Cauzele și tratamentul hemoglobinuriei paroxistice nocturne. Hemoglobinurie paroxistică nocturnă la adulți Simptome de hemoglobinurie nocturnă

Proprietarii brevetului RU 2574968:

Invenţia se referă la medicină, şi anume la diagnosticarea de laborator, şi poate fi utilizată pentru a diagnostica hemoglobinuria paroxistică nocturnă. Pentru a face acest lucru, proba de sânge de testat este colorată cu anticorpi monoclonali CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC). Prezența unei clone PNH printre eritrocite și reticulocite este evaluată prin absența proteinei protectoare CD59 pe membrana reticulocitelor izolate de poarta CD235a - un marker paneritrocitar și CD71 - un receptor pentru transferină. Pentru a evalua clona PNH printre reticulocite, cel puțin 20.000 de evenimente sunt colectate în poarta CD71+, în funcție de poarta CD71+, este construit un grafic FSC(log) vs SSC(log), pe care reticulocitele sunt izolate folosind o poartă suplimentară CD71str, curățând astfel populația de reticulocite de resturi și dublete prin trecere secvențială. În prezența reticulocitelor CD59 100% pozitive, se apreciază absența unei clone PNH și se diagnosticează absența hemoglobinuriei nocturne paroxistice. Dacă la un pacient cu simptome clinice sunt detectate reticulocite CD59 negative și valoarea indicatorilor obținuți este mai mare de 1%, acestea dau o concluzie diagnostică despre prezența unei clone de PNH și, pentru a confirma diagnosticul de hemoglobinurie paroxistică nocturnă, un suplimentar. se recomandă studiul conform protocolului internaţional standardizat. Dacă sunt detectate reticulocite CD59-negative și valoarea indicatorilor obținuți este de 0,1-1%, se apreciază prezența unei clone minore PNH și se recomandă o redeterminare a clonei PNH după 6 luni pentru creșterea valorii acesteia și dezvoltarea hemoglobinuriei paroxistice nocturne, iar dacă această dimensiune este confirmată clonă diagnosticați forma subclinica de hemoglobinurie paroxistică nocturnă fără semne clinice. Utilizarea blocării multiparametrice a celulelor CD71+ face posibilă excluderea resturilor, dubletelor și a anticorpilor monoclonali legați nespecific din analiză. 1 bolnav.

Invenția se referă la medicină, și anume la metode de diagnostic clinic și de laborator, și poate fi utilizată pentru diagnosticarea de screening al hemoglobinuriei nocturne paroxistice (PNH).

Hemoglobinuria paroxistică nocturnă este o boală rară.

PNH este cauzată de o mutație a genei PIG-A. Ca urmare, sinteza ancorei glicozilfosfatidilinnositol (GPI) este întreruptă, care fixează numeroase molecule pe membrana celulelor sanguine (inclusiv CD24 pe granulocite, CD14 pe monocite, CD59 pe eritrocite și precursorii acestora), care protejează celulele sanguine de efectele sistemului complement.

Membrana eritrocitară este cea mai expusă atacului membranelor complexe, iar în absența proteinei protectoare CD59, eritrocitele suferă hemoliză.

HNP se caracterizează prin hemoliză intravasculară, anemie, hemoglobinurie, complicații trombotice, disfagie, letargie, disfuncție erectilă, insuficiență renală cronică și hipertensiune pulmonară.

În plus, o clonă PNH poate apărea în anemia aplastică, anemia hemolitică autoimună și sindromul mielodisplazic. Vârsta medie pentru debutul HPN este de 30-35 de ani. Incidența hemoglobinuriei paroxistice nocturne este de la 1 la 10:1 milioane de oameni. Mortalitatea fără tratament în hemoglobinuria paroxistică nocturnă este de aproximativ 35% în decurs de 5 ani de la debutul bolii.

În prezent, au apărut tehnologii celulare care au făcut posibilă dezvoltarea unor metode moderne de tratare a acestei boli.

În acest sens, a fost nevoie de a crea metode de diagnosticare precise, deoarece. eficacitatea și adecvarea tratamentului depind de conținutul informațional, obiectivitatea și evidența măsurilor de diagnosticare, precum și de caracterul complet al informațiilor obținute, ceea ce permite aprecierea prezenței unei clone PNH și clarificarea diagnosticului.

O metodă cunoscută pentru detectarea HPN folosind metoda Hem pentru diagnosticul hemoglobinuriei paroxistice nocturne (Abdulkadyrov K.M., Clinical Hematology, Handbook - St. Petersburg: Peter, 2006, p. 82), bazată pe stimularea inactivării sistemului complementului ca un rezultat al acidificării probei de sânge și al hipersensibilității la el eritrocite ale pacienților cu hemoglobinurie paroxistică nocturnă. Rezultatul testului Hema este evaluat vizual.

Metoda constă în faptul că în serul sanguin al donatorului se adaugă 0,2 soluție normală de HCl, comparabilă cu serul pacientului conform sistemului de antigene ABO, pH-ul său al serului se va schimba la 6,4 și, prin urmare, este cauzată activarea complementului ( raportul dintre ser și acid este de 9: 1). Apoi, zece volume de ser acidificat sunt amestecate cu un volum dintr-o suspensie 50% de eritrocite spălate. Apoi faceți o evaluare vizuală a suspensiei rezultate. Cu hemoglobinuria paroxistică nocturnă are loc hemoliza eritrocitelor și suspensia capătă o culoare roșiatică sau roșie, în timp ce eritrocitele normale nu se hemolizează în aceleași condiții.

Cu toate acestea, tehnica nu are suficientă sensibilitate pentru a determina clone minore de PNH: dimensiunea minimă a clonelor detectabile este de 4,2-5%. Metoda Hem nu oferă informații despre dimensiunea clonei.

Toate acestea fac imposibilă evaluarea clonei PNH în procente, care, dacă o boală este detectată în timpul screening-ului, este punctul de plecare pentru monitorizarea ulterioară și tratamentul adecvat.

În plus, tehnica este foarte laborioasă și nu îndeplinește cerințele moderne de diagnosticare.

De asemenea, este cunoscută o metodă de diagnosticare a hemoglobinuriei paroxistice nocturne folosind un test de sucroză („Problems of Hematology and Blood Transfusion”, 1972, august, 17(8)55-7, „Assessment of a sucrose test for the diagnostic of paroxism nocturnal hemoglobinuria”, ”, Idelson L.I., Benisovich V.I., Savina L.S., Radzhivilovskaya E.G.).

Metoda se bazează pe sensibilitatea crescută a eritrocitelor unui pacient cu hemoglobinurie nocturnă paroxistică la proteinele sistemului complement, în acest caz datorită adaosului de zaharoză.

Ser proaspăt de donator este adăugat în eritrocitele pacientului, identic cu grupa sanguină a pacientului. Eritrocitele sunt spălate de trei ori în soluție salină fiziologică (0,145 M NaCl), se adaugă 100 μl de sânge citrat sau defibrinat la 900 ml de soluție de zaharoză și se incubează timp de 30 de minute la 37°C sau 23°C. După aceea, tuburile sunt centrifugate, apoi supernatantul este evaluat pentru hemoliză vizibilă. Dacă are loc hemoliză, gradul acesteia, exprimat în procente, se calculează din concentrația de hemoglobină a supernatantului, care este determinată prin metoda cianmethemoglobinei.

Probele de sânge integral sunt amestecate 9:1 cu citrat de sodiu 3,2% sau soluție de oxalat 0,1M, sângele integral este defibrinat prin adăugarea unei sferele de sticlă de 4 mm la 2 ml de sânge. Alicote de sânge integral și plasmă fără trombocite sunt amestecate în diferite proporții. O soluție izotonă de zaharoză se prepară prin dizolvarea a 0,27 mol de reactiv special de zaharoză în 91 ml de NaH2PO4 50 mM și 9 ml de NaHP04. pH-ul este ajustat, dacă este necesar, la 6,1 cu concentrații mici de NaOH. În volumul final se toarnă 1000 ml de apă.

Tuburile sunt centrifugate și supernatantul este evaluat pentru hemoliză vizibilă. Procentul de hemoliză este o valoare calculată, calculată din concentrația de hemoglobină supernatantă, determinată prin metoda cianmethemoglobinei. Pregătiți și alte două alicote - hemoliză 100% și hemoliză „zero” (fără eritrocite) pentru evaluarea probei.

Dezavantajul acestei metode este lipsa de sensibilitate și specificitate pentru diagnosticarea bolii: dimensiunea minimă detectabilă a clonelor - 4,2-5% nu oferă o idee exactă a mărimii clonei, în timp ce aceasta poate fi prezentă în sângele pacientului la valori mai mici - mai puțin de 4,2%. Dezavantajele metodei pot fi atribuite și complexității sale.

De asemenea, este cunoscută o metodă de diagnosticare a unei clone de PNH (Rosse WF. Variations in the red cells in paroxism nocturnal haemoglobinuria. Br J Haematol 1973; 24:327-42. 12), inclusiv măsurarea și analiza gradului de hemoliză la diferite concentrații ale complementului. Această analiză arată că celulele PNH lizează la concentrații mai mici decât celulele normale.

Acest test identifică populațiile de celule cu sensibilitate intermediară la proteinele complement (tip II) între eritrocitele normale (tip I) și eritrocitele anormale în hemoglobinuria paroxistică nocturnă (tip III). Cu toate acestea, metoda este laborioasă și greu de standardizat. Când se utilizează testul, populațiile mici de celule anormale pot fi omise.

Există o metodă cunoscută pentru izolarea reticulocitelor de către CD71 pentru a determina clona PNH prin citometrie în flux între reticulocite și granulocite (Tsagarakis NJ, Paterakis G. Test simplu de citometrie în flux pentru testarea de rutină a hemoglobinuriei paroxistice nocturne bazată pe reticulocite imature și granulocitometrie clinică. .- C. 259-263) (http://onlinelibrary.wiley.coni/doi/10.1002/cyto.b.21030/full).

Se examinează întregul sânge al pacientului, care este diluat în soluție salină tamponată cu fosfat 1:100. Se adaugă 50 pl de sânge diluat în două tuburi, apoi se efectuează colorarea: în primul tub, 10 pl de anticorpi monoclonali (MCA) la CD71 și 20 pl de MCA la CD59; În cel de-al doilea tub se adaugă 10 pl de control izotip IgGl. Rezultatele sunt evaluate pe histograme cu un singur parametru.

În plus, metoda analizează și granulocitele folosind combinații de MCA: 1) CD59-FITC /CD24-PE /CD45-PE-Cy5/; 2) CD66b-FITC/CD16-PE/CD45-PE-Cy5.

Conform acestei metode, sensibilitatea determinării clonei PNH printre granulocite este de 1%, sensibilitatea determinării clonei PNH printre reticulocite este de 5%. Cu toate acestea, metoda propusă a fost testată pe un număr mic de pacienți cu hemoglobinurie paroxistică nocturnă (n=8) și cu clona PNH mai mică de 1% (când a fost evaluată pe granulocite și, în consecință, mai puțin de 5% când a fost determinată pe reticulocite) ( n=7). De asemenea, sensibilitatea detectării clonelor pe reticulocite (5%) nu permite utilizarea tehnicii de evaluare simultană a unei clone printre granulocite și reticulocite. În același timp, printre probele de sânge ale pacienților cu suspiciune de HPN, nu au existat cele cu o dimensiune a clonelor de 1-24%, ceea ce nu oferă o imagine completă a corelației valorilor din acest interval. Cu această abordare, trecerea reticulocitelor este dificilă din cauza absenței unui marker de paneritrocite (CD235a) în panou, care este necesar în special pentru izolarea unei populații pure și pentru tăierea resturilor și dubletelor. În plus, pentru o evaluare obiectivă a unei clone PNH, trebuie evaluate zeci de mii de celule. Un test conform metodei propuse consumă o cantitate mare de anticorpi. Numărul total de evenimente colectate după poartă (conform CD71) (2000 de evenimente) poate să nu fie suficient pentru a identifica o clonă.

Astfel, metoda cunoscută a fost testată pe un număr mic de pacienți cu hemoglobinurie paroxistică nocturnă și clonă PNH, celule care, cel mai probabil, se asociază nespecific cu MCA la CD71, vor distorsiona rezultatele analizei. În plus, pentru această analiză sunt utilizate 6 tipuri de anticorpi monoclonali, 2 dintre ei fiind utilizați de două ori, ceea ce se reflectă în costul ridicat al panoului MCA utilizat. Metoda a fost testată pe 8 pacienți cu HPN, 7 dintre aceștia au avut o valoare a clonelor sub pragul de sensibilitate (1% pentru granulocite, 5% pentru reticulocite). Această metodă nu rezolvă problema detectării fiabile a clonelor PNH minore și nu este o dovadă a sensibilității ridicate a metodei.

Ca analog cel mai apropiat, este cunoscută o metodă de diagnosticare a hemoglobinuriei paroxistice nocturne prin citometrie în flux propusă de Asociația Internațională de Citometrie Clinică (ICCS). (Michael J. Borowitz, Fiona E. Craig, Joseph A. DiGiuseppe, Andrea J. Illingworth, Wendell Rosse, D. Robert Sutherland, Carl T. Wittwer, Stephen J. Richards. Linii directoare pentru diagnosticul și monitorizarea hemoglobinuriei paroxistice nocturne și tulburări asociate prin citometrie în flux, online: 28 APR 2010. DOI: 10.1002/cyto.b.20525).

Metoda include studiul prezenței proteinelor asociate GPI pe granulocite, monocite și eritrocite. Studiul constă în două etape: pregătirea probei și analiza ulterioară pe un citometru de flux.

Pentru analiza eritrocitelor, sângele integral este diluat cu soluție salină tamponată cu fosfat într-un raport de 1:100, se adaugă 10 μl de sânge integral la 990 μl de soluție salină tamponată cu fosfat; Apoi, se adaugă 40 ui din suspensia de celule rezultată în tubul marcat. Pentru a colora eritrocitele, la suspensia celulară sunt adăugați anticorpi monoclonali conjugați cu fluorocromi PE marcați cu CD235FITC și, respectiv, marcați cu CD59. După incubarea cu anticorpi monoclonali timp de 30 de minute la întuneric, probele sunt spălate de anticorpii monoclonali nelegați. Pentru analiza eritrocitelor se efectuează spălarea de două ori prin centrifugarea probei în 4 ml de soluție salină tamponată cu fosfat la 1500 rpm timp de 5 minute, apoi se ia supernatantul, se resuspend celulele, se adaugă 500 μl de soluție salină tamponată cu fosfat pt. analiza ulterioara.

Pentru a colecta și analiza eritrocite pe un citometru de flux, graficele sunt construite folosind software-ul dispozitivului:

Graph-FS(log) vs (împotrivă) SS(log), pe care este izolată o populație de eritrocite (creează o poartă RBC) și resturile, trombocitele și agregatele de eritrocite sunt eliminate;

Graficul CD235a(log) vs FS(log) reflectă evenimentele de la poarta RBC pentru a distinge mai clar populația de eritrocite, populația de eritrocite pozitivă pentru markerul CD235a, creează o nouă poartă (CD235a+)

CD59(log) vs CD235a, (histograma arată evenimentele controlate de CD235a+). Histograma reflectă nivelul de exprimare a CD59 pe eritrocite. Celulele fără deficit de CD59 - tip I sunt eritrocite normale, celule cu deficit parțial de expresie CD59 - clona PNH de tip II, celule care nu exprimă CD59, adică eritrocite cu deficit complet de CD59 - aceasta este clona PNH de tip III.

Conform metodei, sunt colectate cel puțin 50.000 de evenimente citometrice.

Pentru a se pregăti pentru analiza granulocitelor și monocitelor, se adaugă 100 pl de sânge periferic în două tuburi marcate. Apoi, pentru colorarea cu anticorpi monoclonali marcați, se adaugă în fiecare tub o combinație de anticorpi monoclonali marcați:

o combinație de anticorpi monoclonali marcați pentru a determina clona PNH printre granulocite FLAER(AlexaFluor700) /CD15(PE)/CD24(PerCP)/CD45(PE-Cy7) (markeri de poartă: CD45 și CD15, GPI - markeri înrudiți FLAER și CD24) ;

o combinație de anticorpi monoclonali marcați pentru a determina clona PNH dintre monocite FLAER(AlexaFluor700)/CD14PE/CD64PerCP/CD45PE-Cy7, unde markerii de poartă sunt: ​​CD45 și CD64, GPI sunt markeri asociați FLAER și CD14;

Probele colorate sunt incubate timp de 30 de minute la temperatura camerei în întuneric, după care se adaugă 1 ml de soluție de liză în probă pentru a scăpa de eritrocite. După incubare cu o soluție de lizare, probele sunt centrifugate timp de 5 minute la 1500 rpm, după centrifugare, supernatantul este drenat și leucocitele de la fundul tubului sunt resuspendate. Apoi, probele sunt spălate din soluția de lizare prin adăugarea a 2 ml de soluție salină tamponată cu fosfat la probă și centrifugare ulterioară timp de 5 minute la 1500 rpm. După centrifugare, supernatantul este drenat, celulele sunt resuspendate, apoi se adaugă 500 pl de soluție salină tamponată cu fosfat pentru analiză ulterioară.

Pentru analiza și colectarea granulocitelor și monocitelor pe citometrul de flux, următoarele grafice sunt construite folosind software-ul instrumentului:

Pe graficul CD45(log) vs SS, regiuni ale limfocitelor CD45+LY (celule din regiunea de expresie CD45 mare, valori scăzute SS), monocite CD45+MON (celule din regiunea de expresie CD45 medie, valori SS mai mari) și CD45+ Granulocite GRAN (zone celulare cu expresie scăzută a CD45, valori ridicate ale SS).

Pentru a analiza clona PNH printre granulocite, este reprezentat un grafic CD 15 (log) vs SS în funcție de poartă (CD45+GRAN). Folosind poarta CD15+, se izolează o populație de granulocite fără resturi și celule care nu au contactat anticorpi monoclonali anti-CD15;

Histograma FLAER(log) vs CD24(log) (construită în funcție de poarta CD15+. Pe acest grafic este construită poarta PNH GRAN, captând zona negativă pentru exprimarea CD24 și FLAER. Absența acestor markeri pe granulocite indică faptul că celulele aparțin clonei PNH.

Pentru a evalua clona PNH printre monocite, se construiește o diagramă -CD64(log) vs SS în funcție de poarta CD45 MON. În acest grafic, evenimentele C064-pozitive sunt limitate la poarta CD64+MON. În funcție de poarta CD64+MON, este reprezentat grafic un grafic -FLAER(log) vs CD14(log) (în funcție de populația izolată de monocite CD64+ - poartă). Pe acest grafic este construită poarta PNH MON, captând zona negativă pentru expresia CD14 și FLAER. Absența acestor markeri pe monocite indică faptul că celulele aparțin clonei PNH.

Valoarea clonei PNH este procentul de celule (granulocite, monocite, eritrocite) printre care se observă absența proteinelor ancoră asociate GPI.

Studiul clonei PNH conform protocolului internațional este „standardul de aur” în diagnosticul PNH. Cu toate acestea, studiul este costisitor și necesită timp. Pregătirea și analiza conform acestei metode durează cel puțin 2,5-3 ore.

Datorită faptului că HPN este o boală rară, conform diverselor surse, afectează de la 1 până la 10 persoane la 1 milion de populație, majoritatea pacienților trimiși pentru diagnosticarea clonei HPN nu vor fi pozitivi pentru HPN. Prin urmare, nu este recomandabil să se efectueze o analiză laborioasă și costisitoare conform protocolului internațional la pacienții fără HPN, dar este suficient să se răspundă la întrebarea dacă o clonă de PNH este prezentă sau nu. Cu costul anticorpilor monoclonali marcați de la 500 c.u. pentru un nume, un set complet de anticorpi și reactivi pentru diagnosticarea HPN conform abordării internaționale va costa de la 5000 USD. Având în vedere durata scurtă de valabilitate a unora dintre reactivii necesari, chiar și într-un oraș cu o populație de 1 milion de locuitori, de la 10 la 100 de pacienți pot fi examinați cu un kit pe an, respectiv, costul unui studiu poate ajunge până la 500. USD.

Obiectivul invenției este de a crea o metodă precisă, sensibilă și bazată pe dovezi pentru diagnosticul de laborator al hemoglobinuriei paroxistice nocturne, care este ușor de realizat, accesibilă și permite screeningul pentru hemoglobinuria paroxistică nocturnă cu costuri materiale minime.

Esența invenției constă în faptul că într-o metodă de diagnostic de laborator al hemoglobinuriei paroxistice nocturne, inclusiv colorarea sângelui total al pacientului cu anticorpi monoclonali în soluție salină tamponată cu fosfat, incubarea, spălarea celulelor sanguine de la anticorpii monoclonali nelegați prin centrifugare, resuspendarea proba finită, evaluarea ulterioară a mărimii clonei sau absența acesteia în programul citometrului de flux din cauza absenței sau prezenței proteinelor protectoare, o combinație tricoloră de anticorpi monoclonali CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) este utilizat pentru colorarea probei de sânge studiate, care sunt adăugate în eprubeta împreună cu proba, prezența unei clone PNH printre eritrocite și reticulocite sunt evaluate prin absența proteinei CD59 protectoare pe membrana reticulocitelor izolate de CD235a. poarta - un marker de paneritrocite și receptor CD71 pentru transferină, pentru a evalua clona PNH printre reticulocite din poarta CD71+, sunt colectate cel puțin 20.000 de evenimente, în funcție de poarta CD71+, este construit un grafic FSC(log) vs SSC(log), pe care reticulocitele sunt izolate folosind o poartă suplimentară CD71str, curățând astfel populația de reticulocite de resturi și dublete prin metoda de trecere secvențială, valorile obținute ale indicatorilor sunt comparate cu criteriile normale și în prezența a 100% pozitiv pentru reticulocite CD59 judecă absența clonei PNH și diagnosticează absența bolii hemoglobinuriei paroxistice nocturne. Dacă la un pacient cu simptome clinice sunt detectate reticulocite CD59 negative și valoarea indicatorilor obținuți este mai mare de 1%, acestea dau o concluzie diagnostică despre prezența unei clone de PNH și, pentru a confirma diagnosticul de hemoglobinurie paroxistică nocturnă, un suplimentar. se recomandă studiul conform protocolului internațional standardizat, dacă sunt detectate reticulocite CD59 negative și indicatori de valoare obținute 0,1-1% judecă prezența unei clone minore de PNH și recomandă redeterminarea clonei de PNH după 6 luni pentru o creștere a acesteia. valoarea și dezvoltarea hemoglobinuriei paroxistice nocturne, dacă această mărime a clonelor este confirmată, o formă subclinică de hemoglobinurie paroxistică nocturnă este diagnosticată fără semne clinice.

