo'lish kerak:

• rezina qo'lqop bilan ishlash;
• pipetlashda avtomatik dispenserlardan foydalanish kerak;
• ish tugagandan so'ng, tahlil qilingan sarum va reagentlarni va ular bilan aloqada bo'lgan asboblarni dezinfektsiyali eritma bilan davolang.
• Ishlatishdan oldin va keyin uskunani 70% etil spirti bilan artib oling.

Tahlil qilingan sarum 56 0 S haroratda 30 daqiqa davomida inaktivatsiya qilinishi kerak.

To'plamga kiritilgan B retseptorlari tomonidan adsorbsiyalangan diagnostik Salmonella zardobi quruq va faol bo'lmagan.

Ob'ektiv tahlil natijalari quyidagi shartlar bajarilgan taqdirda kafolatlanadi:

• Barcha to'plam reagentlari 2 dan 8 0 S gacha bo'lgan haroratda saqlanishi kerak;
• muddati o'tgan reagentlardan foydalanmang;
• agar ularning qadoqlarida tegishli belgilar bo'lmasa, to'plam reagentlaridan foydalanmang;
• RPHA ni bajarish uchun faqat ushbu to'plamga kiritilgan reagentlardan foydalaning.

Vi-diagnostik

Diagnostik Vi

Vi-antigenik

Ro'yxatdan o'tganlik guvohnomasi No RZN 2016/3905 04/04/2016

Maqsad

"Diagnosticum erythrocyte salmonella Vi-antigen for RPHA" (SED-Vi) reaktivlar to'plami passiv gemagglyutinatsiya (RPHA) reaktsiyasi orqali inson qon zardobida tif isitmasi qo'zg'atuvchisi Vi-antigeniga antikorlarni aniqlash uchun mo'ljallangan. ).

To'plamning xususiyatlari

Ishlash printsipi

Qorin tifining qo'zg'atuvchisiga antikorlar mavjud bo'lganda, Vi antijeni bilan sensibilizatsiyalangan tovuq eritrotsitlarining gemagglyutinatsiyasi kuzatiladi, bu plastinkaning U shaklidagi quduqlari tubida joylashgan eritrotsitlarning "soyabon" shakllanishiga olib keladi. . Tifo isitmasi qo'zg'atuvchisiga antikorlar bo'lmasa, o'rnashgan qizil qon tanachalari "nuqta" hosil qiladi.

Tarkibni sozlash

Reaktiv nomi	Tavsif	To'plamdagi miqdor
Diagnosticum erythrocyte salmonella Vi-antigen, quruq 6% (EDS)	S. typhi Vi antijeni bilan sezgir bo'lgan rasmiylashtirilgan tovuq eritrotsitlari. Jigarrang rangli quruq gigroskopik massa. Eritishdan keyin suspenziya qizil-jigarrang rangga ega.	1 fl., 0,6 ml dan
Salmonella diagnostik sarum adsorbsiyalangan, Vi retseptorlari, quruq (1:20 suyultirilgan, (K+))	Quyon sarum Salmonella adsorbsiyalangan, Vi retseptorlari, 1:20 suyultirilgan. Oq rangdagi quruq gigroskopik gözenekli massa. Eritishdan keyin u shaffof, sarg'ish yoki rangsiz suyuqlikdir.	1 fl., 0,3 ml dan
Sinov namunasi suyultiruvchisi (RSD)	Ko'k-binafsha rangdagi shaffof suyuqlik.	1 fl., 10 ml
Fosfat tampon eritmasi (PBS)	Rangsiz shaffof suyuqlik.	1 fl., 10 ml
Immunologik reaktsiyalar uchun bir martalik polimer tabletka	Shaffof rangsiz polistiroldan tayyorlangan immunologik reaktsiyalar uchun bir martalik polimer tabletka.	1 ta kompyuter.

Diagnostika xususiyatlari

Diagnosticum diagnostik salmonella zardobida adsorbsiyalangan, Vi retseptorlari, quruq (1:20 suyultirish), sarum yorlig'ida ko'rsatilgan titr bilan RPHAda aglutinatsiyalangan bo'lishi kerak. Sog'lom odamlarning qon zardobining diagnostik xususiyatlarining shartli darajasi 1:20 dan yuqori bo'lmagan sarum suyultirilishi deb hisoblanishi kerak. Tahlil vaqti 3040 minut. To'plam skrining variantida 42 qon zardobini yoki titrlash variantida 10 qon zardobini tekshirish uchun mo'ljallangan.

Ehtiyot choralari

To'plam faqat in vitro diagnostika uchun mo'ljallangan. To'plamga kiritilgan moddalar faollashtirilmagan va xavfsizdir. To'plam bilan ishlashda siz SP 1.3.2322-08 va SanPiN 2.1.7.2790-10 ga rioya qilishingiz kerak.

