В современной медицине проведение ПЦР анализа биологических жидкостей организма является высокоточным и информативным. При помощи данного анализа выявляют наличие в организме вирусных и микробных частиц, даже если болезни протекают скрыто и не дают никаких симптомов.
Что значит назначение вам ПЦР анализа? Эта аббревиатура расшифровывается как метод полимеразной цепной реакции - это особый способ проведения лабораторных исследований. При данном методе полученный от пациента биологический материал размещается в специальном аппарате. К исследуемой среде прибавляют набор ферментов-реактивов, которые помогают воспроизводить генетический материал возбудителя (вируса или микроба). При реакции воспроизводится большое количество копий ДНК или РНК, что позволяет идентифицировать путем сравнения с базой данных как вирусную, так и микробную инфекцию.
Что означает результат ПЦР анализа? Если в организме человека имеется возбудитель каких-либо инфекций, даже скрытый, при данном анализе будет выявлено не только его наличие, но и в каком количестве данная инфекция присутствует в теле.
Для анализа на инфекции методом ПЦР можно исследовать все биологические жидкости организма - кровь, моча, слюна, выделения половых органов, слизь горла и носа. Для анализа требуется совсем немного материала, так как если возбудители имеются, за счет воспроизведения их копий, концентрация генетической информации доводится до такой, которая выявит микроб или вирус, и определит его вид. Точность анализа ПЦР очень высока, при помощи данного анализа можно на сегодня определить практически все широко распространенные вирусные, микробные и иные инфекции.
Но, что же чаще всего выявляет анализ ПЦР? К списку инфекций, которые можно выявить данным методом можно отнести инфекционные, в том числе и социально опасные инфекции по типу туберкулеза или гепатитов В и С. Этим же методом можно выявить ВИЧ-инфекцию, хламидийную и уреаплазменную инфекции, микоплазмоз как респираторной системы, так и генитальный. При помощи данного анализа выявляют молочницу, бактериальный вагиноз, трихомониаз. Возможности данного метода позволяют выявлять скрытые инфекции - герпес разных типов, ВПЧ (папилломавирус), а также выявление особого микроба, ответственного за развития язв желудка - хеликобатера.
Сегодня сдать анализ методом ПЦР можно практически в любой частной или государственной лаборатории. Данные виды анализов проводят всем, детям и взрослым. В зависимости от того, какую цель преследует анализ, в зависимости от пола проводятся анализ разного биологического материала.
Так, анализ ПЦР у мужчин проводит по крови или моче, секрету уретры, слизи из глотки или носа, соку простаты или даже сперме. Проведение анализа ПЦР у женщин возможно в крови и моче, влагалищном секрете, выделениях из уретры, слизи носа и глотки.
Очень часто применяют анализ ПЦР при беременности, с его помощью во влагалищном секрете или крови выявляют скрытые инфекции, требующие особого наблюдения в этот период, а иногда и адекватного лечения.
Анализ на инфекции данным методом назначает врач, зачастую сбор материала проводится сразу в кабинете доктора - уролога или гинеколога. Как делается анализ ПЦР?
Исследуемый материал в лаборатории смешивают с реактивами и ждут реакции. При наличии возбудителей, копии их ДНК или РНК размножаются. Выявленные фрагменты генетического материала аппарат сравнивает с базами данных и точно выявляет возбудителя инфекции. Пи необходимости, также указывается и количество возбудителя в тех или иных жидкостях тела. Обычно исследование длится не более 1-2 суток, при необходимости - проводят экспресс-анализы.
Откуда берут анализ ПЦР? Это будет зависеть от того, какие виды возбудителя предполагаются. Если это ВИЧ или гепатиты - берется кровь, если это половые инфекции - берется мазок с уретры или влагалища. При подозрении на мононуклеоз или герпес берут мазок с горла. Также могут использоваться моча, спинномозговая жидкость, отделяемое из ран, мокрота и тд.