Utilizarea invenţiei permite obţinerea următorului rezultat tehnic.

Metoda propusă pentru detectarea unei clone PNH are fiabilitate, acuratețe și sensibilitate ridicate - 0,1%, comparabilă cu metodologia standardizată internațională și este bazată pe dovezi.

Vă permite să determinați prezența clonelor PNH ca o dimensiune semnificativă la pacienții cu hemoglobinurie nocturnă paroxistică adevărată și minoră - de la 0,01 la 1%, la pacienții cu anemie aplastică și sindrom mielodisplazic.

Metoda este mai simplu de implementat, nu necesită costuri mari de materiale în comparație cu metodologia standardizată internațională.

Tehnologia de detectare a clonelor PNH face posibilă utilizarea unui număr minim (trei) de anticorpi monoclonali în screeningul PNH (CD235a, CD71, CD59).

Pentru a studia sângele unui pacient, se folosește un singur tub, ceea ce simplifică și accelerează analiza.

Timpul petrecut pentru efectuarea unui test este de 40-50 de minute. Folosind mai puțini anticorpi fără utilizarea soluțiilor de lizare, analiza este mai ieftină cu aproximativ 75% per test. În același timp, se menține sensibilitatea ridicată și acuratețea diagnosticului.

În cele mai multe cazuri, metoda evită costurile suplimentare asociate cu utilizarea mai multor anticorpi, deoarece, având în vedere apariția rară a bolii, rezultatul este adesea negativ. Tehnica este potrivită pentru screeningul pacienților și este disponibilă pentru instituțiile medicale de diverse profiluri, precum și pentru toate categoriile de cetățeni.

Rezultatul final al analizei în metoda propusă este prezentat ca procent de eritrocite și reticulocite cu un defect al proteinelor înrudite cu GPI, adică o clonă PNH. Tehnica face posibilă determinarea riscului crescut de tromboză, pe baza procentului de clonă PNH detectată.

Metoda propusă este de preferat în comparație cu alte metode cunoscute - testul Ham, testul zaharozei, măsurarea gradului de hemoliză la diferite concentrații de proteine ​​din sistemul complementului.

Rezultatul tehnic este atins datorită noii tehnologii dezvoltate de autori pentru determinarea clonei PNH în hemoglobinuria paroxistică nocturnă prin citometrie în flux, al cărei algoritm prevede determinarea acestei clone pe reticulocite și eritrocite (spre deosebire de cea standard determinată). pe neutrofile, monocite și eritrocite). Autorii sunt primii care folosesc o combinație de anticorpi CD235a(FITC)/CD59(PE)/CD71(APC). Conform metodei propuse, în momentul analizei datelor, se utilizează o procedură suplimentară de încadrare multiparametrică a celulelor CD71+ și excluderea resturilor, dubletelor din analiza și eliminarea anticorpilor monoclonali legați nespecific.

Punctul cheie este studiul reticulocitelor, care, conform tehnologiei dezvoltate de autori, sunt izolate folosind anticorpi la CD71 și examinate folosind o combinație de trei anticorpi monoclonali CD235a(FITC)/CD59(PE)/CD71(APC) selectați. de către autori. Clona PNH dintre reticulocite reflectă adevărata valoare a clonei PNH, autorii au comparat valorile obținute ale clonelor PNH dintre reticulocite cu valorile obținute folosind o abordare internațională standardizată a diagnosticului PNH. Corelația de volum a reticulocitelor PNH-pozitive cu monocite este de 0,95, cu granulocite - 0,93. Procentul de eritrocite PNH-pozitive conform metodei propuse este măsurat cu o sensibilitate mai mare comparativ cu abordarea standardizată internațională, deoarece folosind metoda propusă se examinează cel puțin 1.000.000 de eritrocite, iar conform ICCS, doar 500.000.

Pentru prima dată, o clonă PNH a fost studiată pe reticulocite folosind o combinație de anticorpi monoclonali CD235a/CD71/CD59, ceea ce a făcut posibilă estimarea dimensiunii acestei clone cu o sensibilitate de 100%.

Ca rezultat, a devenit posibilă screening-ul pentru PNH folosind trei anticorpi monoclonali. Utilizarea unei etape suplimentare de izolare a reticulocitelor și a celulelor „de tăiere” care nu sunt legate în mod specific de anticorpi monoclonali (pe graficul FS vs SS, Fig.) oferă un rezultat precis, care permite confirmarea diagnosticului de PNH pe baza de screening și efectuarea unui tratament adecvat eficient.

Metoda se realizează după cum urmează.

Pentru studiu, sângele venos al pacientului este luat într-o eprubetă cu anticoagulant K 2 EDTA. Eprubeta se livreaza la laborator din camera de tratament a institutiei medicale.

Pentru analiza eritrocitelor și reticulocitelor, sângele integral este diluat într-un tub separat de polistiren. Pentru a dilua cu soluție salină tamponată cu fosfat într-un raport de 1:10, se adaugă 50 μl de sânge integral la 450 μl de soluție salină tamponată cu fosfat și se amestecă bine timp de 5 secunde pe un vortex, apoi se adaugă 40 μl din suspensia celulară rezultată. la un tub etichetat.

O combinație tricoloră de anticorpi monoclonali, CD235a(FITC)/CD59(PE)/CD71(APC), este utilizată pentru colorarea probei. Colorarea se realizează prin adăugarea secvenţială a 3 μl de anticorpi monoclonali marcaţi la probă, după care tubul este agitat timp de 5 secunde pe un vortex. Apoi, incubați timp de 15 minute la întuneric la temperatura camerei.

Apoi celulele sanguine sunt spălate de două ori în 4 ml de soluție salină tamponată cu fosfat în modul de centrifugare timp de 5 minute la o frecvență de 1500 rpm. După fiecare centrifugare, colectați cu atenție supernatantul cu o pipetă, astfel încât celulele să rămână la fundul tubului.

Proba preparată este resuspendată timp de 5 secunde pe un vortex și se adaugă 750 μl de soluție salină tamponată cu fosfat, după care proba este gata pentru analiză pe un citometru de flux.

Apoi, evaluați și înregistrați rezultatele utilizând citometrie în flux multicolor. Analiza poate fi efectuată pe orice citometre de flux echipate cu detectoare pentru cel puțin trei canale fluorescente.

Măsurătorile sunt efectuate pe un citometru de flux BD FACSCanto™ II Becton-Dickinson (SUA).

Evaluarea prezenței sau absenței unei clone PNH pe eritrocite și reticulocite, precum și a dimensiunii clonei PNH, se realizează pe un citometru de flux utilizând un software special.

Pentru a evalua clona PNH printre eritrocite și reticulocite, se construiește un grafic - FSC (log) vs SSC (log), folosind o constrângere logică, o zonă de eritrocite este izolată, excluzând resturile și dubletele (Fig. 1a).

O poartă CD235a+ este apoi construită pe diagrama FSC(log) vs CD235a (FIG. 1b), limitând astfel celulele pozitive și excluzând evenimentele legate nespecific la CD235a (resturi și celule care nu aparțin populației CD235a+).

Evenimentele care intră în poarta CD235a+ sunt analizate pe un grafic CD71 vs FSC(log) (FIG. 1e), care evidențiază populația pozitivă CD71.

Pentru o evaluare obiectivă a clonei PNH printre reticulocite, cel puțin 20.000 de evenimente sunt colectate în poarta CD71+.

În funcție de poarta CD71+, se construiește o diagramă FSC(log) vs SSC(log) (Fig. 1f), pe care reticulocitele sunt izolate folosind o poartă suplimentară CD71str și astfel populația este în cele din urmă curățată de resturi și dublete prin metoda de gating secvenţial.

Apoi, un grafic al CD235a vs CD59 (Fig. 1g) este reprezentat pe porțile CD71str (reticulocite izolate). Pe acest grafic, se disting două zone Norm°Ret și PNH°Ret (Fig. 1g), acestea fiind limitele reticulocitelor normale și, respectiv, PNH-pozitive. Statisticile sunt afișate în valori absolute și % din poartă (FIG. 1d și 1h).

Protocoalele de colectare a datelor sunt configurate o singură dată și mai târziu sunt necesare doar ajustări minore.

Poarta CD235a+ din prima etapă a colectării datelor este o poartă de oprire, adică. colectează 1.000.000 de evenimente. Poarta CD235a+ este aplicată graficului CD235a vs CD59 (FIG. 1c). Dacă nu există mai mult de 10 evenimente în regiunile PNH Tip II și PNH Tip III pe diagrama CD235a vs CD59, colectarea datelor este oprită și se ajunge la concluzia că nu există nicio clonă PNH.

Cu un număr mai mare de evenimente în total în aceste regiuni, studiul continuă.

Clona PNH dintre reticulocite este procentul de reticulocite cărora le lipsește proteina CD59 protectoare.

În prezența reticulocitelor CD59 100% pozitive, se apreciază absența unei clone PNH și se diagnosticează absența hemoglobinuriei nocturne paroxistice.

Dacă la un pacient cu simptome clinice sunt detectate reticulocite CD59 negative și valoarea indicatorilor obținuți este mai mare de 1%, se dă o concluzie diagnostică despre prezența unei clone PNH și, pentru a confirma diagnosticul de hemoglobinurie paroxistică nocturnă, se oferă o concluzie suplimentară. studiul este recomandat conform protocolului internațional standardizat (Michael J. Borowitz, Fiona E. Craig, Joseph A. DiGiuseppe, Andrea J. Illingworth, Wendell Rosse, D. Robert Sutherland, Carl T. Wittwer, Stephen J. Richards. Guidelines for diagnosticul și monitorizarea hemoglobinuriei paroxistice nocturne și a tulburărilor aferente prin citometrie în flux).

Când nu sunt detectate reticulocite CD59 negative și valoarea indicatorilor obținuți este de 0,1-1%, se apreciază prezența unei clone minore de PNH. În acest caz, se recomandă redeterminarea clonei PNH după 6 luni pentru a-i crește valoarea și a dezvolta hemoglobinurie paroxistică nocturnă.

Atunci când această mărime a clonei este confirmată prin citometrie în flux conform protocolului internațional, este diagnosticată o formă subclinică de hemoglobinurie paroxistică nocturnă fără semne clinice sau se apreciază o clonă PNH asociată cu AA și MDS atunci când se pun diagnostice adecvate conform recomandărilor (PNH Internațional). Grup de interes (I-PIG)).

Metoda a trecut testele clinice la Departamentul de Diagnostic de Laborator Clinic RMAPO. Am examinat 572 de pacienți trimiși din diferite spitale cu un diagnostic preliminar sau suspiciune de hemoglobinurie paroxistică nocturnă (PNH), anemie aplastică (AA), sindrom mielodisplazic (MPS), anemie hemolitică autoimună (AIHA), cu vârsta cuprinsă între 12 și 82 de ani.

Toți pacienții au fost diagnosticați conform metodei propuse folosind metoda citometriei în flux multicolore, precum și conform abordării standardizate internaționale.

A fost determinată absența proteinei protectoare CD59 pe membrana reticulocitelor izolate de CD235a (marker paneritrocitar) și CD71 (receptor de transferină) și purificate suplimentar prin gating secvenţial conform parametrilor de dispersie a luminii FS/SS, o corelație ridicată a volumului Clona PNH măsurată printre reticulocite a fost dovedită, conform metodei propuse cu clona PNH printre granulocite și monocite, măsurată conform abordării standardizate internaționale.

Au fost examinate 572 de persoane cu vârsta cuprinsă între 15 și 64 de ani, inclusiv 248 de bărbați și 324 de femei. Din cei 572 de pacienți examinați, clona PNH a fost găsită la 175 de pacienți, valorile au variat de la 0,1% la 99,7% (mediana 41,6%). Printre aceștia, 78 de bărbați și 97 de femei. Toți pacienții au fost supuși unor studii paralele ale clonei PNH conform abordării standardizate internaționale și folosind metoda propusă. Corelația dintre valoarea clonei PNH între reticulocite și granulocite a fost de 0,93, între reticulocite și monocite 0,95, respectiv. Sensibilitatea metodei a fost de 98,9%, specificitatea 99,8%, acuratețea globală 99,7%.

În general, în anemia aplastică și sindromul mielodisplazic, clona PNH este mai mică de 1%. Conform recomandărilor, clonele de această dimensiune ar trebui studiate în dinamică cu o frecvență de 1 dată în 6 luni. Cu o creștere a mărimii clonelor și a semnelor clinice corespunzătoare, vorbim despre diagnosticul de HPN.

Exemplu. Pacientul M., de 34 de ani, se afla sub supravegherea medicului hematolog. După ARVI, a existat o creștere a slăbiciunii, icterului și întunecarea urinei.

Pacientul a fost internat în secția unei instituții medicale (MPU) cu plângeri de slăbiciune și întunecare a urinei.

O examinare planificată a fost efectuată în secția de policlinică a unității de sănătate. O examinare obiectivă a evidențiat icter al pielii și mucoaselor vizibile. Pacienta a fost internată în secția de hematologie cu plângeri de slăbiciune generală, stare generală de rău, dificultăți de respirație, tahicardie, urină închisă la culoare, scădere a hemoglobinei și hematii.

O eprubetă cu o probă de sânge periferic stabilizat cu K 2 EDTA a fost trimisă Departamentului de Diagnostic de Laborator Clinic al Academiei Medicale Ruse de Educație Postuniversitară la centrul de referință pentru studiul PNH pentru a identifica clona PNH prin citometrie în flux. Analiza clonei PNH printre granulocite, monocite și eritrocite a fost realizată conform protocolului internațional, iar studiul clonei PNH a fost realizat folosind metoda propusă pe eritrocite și reticulocite.

Totodată, studiul clonei PNH a fost realizat conform protocolului internațional și conform metodei propuse (repetarea propunerii anterioare!). Conform protocolului internațional, proba a fost colorată pentru a detecta clona PNH printre granulocite, monocite și eritrocite și, conform metodei propuse de autori, pentru a detecta clona PNH printre eritrocite și reticulocite. Conform metodei propuse, proba a fost colorată cu anticorpi monoclonali la CD235a(FITC)/CD59(PE)/CD71(APC) prin introducerea acestora la rândul său în 40 μl de sânge integral diluat 1:10.

După incubare timp de 15 minute la întuneric, celulele au fost spălate de două ori în 4 ml de soluție salină tamponată cu fosfat în modul de centrifugare timp de 5 minute la o frecvență de 1500 rpm.

După fiecare centrifugare, supernatantul a fost îndepărtat, în timp ce celulele au rămas la fundul tubului.

Proba preparată a fost resuspendată timp de 5 secunde pe un vortex și s-au adăugat 750 pl de PBS.

Pentru studiul eritrocitelor și reticulocitelor pe diagrama FSC (log) vs SSC (log), a fost identificată o zonă de eritrocite, cu excepția resturilor și dubletelor.

Apoi, pe graficul FSC(log) vs CD235a, au fost izolate celule pozitive pentru CD235a, excluzând resturile și celulele non-CD235a+ care au legat nespecific anticorpii monoclonali anti-CD235a. Evenimentele incluse în poarta CD235a+ au fost analizate pe graficul CD71 vs FSC (log) și a fost identificată o populație pozitivă pentru CD71.

Pentru o evaluare obiectivă a clonei PNH printre reticulocite din poarta CD71+, au fost colectate cel puțin 20.000 de evenimente.

FSC(log) vs SSC(log) a fost reprezentat grafic în funcție de poarta CD71+. Apoi, folosind o poartă CD71str suplimentară, pe acest grafic a fost izolată o populație de reticulocite, care a fost astfel curățată de resturi și dublete prin trecere secvențială.

În continuare, pe graficul CD235a vs CD59, în funcție de poarta CD71str (reticulocite izolate), reticulocitele au fost evaluate pentru prezența proteinei CD59 asociate cu GPI pe membranele reticulocitelor, respectiv celule PNH-pozitive și, respectiv, PNH-negative. Datele statistice au fost reflectate în valori absolute și % din poartă.

În izolarea reticulocitelor de către CD71 și purificarea ulterioară din resturi, populația de celule CD59 a fost de 97,6%. Astfel, folosind metoda propusă, a fost detectată o clonă PNH.

Studiul conform protocolului internațional de detecție a PNH a confirmat că clona PNH este prezentă pe granulocite, monocite și eritrocite în cantitate de 99,2%, 97,6% și, respectiv, 71,0%, ceea ce indică reproductibilitatea rezultatelor propuse. și metode standard. Acest test a servit drept bază pentru diagnosticul hemoglobinuriei nocturne paroxistice.

Studiile clinice au arătat că metoda propusă are fiabilitate, acuratețe și sensibilitate ridicate (clona PNH 0,1%), vă permite să determinați prezența atât a valorilor ridicate ale clonei la pacienții cu hemoglobinurie paroxistică nocturnă, cât și a valorilor minore ( de la 0,1%) la pacienții cu anemie aplastică, sindrom mielodisplazic. Metoda propusă este ușor de realizat, nu necesită costuri mari de material, un test durează 40-50 de minute.

Tehnica este potrivită pentru screeningul pacienților și este disponibilă pentru instituțiile medicale de diverse profiluri, precum și pentru toate categoriile de cetățeni.

O metodă pentru diagnosticul de laborator al hemoglobinuriei paroxistice nocturne, care include colorarea sângelui integral al pacientului cu anticorpi monoclonali în soluție salină tamponată cu fosfat, incubare, spălarea celulelor sanguine de la anticorpii monoclonali nelegați prin centrifugare, resuspendarea probei finite, apoi evaluarea mărimii clonei sau a acesteia. absența în programul citometrului de flux prin absența sau prezența proteinelor protectoare, caracterizată prin aceea că o combinație tricoloră de anticorpi monoclonali CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) este utilizată pentru colorarea probei de sânge testat, care se adaugă în eprubeta împreună cu proba, prezența unei clone PNH printre eritrocite și reticulocite se evaluează în funcție de absența proteinei protectoare CD59 pe membrana reticulocitelor izolate prin poarta CD235a - un marker paneritrocitar și CD71 - un receptor. pentru transferină, cel puțin 20.000 de evenimente sunt colectate în poarta CD71+ pentru a evalua clona PNH printre reticulocite din poarta CD71+, în funcție de poarta CD71+, este trasat un grafic FSC (log) față de SSC (log), pe care sunt izolate reticulocitele utilizând o poartă suplimentară CD71str, curățând astfel populația de reticulocite de resturi și dublete prin metoda porții secvențiale, valorile obținute ale indicatorilor sunt comparate cu criteriile normale și în prezența a 100% pozitive pentru reticulocite CD59, absența PNH este judecată -clonați și diagnosticați absența bolii hemoglobinuriei paroxistice nocturne, dacă este detectat un pacient cu simptome clinice de reticulocite CD59 negative și valoarea indicatorilor obținuți este mai mare de 1%, ei dau o concluzie diagnostică. despre prezența unei clone PNH și, pentru confirmarea diagnosticului de hemoglobinurie paroxistică nocturnă, se recomandă un studiu suplimentar conform protocolului internațional standardizat, dacă sunt detectate reticulocite CD59-negative și valoarea indicatorilor obținuți este de 0,1-1%, se apreciază prezența unei clone minore de PNH și se recomandă redeterminarea clonei PNH după 6 luni pentru o creștere a valorii acesteia și dezvoltarea hemoglobinuriei paroxistice nocturne, dacă se confirmă această mărime, se diagnostichează clona formă subclinică de hemoglobinurie paroxistică nocturnă. fara semne clinice.

Brevete similare:

Invenția se referă la medicină, și anume la oftalmologie, și poate fi utilizată pentru a diagnostica neuropatia optică ereditară (HON). Pentru a face acest lucru, se efectuează studii clinice și citologice și, în plus, se obține o cultură de fibroblaste cu o densitate de 5000-10000 celule pe cm2 din pielea pacientului, colorată cu colorant fluorescent mitocondrial dependent de tensiune TMRE până la o concentrație finală de 25 nM.

Invenția se referă la medicină și descrie un reactiv chemiluminiscent pentru determinarea prezenței și/sau cantității unui analit într-o probă cu conținutul așteptat de analit, în timp ce reactivul este nedispersabil și solubil într-un mediu apos și conține un partener de legare. pentru analit și o compoziție chemiluminiscentă care conține un compus olefin și un chelat de metal, în care compusul olefin este un compus care este capabil să reacționeze cu oxigenul singlet într-o adiție 2+2 pentru a forma dioxetan sau care este capabil să reacționeze cu oxigenul singlet în o cicloadiție 4+2 cu diene și în care metalul sau chelatul de metal este un metal de pământ rar sau metal din Grupa VIII și în care metalul este coordonat la doi sau mai mulți atomi ai aceleiași molecule sau un agent de chelare, unde doi sau mai mulți atomi sunt selectați din grupul format din oxigen, azot și sulf.

SUBSTANȚA: grupul de invenții se referă la medicină, și anume la imunologie, și poate fi utilizat pentru a determina eficacitatea ex-vivo a tratamentului cancerului. Pentru a face acest lucru, după introducerea uneia sau mai multor doze de compoziție imunogenă la subiect, se măsoară nivelul de limfocite T activate (CD3+ CD69+) în organism.

Invenţia se referă la domeniul biotehnologiei şi poate fi utilizată pentru a determina genotipul uman prin polimorfism în gena metaloproteinazei matriceale MMP9-1562 C>T (rs3918242).