Qo'shimcha uskunalar va materiallar

Uskunalar, materiallar, echimlar:

• O'zgaruvchan dozalash hajmi 5 - 40 µl bo‘lgan 1 kanalli pipetkali dispenserlar; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl va 1000 - 5000 µl;
• O'zgaruvchan dozalash hajmi 5 - 40 µl va 40 - 200 µl bo‘lgan 8 yoki 12 kanalli pipetkali dispenserlar;
• distillangan suv (GOST 6709-72).

Tahlil qilingan namunalar

O'rganilayotgan qon zardobi namunalari qon to'plangan paytdan boshlab 3 kundan ortiq bo'lmagan 2 dan 8 ° C gacha haroratda saqlanadi. Zardobni muzlatilgan holda minus 18 °C dan yuqori bo'lmagan haroratda 1 yildan ortiq bo'lmagan muddatda saqlash mumkin. Ishlatishdan oldin namunalar 16 dan 25 °C gacha bo'lgan haroratda eritiladi va chayqatish orqali aralashtiriladi. Qayta muzlatishga yo'l qo'yilmaydi. Bakterial o'sish va gemoliz bo'lgan namunalar ishlatilmasligi kerak. Reaksiyani amalga oshirishdan oldin, sinov sarumlari 30 daqiqa davomida 56 ° C da isitiladi.

Tahlil o'tkazish

Nazorat diagnostikasi sarumini tayyorlash (K+)

0,3 ml (K+) dan quruq (1:20 suyultirish) diagnostik Salmonella zardobidan adsorbsiyalangan Vi retseptorining ishchi eritmasini tayyorlang. Buning uchun K+ bilan shishaning tarkibiga 0,3 ml fosfat bufer eritmasi (PBS) qo'shing. Qolgan sarum miqdorini qismlarga ajratish va muzlatilgan holda minus 18 ° C dan yuqori bo'lmagan haroratda 6 oydan ko'p bo'lmagan muddatda saqlanishi mumkin.

Salmonella eritrotsit diagnostikumini (SED) tayyorlash

Salmonella erythrocyte diagnosticum suspenziyasining ishchi suyultirilishini tayyorlash uchun quruq 6% SED bilan shisha tarkibiga 0,6 ml distillangan suv qo'shiladi va 16 dan 25 ° C gacha bo'lgan haroratda 2 soat davomida namlash uchun qoldiriladi. Keyin eritmaga 2,4 ml fosfat bufer eritmasi (PBS) qo'shiladi. Ishchi eritma 2 dan 8 ° C gacha bo'lgan haroratda 1 oydan ko'p bo'lmagan muddatda saqlanadi. Muzlatish mumkin emas.

Qon zardobini tekshirish paytida RPGA bayonoti

Skrining tekshiruvi uchun qon zardobi tabletka quduqlarida quyidagicha suyultiriladi:

• Plastinkaning birinchi quduqlarida 1:20 lik dastlabki suyultirishlar tayyorlanadi, avval ularga 190 mkl RIP eritmasi, so'ngra 10 mkl sinov zardobi qo'shiladi. Har bir sarum alohida uchi bilan qo'shiladi va ehtiyotkorlik bilan pipetlanadi (zardoblar qo'shilgandan keyin quduqlardagi eritmaning rangi ko'k-binafsha rangdan yashil rangga o'zgarishi kerak);
• 1:40 lik skrining suyultirishlari ikkinchi quduqlarda avval ularga 25 mkl PBS eritmasi, so'ngra 25 mkl oldindan suyultirilgan sarum qo'shib, ehtiyotkorlik bilan pipetlash orqali tayyorlanadi.

Har safar RPGA bajarilganda, K+ titrini nazorat aniqlashni amalga oshirish kerak. Buning uchun 8 ta chuqurchaga uzun qatorga 50 mkl PBS eritmasidan solinadi. Keyin birinchi quduqqa 50 mkl K+ ishchi eritmasidan (1:20) soling, ehtiyotkorlik bilan pipetlang va keyingi quduqlarga 50 mkl o'tkazing, 1:40 dan 1:5120 gacha 2 marta suyultiring. O'z-o'zidan gemagglyutinatsiyaning yo'qligi uchun EDSni kuzatish uchun yana 4 ta quduqqa 50 mkl PBS eritmasi qo'shiladi.

25 mkl SED sinov zardobining skrining suyultirishlari (RIP ni o'z ichiga olgan birinchilardan tashqari) va boshqaruv elementlari bilan plastinkaning barcha quduqlariga qo'shiladi. Ishlatishdan oldin SED suspenziyasini shisha yoki vannada aralashtiring! Tabletka yaxshilab chayqatiladi va 16 dan 25 ° C gacha bo'lgan haroratda 30 - 40 daqiqa davomida nazoratdagi eritrotsitlar to'liq joylashguncha qoldiriladi.

Sinov qon zardobini titrlashda RPGA bayonoti

Sinov zardobi va K+ ishchi eritmasini titrlash plastinkaning qisqa qatorlarida amalga oshiriladi. Yana bir qisqa seriya EDS ning spontan gemagglyutinatsiyasining yo'qligini kuzatish uchun ishlatiladi.