Для точных результатов и диагностики инфекций важно сдавать кровь в утренние часы натощак. Анализ крови методом ПЦР способен выявить возбудителей опасных заболеваний - ВИЧ, гепатиты, сифилис. В периоды обострения и активности вируса в крови могут быть выявлены вирусы герпеса, папилломы и некоторые другие.
Для абсолютной точности анализа важна правильная к нему подготовка. Проще всего подготовиться к анализу крови, никаких ограничений в диете или активности нет, кровь нужно сдать утром, натощак. Анализ мочи сдают после подмывания гениталий, из средней порции в специальный стерильный контейнер. Анализ ПЦР из половых путей заслуживает особого внимания, поэтому важно знать, как подготовиться. За сутки до обследования запрещается секс, перед исследованием рекомендовано не мочиться. При менструации у женщин, дата анализа переносится на 3-5 дней с момента последних выделений.
Анализ в зависимости от возможности лаборатории может готовиться от нескольких часов до нескольких дней. В среднем, сколько дней делается анализ ПЦР? Обычно это одни -двое суток. При экстренной ситуации анализ может быть выполнен в этот же день, через несколько часов.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – метод высокой точности в области диагностирования наследственных патологий, инфекций, вирусных болезней в любой стадии (острой или хронической), а также - на раннем этапе - до очевидных проявлений болезни путем идентификации возбудителей, на основе их ДНК, РНК, являющихся генетическим материалом, в пробах, которые получают от пациента. И сегодня мы поговорим про суть, этапы диагностики и принципы методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), а также о ее стоимости.
Основа анализа - амплификация (удвоение) – создание множества копий из короткого участка ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты), представляющей генетический комплекс человека. Для исследования нужно очень малое количество физиологического вещества (мокрота, каловые массы, соскоб эпителия, сок простаты, кровь, сперма, околоплодные воды, слизь, ткань плаценты, моча, слюна, жидкость плевральная, цереброспинальная). При этом, например, в мочеполовом тракте больного возможно обнаружение даже единичного вредоносного микроба.
Методику ПЦР (полимеразной цепной реакции) разработал американский ученый К. Мюллисом, в 1993 получивший Нобелевскую премию.
Активно используется:
О том, что такое полимеразная цепная реакция, расскажет в подробностях данное видео:
Полимеразная цепная реакция в диагностике инфекционных заболеваний - одна из наиболее надежных методик особой точности и достоверности. К примеру, достоверность проведенного анализа ПЦР на хламидии и на многие другие патогены приближается к 100% (абсолютная). Чаще всего процедуру полимеразной цепной реакции назначают пациентам, у которых при диагностировании возникают сложности с идентификацией конкретного возбудителя.
Лабораторный тест ПЦР применяют:
Так, будущие родители сдают анализ, чтобы узнать, являются ли они носителями генетической патологии, у детей ПЦР определяет вероятность подверженности болезни, передающейся по наследству.
Поскольку ПЦР - высокоэффективный способ диагностики, дающий почти 100% результат, процедуру используют:
Во многих случаях ПЦР - единственно возможный тест для обнаружения развивающегося заболевания, если прочие бактериологические, иммунологические и вирусологические методики диагностирования оказываются бесполезными.
Подробный анализ ДНК патогена используется:
Анализ полимеразно-цепной реакции проводится на основе многократной амплификации (удвоения) конкретного фрагмента ДНК и РНК при использовании особых ферментов-праймеров. В результате цепочки копирования получается количество материала, достаточное для исследования.
В ходе процедуры копируется только искомый фрагмент (соответствующий заданным конкретным условиям) и в случае, если он действительно присутствует в пробе.
О том, как проходит ПЦР, рассказывает это подробное видео с полезными схемами:
Процедура ПЦР применяется в клинике инфекционных болезней, неонатологии, акушерстве, педиатрии, урологии, гинекологии, венерологии, неврологии, нефрологии, офтальмологии.
Показания для назначения анализа:
Также используется диагностика при необходимости точного выявления следующих возбудителей::
Используется и для определения инфекций:
Поскольку процедура проводится не с пациентом, без какого-либо воздействия на организм, а с биологическим материалом, взятым для исследования, то никаких противопоказаний для ПЦР не имеется по причине отсутствия потенциальной опасности.