Invenţia se referă la o metodă pentru determinarea activităţii biologice a ouălor embrionare de Trichuris. Metoda caracterizată include efectuarea a cel puțin 3 teste selectate dintre: - evaluarea și/sau confirmarea stadiului de dezvoltare embrionară a ouălor prin intermediul unei metode PCR cantitative folosind secvențe markeri adecvate pentru determinarea numărului de copii ale ADN-ului genomic, - evaluarea activitatea metabolică a ouălor embrionare folosind metode biochimice și/sau biologice moleculare; - evaluarea inductibilității expresiei genelor în ouăle embrionare; - evaluarea motilității larvelor de Trichurs folosind un microscop pe perioade lungi de observare după preincubare la temperaturi ridicate; și/sau - evaluarea ratei de ecloziune a larvelor de Trichuris în corpul unui animal de laborator.

Invenția se referă la medicină, și anume la cardiologie, și poate fi utilizată pentru a prezice riscul de mortalitate cardiovasculară la pacienții cu insuficiență cardiacă cronică postinfarct asociată cu diabet zaharat de tip 2.

Invenţia se referă la medicină, şi anume la oncologie şi biochimie clinică. Esența metodei constă în faptul că celulele sanguine periferice fixe sunt tratate cu anticorpi primari la proteina care leagă estrogenul care interacționează în mod specific cu antigenele de pe suprafața granulocitelor segmentate, apoi anticorpii secundari marcați fluorescent anti-specie sunt adăugați la antigenul rezultat. -complex de anticorpi, iar în prezența colorării suprafeței granulocitelor segmentate sunt diagnosticate cu neoplasme maligne, iar în absența colorării suprafeței granulocitelor segmentate, sunt diagnosticate neoplasme benigne.

Invenția se referă la medicină, și anume la oncologie, și poate fi utilizată pentru a prezice dezvoltarea metastazelor hematogene după tratamentul combinat al cancerului de rinichi.

Invenția se referă la medicină, și anume la obstetrică și ginecologie, și poate fi utilizată pentru a prezice întârzierea creșterii fetale intrauterine. Pentru a face acest lucru, în sângele venos al unei femei în stadiile incipiente ale sarcinii, conținutul relativ de limfocite CD3 + CD16 + 56 +, nivelul componentei C3 a complementului și receptorul solubil al factorului de necroză tumorală (sTNF-R) sunt determinate.

SUBSTANȚĂ: invenția se referă la medicină, și anume la gastroenterologie, și poate fi utilizată pentru diagnosticarea pseudochistului pancreatic postnecrotic purpurant. Pentru a face acest lucru, activitatea fagocitelor este determinată în sângele pacientului de nivelul de expresie al CD 14+/HLA-DR+ prin citometrie în flux și analiză statistică ROC. Când conținutul de CD14+/HLA-DR+ este sub 85%, este diagnosticat un pseudochist pancreatic postnecrotic purpurant. Utilizarea acestei metode face posibilă diagnosticarea unui pseudochist postnecrotic supurant al pancreasului, ceea ce face posibilă determinarea tacticii de gestionare a acestor pacienți și efectuarea alegerii intervenției chirurgicale. 2 ex., 1 filă.

Invenţia se referă la medicină, şi anume la oncohematologie, şi poate fi utilizată pentru a prezice dezvoltarea supravieţuirii fără boală la pacienţii cu mielom multiplu după transplantul autolog de celule stem hematopoietice. Scopul invenției este de a simplifica metoda de predicție a supraviețuirii fără boală la pacienții cu mielom multiplu după AHSCT. O metodă pentru prezicerea supraviețuirii fără recidivă la pacienții cu mielom multiplu după transplantul autolog de celule stem hematopoietice (AHSC) include citometria în flux și evaluarea conținutului relativ al uneia dintre populațiile de limfocite folosind valoarea pragului acesteia. În metoda propusă, după procedura de afereză, înainte de transplant, se determină numărul relativ de celule B CD45+CD19+ din produsul de afereză al pacientului, iar dacă conținutul de celule B CD45+CD19+ este mai mare de 2,5%, o cantitate mai scurtă. perioada de supraviețuire fără recidivă după AHSCT este prezisă, iar dacă conținutul de celule B CD45 +CD19+ mai mic de 2,5% prezice o supraviețuire mai lungă fără recidivă după AHSCT. 1 bolnav.

Invenţia se referă la domeniul medicinei, şi anume la imunologie, şi poate fi utilizată pentru evaluarea reacţiei de transformare a blatului limfocitelor. Pentru aceasta, brucelina este utilizată pentru activarea specifică a limfocitelor. Detectarea formelor blastice de limfocite se realizează folosind anticorpi monoclonali la CD34, urmată de numărarea celulelor prin citometrie în flux. Utilizarea acestei metode permite înregistrarea limfocitelor activate de brucelină în RBTL folosind anticorpi monoclonali CD34 la pacienții cu bruceloză și donatori sănătoși. 1 filă.

Invenţia se referă la medicină, şi anume la imunologie, şi poate fi utilizată pentru detectarea anticorpilor la HLA-G alogenic în serul sanguin. Pentru a face acest lucru, utilizați testul de compatibilitate încrucișată (potrivire încrucișată) celule mononucleare donatoare cu serul primitorului. Subpopulațiile mononucleare sunt analizate prin citofluorometrie în flux pentru legarea anticorpilor monoclonali HLA-G și se evaluează gradul de exprimare a HLA-G pe celulele mononucleare donatoare experimentale și martor. În același timp, sunt semnificative subpopulațiile de CD3-HLA-G+ și CD3+HLA-G+, conform cărora coeficientul de suprimare (KF) se calculează în cadrul experimental în raport cu cel de control după formula: SP HLA- G = (H L A − G O P − H L A − G K O N T) H L A − G K O N T × 100, unde HLA-Gop este numărul relativ total de subpopulații care exprimă HLA-G: (CD3-HLA-G++CD3+HLA-G+) în setare experimentală, %; HLA-Gcont - numărul relativ total de subpopulații care exprimă HLA-G: (CD3-HLA-G++CD3+HLA-G+) în setarea de control, %. În același timp, prezența sensibilizării la HLA-G alogen este diagnosticată cu o valoare negativă a CPHLA-G. Utilizarea acestei metode vă permite să detectați sensibilizarea alogenă la HLA-G folosind citometria în flux, determinând subpopulațiile CD3-HLA-G+ și CD3+HLA-G+. 3 pr., 3 ill., 2 tab.

Invenția se referă la medicină, și anume la obstetrică și ginecologie, și poate fi utilizată pentru a prezice reapariția unui avort spontan amenințat. Pentru a face acest lucru, se efectuează un studiu imunologic al sângelui venos periferic la 7-12 săptămâni de gestație la femeile cu amenințare de avort spontan. După tratamentul amenințării de avort spontan, se determină conținutul relativ de CD45RA-CD62L- în populația de limfocite CD8+. Dacă valoarea sa este mai mare de 23,9%, la femeile cu antecedente de avort spontan recurent este prezisă un avort spontan în al doilea trimestru. Utilizarea acestei metode face posibilă prezicerea reapariției unui avort spontan amenințat în al doilea trimestru de gestație, ceea ce va permite alegerea tacticii potrivite pentru gestionarea unei femei însărcinate și va reduce frecvența acestei complicații. 1 filă, 4 pr.

Invenţia se referă la medicină, şi anume la transfuziologie, şi poate fi utilizată pentru a controla eficienţa iradierii sângelui donatorului. Metoda include stadializarea reacției de transformare blastică a celulelor sanguine cu mitogenul fitohemaglutinină și luarea în considerare a rezultatelor reacției prin determinarea indicelui de stimulare a limfocitelor. Reacția este stabilită în raport cu sângele donator iradiat, rezultatele sunt înregistrate cu ajutorul unui citometru de flux utilizând anticorpi monoclonali marcați cu diferiți fluorocromi, pornind limfocite activate cu expresie redusă a markerului leucocitar comun CD45 și determinând procentul de T- dublu negativ. limfocite cu imunofenotipul CD3+ printre ele.CD4-CD8-, în timp ce o probă neiradiată din același sânge este luată ca martor. După aceea, eficacitatea iradierii este determinată de raportul dintre conținutul de limfocite T dublu negative cu imunofenotipul CD3+CD4-CD8- în sângele de control iradiat testat și același neiradiat ca și limfocitele T negative cu imunofenotip CD3+CD4-CD8- în experiment (în sângele iradiat testat), Sdntlk - procentul de limfocite T dublu negative cu imunofenotipul CD3+CD4-CD8- în control (în proba neiradiată a același sânge). Dacă diferența cu controlul este mai mare de 50%, se face o concluzie despre inferioritatea funcțională a limfocitelor T din sângele iradiat și siguranța imunologică a acestui produs sanguin pentru primitor. Utilizarea acestei metode vă permite să determinați eficacitatea iradierii sângelui donatorului prin citometrie în flux.

Invenția se referă la medicină, și anume la obstetrică și ginecologie, și face posibilă prezicerea unui amenințare de avort spontan la femeile însărcinate. Pentru a face acest lucru, în perioada de 5-12 săptămâni de gestație, se determină numărul relativ de monocite CD178+ de gestație în sângele venos periferic. Cu valoarea sa egală cu 37,7% sau mai puțin într-o poartă monocitară, este prezis un avort spontan întârziat amenințat la femeile cu un avort amenințat la începutul sarcinii și cu antecedente de avort spontan recurent. Folosirea acestei metode vă permite să alegeți tactica potrivită pentru sarcină, să efectuați un set de măsuri terapeutice și preventive și să reduceți riscul de complicații și rezultate adverse ale sarcinii într-un grup de femei cu risc ridicat de avort spontan. 3 pr., 1 filă.

Invenția se referă la medicină, și anume la obstetrică, și se referă la alegerea tacticii pentru gestionarea femeilor însărcinate cu insuficiență placentară și sindrom de întârziere a creșterii fetale (FGR). Pentru a face acest lucru, la pacienții cu insuficiență fetoplacentară și IGR în serul sanguin, activitatea superoxid dismutazei, conținutul factorului de creștere placentară, endoglină și melatonină sunt determinate prin imunotest enzimatic. Pe baza acestor indicatori, coeficientul predictiv P se calculează folosind formula: P=(0,0001*COD+0,0255*Mel+0,1636*CD105+(-0,0487*PGF)-8,5389, unde COD este superoxid dismutază, pg/ml, Mel - melatonină, pg / ml, CD 105 - endoglin, pg / ml, PGF - factor de creștere placentar, pg / ml Cu o valoare P de 0,64 sau mai mult, este prezis un risc ridicat de a dezvolta o stare critică a fătului în perioada antenatală , care impune întreruperea sarcinii prin cezariană de urgență în interesul fătului.

Invenția se referă la medicină, și anume la otolaringologie, și poate fi utilizată pentru diagnosticul expres diferențial al amigdalitei virale și bacteriene acute la adulți. Pentru aceasta, se efectuează prelevarea de probe de sânge periferic și se determină conținutul relativ al subpopulațiilor de granulocite neutrofile care exprimă simultan CD16, CD11b pe membrana de suprafață. Prezența unei subpopulații de CD16brightCD11bdimNG% de la 80 la 99,9% cu o densitate mare de expresie a CD16 și o densitate scăzută de expresie a CD11b este luată ca normă. Dacă o subpopulație de CD16brightCD11bbrightNG sau CD16dimCD11bbrightNG este detectată într-o cantitate de 40% sau mai mult, se determină o infecție virală acută sau, respectiv, o infecție bacteriană acută. Utilizarea acestei metode permite asigurarea acurateții diagnosticului diferențial al amigdalitei virale și bacteriene acute la adulți. 3 pr., 1 filă.

SUBSTANȚA: grupul de invenții se referă la medicină, și anume la diagnosticul de laborator, și poate fi utilizat pentru identificarea simultană a reprezentanților grupurilor taxonomice condiționate de microorganisme patogene pentru oameni și animale. Se caracterizează prin utilizarea a cel puțin cinci teste imunocromatografice pe bandă plasate într-o singură carcasă. În același timp, în primul și al doilea canal al corpului dispozitivului există teste de bandă pentru detectarea toxinelor, în al treilea canal - un test de bandă pentru detectarea formelor vegetative de bacterii, în al patrulea - forme de spori de bacterii și în cel de-al treilea canal. al cincilea - un test pe bandă pentru detectarea mediului nutritiv pentru cultivarea virusurilor.și rickettsia. Testarea se efectuează prin așezarea corpului testelor imunocromatografice pe bandă într-o pungă cephlen termoizolantă, constând din două straturi de cephlen, cu o garnitură termoizolantă din material termoizolant poros între ele și corpul testelor imunocromatografice pe bandă. în interiorul pungii este încălzit de o sursă de căldură constantă, iar deschiderea pungii este închisă cu o clemă mecanică și luați în considerare acest moment începutul testării. De asemenea, este propus un dispozitiv de analiză imunocromatografică. EFECT: grupul de invenții face posibilă creșterea productivității analizei imunocromatografice, extinderea intervalului de temperatură al analizei imunocromatografice de la minus 20 la plus 50°C, reducerea timpului de obținere a unui rezultat la 10 minute comparativ cu analiza la temperatura camerei (20 minute), cu condiția să se realizeze aceeași sensibilitate, pentru a crește sensibilitatea analizei față de analiza efectuată la temperatura camerei. 2 n. și 7 z.p. f-ly, 5 ill., 4 tab., 8 pr.

Invenţia se referă la medicină, şi anume la diagnosticarea de laborator, şi poate fi utilizată pentru a diagnostica hemoglobinuria paroxistică nocturnă. Pentru a face acest lucru, proba de sânge de testat este colorată cu anticorpi monoclonali CD235aCD59CD71. Prezența unei clone PNH printre eritrocite și reticulocite este evaluată prin absența proteinei protectoare CD59 pe membrana reticulocitelor izolate de poarta CD235a - un marker paneritrocitar și CD71 - un receptor pentru transferină. Pentru a evalua clona PNH printre reticulocite, cel puțin 20.000 de evenimente sunt colectate în poarta CD71+, în funcție de poarta CD71+, se construiește o diagramă FSC vs SSC, pe care reticulocitele sunt izolate folosind o poartă suplimentară CD71str, curățând astfel populația de reticulocite de la resturi si dublete prin metoda gating secvential. În prezența a 100 de reticulocite CD59 pozitive, se apreciază absența unei clone PNH și se diagnosticează absența hemoglobinuriei nocturne paroxistice. Dacă la un pacient cu simptome clinice sunt detectate reticulocite CD59 negative și valoarea indicatorilor obținuți este mai mare de 1, se oferă o concluzie diagnostică despre prezența unei clone PNH și se recomandă un studiu suplimentar pentru a confirma diagnosticul de hemoglobinurie paroxistică nocturnă. conform protocolului internațional standardizat. Dacă sunt detectate reticulocite CD59-negative și valoarea indicatorilor obținuți este de 0,1-1, se apreciază prezența unei clone minore de PNH și se recomandă redeterminarea clonei PNH după 6 luni pentru a crește valoarea acesteia și a se dezvolta. hemoglobinurie paroxistică nocturnă, iar dacă o astfel de mărime a clonelor este confirmată, diagnosticați o formă subclinică de hemoglobinurie paroxistică nocturnă fără semne clinice. Utilizarea blocării multiparametrice a celulelor CD71+ face posibilă excluderea resturilor, dubletelor și a anticorpilor monoclonali legați nespecific din analiză. 1 bolnav.

Catad_tema Boli de sange - articole

ICD 10: D61.1, D61.2, D61.3, D61.8, D61.9

Anul aprobării (frecvența revizuirii): 2014 (revizuire la fiecare 2 ani)

ID: KR121

Asociații profesionale:

• Societatea Nationala de Hematologie

Aprobat

Societatea Rusă de Hematologi

De acord

Consiliul științific al Ministerului Sănătății al Federației Ruse __ __________ 201_

Criterii de calitate

Nivelul dovezilor

Măsuri de diagnostic

Efectuați un test de sânge clinic avansat

Au fost efectuate studii morfologice și citochimice ale preparatului măduvei osoase

A fost efectuat un studiu citogenetic al celulelor măduvei osoase

S-a efectuat un studiu morfologic (histologic) al preparatului măduvei osoase

Radiografia toracică și/sau tomografia computerizată a toracelui și a creierului

Criterii de calitate a evenimentului (semantic, continut, proces).

S-a efectuat un studiu morfologic și/sau histologic și/sau citogenetic standard al pregătirii măduvei osoase.

Terapie imunosupresoare combinată efectuată (în absența contraindicațiilor)

Tastarea fratelui HLA a fost finalizată

S-a efectuat un consult la centrul de transplant în termen de 3 luni de la momentul constatării evoluției refractare

Criterii temporare de evaluare a calității

Terapia imunosupresoare a fost efectuată în decurs de 1 lună de la confirmarea histologică și/sau citogenetică a diagnosticului (în absența contraindicațiilor medicale)

Parametrii clinici și hematologici au fost evaluați în timpul terapiei de cel puțin 2 ori pe săptămână până la obținerea unui răspuns hematologic complet.

A fost efectuat un studiu morfologic al pregătirii măduvei osoase cu evaluarea hematopoiezei măduvei osoase după finalizarea programului de terapie

S-a efectuat un studiu citogenetic standard al preparatului măduvei osoase (un studiu a cel puțin 20 de metafaze) și/sau un studiu al măduvei osoase folosind metoda hibridizării fluorescente (dacă studiul citogenetic nu este informativ pentru identificarea anomaliilor caracteristice sindromului mielodisplazic)

O clonă de hemoglobinurie paroxistică nocturnă a fost determinată prin citometrie în flux foarte sensibilă la fiecare 6-12 luni și au fost evaluate semnele clinice și de laborator ale hemolizei.

Examenul morfologic și/sau histologic și/sau citogenetic standard a fost efectuat înainte de următoarea etapă de tratament

A efectuat un al doilea curs de globulină antitimocitară, determinarea tipării HLA (pentru a determina prezența donatorilor de măduvă osoasă alogenă, în absența unui răspuns după 3-6 luni)

Bibliografie

1. Kokhno A.V., Pimenova M.A., Parovichnikova E.N., Domracheva E.V. S.V.G. Identificarea anomaliilor cariotipului ascunse în sindromul mielodisplazic. / S. V. G. Kokhno A. V., Pimenova M. A., Parovichnikova E. N., Domracheva E. V. // Hematologie și transfuziologie - 2014. - V. 59 - Nr. 1 - 25-28s.

1. Kulagin A.D. Anemia aplastică / Kulagin A.D. / ed. K.V.A. Lisukov I.A. - - Novosibirsk: Nauka, 2008. Numărul. Știința.
2. Mihailova E.A. Protocol pentru programul de tratament al pacienților cu anemie aplastică: terapie imunosupresoare combinată / ed. V.G.Savcenko. Moscova: Practică, 2012. - 135-150s.
3. Afable M.G. Evoluția clonală în anemia aplastică. / M. G. Afable, R. V Tiu, J. P. Maciejewski // Hematologie Am. soc. Hematol. Educ. Program - 2011. - T. 2011 - 90-5s.
4. Bacigalupo A. Strategii de tratament pentru pacientii cu anemie aplastica severa. / A. Bacigalupo // Transplant de măduvă osoasă. - 2008. - T. 42 Suppl 1 - Nr SUPPL.1 - S42-S44s.
5. Borowitz M.J. Ghid pentru diagnosticul și monitorizarea hemoglobinuriei paroxistice nocturne și a tulburărilor asociate prin citometrie în flux. / M. J. Borowitz, F. E. Craig, J. A. Digiuseppe, A. J. Illingworth, W. Rosse, D. R. Sutherland, C. T. Wittwer, S. J. Richards // Cytometry B. Clin. Cytom. - 2010. - T. 78 - Nr. 4 - 211-30s.
6. Kulagin A. Valoarea prognostică a prezenței clonelor de hemoglobinurie paroxistică nocturnă la pacienții cu anemie aplastică tratați cu imunosupresie combinată: Rezultatele studiului prospectiv în două centre / A. Kulagin, I. Lisukov, M. Ivanova, I. Golubovskaya, I. Kruchkova, S. Bondarenko, V. Vavilov, N. Stancheva, E. Babenko, A. Sipol, N. Pronkina, V. Kozlov, B. Afanasyev // Br. J. Haematol. - 2014. - T. 164 - Nr. 4 - 546-554s.
7. Marsh J.C.W. Ghid pentru diagnosticul și managementul anemiei aplastice / J. C. W. Marsh, S. E. Ball, J. Cavenagh, P. Darbyshire, I. Dokal, E. C. Gordon-Smith, J. Keidan, A. Laurie, A. Martin, J. Mercieca, S. B. Killick, R. Stewart, J. A. L. Yin // Br. J. Haematol. - 2009. - T. 147 - Nr. 1 - 43-70s.
8. Marsh J.C.W. Ghid pentru diagnosticul și managementul anemiei aplastice. / J. C. W. Marsh, S. E. Ball, J. Cavenagh, P. Darbyshire, I. Dokal, E. C. Gordon-Smith, J. Keidan, A. Laurie, A. Martin, J. Mercieca, S. B. Killick, R. Stewart, J. A. L. Yin / /Br. J. Haematol. - 2009. - T. 147 - Nr. 1 - 43-70s.
9. Marsh J.C.W. Managementul pacientului cu anemie aplastică refractară: care sunt opțiunile? J. C. W. Marsh, A. G. Kulasekararaj - 2014. - T. 122 - 3561-3567s.
10. Scheinberg P. Horse antithymocyte globulin as salvage therapy after rabbit antithymocyte globulin for severe aplastic anemia / P. Scheinberg, D. Townsley, B. Dumitriu, P. Scheinberg, B. Weinstein, O. Rios, C. O. Wu, N. S. Young // Am . J. Hematol. - 2014. - T. 89 - Nr. 5 - 467-469s.
11. Scheinberg P. Cum tratez anemia aplastică dobândită. / P. Scheinberg, N. S. Young // Blood - 2012. - T. 120 - Nr. 6 - 1185-96s.
12. Tânărul N.S. Epidemiologia anemiei aplastice // Eșecul măduvei osoase. Sindr. - 1–46 s.
13. Tânărul N.S. Problema clonalității în anemia aplastică: ghicitoarea doctorului Dameshek, reformulată // Sânge. - 1992. - T. 79. - Nr. 6. - 1385-1392s.
14. Tânărul N.S. Mecanisme fiziopatologice în anemia aplastică dobândită. // Hematologie Am. soc. Hematol. Educ. program. - 2006. - 72–77s.
15. Tânărul N.S. Relația dintre anemie aplastică și HPN. // Int. J. Hematol. - 2002. - T. 76 Suppl 2. - 168-172s.
16. Zeng Y. Fiziopatologia complexă a anemiei aplastice dobândite. / Y. Zeng, E. Katsanis // Clin. Exp. Imunol. - 2015. - T. 180 - Nr. 3 - 361-70s.
17. Vinogradova M.A. Complicații infecțioase la pacienții cu anemie aplastică / Vinogradova M.A. - Moscova: disertație pentru gradul de Candidat în Științe Medicale / Instituția de Stat „Centrul de Cercetare Hematologică al Academiei Ruse de Științe Medicale”, 2009.