Sinov zardobini titrlash uchun qisqa qatorlarning birinchi quduqlariga 180 mkl RIP eritmasi qo'shiladi. Boshqa barcha quduqlarga 50 mkl PBS eritmasi qo'shing.

RIP eritmasi bilan quduqlarga 20 mkl sinov zardobi qo'shiladi (1:10 suyultirish olinadi). Har bir sarum o'z uchi bilan qo'shiladi va ehtiyotkorlik bilan pipetlanadi (quduqlardagi eritmaning rangi ko'k-binafshadan yashil rangga o'zgarishi kerak). Keyin birinchi quduqlardan 50 mkl qatorlardagi keyingi quduqlarga o'tkaziladi va 1:20 dan 1:1280 gacha ikki marta suyultiriladi. Titrlash oxirida oxirgi quduqlardan 50 mkl hajmdagi eritmalar chiqariladi.

Har safar RPGA bajarilganda, K+ titrini nazorat aniqlashni amalga oshirish kerak. Buning uchun 8 ta chuqurchaga uzun qatorga 50 mkl PBS eritmasidan solinadi. Keyin birinchi quduqqa 50 mkl K+ ishchi eritmasidan (1:20) soling, ehtiyotkorlik bilan pipetlang va keyingi quduqlarga 50 mkl o'tkazing, 1:40 dan 1:5120 gacha 2 marta suyultiring.

O'z-o'zidan gemagglyutinatsiyaning yo'qligi uchun diagnostikani nazorat qilish uchun qisqa qatorning barcha quduqlariga 50 mkl PBS eritmasi qo'shiladi.

Barcha quduqlarga 25 mkl SED qo'shiladi (RIP ni o'z ichiga olgan sinov sarumlari uchun har bir qatorning birinchi quduqlaridan tashqari). Ishlatishdan oldin SED suspenziyasini shisha yoki vannada aralashtiring! Tabletka yaxshilab chayqatiladi va 16 dan 25 ° C gacha bo'lgan haroratda 30 - 40 daqiqa davomida nazoratdagi eritrotsitlar to'liq joylashguncha qoldiriladi.

Natijalarni hisobga olish va sharhlash

Qon zardobini tekshirishda natijalarni hisobga olish

Natijalar to'rtta xochning an'anaviy shkalasida hisobga olinadi. Sarum titri uning suyultirilishi deb hisoblanadi, bu gemagglyutinatsiyani kamida 3 (+++) xoch bilan beradi.

• ++++ (4+) - aglutinatsiyalangan eritrotsitlar teshikning pastki qismida teskari "soyabon" hosil qiladi, uning qirralari tushadi;
• +++ (3+) - aglyutinlangan eritrotsitlar teshik tubida teskari “soyabon” hosil qiladi, uning qirralari silliq;
• ++ (2+) - agglyutinlangan eritrotsitlar bilan bir qatorda quduq tubida aglyutinlanmagan eritrotsitlarning kichik “halqasi” ko'rinishidagi cho'kma mavjud;
• + (1+) - ko'pchilik qizil qon hujayralari aglyutinatsiyalanmagan va kichik "halqa" shaklida joylashadi;
• (-) - aglutinatsiyalanmagan qizil qon tanachalari quduq tubida "nuqta" hosil qiladi.

Ijobiy natija Vi-antigen bilan yuklangan eritrotsitlarning kamida 3 ta xoch (+++) bilan gemagglyutinatsiyasi hisoblanadi.

Diagnostika sifatini nazorat qilish nazorat qatorining 4 ta qudug'i bilan ta'minlanadi, ularga faqat PBS va SED eritmasi qo'shilgan. Bu quduqlarda spontan gemagglyutinatsiya bo'lmasligi kerak - reaktsiya salbiy (-). Aks holda, tadqiqotni takrorlash kerak. Qayta bosqichda gemagglyutinatsiya paydo bo'lsa, preparat qo'llanilmaydi.

Salbiy natijaga ega bo'lgan sarumlar diagnostik titri 1:40 yoki undan past bo'lgan Vi antigeniga antikorlarni o'z ichiga olmaydi.

1:40 suyultirilganda ijobiy natija bergan sarum titrini aniqlash uchun sarum titrlash bilan qayta tekshirilishi kerak.

Qon zardobini titrlashda natijalarni hisobga olish

Sarum titri uning suyultirilishi hisoblanadi, bu gemagglyutinatsiyani kamida 3 (+++) xoch beradi.

Diagnostika sifatini nazorat qilish EDS monitoringi uchun qator quduqlari tomonidan ta'minlanadi. Bu quduqlarda spontan gemagglyutinatsiya bo'lmasligi kerak - reaktsiya salbiy (-). Aks holda, tadqiqotni takrorlash kerak. Agar takroriy tekshiruv paytida gemagglyutinatsiya paydo bo'lsa, preparat qo'llanilmaydi.