Однако забор биоматериала из шеечного канала матки не проводят после процедуры кольпоскопии. Сдача мазков, соскобов на анализ разрешена только через 4 – 6 дней после окончания менструации и полного прекращения выделений.
Никакое негативное влияние на пациента при изолированном исследовании его биоматериала в лабораторных условиях невозможно.
В качестве образца для анализа ПЦР, при котором выявляют ДНК чужеродного патогена, служит любая биологическая жидкость, ткань, выделения организма. Забор исследуемого вещества проводят в виде взятия крови из вены, соскоба из гортани, полости носа, мочеиспускательного канала, плевральной полости, шейки матки.
Перед диагностической процедурой врач объясняет пациенту, забор какого материала будет взят:
Достоверность и точность анализа зависит от стерильности условий при взятии материала. Поскольку исследование ПЦР обладает высокой чувствительностью, любое загрязнение исследуемого вещества способно искажать результат.
Грамотная подготовка к сдаче биоматериала не представляет для пациентов никаких трудностей. Имеются определенные рекомендации:
О том, как проводится диагностика по методике полимеразной цепной реакции, читайте ниже.
При выполнении исследования ПЦР раз за разом в реакторе (амплификаторе или термоциклере) повторяются определенные циклы:
Эти циклы повторяются по типу «цепной реакции», каждый раз приводя к удвоению копий специфичного фрагмента ДНК (например, отрезка, где запрограммирован определенный вирус). За несколько часов образуется множество копий фрагмента ДНК, и выявляется их присутствие в образце. После этого проводят анализ и сравнение результатов с данными базы различных видов патогенов, чтобы определить вид инфекции.
Про расшифровку результатов и вывод исходя из ПЦР-реакции читайте ниже.
Окончательный результат исследования выдается через 1 – 2 суток после сдачи биологического материала. Нередко – уже в первые сутки после анализа.
Если результат положительный, но признаков активизации инфекции не выявлено – такое состояние организма называют бессимптомным «здоровым носительством». Чаще всего наблюдается при взятии биоматериала из определенного места (цервикальный канал, уретра, полость рта) при вирусных заболеваниях. Лечения в этом случае не требуется, но обязательно постоянное врачебное наблюдение, поскольку существует вероятность:
Однако - если положительным является анализ крови, это указывает на то, что инфекция поразила организм, и это уже не состояние носительства, а патология, требующая незамедлительной специфической терапии.
Количественный результат определяет специалист конкретно для определенного вида инфекции. На его основании можно оценить степень развития, стадию болезни, что дает возможность оперативно назначить правильное лечение.
Цены на проведение полимеразной цепной реакции определяют: вид исследования, сложность идентификации возбудителя, трудность забора биологического материала, вид анализа (качественный или количественный), уровень цен в лаборатории.
С другой стороны, при исследовании ПЦР можно определить сразу несколько патогенов при заборе одного вида материала для анализа. Это позволяет сэкономить на других лабораторных анализах.
Ориентировочно, стоимость анализа ПЦР в рублях:
Еще больше полезной информации в отношении исследования ПЦР содержится в видеосюжете ниже:
При подозрении на воспалительные заболевания мочеполовой сферы врачом урологом-андрологом проводятся различные исследования для определения возбудителя заболевания и дальнейшего подбора соответствующего антибактериального лечения.
Мазок на флору: врач определяет возбудителя инфекции (например, передаваемой половым путем)при помощи микроскопа.
Если проводится микроскопия с подсветкой, то метод называется иммунофлюоресцентным.
Бактериологическийпосев – основан на исследовании биологического материала пациента (моча, кровь, кал), который помещается в специальную среду. В результате размножения микроорганизмов можно легко обнаружить возбудителя инфекции. Такой способ очень удобен для выявления бактерий и грибов. Но в данном случае срок получения результата довольно большой – до 5-7 дней. К тому же есть вероятность, что микроорганизм не вырастет в созданных условиях, что также повлияет на результат анализа.