Anexa A1. Componența grupului de lucru

Voitsekhovsky V.V. doctor, Blagoveshchensk

Vopilina N.A. GBUZ „Spitalul Clinic Regional Tambov numit după I.I. V.D.Babenko, Tambov

Gaponova T.V. Candidat la științe medicale, director general adjunct al instituției bugetare de stat federale Centrul de cercetare hematologică al Ministerului Sănătății al Rusiei, Moscova

Golubeva M.E. „Centrul hematologic orășenesc” la MBUZ „GKP Nr. 5”, Perm

Kaporskaya T.S. Candidat la științe medicale, șef al departamentului de hematologie, instituția medicală bugetară de stat din Irkutsk, Ordinul Insigna de Onoare, Spitalul Clinic Regional, Irkutsk,

Klyasova G.A. Doctor în științe medicale, profesor, șef al Laboratorului științific și clinic de microbiologie, Instituția bugetară de stat federală Centrul de cercetare hematologică al Ministerului Sănătății al Rusiei, Moscova,

Konstantinova T.S.Șef al Departamentului de Hematologie, Centrul Regional de Hematologie al Spitalului Clinic Regional Sverdlovsk nr. 1, Ekaterinburg,

Kulagin A.D. Doctor în științe medicale, medic șef adjunct al clinicii, Universitatea de Stat de Medicină din Sankt Petersburg. acad. I.P. Pavlova” de la Ministerul Sănătății al Rusiei, Institutul de Cercetare de Hematologie și Transplantologie Pediatrică din Sankt Petersburg, numit după. R.M. Gorbacheva,

Lapin V.A. Candidat la științe medicale, șef al Departamentului de Hematologie, Spitalul Clinic Regional, Yaroslavl

Mihailova E.A. Doctor în științe medicale, profesor, cercetător principal, Departamentul de chimioterapie pentru hemoblastoze și depresii hematopoietice, Instituția bugetară de stat federală Centrul de cercetare hematologică al Ministerului Sănătății al Rusiei, Moscova,

Parovichnikova E.N. Doctor în științe medicale, șef al Departamentului științific și clinic de chimioterapie pentru hemoblastoze, depresii hematopoietice și transplant de măduvă osoasă, Instituția bugetară de stat federală Centrul de cercetare hematologică al Ministerului Sănătății al Rusiei, Moscova,

Ploskikh M.A. GBUZ PC „Spitalul Clinic Regional Perm”, Perm

Savcenko V.G. Academician, doctor în științe medicale, profesor, director general al instituției bugetare de stat federale Centrul de cercetare hematologică al Ministerului Sănătății al Rusiei, Moscova,

Samoilova O.S. Candidat la științe medicale, șef al Departamentului de Hematologie, Spitalul Clinic Regional Nijni Novgorod Regiunea Nijni Novgorod. N.A. Semashko, Nijni Novgorod,

Skripkina N.S. hematolog GAUZ JSC „Spitalul Clinic Regional Amur”, Blagoveșcensk,

Tikunova T.S. OGBUZ „Spitalul Clinic Regional Belgorod Sf. Joasaf”, Belgorod

Troitskaya V.V. Candidat la științe medicale, șef al Departamentului științific și clinic de chimioterapie pentru hemoblastoze și depresii hematopoietice, Instituția bugetară de stat federală Centrul de cercetare hematologică al Ministerului Sănătății al Rusiei, Moscova,

Ustinova E.N. Candidat la științe medicale, cercetător, Departamentul de chimioterapie pentru hemoblastoze și depresii hematopoietice, Instituția bugetară de stat federală Centrul de cercetare hematologică al Ministerului Sănătății al Rusiei, Moscova,

Chagorova T.V. GBUZ „Dispensar regional oncologic”, Penza

Specialisti in hematologie;

oncologi;

terapeuți specialiști;

Metodologia de colectare a probelor

Metode utilizate pentru colectarea/selectarea probelor: căutări în baze de date electronice.

Descrierea metodelor utilizate pentru colectarea/selectarea dovezilor: baza de dovezi pentru recomandări sunt publicațiile incluse în Biblioteca Cochrane, bazele de date EMBASE și MEDLINE. Adâncimea căutării a fost de 10 ani.

Niveluri de dovezi	Descriere
	Meta-analize de înaltă calitate, revizuiri sistematice ale studiilor randomizate controlate (RCT) sau RCT cu risc foarte scăzut de părtinire
	Meta-analize bine efectuate, sistematice sau RCT cu risc scăzut de părtinire
	Meta-analize, sistematice sau RCT cu risc ridicat de părtinire
	Revizuiri sistematice de înaltă calitate ale studiilor caz-control sau de cohortă. Evaluări de înaltă calitate ale studiilor caz-control sau de cohortă cu risc foarte scăzut de efecte de confuzie sau părtinire și probabilitate moderată de cauzalitate
	Studii de caz-control sau de cohortă bine realizate, cu risc moderat de efecte de confuzie sau părtinire și probabilitate moderată de cauzalitate
	studii de caz-control sau de cohortă cu un risc ridicat de efecte de confuzie sau părtiniri și o probabilitate moderată de cauzalitate
	Studii non-analitice (de exemplu: rapoarte de caz, serii de cazuri
	Opinia expertului

Metode utilizate pentru a evalua calitatea și puterea dovezilor:

Consensul experților;

Metode utilizate pentru analiza probelor:

Recenzii sistematice cu tabele de dovezi.

Descrierea metodelor utilizate pentru analiza probelor:

La selectarea publicațiilor ca surse potențiale de dovezi, metodologia utilizată în fiecare studiu este revizuită pentru a asigura validitatea acestuia. Rezultatul studiului afectează nivelul de dovezi atribuit publicației, care, la rândul său, afectează puterea recomandărilor care decurg din aceasta.

Studiul metodologic se bazează pe câteva întrebări cheie care se concentrează pe acele caracteristici ale designului studiului care au un impact semnificativ asupra validității rezultatelor și concluziilor.

Factorul subiectiv poate afecta, fără îndoială, și procesul de evaluare. Pentru a minimiza erorile potențiale, fiecare studiu a fost evaluat independent, adică. cel puțin doi membri independenți ai grupului de lucru. Orice diferențe de evaluări au fost deja discutate de întregul grup. Dacă era imposibil să se ajungă la un consens, a fost implicat un expert independent.

Tabele de dovezi:

tabelele de probe au fost completate de membrii grupului de lucru.

Metode utilizate pentru formularea recomandărilor:

consensul experților.

Indicatori de bune practici (puncte bune - GРРs):

Analiză economică:

Analiza costurilor nu a fost efectuată și nu au fost analizate publicațiile de farmacoeconomie.

Evaluare inter pares externă;

Evaluare inter pare.

	Descriere
	Cel puțin o meta-analiză, o revizuire sistematică sau un RCT evaluat 1++ care este direct aplicabil populației țintă și demonstrează rezultate solide sau un corp de dovezi care include rezultate din studii evaluate ca 1+ care sunt direct aplicabile populației țintă și demonstrează consistența generală a rezultatelor
	un corp de dovezi care include rezultate din studiile evaluate 2++ care sunt direct aplicabile populației țintă și care demonstrează consistența generală a rezultatelor sau dovezi extrapolate din studii evaluate 1++ sau 1+
	un corp de dovezi care include rezultate din studiile evaluate 2+ care sunt direct aplicabile populației țintă și demonstrează consistența generală a rezultatelor; sau dovezi extrapolate din studii evaluate 2++
	Dovezi de nivel 3 sau 4; sau dovezi extrapolate din studii evaluate 2+

Aceste recomandări preliminare au fost revizuite de către experți independenți cărora li s-a cerut să comenteze în primul rând măsura în care interpretarea dovezilor care stau la baza recomandărilor este de înțeles.

Au fost primite comentarii de la medicii primari și terapeuții raionali cu privire la inteligibilitatea prezentării recomandărilor și evaluarea lor asupra importanței recomandărilor ca instrument de lucru pentru practica de zi cu zi.

De asemenea, proiectul a fost trimis unui evaluator non-medical pentru comentarii din perspectiva pacientului.

RCHD (Centrul Republican pentru Dezvoltarea Sănătății al Ministerului Sănătății al Republicii Kazahstan)
Versiune: Protocoale clinice ale Ministerului Sănătății al Republicii Kazahstan - 2015

Hemoglobinurie paroxistică nocturnă [Marchiafava Micheli] (D59.5)

Oncohematologie

Informații generale

Scurta descriere

Recomandat
Consiliul de experti
RSE pe REM „Centrul Republican
dezvoltarea sanatatii"
Ministerul Sanatatii
si dezvoltare sociala
Republica Kazahstan
din 9 iulie 2015
Protocolul #6

Definiție:
Hemoglobinurie paroxistică nocturnă (PNH) este o boală a sângelui sistemică rară, dobândită, care pune viața în pericol și progresivă, caracterizată prin hemoliză intravasculară cronică, insuficiență medulară, un risc crescut de complicații trombotice, insuficiență renală și hipertensiune pulmonară. .

Nume protocol: Hemoglobinurie paroxistică nocturnă la adulți

Cod protocol:

Cod ICD -10:
D59.5 - Hemoglobinurie paroxistică nocturnă.

Data dezvoltării protocolului: 2015

Abrevieri utilizate în protocol:
* - medicamente achiziționate ca parte a unui singur import;
AA - anemie aplastică;
AG - hipertensiune arterială;
BP - tensiunea arterială;
ALAT - alanin aminotransferaza;
ASAT - aspartat aminotransferaza;
HIV - virusul imunodeficienței umane;
GGTP - gamaglutamiltranspeptidază;
ELISA - imunotest enzimatic;
CT - tomografie computerizată;
LDH-lactat dehidrogenază;

MDS - sindrom mielodisplazic;
MPO - mieloperoxidază;
NE - naftilesterază;
KLA - hemoleucograma completă;
PNH - hemoglobinurie paroxistică nocturnă;
sPNH - hemoglobinurie paroxistica subclinica;
TCM - transplant de măduvă osoasă;
UZDG - dopplerografie ultrasonică;
UZDG - dopplerografie ultrasonică;
Ultrasunete - examen cu ultrasunete;
EF - fracția de ejecție;
FGDS - fibrogastroduodenoscopie;
BH - frecvența respiratorie;
HR - ritmul cardiac;
ECG - electrocardiografie;
EchoCG - ecocardiografie;
NMRI - imagistica prin rezonanță magnetică nucleară;
CD - cluster de diferențiere;
HLA - sistem antigen leucocitar uman;
Hb - hemoglobina;
Ht - hematocrit;
Tr - trombocite.

Utilizatori de protocol: terapeuți, medici generaliști, oncologi, hematologi.

Scala nivelului de probe.

Nivelul dovezilor Caracteristicile studiilor care au stat la baza recomandărilor A Metaanaliză de înaltă calitate, revizuire sistematică a studiilor clinice randomizate (RCT) sau RCT mari cu o probabilitate foarte scăzută (++) de părtinire, ale căror rezultate pot fi generalizate la populația adecvată. ÎN Revizuirea sistematică de înaltă calitate (++) a studiilor de cohortă sau caz-control sau a studiilor de cohortă sau caz-control de înaltă calitate (++) cu un risc foarte scăzut de părtinire sau RCT cu un risc scăzut (+) de părtinire, ale căror rezultate pot fi extinse la populația corespunzătoare. CU Studiu de cohortă sau caz-control sau controlat fără randomizare cu risc scăzut de părtinire (+), ale cărui rezultate pot fi generalizate la populația adecvată sau RCT cu un risc foarte scăzut sau scăzut de părtinire (++ sau +), ale căror rezultate nu pot fi distribuite direct populației relevante. D Descrierea unei serii de cazuri sau studiu necontrolat sau Opinia expertului

Clasificare

Clasificare clinică:

Există 3 forme principale de HPN.
1. Forma clasica caracterizat prin semne clinice și de laborator de hemoliză intravasculară fără semne ale altor boli asociate cu insuficiența măduvei osoase (anemie aplastică (AA), sindrom mielodisplazic (MDS), mielofibroză idiopatică).
2. HPN diagnosticată la pacienţii cu AA (AA/PNG), MDS (MDS/PNG)și extrem de rar cu mielofibroză (mielofibroză idiopatică/HNP), atunci când aceste boli au semne clinice și/sau de laborator de hemoliză intravasculară, iar în sângele periferic este detectată o clonă de celule cu fenotip PNH.
3. forma subclinica boli ( AA/sPNH, MDS/sPNH, mielofibroză idiopatică/sPNH), diagnosticat la pacienții fără semne clinice și de laborator de hemoliză, dar în prezența unei clone minore de celule cu fenotip PNH (de obicei<1 %). Следует отметить, что субклиническое течение ПНГ может отмечаться и при большем размере клона.

Izolarea formei subclinice a HPN nu are semnificație clinică independentă, dar este necesară pentru a asigura monitorizarea acestor pacienți din cauza probabilității unei creșteri a dimensiunii clonei și a progresiei hemolizei, care poate domina printre manifestările clinice și necesită o terapie adecvată.
Ținând cont de faptul că forma subclinică a HPN în AA și/sau SMD nu are semnificație clinică independentă.

Forma clasică a PNG.
Pacienții cu HPN clasică au de obicei hemoliză intravasculară severă cu lactat dehidrogenază (LDH) seric crescută, reticulocitoză și niveluri scăzute de haptoglobină. În această variantă de HPN, nu există semne morfologice definitive ale altor patologii ale măduvei osoase (AA, MDS, mielofibroză) iar anomaliile cariotipului nu sunt caracteristice.

PNH pe fondul sindroamelor de insuficiență medulară (AA/PNH, MDS/PNH).
La pacienții cu AA/HPN și MDS/HNP sunt diagnosticate semne clinice și de laborator de hemoliză intravasculară. În diferite stadii de dezvoltare a bolii, pot predomina simptomele insuficienței măduvei osoase sau hemolizei intravasculare, iar în unele cazuri există o combinație a acestora. Deși pacienții cu clone de HNP mici au de obicei simptome minime și doar semne de laborator de hemoliză intravasculară, monitorizarea (de două ori pe an) este necesară. Acest lucru se datorează faptului că, în timp, extinderea clonei este posibilă cu dezvoltarea hemolizei severe și un risc ridicat de complicații trombotice.

Forma subclinica a HPN (AA/sPNH, MDS/sPNH).
Pacienții cu HPN subclinic nu au nicio dovadă clinică sau de laborator de hemoliză. Populațiile mici de celule cu deficit de GPIAP pot fi detectate numai folosind citometrie în flux foarte sensibilă. Forma subclinica a HPN poate fi diagnosticata pe fondul unor afectiuni caracterizate prin afectarea functiei maduvei osoase, in principal AA si MDS.in timp se dezvolta forma hemolitica a AA/PNH.

Diagnosticare

Lista măsurilor de diagnostic de bază și suplimentare:
Principalele examinări diagnostice (obligatorii) efectuate la nivel ambulatoriu:
Hemoleucograma completă (numărarea reticulocitelor într-un frotiu);
Imunofenotiparea sângelui periferic pentru determinarea procentului de HNP a eritrocitelor tipuri I, II și III prin citometrie în flux;
test biochimic de sânge (bilirubină totală, bilirubină directă, LDH);
testul Coombs;
mielograma.

Examinări diagnostice suplimentare efectuate la nivel ambulatoriu:



determinarea concentrației de acid folic și vitamina B12;
· coagulograma;
studiul citogenetic standard al măduvei osoase;
· analiza generală a urinei
ELISA pentru markeri ai hepatitei virale;
ELISA pentru markeri HIV;
ELISA pentru markeri ai virusurilor grupului herpes;
· HLA - tastare;
ECG;
Ecografia organelor abdominale (ficat, splina, pancreas, vezica biliara, ganglioni limfatici, rinichi, la femei - pelvis mic);

Lista minimă de examinări care trebuie efectuate atunci când se face referire la spitalizarea planificată:
test general de sânge (calcularea leucoformulei, trombocitelor și reticulocitelor într-un frotiu);
mielograma;
Grupa de sânge și factorul Rh
test biochimic de sânge (proteine ​​totale, albumină, bilirubină totală, bilirubină directă, creatinina, uree, ALaT, ASAT, GGTP, glucoză, LDH, proteină C reactivă, fosfatază alcalină);
testul Coombs;
Ecografia cavității abdominale și a splinei;
· Ecografia organelor pelvine – pentru femei.

Principalele examinări de diagnostic (obligatorii) efectuate la nivel de spital:

Test de sânge general (calcularea leucoformulei, trombocitelor și reticulocitelor într-un frotiu);
- imunofenotiparea sângelui periferic pentru determinarea procentului de HNP a eritrocitelor tipuri I, II și III prin citometrie în flux;
- test biochimic de sange (bilirubina totala, bilirubina directa, LDH);
- Testul Coombs
- mielograma.
- studiul citogenetic standard al măduvei osoase;
- ELISA pentru markeri ai hepatitei virale;
- ELISA pentru markeri HIV;
- ELISA pentru markeri ai virusurilor grupului herpes;
Radiografia organelor toracice.
Examene suplimentare de diagnostic efectuate la nivel de spital:
determinarea nivelului de haptoglobină.
grupa sanguină și factorul Rh;
Test biochimic de sânge (proteine ​​totale, albumină, bilirubină totală, bilirubină directă, creatinina, uree, ALaT, ASAT, glucoză, LDH, GGTP, proteină C reactivă, fosfatază alcalină);
metabolismul fierului (determinarea nivelului de fier seric, a capacității totale de legare a fierului a serului și a nivelului de feritină);
Determinarea concentrației de acid folic și vitamina B12;
· coagulograma;
· HLA - tastare;
· analiza generală a urinei;
determinarea nivelului de hemosiderine în urină;
testul Reberg-Tareev (determinarea vitezei de filtrare glomerulară);
ECG;
Ecografia organelor abdominale (ficat, splina, pancreas, vezica biliara, ganglioni limfatici, rinichi, la femei - pelvis mic);
radiografie a pieptului;
· Ecografia arterelor si venelor;
ecocardiografie;
FGDS (extinderea venelor esofagului);
monitorizarea zilnică a tensiunii arteriale;
Monitorizare ECG 24 de ore.

Măsuri de diagnostic luate în etapa asistenței medicale de urgență:
colectarea plângerilor și anamneza bolii;
examinare fizică.

Criterii de diagnosticare pentru stabilirea unui diagnostic:

Plângeri și anamneză:
- slăbiciune;
- oboseală rapidă;


- sângerare crescută.

Anamneză: trebuie acordată atenție:
- slăbiciune de lungă durată;
- oboseală rapidă;
- boli infecțioase frecvente;
- atacuri acute de durere în regiunea lombară;
- întunecarea urinei, în principal noaptea și dimineața;
- sindromul Budd-Chiari (tromboza venelor hepatice);
- tromboză de diferite localizări;
- sângerare crescută;
- apariția erupțiilor cutanate hemoragice pe piele și mucoase;
- înregistrare la dispensar pentru AA sau MDS.

Examinare fizică[ 8 ]:
- o combinație de paloare și îngălbenire a pielii;
- erupții cutanate hemoragice - peteșii, echimoze de diverse localizări;
- dificultăți de respirație;
- tahicardie;
- mărirea ficatului;
- marirea splinei.

Cercetare de laborator:
Dacă se suspectează PNH, citometria în flux poate oferi un diagnostic precis. Citometria în flux este cea mai sensibilă și mai informativă metodă.
· Analize generale de sânge: Numărul de reticulocite este de obicei crescut, iar eritrocitele din punct de vedere morfologic nu diferă de norma privind frotiurile de sânge periferic. Din cauza hemolizei, normoblastele sunt adesea prezente în sânge, se observă policromatofilie. Ca urmare a pierderii semnificative de fier în urină, pacienții cu HPN au o mare probabilitate de a dezvolta deficit de fier, iar apoi eritrocitele capătă aspectul caracteristic IDA - hipocromic cu tendință de microcitoză.Numărul de leucocite și trombocite este adesea redus. Se poate observa și pancitopenie de severitate diferită. Cu toate acestea, spre deosebire de anemia aplastică, reticulocitoza apare de obicei împreună cu citopenia.
· Chimia sângelui:În serul sanguin, cantitatea de bilirubină, hemoglobină liberă și methemoglobină este crescută. Există semne de hemoliză intravasculară, adică o scădere sau absență a haptoglobinei, o creștere a LDH și un nivel crescut de hemoglobină liberă și fier în urină. Niveluri scăzute de haptoglobină se observă în mod constant în hemoliza intravasculară, dar și în cazurile de hemoliză extravasculară, în special cronică. Deoarece haptoglobina este, de asemenea, un reactiv de fază acută, scăderea sau absența sa bruscă este cea mai informativă.
· În urină: se pot observa hematurie și proteinurie. Semnele constante de valoare diagnostică sunt hemosiderinuria și detectarea detritusului de sânge în urină.
· Studiu morfologic: Măduva osoasă prezintă hiperplazie eritroidă. Adesea determinată de hipoplazia măduvei osoase, conținut redus de siderocite și sideroblaste.
· Imunofenotiparea: Un semn precoce și de încredere al fenotipului PNH este expresia proteinelor asociate GPI: expresia CD14 și CD48 este determinată pe monocite, CD16 și CD66b pe granulocite, CD48 și CD52 pe limfocite, CD55 și CD59 pe eritrocite, CD55, CD58 .

Cercetare instrumentală:
· Ecografia organelor abdominale: mărirea ficatului, splinei.
· Ecografia arterelor și venelor: tromboza arterelor și venelor
· ECG:încălcarea conducerii impulsurilor în mușchiul inimii.
· EchoCG: semne de insuficiență cardiacă (EF<60%), снижение сократимости, диастолическая дисфункция, легочная гипертензия, пороки и регургитации клапанов.
· CT/RMN pentru întregul corp: detectarea trombozei (cerebrală, portală etc.)
· Scanarea CT a segmentului toracic: modificări infiltrative în țesutul pulmonar, semne de hipertensiune pulmonară.
· FGDS: varice ale esofagului.
· Spirografie: testarea funcției pulmonare.

Indicații pentru consultarea specialiștilor restrânși:
Medic pentru diagnostic și tratament endovascular cu raze X - instalarea unui cateter venos central de la un acces periferic (PICC);
hepatolog - pentru diagnosticul și tratamentul hepatitei virale;
· ginecolog - sarcina, metroragii, menoragii, consultatie la prescrierea contraceptivelor orale combinate;
Dermatovenerolog - sindrom cutanat nr.
medic specialist boli infecțioase - suspiciune de infecții virale;
cardiolog - hipertensiune arterială necontrolată, insuficiență cardiacă cronică, aritmie cardiacă și tulburări de conducere;
· neuropatolog accident cerebrovascular acut, meningita, encefalita, neuroleucemie;
neurochirurg - accident cerebrovascular acut, sindrom de luxație;
nefrolog (eferentolog) - insuficienta renala;
oncolog - suspiciune de tumori solide;
otorinolaringolog - pentru diagnosticul și tratamentul bolilor inflamatorii ale sinusurilor paranazale și ale urechii medii;
Oftalmolog - tulburări de vedere, boli inflamatorii ale ochiului și anexelor;
proctolog - fisura anala, paraproctita;
psihiatru - psihoze;
psiholog - depresie, anorexie etc.;
· resuscitator - tratamentul sepsisului sever, șocului septic, sindromului de leziune pulmonară acută în sindrom de diferențiere și stări terminale, instalare catetere venoase centrale.
reumatolog - sindromul Sweet;
Chirurg toracic - pleurezie exudativă, pneumotorax, zigomicoză pulmonară;
· transfuziolog - pentru selectarea mediilor de transfuzie în cazul testului indirect pozitiv la mantiglobulină, eșec transfuziei, pierdere acută masivă de sânge;
Urolog - boli infecțioase și inflamatorii ale sistemului urinar;
ftiziatru - suspiciune de tuberculoză;
chirurg - complicații chirurgicale (infecțioase, hemoragice);
· chirurg maxilo-facial – boli infecțioase și inflamatorii ale sistemului dento-maxilar.

Diagnostic diferentiat

Diagnostic diferentiat.
Diagnosticul diferențial se realizează cu alte tipuri de anemie hemolitică și cu o variantă citopenică a HNP - cu anemie aplastică.

anemie cu deficit de B-12. Adesea este nevoie de diagnostic diferențial al HPN, care apare cu pancitopenie și hemoliză, din anemie cu deficit de B12 cu sindrom hemolitic. În ambele boli, hemoliza este destul de pronunțată. Diferențele dintre aceste boli sunt prezentate în tabel:

Masa. Diferențele diagnostice diferențiale între anemia cu deficit de B12 și HPN.

semne	anemie cu deficit de B12 cu sindrom hemolitic	HPN cu pancitopenie
Entitate nosologică	Anemia cauzată de o încălcare a formării globulelor roșii și a hemoglobinei din cauza unui deficit de vitamina B-12	Varianta anemie hemolitică dobândită - hemoliză intravasculară, HNP
urină neagră	-	+
Apariția hemosiderinei și a hemoglobinei în urină	-	+
O creștere a conținutului de hemobină liberă din sânge	-	+
indicator de culoare al sângelui	Creștet (anemie hipercromă)	Scăzut (anemie hipocromă)
Conținutul de fier din sânge	Normal sau ușor crescut	Redus
Hematopoieza de tip megaloblastic (conform mielogramei)	caracteristică	nu caracteristic
Neutrofile hipersegmentate în sângele periferic	Caracteristică	nu tipic

Anemie aplastica. Este necesar să se diferențieze AA de PNH atunci când anemia aplastică este însoțită de dezvoltarea sindromului hemolitic. Se știe că hemoglobinuria paroxistică nocturnă se manifestă prin anemie, tendință la leucopenie, trombocitopenie. Astfel, situația de diagnosticare poate fi destul de complicată cu o similitudine pronunțată a simptomelor ambelor boli. De asemenea, trebuie subliniat aici că principalele simptome ale hemoglobinuriei paroxistice nocturne sunt hemosiderinuria și hemoglobinuria, precum și un nivel ridicat de hemoglobină liberă în plasmă. Aceste simptome sunt absente în anemia aplastică. Diagnosticul diferențial al acestor două boli este prezentat în tabel.

Masa. Diferențe de diagnostic diferențial între AA cu hemoliză și HPN.

semne	AA cu hemoliză	PNG
Urina intens închisă (neagră), mai ales noaptea	-	+
Durere în abdomen și regiunea lombară	-	+
Tromboza vaselor periferice ale extremităților, rinichilor și alte localizări	-	+
Mărirea splinei	-	+
Reticulocitoza	-	+
Niveluri ridicate de hemoglobină liberă în sânge	-	+
aplazia măduvei osoase	caracteristică	Se întâmplă rar, mai des există hiperplazia germenului hematopoietic roșu
Hiperplazia țesutului hematopoietic în biopsia cu trefină	-	+
Hemosiderinurie și hemoglobinurie	-	+

Anemia hemolitică autoimună. Datorită prezenței hemoglobinuriei și hemosiderinuriei la pacienți, este necesară diferențierea HPN cu anemie hemolitică autoimună. Principalele diferențe de diagnostic diferențial:
In cazul anemiei hemolitice autoimune, testele zaharozei si Hema sunt negative, in boala Marchiafava-Mikeli sunt pozitive;
În anemia hemolitică autoimună cu hemolizine termice, serul pacientului determină hemoliza eritrocitelor donatorului.

Tratament

Obiectivele tratamentului:
Obținerea și menținerea remisiunii (vezi paragraful 15 - Indicatori ai eficacității tratamentului).

Tactici de tratament:
Tratament non-medicament:
Modul II: protectie generala.
Cura de slabire: Pacienții neutropenici sunt sfătuiți să nu urmeze o dietă specifică ( nivelul probelor B).

Tratament medical.
Algoritmul general pentru tratamentul pacienților cu HPN, în funcție de forma bolii și de severitatea hemolizei, este prezentat în figură.

Algoritm pentru tratamentul pacienților cu HPN.


Terapie cu Eclizumab.
Eculizumab este un anticorp monoclonal umanizat care se leagă de componenta C5 a complementului. Acest lucru previne divizarea C5 în C5a și C5b, inhibând astfel formarea de citokine proinflamatorii (prin C5a) și MAC (prin C5b).
Până în prezent, un studiu multicentric, randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo, TRIUMPH a evaluat eficacitatea eculizumabului în stabilizarea nivelurilor de hemoglobină și reducerea dependenței de transfuzie la 87 de pacienți dependenți de transfuzii cu HPN pe parcursul a 6 luni de terapie.
Studiul a inclus pacienți cu vârsta peste 18 ani care au suferit cel puțin 4 transfuzii de mediu care conține eritrocite în ultimul an, cu o clonă eritrocitară PNH tip III de cel puțin 10%, un nivel de trombocite de cel puțin 100 mii/mcL și o creștere a LDH ³1,5 normal. Toți pacienții au primit un vaccin antimeningococic înainte de inițierea terapiei.
Principalul rezultat al studiului a fost stabilizarea nivelului hemoglobinei la 49% dintre pacienții tratați cu eculizumab (r<0,001) и снижение необходимости в трансфузиях в этой группе до нуля (в группе плацебо за 6 месяцев потребовалось от 6 до 16 трансфузий), а также улучшение качества жизни.
Rezultatele acestui studiu au stat la baza aprobării de către FDA a utilizării eculizumabului pentru HPN dependentă de transfuzii cu hemoliză.
Cercetarea lui R. Hillmen et al. și studiile prospective ulterioare au anumite limitări care fac dificilă extrapolarea rezultatelor sale la toți pacienții cu HPN, care sunt detaliate în raportul FDA și în revizuirea Cochrane a lui Arturo J Martí-Carvajal:
Eficacitatea a fost studiată numai la pacienții cu vârsta peste 18 ani;
· Datele privind pacienții vârstnici sunt, de asemenea, limitate (doar 15 pacienți din studiu aveau peste 65 de ani);
· Studiul a inclus numai pacienţi dependenţi de transfuzii cu hemoliză;
· Un număr mic de pacienți cu episoade trombotice, o frecvență mare de prescriere a profilaxiei anticoagulante nu ne permit să evaluăm efectul eculizumabului asupra riscului de complicații trombotice și să recomandăm ca anticoagulantele să nu fie utilizate la pacienții cărora li se administrează eculizumab. Reducerea relativă a frecvenței episoadelor trombotice pe fondul profilaxiei anticoagulante și al terapiei cu eculizumab este de 81%;
· Chestionarul de calitate a vieții utilizat nu a fost validat pentru pacienții cu HPN și îmbunătățirea calității vieții nu a putut fi asociată decât cu o creștere a nivelului hemoglobinei;
· Perioadă scurtă de urmărire;
Studiul a fost sponsorizat de producătorul medicamentului;
· Nu există date privind efectul eculizumab comparativ cu placebo asupra supraviețuirii globale, riscului de transformare în LMA și SMD. O creștere a supraviețuirii globale a fost demonstrată într-un singur studiu controlat istoric (1997-2004). În 2013, au fost publicate date din trei studii prospective pe 195 de pacienți cu HPN și hemoliză și au arătat o rată de supraviețuire de 97,6% la 36 de luni, dar nu a existat nicio comparație cu grupul placebo.
Date limitate privind utilizarea eculizumab la femeile gravide. Sarcina crește incidența complicațiilor grave ale HPN care pun viața în pericol. Există o mare probabilitate ca eculizumab să traverseze bariera hematoplacentară și laptele matern. Datorită rarității bolii, în prezent nu există studii controlate cu eculizumab la femeile însărcinate. Sunt descrise două cazuri de prescripție de eculizumab la gravide din 4 și 5 săptămâni de gestație cu sarcini ulterioare necomplicate și naștere de copii sănătoși.
· Chiar și cu un tratament de lungă durată, cu o durată de aproximativ 30 de luni, aproximativ 18% dintre pacienți rămân dependenți de transfuzii. O posibilă explicație pentru acest fenomen este participarea la procesele de hemoliză intravasculară a fragmentului de complement C3, care nu este inhibat de eculizumab.

Eculizumab poate fi recomandat pentru includerea în programul de tratament pentru următoarele categorii de pacienţi cu HPN clasică peste 18 ani:
dependență de transfuzii din cauza hemolizei cronice ( nivelul probelor A);
Prezența complicațiilor trombotice nivelul probelorD);
Sarcina la pacientele cu HPN ( nivelul probelorD).

Atunci când se determină indicațiile pentru terapia cu eculizumab, nu trebuie luat în considerare doar nivelul LDH.

Mod de administrare și dozare a eculizumab
Medicamentul se administrează intravenos, picurare, timp de 25-45 de minute - pentru adulți.
Cursul de tratament include un ciclu inițial de 4 săptămâni, urmat de un ciclu de terapie de întreținere. Ciclul inițial este de 600 mg de medicament o dată pe săptămână timp de 4 săptămâni. Terapia de întreținere - 900 mg pentru a 5-a săptămână, urmată de introducerea a 900 mg de medicament la fiecare (14±2) zile.

Hemoliza „recursive”.
Regimul standard de terapie cu eculizumab este suficient pentru blocarea completă și stabilă a hemolizei mediate de complement. La unii pacienti, din cauza
caracteristicile metabolismului medicamentului sau infecțiile pot dezvolta hemoliză „de descoperire”. În această situație, semnele de hemoliză apar în 2-3 zile.
înainte de următoarea injecție de eculizumab. Pacienții pot dezvolta hemoglobinurie, pot reveni la simptomele inițiale (respirație scurtă, slăbiciune, spasm al mușchilor netezi etc.), nevoia de transfuzii, creșterea nivelului de LDH, reticulocite și scăderea nivelului de haptoglobină. Tratamentul hemolizei „recursive” implică reducerea intervalului dintre injecțiile cu eculizumab la 12 zile sau creșterea dozei la 1200 mg pentru 1-2 injecții.

Prevenirea și tratamentul infecției meningococice.
În timpul tratamentului cu eculizumab, este necesar să se controleze apariția simptomelor de infecție și infecții bacteriene în timp util pentru a prescrie antibiotice. La diagnosticarea unei infecții meningococice, următoarea administrare a medicamentului este anulată.
Mecanismul de acțiune al eculizumabului sugerează un risc crescut de boală meningococică ( Neisseria meningitidis) pe fondul utilizării acestuia (nivelul de probă B).
Toți pacienții trebuie vaccinați împotriva meningococului cu 2 săptămâni înainte de începerea tratamentului, precum și revaccinarea între 2,5-3 ani de terapie. Cel mai preferat este un vaccin conjugat tetravalent împotriva serotipurilor A, C, Y şi W135. Dacă este necesar un tratament urgent cu eculizumab la un pacient nevaccinat, este posibil să se inițieze terapia pe fondul unei profilaxii antibiotice adecvate, care ar trebui să continue timp de 2 săptămâni după vaccinarea împotriva infecției meningococice.

Terapie simptomatică.
În tratamentul eculizumabului, terapia simptomatică include administrarea de acid folic (5 mg/zi), vitamina B12 (în caz de deficiență), preparate de fier (în caz de deficiență), anticoagulante (warfarină, heparină cu greutate moleculară mică) pentru trombotice. complicații, transfuzii de produse sanguine în funcție de simptomele clinice, hidratare în timpul dezvoltării unei crize hemolitice. Preparatele de fier trebuie administrate cu prudență din cauza posibilității de creștere a hemolizei.

Terapia anticoagulantă.
După un eveniment trombotic, poate fi recomandată terapia anticoagulantă pe termen lung (pe toată durata vieții) (derivați cumarinici sau heparine). Terapia sindromului Budd-Chiari necesită ca pacientul să fie într-o secție chirurgicală specializată pentru tromboliza locală și sistemică. Terapia anticoagulantă pentru prevenirea primară a trombozei poate fi indicată în cazuri selectate dacă o clonă de PNH este detectată în ≥ 50% din granulocite și există riscuri suplimentare de complicații trombotice, cu excepția pacienților cu aplazie medulară.

suport pentru transfuzii.
Indicații pentru transfuzia de componente sanguine:

Suspensie/masă eritrocitară.
În raport cu suspensia/masa eritrocitară, este necesară selecția după grupa sanguină și factorul Rh;
· în raport cu pacienții cu transfuzii multiple în istorie, este indicat să se selecteze pentru următoarele antigene: Kell, Duffy, Kidd, MNS;
imediat înainte de transfuzia de suspensie/masă eritrocitară, este necesar să se efectueze un test de compatibilitate cu serurile standard;
Praguri la care se consideră nevoia de transfuzie de suspensie/masă eritrocitară: Hb<80 г/мл, Ht <25%;
· calculul volumului maxim de suspensie/masă eritrocitară se determină prin următoarea formulă: Hb (g/dl) x4 x greutatea receptorului (kg).

Concentrat de trombocite.
Concentratul de trombocite trebuie selectat în funcție de grupa sanguină și factorul Rh;
transfuzie de concentrat de trombocite pentru prevenirea sângerării, efectuată la nivelul Tr<10 тыс кл/мкл;
pacienților cu febră febrilă, sângerări ale mucoaselor, se recomandă transfuzarea concentratului de trombocite la nivelul Tr<20 тыс кл/мкл;
La planificarea unei intervenții invazive pentru un pacient, se recomandă transfuzia de concentrat de trombocite la nivelul Tr.<50 тыс кл/мкл;
Doza terapeutică de trombocite recomandată pentru adulți: 3 x 10 11 celule/l într-un volum de 200-300 ml.

Evaluarea eficacității transfuziei:
oprirea sângerării;
determinarea nivelului de trombocite a doua zi - nivel persistent Tr<20 тыс кл/мкл свидетельствует о рефрактерности к трансфузиям;
Cu excluderea tuturor cauzelor trombocitopeniei, este necesar să se testeze prezența anticorpilor anti-leucocitari;
Dacă sunt detectați anticorpi, transfuzia de trombocite trebuie efectuată de la un donator compatibil HLA.

Plasmă proaspătă congelată.
Deoarece FFP conține un complement, transfuziile pot provoca dezvoltarea hemolizei la pacienții cu HPN. Transfuziile de FFP în HPN ar trebui de preferință evitate.

Tratament medical oferit în regim ambulatoriu:
- o listă de medicamente esențiale cu o indicație a formei de eliberare (având o probabilitate de utilizare de 100%):

Medicamente antineoplazice și imunosupresoare
. eculizumab * 300 mg, concentrat pentru soluție perfuzabilă, 10 mg/ml.

· filgrastim, soluție injectabilă 0,3 mg/ml, 1 ml;
Ondansetron, injecție 8 mg/4 ml.

Agenți antibacterieni
azitromicină, comprimat/capsulă, 500 mg;
amoxicilină/acid clavulanic, comprimat filmat, 1000 mg;
moxifloxacină, comprimat, 400 mg;
ofloxacină, tabletă, 400 mg;
comprimat de ciprofloxacină, 500 mg;
metronidazol, tabletă, 250 mg, gel dentar 20g;
eritromicină, comprimat de 250 mg.

anidulafungin, pulbere liofilizată pentru soluție injectabilă, 100 mg/flacon;



Clotrimazol, soluție de uz extern 1% 15ml;

fluconazol, capsulă/comprimat 150 mg.

aciclovir, tableta, 400 mg, gel in tub 100.000 unitati 50g;


famciclovir comprimate 500 mg

Soluții utilizate pentru a corecta încălcările echilibrului apei, electroliților și acido-bazici

· dextroza, solutie pentru perfuzii 5% 250ml;
Clorura de sodiu, solutie perfuzabila 0,9% 500 ml.

Heparină, injectare 5000 UI/ml, 5 ml; (pentru spălarea cateterului)

comprimat de rivaroxaban
· acid tranexamic, capsula/tableta 250 mg;

Ambroxol, soluție orală și inhalabilă, 15mg/2ml, 100ml;

atenolol, comprimat 25 mg;



Drotaverină, comprimat 40 mg;


levofloxacină, comprimat, 500 mg;

Lisinopril comprimat 5 mg
metilprednisolon, comprimat, 16 mg;

omeprazol 20 mg capsulă;

prednisolon, comprimat, 5 mg;
Smectită dioctaedrică, pulbere pentru suspensie orală 3,0 g;

Torasemid, comprimat de 10 mg;
fentanil, sistem terapeutic transdermic 75 mcg/h; (pentru tratamentul durerii cronice la pacienții cu cancer)

Tratament medical acordat la nivel de spital:
- o listă de medicamente esențiale cu o indicație a formei de eliberare (având o probabilitate de utilizare de 100%):

Eculizumab * 300 mg, concentrat pentru soluție perfuzabilă, 10 mg/ml.

- o listă de medicamente suplimentare cu indicarea formei de eliberare (probabilitate de utilizare mai mică de 100%):

Medicamente care reduc efectul toxic al medicamentelor anticanceroase
. filgrastim, injecție 0,3 mg/ml, 1 ml;
. ondansetron, injecție 8 mg/4 ml.

Agenți antibacterieni
azitromicină, comprimat/capsulă, 500 mg, pulbere liofilizată pentru soluție pentru perfuzie intravenoasă, 500 mg;
Amikacin, pulbere pentru soluție injectabilă, 500 mg/2 ml sau pulbere pentru soluție injectabilă, 0,5 g;
Amoxicilină / acid clavulanic, comprimat filmat, 1000 mg, pulbere pentru soluție pentru injecție intravenoasă și intramusculară 1000 mg + 500 mg;
Vancomicină, pulbere/liofilizat pentru soluție perfuzabilă 1000 mg;
· gentamicina, solutie injectabila 80mg/2ml 2ml;
imipinem, cilastatină pulbere pentru soluție perfuzabilă, 500 mg/500 mg;
Colistimetat de sodiu*, liofilizat pentru soluție perfuzabilă 1 milion U/flacon;
comprimat metronidazol, 250 mg, solutie perfuzabila 0,5% 100ml, gel dentar 20g;
Levofloxacină, soluție perfuzabilă 500 mg/100 ml, comprimat 500 mg;
linezolid, soluție perfuzabilă 2 mg/ml;
Meropenem, liofilizat/pulbere pentru soluție injectabilă 1,0 g;
moxifloxacină, comprimat 400 mg, soluție perfuzabilă 400 mg/250 ml
ofloxacină, comprimat 400 mg, soluție perfuzabilă 200 mg/100 ml;
piperacilină, tazobactam pulbere pentru soluție injectabilă 4,5 g;
· tigeciclină*, pulbere liofilizată pentru soluţie injectabilă 50 mg/flacon;
Ticarcilină/acid clavulanic, pulbere liofilizată pentru soluție perfuzabilă 3000mg/200mg;
cefepimă, pulbere pentru soluție injectabilă 500 mg, 1000 mg;
cefoperazonă, sulbactam pulbere pentru soluție injectabilă 2 g;
· ciprofloxacină, soluție perfuzabilă 200 mg/100 ml, 100 ml, comprimat 500 mg;
eritromicină, comprimat 250 mg;
Ertapenem liofilizat, pentru soluție pentru injecții intravenoase și intramusculare 1 g.