ДНК-диагностика(ПЦР) – самый точный из методов биологической диагностики.
Особенно актуален при диагностике инфекций, передаваемых половым путем (ИППП).
ДНК-диагностику проводят методом полимеразной цепной реакции или ПЦР. Для этого из биологического материала извлекается часть ДНК микроба. Риск ошибки при использовании данного метода составляет не более 3%. Кроме того, этот способ диагностики не только точен, но и позволяет быстро получить результаты в течение 1-3 дней. К тому же, этот метод применим к более широкому спектру микробов и подходит для выявления вялотекущих и скрытых инфекций.
Чаще всего этот метод используют урологи и гинекологи для определения наличия хламидий, гонококков, различных видов микоплазм, уреаплазм, трихомонад, вируса герпеса, цитомегаловируса, вируса папилломы и прочих инфекций.
ПЦР – это полимеразная цепная реакция. Позволяет лабораторным методом определить наличие половых инфекций у мужчин и женщин, даже если концентрация возбудителя минимальна. Достоверность метода 97-99%.
В качестве материала для обследования используют чаще всего соскоб из уретры (мочеиспускательный канал). Также определяют микроорганизм из физиологических жидкостей: кровь, эякулят (сперма), секрет простаты. После забора материала он в кратчайшие сроки доставляется в лабораторию. Там лаборант выделяет все ДНК (генетический материал) и сравнивает с нормальной ДНК пациента и микроорганизмов, вызывающих половые инфекции.
Выявить заболевание уже можно при наличии 100-105 клеток в 1 мл материала.
Однако результат может быть не только положительный и отрицательный.
Ложноположительный результат бывает при несоблюдении стерильности при заборе материала и при его исследовании, а также при уже пройденном лечении, когда ДНК микроорганизмов еще не вывелась, а сами возбудители уже не жизнеспособны.
А ложноотрицательный результат встречается в том случае, если концентрация микроорганизмов очень мала и тест-системы не способны почувствовать их наличие.
Микроорганизмы, к которым чувствителен метод ПЦР диагностики:
Состояния, когда проводится ПЦР диагностика:
Как подготовиться к исследованию?
Как проводится взятие мазка на ЗППП?
Во время осмотра врач уролог-андролог с помощью специальной небольшой одноразовой щеточки (зонда) берет материал для исследования у мужчин из мочеиспускательного канала. В определенных случаях на ПЦР берется секрет простаты или эякулят (сперма).
Сколько дней готовиться забор ПЦР на половые инфекции?
Один рабочий день (если анализ сдан до с 8.30 до 11.00).
Как оценивается результат мазка на ЗППП?
У здорового человека все инфекции должны отсутствовать.
Что делать, если в анализе мазка на половые инфекции выявлены положительные результаты?
С результатами анализа обратиться к лечащему врачу (урологу-андрологу).
Иммуноферментный анализ (ИФА)
Суть иммуноферментного анализа (ИФА) заключается в выявлении специфических (индивидуальных для каждого микроорганизма) антител.
Антитела (иммуноглобулины, Ig) - специфические белки-защитники, вырабатываемые лейкоцитами (белыми кровяными тельцами) в ответ на появление в организме чужеродного генетического материала (вирусов, бактерий, простейших).
Иными словами, данные иммуноферментного анализа (ИФА) показывают не факт наличия инфекционного агента (инфекции) в организме, а состояние иммунитета к этому инфекционному агенту, т.е на основании данных ИФА можно лишь опосредованно (косвенно) судить о наличии /отсутствии инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) по ответной реакции на него иммунной (защитной) системы организма.
В зависимости от срока давности существования в организме человека вирусов, бактерий, простейших вырабатываются антитела классов А, M, G (IgА, IgM, IgG).
Иммунноферментный анализ (ИФА) в урологии и андрологии широко используют для диагностики микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомоноза, гарднереллеза, гонореи, TORCH-инфекций (токсоплазмы, краснухи, цитомегаловирусной инфекции и герпеса).