Medicamente antifungice
Amfotericină B*, pulbere liofilizată pentru soluție injectabilă, 50 mg/flacon;
anidulofungin, pulbere liofilizată pentru soluție injectabilă, 100 mg/flacon;
voriconazol pulbere pentru soluție perfuzabilă 200 mg/flacon;
comprimat de voriconazol, 50 mg;
· itraconazol, soluţie orală 10 mg/ml 150,0;
Caspofungină, liofilizat pentru soluție perfuzabilă 50 mg;
clotrimazol, crema de uz extern 1% 30g, solutie de uz extern 1% 15ml;
· micafungină, pulbere liofilizată pentru soluție injectabilă 50 mg, 100 mg;
fluconazol, capsulă/comprimat 150 mg, soluție perfuzabilă 200 mg/100 ml, 100 ml.

Medicamente antivirale
aciclovir, cremă pentru uz extern, 5% - 5,0, comprimat - 400 mg, pulbere pentru soluție perfuzabilă, 250 mg;
Valaciclovir, comprimat, 500 mg;
valganciclovir, comprimat, 450 mg;
· ganciclovir*, liofilizat pentru soluţie perfuzabilă 500 mg;
famciclovir, comprimate, 500 mg №14.

Medicamente utilizate pentru pneumocistoză
sulfametoxazol/trimetoprim, concentrat pentru soluție perfuzabilă (80mg+16mg)/ml, 5ml;
sulfametoxazol/trimetoprim comprimat 480 mg.

Medicamente imunosupresoare suplimentare:
Dexametazonă, injecție 4 mg/ml 1 ml;
metilprednisolon, comprimat de 16 mg, injecție de 250 mg;
Prednisolon, injectare 30 mg/ml 1 ml, comprimat 5 mg.

Soluții utilizate pentru a corecta încălcările echilibrului de apă, electroliți și acido-bazici, nutriția parenterală
albumină, soluție perfuzabilă 10%, 100 ml;
albumină, soluție perfuzabilă 20% 100 ml;
· apă pentru preparate injectabile, soluție injectabilă 5 ml;
· dextroza, solutie pentru perfuzii 5% - 250m, 5% - 500ml; 40% - 10 ml, 40% - 20 ml;
· clorură de potasiu, soluţie pentru administrare intravenoasă 40 mg/ml, 10 ml;
· gluconat de calciu, soluție injectabilă 10%, 5 ml;
· clorură de calciu, soluție injectabilă 10% 5 ml;
Sulfat de magneziu, injectare 25% 5 ml;
Manitol, injecție 15% -200,0;
· clorură de sodiu, soluție perfuzabilă 0,9% 500ml;
· clorură de sodiu, soluție perfuzabilă 0,9% 250ml;
Soluție perfuzabilă de clorură de sodiu, clorură de potasiu, acetat de sodiu într-un flacon de 200 ml, 400 ml;
· clorură de sodiu, clorură de potasiu, acetat de sodiu soluție perfuzabilă 200ml, 400ml;
Soluție perfuzabilă clorură de sodiu, clorură de potasiu, bicarbonat de sodiu 400ml;
L-alanină, L-arginină, glicină, L-histidină, L-izoleucină, L-leucină, L-lizină clorhidrat, L-metionină, L-fenilalanină, L-prolină, L-serină, L-treonină, L-triptofan , L-tirozină, L-valină, acetat de sodiu trihidrat, glicerofosfat de sodiu pentihidrat, clorură de potasiu, clorură de magneziu hexahidrat, glucoză, clorură de calciu dihidrat, emulsie amestec ulei de măsline și soia pentru inf.: recipiente cu trei camere 2 l
hidroxietil amidon (pentaamidon), soluție perfuzabilă 6% 500 ml;
Complex de aminoacizi, emulsie de infuzie care conține un amestec de uleiuri de măsline și soia în raport de 80:20, o soluție de aminoacizi cu electroliți, o soluție de dextroză, cu un conținut total de calorii de 1800 kcal 1 500 ml recipient din trei bucăți.

Medicamente utilizate pentru terapie intensivă (medicamente cardiotonice pentru tratamentul șocului septic, relaxante musculare, vasopresoare și anestezice):
Aminofilina, injectare 2,4%, 5 ml;
· amiodarona, injectabil, 150 mg/3 ml;
atenolol, comprimat 25 mg;
Besilat de atracuriu, soluție injectabilă, 25 mg/2,5 ml;
atropină, soluție injectabilă, 1 mg/ml;
diazepam, soluție pentru administrare intramusculară și intravenoasă 5 mg/ml 2 ml;
dobutamina*, injectare 250 mg/50,0 ml;
· dopamină, soluţie/concentrat pentru soluţie injectabilă 4%, 5 ml;
insulina obișnuită;
· ketamină, soluție injectabilă 500 mg/10 ml;
· morfină, soluție injectabilă 1% 1ml;
norepinefrină*, injecție 20 mg/ml 4,0;
· bromură de pipecuronium, pulbere liofilizată pentru preparat injectabil 4 mg;
propofol, emulsie pentru administrare intravenoasă 10 mg/ml 20 ml, 10 mg/ml 50 ml;
bromura de rocuroniu, solutie pentru administrare intravenoasa 10 mg/ml, 5 ml;
tiopental de sodiu, pulbere pentru soluție pentru administrare intravenoasă 500 mg;
· fenilefrină, soluție injectabilă 1% 1ml;
fenobarbital, comprimat 100 mg;
imunoglobulină umană normală, soluție perfuzabilă;
Epinefrină, injecție 0,18% 1 ml.

Medicamente care afectează sistemul de coagulare a sângelui
Acid aminocaproic, soluție 5% -100 ml;
Complex coagulant anti-inhibitor, pulbere liofilizată pentru soluție injectabilă, 500 UI;
Heparină, injectare 5000 UI/ml, 5 ml, gel în tub 100000 UI 50g;
burete hemostatic, dimensiune 7*5*1, 8*3;
Nadroparină, injectare în seringi preumplute, 2850 UI anti-Xa/0,3 ml, 5700 UI anti-Xa/0,6 ml;
Enoxaparină, soluție injectabilă în seringi 4000 anti-Xa UI/0,4 ml, 8000 anti-Xa UI/0,8 ml.

Alte medicamente
bupivacaină, injecție 5 mg/ml, 4 ml;
Lidocaină, soluție injectabilă, 2%, 2 ml;
Procaina, injectare 0,5%, 10 ml;
soluție normală de imunoglobulină umană pentru administrare intravenoasă 50 mg/ml - 50 ml;
· omeprazol, capsulă 20 mg, pulbere liofilizată pentru soluție injectabilă 40 mg;
famotidină, pulbere liofilizată pentru soluție injectabilă 20 mg;
Ambroxol, injectabil, 15 mg/2 ml, soluție orală și inhalabilă, 15 mg/2 ml, 100 ml;
amlodipină 5 mg comprimat/capsulă;
acetilcisteină, pulbere pentru soluție orală, 3 g;
Dexametazonă, picături oftalmice 0,1% 8 ml;
Difenhidramină, injecție 1% 1 ml;
Drotaverină, injecție 2%, 2 ml;
captopril, comprimat 50 mg;
· ketoprofen, soluție injectabilă 100 mg/2 ml;
· lactuloză, sirop 667g/l, 500 ml;
Levomicetină, sulfadimetoxină, metiluracil, unguent de uz extern trimecaină 40g;
Lisinopril comprimat 5 mg
· metiluracil, unguent de uz local în tub 10% 25g;
nafazolină, picături nazale 0,1% 10ml;
nicergolină, liofilizat pentru prepararea unei soluții injectabile 4 mg;
povidonă-iodă, soluție de uz extern 1 l;
salbutamol, solutie pentru nebulizator 5mg/ml-20ml;
Smectitedioctahedral, pulbere pentru suspensie pentru administrare orală 3,0 g;
spironolactonă, capsulă 100 mg;
Tobramicină, picături oftalmice 0,3% 5 ml;
Torasemid, comprimat de 10 mg;
· tramadol, soluție injectabilă 100 mg/2 ml;
Tramadol, soluție orală (picături) 100 mg/1 ml 10 ml;
fentanil, sistem terapeutic transdermic 75 mcg/h (pentru tratamentul durerii cronice la bolnavii de cancer);
acid folic, tabletă, 5 mg;
furosemid, soluție injectabilă 1% 2 ml;
cloramfenicol, sulfadimetoxină, metiluracil, unguent de uz extern trimecaină 40g;
Clorhexidină, soluție 0,05% 100ml;
Cloropiramină, injectare 20 mg/ml 1 ml.

Tratamentul medicamentos oferit în stadiul de îngrijire de urgență: nerealizate.

Alte tipuri de tratament:
Alte tipuri de tratament oferite la nivel ambulatoriu: nu se aplica.

Alte tipuri furnizate la nivel staționar:

Transplant de măduvă osoasă (nivel de evidență B)
Indicațiile pentru MTC în HPN sunt similare cu anemiei aplastice severe.
În timp ce eculizumab poate controla hemoliza intravasculară și complicațiile asociate ale HPN, în primul rând dependența de transfuzii, transplantul alogen de măduvă osoasă (BMT) rămâne singurul tratament definitiv pentru această boală. Cu toate acestea, MTC este asociată cu o mortalitate ridicată. Astfel, într-un studiu retrospectiv pe 26 de pacienți cu HPN din Italia care au primit BMT, rata de supraviețuire la 10 ani a fost de 42%, iar probabilitatea de supraviețuire la 2 ani la 48 de pacienți care au primit BMT de la un frate identic cu HLA, conform Registrul Internațional de Transplant de Măduvă Osoasă, a fost de 56%. Indiferent de indicația pentru BMT, rata complicațiilor rămâne foarte mare. Frecvența bolii grefă contra gazdă la pacienții cu HPN este de 42-54%, jumătate dintre pacienți dezvoltă boală hepatică veno-ocluzivă, negrefă sau respingere și, în plus, riscul de extindere a clonei PNH rămâne. . TCM și complicațiile asociate afectează negativ calitatea vieții pacienților.

Alte tipuri de tratament oferite în etapa asistenței medicale de urgență: nu se aplica.

Caracteristici ale managementului pacientelor gravide.
Sarcina cu HPN este asociată cu un nivel ridicat de mortalitate maternă și infantilă (11,6%, respectiv 7,2%).
În prezent, au fost descrise doar cazuri izolate de terapie cu eculizumab în timpul sarcinii cu un rezultat favorabil pentru mamă și făt. Nu există efecte teratogene ale medicamentului. În timpul sarcinii, terapia cu eculizumab nu trebuie întreruptă. Dacă pacienta nu a primit anterior eculizumab, medicamentul poate fi prescris în timpul sarcinii. În acest caz, terapia cu eculizumab trebuie continuată timp de 3 luni după naștere. În cazurile de hemoliză „de dezvoltare” în timpul sarcinii, poate fi necesară ajustarea dozei de medicament (de exemplu, terapie de întreținere de 900 mg pe săptămână).

Intervenție chirurgicală:
Intervenție chirurgicală asigurată în regim ambulatoriu: nerealizate.

Intervenția chirurgicală efectuată într-un spital:
Odată cu dezvoltarea complicațiilor infecțioase și a sângerărilor care pun viața în pericol, pacienții sunt supuși intervențiilor chirurgicale conform indicațiilor de urgență.

Management suplimentar:
In timpul terapiei cu eculizumab se recomanda urmatoarele analize de laborator: un test clinic de sange cu determinarea reticulocitelor, LDH, creatinina sanguina, peptida natriuretica cerebrala B (daca este posibil), D-dimer, fier seric, feritina, test antiglobulina directa. Controlul mărimii clonei PNH este efectuat pe baza rezultatelor citometriei în flux extrem de sensibile.
La pacienții cărora li se administrează eculizumab, există o creștere semnificativă statistic a dimensiunii clonei PNH. În studiul TRIUMPH, pe parcursul a 26 de săptămâni, clona PNH eritrocitară de tip III a crescut de la 28,1% la 56,9%, în timp ce nu a existat nicio schimbare în grupul placebo. În cazul întreruperii tratamentului cu eculizumab, este necesară monitorizarea mărimii clonei PNH, a nivelului de reticulocite, haptoglobină, LDH, bilirubină, D-dimeri pentru detectarea în timp util a hemolizei și prevenirea potențialelor complicații.

Indicatori de eficacitate a tratamentului:
Un sistem specific de evaluare a răspunsului la terapie în HPN nu a fost încă dezvoltat. Atunci când evaluați efectul tratamentului, luați în considerare:
· manifestări clinice – slăbiciune;
nivelul hemoglobinei;
nevoia de transfuzii de componente sanguine;
episoade trombotice;
Activitatea hemolizei (nivelul reticulocitelor, LDH, haptoglobina).

Medicamente (substanțe active) utilizate în tratament

Burete hemostatic

Azitromicină (Azitromicină)

Albumină umană (albumină umană)

Ambroxol (Ambroxol)

Amikacin (Amikacin)

Acid aminocaproic (acid aminocaproic)

Aminoacizi pentru nutriție parenterală + Alte medicamente (emulsii de grăsimi + Dextroză + Multimineral)

Aminofilină (Aminofilină)

Amiodarona (Amiodarona)

Amlodipină (Amlodipină)

Amoxicilină (Amoxicilină)

Amfotericina B (Amfotericina B)

Anidulafungin (Anidulafungin)

Complexul coagulant antiinhibitor (complexul coagulant antiinhibitor)

Atenolol (Atenolol)

Atracurium besylate (Atracurium besylate)

Atropină (atropină)

Acetilcisteină (acetilcisteină)

Aciclovir (Aciclovir)

Bupivacaina (Bupivacaina)

Valaciclovir (Valaciclovir)

Valganciclovir (Valganciclovir)

Vancomicina (Vancomicina)

Apă pentru injecție (apă pentru injecție)

Voriconazol (Voriconazol)

Ganciclovir (Ganciclovir)

Gentamicină (Gentamicină)

Heparina de sodiu (Heparina de sodiu)

Amidon hidroxietil (amidon hidroxietil)

Dexametazonă (Dexametazonă)

Dextroză (Dextroză)

Diazepam (Diazepam)

Difenhidramină (Difenhidramină)

Dobutamina (Dobutamina)

Dopamina (Dopamina)

Drotaverină (Drotaverinum)

Imipenem (Imipenem)

Imunoglobulină umană normală (Imunoglobulină umană normală)

Itraconazol (Itraconazol)

Clorura de potasiu (Clorura de potasiu)

Gluconat de calciu (gluconat de calciu)

Clorura de calciu (Clorura de calciu)

Captopril (Captopril)

Caspofungin (Caspofungin)

Ketamina

Ketoprofen (Ketoprofen)

Acid clavulanic

Clotrimazol (Clotrimazol)

Colistimetat de sodiu (Colistimetat de sodiu)

Complex de aminoacizi pentru nutriția parenterală

Concentrat de trombocite (CT)

Lactuloză (Lactuloză)

Levofloxacină (Levofloxacină)

Lidocaina (Lidocaina)

Lisinopril (Lisinopril)

Linezolid (Linezolid)

Sulfat de magneziu (sulfat de magneziu)

Manitol (manitol)

Meropenem (Meropenem)

Metilprednisolon (Metilprednisolon)

Metiluracil (Dioxometiltetrahidropirimidină) (Metiluracil (Dioxometiltetrahidropirimidină))

Metronidazol (Metronidazol)

Micafungin (Micafungin)

Moxifloxacină (Moxifloxacină)

Morfina (Morfina)

Nadroparina de calciu (Nadroparina de calciu)

Acetat de sodiu

Bicarbonat de sodiu (hidrocarbonat de sodiu)

Clorura de sodiu (Clorura de sodiu)

Nafazolina (Nafazolina)

Nicergoline (Nicergolina)

Noradrenalina (Noradrenalina)

Omeprazol (Omeprazol)

Ondansetron (Ondansetron)

Ofloxacină (Ofloxacină)

Bromură de pipecuroniu (bromură de pipekuroniyu)

Piperacilină (piperacilină)

Plasmă, proaspăt congelată

Povidonă - iod (Povidonă - iod)

Prednisolon (Prednisolon)

Procaina (Procaina)

Propofol (Propofol)

Rivaroxaban (Rivaroxaban)

Bromură de rocuroniu (Rocuronium)

Salbutamol (Salbutamol)

Smectită dioctaedrică (smectită dioctaedrică)

Spironolactonă (Spironolactonă)

Sulbactam (Sulbactam)

Sulfadimetoxina (Sulfadimetoxina)

Sulfametoxazol (Sulfametoxazol)

Tazobactam (Tazobactam)

Tigeciclina (tigeciclina)

Ticarcilină (Ticarcilină)

Tiopental-sodiu (Thiopental sodiu)

Tobramicină (Tobramicină)

Torasemid (Torasemid)

Tramadol (Tramadol)

Acid tranexamic (acid tranexamic)

Trimecaină (Trimecaină)

Trimetoprim (Trimetoprim)

Famotidină (Famotidină)

Famciclovir (Famciclovir)

Fenilefrină (Fenilefrină)

Fenobarbital (Fenobarbital)

fentanil (fentanil)

Filgrastim (Filgrastim)

Fluconazol (Fluconazol)

Acid folic

Furosemid (Furosemid)

Cloramfenicol (Cloramfenicol)

Clorhexidina (Clorhexidina)

Cloropiramină (Cloropiramină)

Cefepime (Cefepime)

Cefoperazonă (Cefoperazone)

Cilastatin (Cilastatin)

Ciprofloxacin (Ciprofloxacin)

Eculizumab (Eculizumab)

Enoxaparina de sodiu (Enoxaparina de sodiu)

Epinefrină (Epinefrină)

Eritromicină (Eritromicină)

masa eritrocitară

Suspensie de eritrocite

Ertapenem (Ertapenem)

Grupe de medicamente în funcție de ATC utilizate în tratament

Spitalizare

Indicatii pentru spitalizare:
Indicații pentru spitalizarea de urgență:
HPN nou diagnosticată;
complicații trombotice;
criza hemolitică;
neutropenie febrilă.

Indicații pentru spitalizarea planificată:
Examinarea, determinarea tacticilor pentru tratament ulterioar;
Transplant alogen de măduvă osoasă.

Prevenirea

Acțiuni preventive: Nu.

informație

Surse și literatură

1. Procesele-verbale ale ședințelor Consiliului de experți al RCHD MHSD RK, 2015
   1. Referințe: 1. Scottish Intercollegiate Guidelines Network (SIGN). SIGN 50: un manual pentru dezvoltatori de ghiduri. Edinburgh: SIGN; 2014. (publicația SIGN nr. 50). . Disponibil la adresa URL: http://www.sign.ac.uk 2. Kulagin A.D., Lisukov I.A., Ptushkin V.V., Shilova E.R., Tsvetaeva N.V., Mikhailova E. A. Ghiduri clinice naționale pentru diagnosticul și tratamentul hemoglobinuriei paroxistice nocturne, Oncohematology 2/2014 p.20-28 3. Parker C., Omine M., Richards S. și colab. Diagnosticul și managementul hemoglobinuriei paroxistice nocturne. Blood 2005; 106:3699–709. 4. de Latour R. P., Mary J. Y., Salanoubat C. et al. Hemoglobinurie paroxistică nocturnă: istoria naturală a subcategoriilor de boală. Sânge 2008; 112:3099–106. 5. Brodsky R. A. Cum tratez hemoglobinuria paroxistică nocturnă. Sânge 2009; 113:6522-7. 6. Movalia M. K., Weitz I., Lim S. H., Illingworth A. Incidența clonelor PNH prin codul de diagnostic utilizând citometria în flux de înaltă sensibilitate. Blood (ASH Annual Meeting Abstracts) 2011; 118:1033. 7. Wanachiwanawin W., Siripanyaphinyo U., Piyawattanasakul N., Kinoshita T. Un studiu de cohortă al naturii clonelor paroxistice de hemoglobinurie nocturnă și mutații PIG-A la pacienții cu anemie aplastică. Eur J. Haematol 2006; 76:502–9. 8. Hematologie; Cel mai recent ghid. Sub redacția generală a Doctorului în Științe Medicale. Profesorii K.M. Abdulkadirov. Moscova: Editura Eksmo; Sankt Petersburg: Editura Sova, 2004; 294-299. 9. Borowitz M. J., Craig F. E., Digiuseppe J. A. et al. Ghid pentru diagnosticul și monitorizarea hemoglobinuriei paroxistice nocturne și a tulburărilor asociate prin citometrie în flux. CytometryB Clin Cytom 2010; 78(4):211–30. 10. Schubert J., Alvarado M., Uciechowski P. et al. Diagnosticul hemoglobinuriei nocturne paroxistice folosind imunofenotiparea celulelor sanguine periferice. Br J Haematol 1991; 79:487–92 11. Okorokov A. N. Diagnosticul bolilor organelor interne, Volumul 4, Diagnosticul bolilor sistemului sanguin. Editura: M: Literatură medicală 2001. p.67, p.100, p.163. 12. Gardner A, Mattiuzzi G, Faderl S, Borthakur G, Garcia-Manero G, Pierce S, Brandt M, Estey E. Comparație randomizată a dietelor gătite și negătite la pacienții care urmează terapie de inducție a remisiunii pentru leucemia mieloidă acută. J ClinOncol. 10 decembrie 2008; 26(35):5684-8. 13. Carr SE, Halliday V. Investigarea utilizării dietei neutropenice: un sondaj al dieteticienilor din Marea Britanie. Dieta J Hum Nutr. 2014 aug 28. 14. Boeckh M. Dieta neutropeică-bună practică sau mit? Transplant de măduvă sanguină Biol. 2012 septembrie; 18(9):1318-9. 15. Trifilio, S., Helenowski, I., Giel, M. şi colab. Sub semnul întrebării rolul unei diete neutropenice în urma transplantului de celule stem hematopoietice. Transplant de măduvă sanguină Biol. 2012; 18:1387–1392. 16. DeMille, D., Deming, P., Lupinacci, P. și Jacobs, L.A. Efectul dietei neutropenice în ambulatoriu: un studiu pilot. Oncol Nurs Forum. 2006; 33: 337–343 17. Hillman P., Hall C., Marsh J. C. și colab. Efectul eculizumabului asupra hemolizei și nevoilor de transfuzie la pacienții cu hemoglobinurie paroxistică nocturnă. N Engl J Med 2004; 350:552–9. 18. Hillmen P., Young N. S., Schubert J. și colab. Inhibitorul complementului eculizumab în hemoglobinuria paroxistică nocturnă N Engl J Med 2006;355:1233–43. 19. Brodsky R. A., Young N. S., Antonioli E. et al. Studiu multicentric de fază 3 al inhibitorului complementului eculizumab pentru tratamentul pacienților cu hemoglobinurie paroxistică nocturnă. Sânge 2008; 111(4):1840–7. 20. Kelly R. J., Hill A., Arnold L. M. și colab. Tratament de lungă durată cu eculizumab în hemoglobinuria paroxistică nocturnă: eficacitate susținută și supraviețuire îmbunătățită.Blood 2011; 117:6786-92. 21. Hillmen P., Muus P., Roth A. et al. Siguranța și eficacitatea pe termen lung a tratamentului susținut cu eculizumab la pacienții cu hemoglobinurie paroxistică nocturnă Br J Haemotol 2013;162(1):62–73. 22. Dmytrijuk A, Robie-Suh K, Cohen MH, Rieves D, Weiss K, Pazdur R. Raport FDA: eculizumab (Solis) pentru tratamentul pacientilor cu hemoglobinurie paroxistica nocturna Oncolog. 2008 septembrie; 13(9):993-1000. 23. Martí-Carvajal AJ, Anand V, Cardona AF, Solà I. Eculizumab pentru tratarea pacienților cu hemoglobinurie paroxistică nocturnă. Baza de date Cochrane Syst Rev. 30 octombrie 2014; 10:CD010340. 24. Kelly R, Arnold L, Richards S, Hill A, Bomken C, Hanley J, Loughney A, Beauchamp J, Khursigara G, Rother RP, Chalmers E, Fyfe A, Fitzsimons E, Nakamura R, Gaya A, Risitano AM, Schubert J, Norfolk D, Simpson N, Hillmen P. Managementul sarcinii în hemoglobinuria nocturnă paroxistică pe eculizumab pe termen lung. British Journal of Hematology.2010; 149:446-450. 25. Risitano AM. Hemoglobinuria paroxistică nocturnă și sistemul complementului: perspective recente și strategii anticomplementare noi Adv Exp Med Biol. 2013; 735:155-72. 26. Hemoglobinurie Nocturnă paroxistică (HPN). Recomandări ale societății pentru diagnosticul și terapia bolilor hematologice și oncologice, 2012. www.dgho-onkopedia.de 27. Hall C., Richards S., Hillmen P. Profilaxia primară cu warfarină previne tromboza în hemoglobinuria paroxistică nocturnă (PNH). Blood 2003; 102:3587–91. 28. Santarone S., Bacigalupo A., Risitano A. M. et al. Transplantul de celule stem hematopoietice pentru hemoglobinuria paroxistica nocturnă: rezultatele pe termen lung ale unui studiu retrospectiv din partea Grupului Italiano Trapianto Midollo Osseo (GITMO). Haematologica 2010; 95:983-8. 29. Saso R., Marsh J., Cevreska L. et al. Transplant de măduvă osoasă pentru hemoglobinuria paroxistică nocturnă. Br J Haematol 1999; 104:392-6. 30. de Latour R. P., Schrezenmeier H., Mary J-Y. et al. Transplant de celule stem pentru hemoglobinuria paroxistică nocturnă: un studiu comun în curs de desfășurare al Grupului AAWP EBMT și al Societății Franceze de Hematologie (EBMTabstract 316). Transplant de măduvă osoasă 2009; 43(Suppl 1):57–8. 31. Armitage J. O. Transplant de măduvă osoasă. N Engl J Med 1994; 330:827–38. 32. Benavides Lopez E. Expansiunea clonală a PNH după transplant de măduvă osoasă: raport de caz. Haematologica 2011; 96:524. 33. Fraser C. J., Bhatia S., Ness K. și colab., Impactul bolii cronice grefă-versus-gazdă asupra stării de sănătate a supraviețuitorilor transplantului de celule hematopoietice: un raport de la Studiul de supraviețuitor al transplantului de măduvă osoasă Blood 2006; 108:2867–73. 34. Bieri S., Roosnek E., Helg C. et al.Calitatea vieții și integrarea socială după SCT hematopoietic alogen. Transplant de măduvă osoasă 2008; 42:819-27.

informație

Lista dezvoltatorilor de protocol cu ​​date de calificare:

1) Kemaikin Vadim Matveyevich - Candidat la Științe Medicale, SA „Centrul Științific Național de Oncologie și Transplant”, șef al Departamentului de Oncohematologie și Transplant de Măduvă Osoasă.
2) Klodzinsky Anton Anatolyevich - Candidat la Științe Medicale, SA „Centrul Științific Național de Oncologie și Transplantologie”, Hematolog, Departamentul de Oncohematologie și Transplant de Măduvă Osoasă.
3) Ramazanova Raigul Mukhambetovna - doctor în științe medicale, profesor al SA „Universitatea Medicală Kazahă de Educație Continuă”, șef al cursului de hematologie.
4) Gabbasova Saule Telembaevna - RSE pe REM „Institutul Kazah de Cercetare de Oncologie și Radiologie”, șef al departamentului de hemoblastoze.
5) Karakulov Roman Karakulovich - Doctor în Științe Medicale, Profesor, Academician al MAI RSE pe REM „Institutul Kazah de Cercetare de Oncologie și Radiologie”, Cercetător șef al Departamentului de Hemoblastoze.
6) Tabarov Adlet Berikbolovich - Șeful Departamentului de Management al Inovării al RSE pe REM „Spitalul Administrației Centrului Medical al Președintelui Republicii Kazahstan”, farmacolog clinician, medic pediatru.
7) Rapilbekova Gulmira Kurbanovna, doctor în științe medicale. SA „Centrul Științific Național pentru Maternitate și Copilărie” - șef al secției de obstetrică nr. 1.

Indicarea lipsei de conflict de interese: absent.

Recenzători:
1) Afanasiev Boris Vladimirovici - doctor în științe medicale, director al Institutului de Cercetări Științifice de Oncologie, Hematologie și Transplant Pediatric, numit după R.M. Gorbacheva, șeful Departamentului de Hematologie, Transfuziologie și Transplantologie al Instituției de Învățământ General al Bugetului de Stat de Învățământ Profesional Superior, Universitatea Medicală de Stat Prima din Sankt Petersburg. I.P. Pavlova.
2) Rakhimbekova Gulnar Ayapbekkyzy - doctor în științe medicale, profesor, Centrul Medical Științific Național SA, șef de departament.
3) Pivovarova Irina Alekseevna - Doctor în Medicina, Master în Administrarea Afacerilor, Hematolog șef independent al Ministerului Sănătății și Dezvoltării Sociale al Republicii Kazahstan.

Indicarea condițiilor de revizuire a protocolului: revizuirea protocolului după 3 ani și/sau când apar noi metode de diagnostic și/sau tratament cu un nivel de evidență mai ridicat.

Fișiere atașate

Atenţie!

• Prin auto-medicație, puteți provoca vătămări ireparabile sănătății dumneavoastră.
• Informațiile postate pe site-ul web MedElement și în aplicațiile mobile „MedElement (MedElement)”, „Lekar Pro”, „Dariger Pro”, „Boli: ghidul unui terapeut” nu pot și nu trebuie să înlocuiască o consultație în persoană cu un medic. Asigurați-vă că contactați unitățile medicale dacă aveți boli sau simptome care vă deranjează.
• Alegerea medicamentelor și dozajul acestora trebuie discutate cu un specialist. Doar un medic poate prescrie medicamentul potrivit și doza acestuia, ținând cont de boala și de starea corpului pacientului.
• Site-ul web MedElement și aplicațiile mobile „MedElement (MedElement)”, „Lekar Pro”, „Dariger Pro”, „Diseases: Therapist's Handbook” sunt exclusiv resurse de informare și referință. Informațiile postate pe acest site nu trebuie folosite pentru a schimba în mod arbitrar rețetele medicului.
• Editorii MedElement nu sunt responsabili pentru nicio daune aduse sănătății sau daune materiale rezultate din utilizarea acestui site.

Hemoglobinuria paroxistică nocturnă, cunoscută și sub denumirea de boala Strübing-Marchiafave, boala Marchiafava-Micheli, este o boală rară, o patologie progresivă a sângelui care amenință viața pacientului. Este una dintre soiurile de anemie hemolitică dobândită, cauzată de încălcări ale structurii membranelor eritrocitare. Celulele defecte sunt supuse unei descompunere prematură (hemoliză) care are loc în interiorul vaselor. Boala este de natură genetică, dar nu este considerată moștenită.

Frecvența de apariție este de 2 cazuri la 1 milion de persoane. Incidența este de 1,3 cazuri la un milion de persoane pe parcursul anului. Se manifestă preponderent la persoanele cu vârsta cuprinsă între 25-45 de ani, dependența incidenței de sex și rasă nu a fost identificată. Există cazuri izolate de boală la copii și adolescenți.

Important: vârsta medie de depistare a bolii este de 35 de ani.

Cauzele bolii

Cauzele și factorii de risc pentru dezvoltarea bolii sunt necunoscute. S-a stabilit că patologia este cauzată de o mutație a genei PIG-A situată în brațul scurt al cromozomului X. Factorul mutagen nu a fost încă identificat. În 30% din cazurile de hemoglobinurie paroxistică nocturnă, există o legătură cu o altă boală a sângelui - anemia aplastică.

Formarea, dezvoltarea și maturarea celulelor sanguine (hematopoieza) are loc în măduva osoasă roșie. Toate celulele sanguine specializate sunt formate din așa-numitele celule stem, nespecializate, care și-au păstrat capacitatea de a se diviza. Formate ca urmare a diviziunilor și transformărilor succesive, celulele sanguine mature intră în fluxul sanguin.

Mutația genei PIG-A chiar și într-o singură celulă duce la dezvoltarea PNH. Deteriorarea genei modifică și activitatea celulelor în procesele de menținere a volumului măduvei osoase, celulele mutante se înmulțesc mai activ decât cele normale. În țesutul hematopoietic, se formează destul de rapid o populație de celule care produc celule sanguine defecte. În același timp, clona mutantă nu aparține formațiunilor maligne și poate dispărea spontan. Cea mai activă înlocuire a celulelor normale ale măduvei osoase cu cele mutante are loc în procesele de recuperare a țesutului măduvei osoase după leziuni semnificative cauzate, în special, de anemie aplastică.

Deteriorarea genei PIG-A duce la deteriorarea sintezei proteinelor de semnalizare care protejează celulele corpului de efectele sistemului complement. Sistemul de complement este proteine ​​plasmatice specifice care oferă protecție generală imunitară. Aceste proteine ​​se leagă de globulele roșii deteriorate și le topesc, iar hemoglobina eliberată este amestecată cu plasma sanguină.

Clasificare

Pe baza datelor disponibile cu privire la cauzele și caracteristicile modificărilor patologice, se disting mai multe forme de hemoglobinurie paroxistică nocturnă:

1. Subclinic.
2. Clasic.
3. Asociat cu tulburări ale hematopoiezei.

Forma subclinica a bolii este adesea precedata de anemie aplastica. Nu există manifestări clinice ale patologiei, cu toate acestea, prezența unui număr mic de celule sanguine defecte este detectată numai în studii de laborator.

Pe o notă. Există opinia că HPN este o boală mai complexă, a cărei primă etapă este anemia aplastică.

Forma clasică continuă cu manifestări ale simptomelor tipice, în sângele pacientului există populații de eritrocite defecte, trombocite și unele tipuri de leucocite. Metodele de cercetare de laborator confirmă distrugerea intravasculară a celulelor alterate patologic, tulburările hematopoiezei nu sunt detectate.

După bolile transferate, care duc la insuficiența hematopoiezei, se dezvoltă a treia formă de patologie. Un tablou clinic pronunțat și liza intravasculară a eritrocitelor se dezvoltă pe fondul leziunilor măduvei osoase.

Există o clasificare alternativă, conform căreia disting:

1. De fapt PNG, idiopatic.
2. Dezvoltându-se ca sindrom concomitent în alte patologii.
3. Dezvoltarea ca o consecință a hipoplaziei măduvei osoase.

Severitatea evoluției bolii în diferite cazuri nu este întotdeauna interconectată cu numărul de eritrocite defecte. Sunt descrise ambele cazuri de curs subclinic cu un conținut de celule modificate care se apropie de 90%, cât și cazuri extrem de severe, cu o înlocuire de 10% din populația normală.

Dezvoltarea bolii

În prezent, se știe că în sângele pacienților cu hemoglobinurie paroxistică nocturnă pot fi prezente în sânge trei tipuri de eritrocite cu sensibilitate diferită la distrugerea de către sistemul complement. Pe lângă celulele normale, în fluxul sanguin circulă eritrocitele, a căror sensibilitate este de câteva ori mai mare decât în ​​mod normal. În sângele pacienților diagnosticați cu boala Marchiafava-Micheli au fost găsite celule a căror sensibilitate la complement a fost de 3-5 și de 15-25 de ori mai mare decât în ​​mod normal.

Modificările patologice afectează și alte celule sanguine, și anume trombocitele și granulocitele. La apogeul bolii, pancitopenia este detectată la pacienți - un conținut insuficient de celule sanguine de diferite tipuri.

Severitatea manifestării bolii depinde de raportul dintre populațiile de celule sanguine sănătoase și defecte. Conținutul maxim de eritrocite hipersensibile la hemoliza dependentă de complement este atins în 2-3 ani de la momentul mutației. În acest moment, apar primele simptome tipice ale bolii.

Patologia se dezvoltă de obicei treptat, debutul crizei acute este rar. Exacerbările se manifestă pe fondul menstruației, al stresului sever, al bolilor virale acute, al intervenției chirurgicale, al tratamentului cu anumite medicamente (în special, cele care conțin fier). Uneori boala este exacerbată prin utilizarea anumitor alimente sau fără un motiv aparent.

Există dovezi ale manifestărilor bolii Marchiafava-Micheli din cauza expunerii.

Dizolvarea celulelor sanguine în grade diferite la pacienții cu hemoglobinurie nocturnă paroxistică stabilită are loc în mod constant. Perioadele de flux moderat sunt intercalate cu crize hemolitice, distrugerea masivă a globulelor roșii, ceea ce duce la o deteriorare bruscă a stării pacientului.

În afara crizei, pacienții sunt îngrijorați de manifestările de hipoxie generală moderată, cum ar fi dificultăți de respirație, atacuri de aritmie, slăbiciune generală și toleranța la efort se agravează. În timpul unei crize se manifestă dureri abdominale, localizate mai ales în buric, în partea inferioară a spatelui. Urina devine neagră, cea mai întunecată porțiune este dimineața. Motivele acestui fenomen nu au fost încă stabilite definitiv. Cu PNH se dezvoltă o ușoară pastositate a feței, se observă îngălbenirea pielii și a sclerei.

Pe o notă! Un simptom tipic al bolii este colorarea urinei. Aproximativ jumătate din cazurile cunoscute de boală nu se manifestă.

În perioadele dintre crize, pacienții pot prezenta:

• anemie;
• tendință la tromboză;
• mărirea ficatului;
• manifestări ale distrofiei miocardice;
• tendinta la inflamatie de origine infectioasa.

Când celulele sanguine sunt distruse, se eliberează substanțe care cresc coagularea, ceea ce provoacă tromboză. Poate că formarea cheagurilor de sânge în vasele ficatului, rinichilor, vaselor coronare și cerebrale este, de asemenea, afectată, ceea ce poate duce la moarte. Tromboza localizată în vasele ficatului duce la creșterea dimensiunii organului. Încălcările fluxului sanguin intrahepatic implică modificări distrofice ale țesutului. Odată cu blocarea sistemului venei porte sau a venelor splinei, se dezvoltă splenomegalia. Tulburările metabolismului azotului sunt însoțite de disfuncții ale mușchilor netezi, unii pacienți se plâng de dificultăți de înghițire, spasme ale esofagului, disfuncția erectilă este posibilă la bărbați.

Important! Complicațiile trombotice ale HPN afectează predominant venele, tromboza arterială este rară.

Video - Hemoglobinurie paroxistică nocturnă

Mecanisme de dezvoltare a complicațiilor HPN

Criza hemolitică se manifestă prin următoarele simptome:

• durere abdominală acută cauzată de tromboze multiple ale venelor mezenterice mici;
• icter crescut;
• durere în regiunea lombară;
• scăderea tensiunii arteriale;
• creșterea temperaturii corpului;
• colorarea urinei cu negru sau maro închis.

În cazuri rare, se dezvoltă un „rinichi hemolitic”, o formă specifică tranzitorie de insuficiență renală, însoțită de anurie acută. Datorită funcției excretorii afectate, compușii organici care conțin azot se acumulează în sânge, care sunt produsele finale ale descompunerii proteinelor, și se dezvoltă azotemia. După ce pacientul iese din criză, conținutul de elemente formate din sânge este restabilit treptat, icterul și manifestările de anemie dispar parțial.

Cea mai frecventă variantă a evoluției bolii este o criză, presărată cu perioade de stare satisfăcătoare stabilă. La unii pacienți, perioadele dintre crize sunt foarte scurte, insuficiente pentru a restabili compoziția sângelui. Acești pacienți dezvoltă anemie persistentă. Exista si o varianta a fluxului cu debut acut si crize frecvente. În timp, crizele devin mai puțin frecvente. În cazuri deosebit de severe, este posibil un rezultat fatal, care este cauzat de insuficiența renală acută sau tromboza vaselor care hrănesc inima sau creierul.

Important! Regularitățile zilnice în dezvoltarea crizelor hemolitice nu au fost dezvăluite.

În cazuri rare, boala poate avea și un curs lung calm, sunt descrise cazuri izolate de recuperare.

Diagnosticare

În stadiile incipiente ale bolii, diagnosticul este dificil din cauza manifestării unor simptome nespecifice disparate. Uneori este nevoie de câteva luni de observație pentru a pune un diagnostic. Simptomul clasic - colorarea specifica a urinei - apare in timpul crizelor si nu la toti pacientii. Motivele suspiciunii de boala Marchiafava-Micheli sunt:

• deficit de fier de etiologie necunoscută;
• tromboză, dureri de cap, accese de durere în partea inferioară a spatelui și a abdomenului fără un motiv aparent;
• anemie hemolitică de origine necunoscută;
• topirea celulelor sanguine, însoțită de pancitopenie;
• complicații hemolitice asociate cu transfuzia de sânge proaspăt de la donator.

În procesul de diagnosticare, este important să se stabilească faptul că eritrocitelor intravasculare cronice și să se identifice semnele serologice specifice ale HPN.

În complexul de studii, dacă se suspectează hemoglobinurie paroxistică nocturnă, pe lângă analizele generale de urină și sânge, se efectuează următoarele:

• determinarea conținutului de hemoglobină și haptoglobină din sânge;
• imunofenotiparea prin citometrie în flux pentru a identifica populațiile de celule defecte;
• teste serologice, în special testul Coombs.

Este necesar un diagnostic diferențial cu hemoglobinurie și anemie de altă etiologie, în special, ar trebui exclusă anemia hemolitică autoimună. Simptomele comune sunt anemia, icterul, creșterea bilirubinei în sânge. Mărirea ficatului sau/și a splinei nu este observată la toți pacienții

semne	hemolitic autoimun anemie	PNG
Testul Coombs	+	-
Conținut crescut de gratuit hemoglobina în plasma sanguină	-	+
Testul Hartmann (zaharoză)	-	+
Testul sunca (acid)	-	+
Hemosiderină în urină	-	+
Tromboză	±	+
hepatomegalie	±	±
Splenomegalie	±	±

Rezultatele testului Hartman și Hem sunt specifice pentru HPN și sunt cele mai importante caracteristici de diagnostic.

Tratament

Ameliorarea crizei hemolitice se realizează prin transfuzii repetate de masă eritrocitară, decongelate sau spălate în prealabil de mai multe ori. Se crede că sunt necesare cel puțin 5 transfuzii pentru a obține un rezultat stabil, cu toate acestea, numărul de transfuzii poate diferi de medie și este determinat de severitatea stării pacientului.

Atenţie! Este imposibil să transfuzi sânge fără pregătire preliminară la astfel de pacienți. Transfuzia de sânge la donator exacerba cursul crizei.

Pentru eliminarea simptomatică a hemolizei, pacienților li se poate prescrie nerobol, dar după întreruperea medicamentului, sunt posibile recidive.

În plus, sunt prescrise acid folic, fier, hepatoprotectori. Odată cu dezvoltarea trombozei, se folosesc anticoagulante cu acțiune directă și heparină.

În cazuri extrem de rare, pacientului i se arată splenectomie - îndepărtarea splinei.

Toate aceste măsuri sunt de susținere, ameliorează starea pacientului, dar nu elimină populația de celule mutante.

0

Anemia aplastică este o boală rară a sistemului sanguin caracterizată prin pancitopenie în sângele periferic și măduva osoasă hipocelulară (până la aplazie completă), cu înlocuirea țesutului hematopoietic activ cu țesut adipos. Prima descriere a bolii, făcută de P. Ehrlich, se referă la 1888.

Boala apare in majoritatea regiunilor Europei si Americii cu o frecventa de 2-3 cazuri pe an la 1 milion de populatie. Incidența anemiei aplastice este de 2-3 ori mai mare în Asia de Est. Se remarcă două vârfuri de incidență: la vârsta de 10 până la 25 de ani și la persoanele de peste 60 de ani fără diferențe semnificative pe sex. O formă rară este anemia aplastică congenitală - anemia Fanconi, care în majoritatea cazurilor se manifestă ca o boală autosomal recesivă.

Etiologie și patogeneză
Etiologia bolii în 70-80% din cazuri este necunoscută (forme idiopatice), iar în alte cazuri, apariția anemiei aplastice este asociată cu diverși factori chimici, fizici, infecții (anemie aplastică post-hepatită, forme asociate cu citomegalovirus). , infecție cu parvovirus etc.).

Cele mai frecvente sunt formele dobândite de anemie aplastică, dar până la 15-20% din cazurile bolii pot fi variante constituționale/congenitale (anemie Fanconi, anemie asociată cu diskratoză), însoțită de diverse anomalii citogenetice. Exista si o varianta de anemie aplastica asociata cu hemoglobinurie paroxistica nocturna.

Principalul mecanism patogenetic pentru dezvoltarea aplaziei hematopoietice în anemia aplastică este afectarea mediată imun a celulei stem hematopoietice. În același timp, nu sunt excluse un defect funcțional în celulele stem hematopoietice și patologia micromediului hematopoietic.

Dovada proceselor imune active în măduva osoasă a pacienților cu anemie aplastică este o creștere a conținutului de limfocite T mature și activate, celule cu fenotipul supresor-ucigaș, inversarea raportului helper-supresor, detectată în mod natural în acest grup de pacientii.

Caracterizat printr-o creștere a nivelului de citokine care afectează negativ procesele de hematopoieză, cum ar fi IFNu, IL-2, factorul de necroză tumorală (TNFα). În același timp, aparent, un mecanism de declanșare necontrolat îmbunătățit al apoptozei dependente de Fas a celulelor hematopoietice joacă, de asemenea, un rol semnificativ în dezvoltarea bolii. Pentru pacienții cu anemie aplastică, o deficiență a factorilor care reglează hematopoieza nu este de obicei caracteristică.Există anumite relații patogenetice între anemie aplastică, hemoglobinurie paroxistică nocturnă și sindrom mielodisplazic, a cărui natură încă nu este complet clară. Anemia aplastică se poate transforma în cele din urmă în hemoglobinurie paroxistică nocturnă și sindrom mielodisplazic. PNH-clona de dimensiuni mici, fără semne de hemoliză, este detectată, conform studiilor recente, la 50-70% dintre pacienții cu anemie aplastică. Clonele cu anomalii citogenetice, în lipsa unor dovezi în favoarea sindromului mielodisplazic, pot fi determinate la unii pacienţi cu anemie aplastică.

Tabloul clinic
În funcție de severitatea cursului, de mortalitatea precoce ridicată în rândul pacienților cu anemie aplastică severă și de complexitatea tratamentului, această categorie este comparabilă cu grupul de pacienți cu leucemie acută. Mortalitatea fără tratament în primele 6 luni în formele severe de anemie aplastică ajunge la 50% sau mai mult. Cauzele morții pacienților sunt progresia bolii și dezvoltarea complicațiilor infecțioase hemoragice și severe.

Manifestările clinice ale bolii se datorează în principal prezenței sindromului anemic și hemoragic. Pacienții cu anemie aplastică se caracterizează prin grade variate de paloare a pielii și a mucoaselor vizibile. De regulă, pe piele și mucoase există hemoragii de diferite dimensiuni - de la puncții mici la cele confluente. Adesea există hemoragii în fundul ochiului, retină, care este însoțită de o scădere a acuității vizuale. Hemoragiile pe membranele mucoase ale cavității bucale pot fi însoțite de simptome de stomatită, necroză a țesuturilor moi. În formele severe ale bolii cu manifestări hemoragice severe, sunt posibile hemoragii în peretele intestinal. În acest din urmă caz, va exista un tablou clinic corespunzător: sindrom de durere, balonare și sensibilitate la palpare, tulburări ale peristaltismului. În același timp, la unii pacienți (până la 20% în medie), în timpul examinării inițiale nu se observă manifestări hemoragice vizibile.Modificări ale sistemului cardiovascular se manifestă prin tahicardie, extinderea limitelor inimii, tonuri înfundate ale inimii, suflu sistolic pe suprafața inimii.

Limfadenopatia, hepato- și splenomegalia nu sunt tipice pentru anemia aplastică. Cu granulocitopenia profundă, există o tendință crescută de a dezvolta complicații infecțioase și inflamatorii-necrotice.

Debutul acut în anemie aplastică se observă la 12-15% dintre pacienți și se însoțește de febră, durere în gât necrotică, sângerări nazale, gingivale, uterine pronunțate, apariția de hemoragii multiple la nivelul pielii și mucoaselor. La peste 80% dintre pacienți, boala se dezvoltă treptat cu manifestări în creștere ale sindromului anemic și hemoragic.

Cu anemie Fanconi, de obicei detectată la o vârstă fragedă, pot fi determinate anomalii ale scheletului, pigmentarea pielii - pete de culoare „cafea cu lapte”.

Cercetare de laborator
Hemoleucograma completă arată de obicei pancitopenie cu limfocite relativ intacte. Anemia este de obicei normocromă și se caracterizează prin reticulocitopenie. Se poate observa macrocitoza. Trombocitele sunt mult reduse ca număr și sunt de obicei mici.

Tabloul măduvei osoase a pacienților cu anemie aplastică se caracterizează printr-un număr redus de celule hematopoietice și spații adipoase lărgite. Eritropoieza este îngustată sau absentă, diseritropoieza este adesea observată, neînsoțită de modificări displazice în alte rânduri de hematopoieza, ca în sindromul mielodisplazic. Numărul de megacariocite și celule granulocitare este redus semnificativ. Deoarece afectarea măduvei osoase este neuniformă, se poate observa hiperplazia focală a germenilor eritroizi și granulocitelor, iar atunci când „buzunarul fierbinte” al acestora cu un focar de hematopoieza intactă este aspirat, parametrii mielogramei, în special în stadiile incipiente ale bolii, pot fi aproape de normal. Pentru a evalua celularitatea generală și a evalua morfologia celulelor hematopoietice reziduale, studiul unui specimen de biopsie de trefină de măduvă osoasă de înaltă calitate este de o importanță decisivă.

Diagnostic diferentiat
Diagnosticul anemiei aplastice se bazează pe determinarea pancitopeniei în sângele periferic și celularitatea redusă a măduvei osoase conform biopsiei cu trefina. Înlocuirea țesutului hematopoietic activ cu țesut adipos este caracteristică, în absența infiltrației de celule atipice și a semnelor de fibroză. Examinarea atentă a frotiurilor de sânge și a preparatelor de măduvă osoasă ne permite să excludem prezența neutrofilelor displazice și a trombocitelor anormale, a celulelor tumorale.

Grupurile internaționale de cercetare au recomandat ca diagnosticul anemiei aplastice să se bazeze pe prezența a cel puțin doi dintre următorii parametri sanguini în combinație cu modificări caracteristice ale tabloului măduvei osoase: nivelul hemoglobinei
Planul de examinare a pacienților cu suspiciune de anemie aplastică include un test de sânge clinic complet cu determinarea numărului de trombocite și reticulocite, numărul de mielograme și examenul histologic al biopsiei de trefina măduvei osoase. Pentru a identifica variantele bolii asociate cu prezența unei clone PNH, toți pacienții cu anemie aplastică ar trebui testați pentru hemoglobinurie paroxistică nocturnă folosind citometrie în flux foarte sensibilă. Potențialii beneficiari de măduvă osoasă sunt supuși tipării HLA a celulelor sanguine.

Pentru diagnosticarea formelor congenitale rare ale bolii, este importantă o anamneză aprofundată și examinarea pacientului. Pentru a exclude anemia Fanconi, este indicată o analiză cromozomială a limfocitelor din sânge - un test pentru defecțiuni cromozomiale induse cu diepoxibutan sau mitomicină.

Atunci când se efectuează diagnosticul diferențial, este necesar să se excludă citopeniile de origine secundară. Acest lucru, pe lângă un istoric și o examinare detaliată, poate necesita teste precum determinarea nivelului de vitamina B12 și folaților din sânge, testare pentru viruși, imunofenotiparea celulelor măduvei osoase, ecografie și ecocardiografie, teste pentru a exclude bolile reumatoide și alte teste conform indicațiilor.

Diagnosticul diferențial se efectuează și cu aplazia parțială a celulelor roșii dobândite și o formă congenitală - anemie Diamond-Blackfan, în care aplazia germenului eritroid al măduvei osoase este detectată cu păstrarea granulo- și trombocitopoiezei.

Clasificare
Pentru a determina tactica terapiei, este necesar să se determine severitatea anemiei aplastice. În conformitate cu clasificarea internațională, se obișnuiește să se facă distincția între formele severe și nesevere de anemie aplastică. Scopul principal al acestei clasificări a fost de a identifica un grup de pacienți care sunt indicați în primul rând pentru transplant de măduvă osoasă din cauza riscului de deces prematur.

Tratament
Strategia pentru tratamentul anemiei aplastice ar trebui să vizeze restabilirea deficienței de celule stem hematopoietice și suprimarea proceselor imunologice distructive.

Restaurarea completă a hematopoiezei măduvei osoase la pacienții cu anemie aplastică poate fi realizată numai cu transplantul de celule stem hematopoietice, care este metoda de elecție la pacienții tineri cu forme severe și super-severe ale bolii. Cu toate acestea, principala metodă de terapie pentru majoritatea pacienților este terapia imunosupresoare, deoarece este mai accesibilă, cu mai puține contraindicații și este comparabilă cu transplantul de celule stem hematopoietice din punct de vedere al eficacității.

Primele încercări de tratare a anemiei aplastice cu transplant de măduvă au fost făcute încă din anii 1930, dar complexitatea și imperfecțiunea tehnologiei de selectare a donatorilor și a metodelor de transplant de la acea vreme au limitat posibilitățile de utilizare a transplantului. Odată cu îmbunătățirea tehnologiei și tehnicii de selecție a donatorilor, transplantul de măduvă osoasă a intrat în standardul de îngrijire pentru pacienții cu anemie aplastică severă ca metodă de elecție la pacienții nou diagnosticați cu anemie aplastică severă în prezența unui donator înrudit cu HLA-identic și ca metodă de elecție. o metoda de terapie pentru pacientii cu boala severa care nu au raspuns.pentru tratamentul cu imunoglobulina antitimocitara si ciclosporina. O creștere a eficienței transplantului alogen de măduvă osoasă a fost realizată ca urmare a scăderii frecvenței complicațiilor infecțioase, a îmbunătățirii regimurilor de pregătire pre-transplant, a scăderii incidenței reacțiilor de respingere și a bolii grefă contra gazdă.

Potrivit Grupului de lucru european pentru studiul transplantului de măduvă osoasă și anemiei aplastice, rata de supraviețuire a pacienților cu anemie aplastică severă după transplantul de celule stem hematopoietice, care a fost în 1970-1979. 43%, în 1991-1996 a crescut la 69%, iar până în 1997-2002. - până la 72%. Supraviețuirea pe termen lung a pacienților cu anemie aplastică după transplant poate ajunge în prezent la 80-96%. Sursa preferată de celule stem hematopoietice pentru pacienții cu anemie aplastică este măduva osoasă.

Pacienților cu anemie aplastică neseveră și anemie aplastică severă cu vârsta de peste 40 de ani și/sau fără un donator de frați potriviți cu HLA li se recomandă să urmeze un curs de terapie imunosupresoare. Utilizarea terapiei imunosupresoare se bazează pe conceptul de patogeneză a anemiei aplastice ca proces patologic cauzat de reglarea imună afectată a hematopoiezei. Regimul standard de terapie imunosupresoare, care dă cele mai bune rezultate atât pentru pacienții cu anemie aplastică severă, cât și cu anemie aplastică neseveră, este o combinație de imunoglobuline antitimocite și ciclosporină A. Beneficiile terapiei combinate au fost confirmate de multe grupuri de cercetare. Astfel, rezultatele pe 11 ani ale terapiei imunosupresoare, conform grupului german de oameni de știință, au arătat o creștere a frecvenței remisiilor atunci când imunoglobulina antitimocitară și ciclosporină au fost adăugate la terapie de la 41 la 70% în grupul general de pacienți și de la 31. la 65% în anemia aplastică severă. În același timp, timpul median pentru obținerea remisiunii a scăzut de la 82 la 60 de zile, iar morbiditatea fără recădere a crescut cu 18%.

Imunoglobulina antitimocitară este un medicament obținut prin imunizarea animalelor cu limfocite umane (timocite fetale). Medicamentele din această serie au un efect limfocitotoxic selectiv asupra supresoarelor T activate, inhibă producția de citokine supresoare de către celulele T, acționează asupra apoptozei prin reducerea expresiei antigenului Fas pe celulele CD+ ale măduvei osoase a pacienților.

Ciclosporină A - un metabolit al ciupercii Tolipocladium inflatum, o polipeptidă ciclică care modifică selectiv și reversibil funcția limfocitelor, inhibând producerea și fixarea limfokinelor pe receptori specifici; inhibă fazele G0 și G1 ale ciclului celular al celulelor imunocompetente, reduce activitatea genelor responsabile de sinteza IL-2 și a unui număr de alte citokine. Avantajul CsA este acțiunea sa reversibilă specifică în absența unui efect copleșitor asupra hematopoiezei, precum și conservarea relativă a imunității antiinfecțioase.

Cursurile de terapie cu imunoglobulină antitimocitară, cu o durată de 4-5 zile, sunt efectuate într-un spital. Dozele recomandate de medicament pentru imunoglobulina antitimocitară ecvină sunt de 20-40 mg/kg greutate corporală. Pentru a îmbunătăți rezultatele și a preveni reacțiile alergice, boala serului, glucocorticoizii sunt de obicei prescriși simultan sub forma unui curs scurt [metilprednisolon în doză de 1-3 mg / kg)]. La sfârșitul administrării imunoglobulinei antitimocite pe o perioadă lungă (de la 6 luni), preparatele orale CsA sunt prescrise în doze de 5-7 mg/kg și mai mari în absența toxicității semnificative. Când se utilizează acest mod, rata de răspuns este de 60-80%, cu o rată de supraviețuire la 5 ani a pacienților cu anemie aplastică severă de 75-85%.

Primele rezultate pozitive persistente în timpul terapiei imunosupresoare sunt de obicei observate după 2-3 luni și, prin urmare, este recomandabil să se determine rezultatele terapiei după 3-6 luni de la începerea tratamentului. Criteriile pentru eficacitatea terapiei sunt remisiunea completă și parțială. Remisiunea clinică și hematologică completă implică absența simptomelor clinice ale bolii, ameliorarea completă a sindromului hemoragic, conținutul de hemoglobină mai mare de 110 g/l; conținutul de granulocite este mai mare de 1,0x109 / l, trombocitele este mai mare de 100x109 / l (în alte cazuri - mai mult de 125-150x109 / l). Remisiunea clinică și hematologică parțială se caracterizează prin absența simptomelor clinice ale bolii și manifestări ale sindromului hemoragic, conținut de hemoglobină mai mare de 80 g/l cu independență de terapia hemocomponentă, conținut de granulocite mai mare de 0,5x109/l, trombocite mai mult de 20,0x109/l.

Îmbunătățirea clinică și hematologică poate fi, de asemenea, un rezultat pozitiv, în care nu există manifestări hemoragice pronunțate, nevoia de terapie hemocomponentă este redusă, iar parametrii hematologici se îmbunătățesc cu un conținut de granulocite mai mare de 0,5x109/l, trombocite mai mult de 20,0x109/l. l.

Pentru a evalua eficacitatea tratamentului pacienților cu anemie aplastică, în funcție de severitatea evoluției bolii, grupul european de experți propune următoarele criterii. Conform recomandărilor actuale, CsA ar trebui continuată după primirea răspunsului hematologic maxim [remisie parțială persistentă cu îmbunătățire a tuturor liniilor hematopoietice, remisiune completă] de la 6 la 12 luni, urmată de retragere treptată, care minimizează numărul de recăderi.

Există o experiență pozitivă cu utilizarea dozelor mari de ciclofosfamidă în prima linie de terapie. Primele publicații datând din 1996 au arătat un efect bun al terapiei imunosupresoare cu aceste medicamente la pacienții cu anemie aplastică, dar în prezența unor complicații grave în timpul terapiei, inclusiv infecții letale. Cu toate acestea, pe măsură ce terapia adjuvantă se îmbunătățește, publicațiile mai recente arată rezultate bune ale tratamentului, cu remisiuni mai complete și mai susținute la pacienții cu anemie aplastică severă, deși aceste rezultate nu au fost confirmate de studiile randomizate controlate.

Dacă primul curs de terapie combinată cu imunoglobulină antitimocit/CsA este ineficient pentru pacienții cu anemie aplastică severă, se ia în considerare posibilitatea transplantului de măduvă osoasă de la un donator compatibil neînrudit. În același timp, probabilitatea de rezultate favorabile este mai mare atunci când transplantul este efectuat la o dată mai devreme.

Dezavantajele terapiei imunosupresoare ca metodă de tratare a pacienților cu anemie aplastică includ:
conservarea defectelor reziduale în hematopoieză (sub formă de conservare a focarelor de hipoplazie a măduvei osoase, inferioritatea funcțională a mielocariocitelor);
risc ridicat de recidivă (până la 20-30% dintre pacienți și peste);
complicații clonale tardive (până la 20-60% cu urmărire pe termen lung), inclusiv sindrom mielodisplazic, leucemie acută, hemoglobinurie paroxistică nocturnă.

Frecvența recăderilor la pacienții cu anemie aplastică după prima linie de terapie imunosupresoare este relativ mare, cu toate acestea, în cele mai multe cazuri, astfel de recăderi sunt tratate cu succes cu cursuri repetate de terapie imunosupresoare și nu agravează semnificativ prognosticul general. Astfel, studii recente au arătat că, în caz de recădere după primul curs de succes de terapie, care a inclus imunoglobulina antitimocitară, cursurile repetate duc la remisiuni la 11-65% dintre pacienți.

În a 2-a și următoarele linii de terapie, este posibil să se utilizeze medicamente precum alemtuzumab, preparate cu acid micofenolic pentru intoleranța la CsA. Există dovezi ale unei experiențe pozitive cu utilizarea daclizumab (anticorpi monoclonali recombinanți împotriva receptorului IL-2) și a unui număr de alte medicamente imunosupresoare, dar încă nu există date suficient de convingătoare cu privire la utilizarea lor la grupuri mari de pacienți cu anemie aplastică. .

Splenectomia, folosită anterior în tratamentul pacienţilor cu anemie aplastică, este acum rar utilizată, deşi unii autori consideră că utilizarea ei este justificată în linia a 2-a-3 de terapie, mai ales în prezenţa unei componente autoimune.

S-a demonstrat că, în îmbunătățirea rezultatelor terapiei pentru anemie aplastică, începerea timpurie a unui curs de tratament și terapia adecvată însoțitoare sunt de mare importanță. Acesta din urmă include terapia de înlocuire a hemocomponentelor pentru a menține nivelul de globule roșii și trombocite la un nivel sigur.

Indicațiile pentru numirea tromboconcentratului este sindromul hemoragic cu trombocite.
În ultimii ani, s-au încercat folosirea agoniştilor receptorilor de trombopoietină (eltrombopag) pentru controlul sindromului hemoragic, cu rezultate bune. Mai mult, există date care indică capacitatea agoniștilor receptorilor de trombopoietină de a conduce nu numai la creșterea numărului de trombocite și ameliorarea manifestărilor hemoragice, ci și la îmbunătățirea altor linii celulare.

Deoarece dependența de transfuzie duce adesea la supraîncărcare cu fier post-transfuzie la pacienții cu anemie aplastică, pacienții cu transfuzii frecvente de celule roșii din sânge și niveluri serice de feritină peste 1000 mg/l sunt tratați cu chelatori de fier.

Dacă apar complicații infecțioase la pacienții cu anemie aplastică, terapia se efectuează conform regulilor comune pentru pacienții care primesc terapie imunosupresoare, cu numirea de medicamente antibacteriene cu spectru larg, medicamente antifungice conform indicațiilor.

Utilizarea stimulentelor hematopoietice - factor de stimulare a coloniilor de granulocite și eritropoietina - la pacienții cu anemie aplastică nu este considerată oportună de majoritatea cercetătorilor din cauza eficacității lor scăzute în acest grup de pacienți și a riscului crescut de apariție a complicațiilor clonale. Datele din observații pe termen lung și meta-analiză, prezentate în mod regulat în anii 2000 la congresele științifice și conferințe hematologice ale Societății Americane de Hematologie, Asociației Europene de Hematologie, Grupului European pentru Transplantul de Măduvă Osoasă și altele, au arătat că utilizarea eritropoietinei și G-CSF nu afectează semnificativ reducerea mortalității sau creșterea răspunsurilor complete și globale la terapie. Cu toate acestea, cure scurte de G-CSF pot fi recomandate pentru infecțiile sistemice severe la pacienții cu granulocitopenie profundă.Prognosticul bolii depinde în principal de severitatea aplaziei și de inițierea timpurie a terapiei active. Fără tratament, în formele severe, până la 50% dintre pacienți mor în primele luni, iar cu terapia modernă, supraviețuirea pe termen lung este de 70-80%.

În ceea ce privește terapia imunosupresoare, rezultatele tratamentului sunt mai bune la pacienții cu răspuns precoce granulocitar și reticulocitar. Datele disponibile indică, de asemenea, un răspuns mai bun la terapia imunosupresoare la pacienții cu anemie aplastică asociată cu prezența unei clone PNH. Printre factorii care influențează prognosticul bolii se numără eficacitatea terapiei imunosupresoare și probabilitatea evoluției clonale; recent, s-a acordat atenție scurtării lungimii telomerilor din celulele sanguine.