В случае низкой иммуногенности инфекционного агента (инфекции) либо недостаточной активности иммунной системы выработка антител (иммуноглобулинов классов А, M, G) может отсутствовать или быть диагностически незначимой при фактическом (реальном) наличии инфекционного агента (инфекции) в организме по данным полимеразной цепной реакции (ПЦР). Слабой иммуногенностью (способностью существовать незаметно для иммунной системы) обладают микоплазмы, уреаплазмы, трихомонада.
В ряде случаев данные иммуноферментного анализа (ИФА) могут быть ложноположительными, т.е. при фактическом отсутствии инфекционного агента (инфекции) в организме иммуноферментный анализ (ИФА) определяет наличие антител к нему. Высокая частота ложноположительных реакций часто отмечается при диагностике методом ИФА трихомоноза (трихомониаза).
Низкой иммуногенностью инфекционного агента (бактерий, вирусов, простейших) и индивидуальными особенностями иммунитета человека объясняется кажущееся противоречие данных ИФА и ПЦР, при котором исследование методом ИФА не находит инфекцию, а метод ПЦР свидетельствует о наличии инфекции в организме.
Таким образом, диагностика инфекционных заболеваний, включая инфекции, передаваемые половым путем, требует комплексной (совокупной) оценки данных всех диагностических методов.
Как сдать кровь на ИФА
ПСА – PSA
Простатический специфический антиген
Простатический специфический антиген (ПСА, PSA) – это один из важнейших диагностических признаков заболеваний предстательной железы. Он представляет собой вещество белковой природы, которое выделяется клетками предстательной железы.
Функция ПСА (PSA) в норме заключается в разжижении спермы после семяизвержения. Большая часть ПСА (PSA) выводится из организма мужчины спермой, однако очень незначительная часть его попадает в кровь, что определяется с помощью особых тестов. Ввиду крайне малых концентраций этого вещества в крови, для его определения применяются очень чувствительные методы – техника моноклональных антител.
Пса может находится в крови как в свободном виде, так и в связанном. Общая концентрация ПСА (PSA) определяется путем суммирования свободного и общего ПСА (PSA) . В норме содержание ПСА (PSA) в крови составляет около 4 нг/мл. Однако, в связи с тем, что предстательная железа с возрастом увеличивается и продуцирует тем самым больше ПСА (PSA) , обычно уровень его у молодых бывает ниже, а у пожилых мужчин – выше. Так, возрастные характеристики концентрации ПСА (PSA) таковы: (40 - 49, 2.5), (50 - 59, 3.5), (60 - 69, 4.5), (70 - 79, 6.5).< Тест на ПСА (PSA) используется в двух значениях:
При выполнении диагностического теста ПСА (PSA) уровень его выше 4 нг/мл и ниже 10 нг/мл считается подозрительным в плане рака простаты. В большинстве случаев, однако, у мужчин с таким уровнем ПСА (PSA) в крови не обнаруживается рак предстательной железы. При уровне ПСА (PSA) выше 10 нг/мл вероятность обнаружения рака простаты растет.
Тест ПСА (PSA), проводимый для контроля течения рака предстательной железы, применяется для выявления рецидива рака после первичного лечения. Например, при полном удалении предстательной железы и всех тканей, пораженных метастазами, уровень ПСА (PSA) падает до нуля. Если при последующем тесте на ПСА (PSA) он становится положительным, это означает, что в организме остались ткани, пораженные раком.
Другие причины повышения уровня ПСА (PSA)
Кроме того, уровень ПСА (PSA) весьма чувствителен к всевозможным инструментальным манипуляциям в отношение предстательной железы: катетеризации мочевого пузыря, массажу простаты, биопсии простаты и т.д.
Что такое ложноположительный тест ПСА (PSA)?
Тест на ПСА (PSA) считается ложноположительным, когда повышение уровня ПСА связано с другими причинами, а не раком предстательной железы. К ним относятся простатит и аденома предстательной железы. Также следует отметить, что даже простое пальцевое ректальное исследование простаты или эякуляция в течение последних 48 часов может иногда давать ложноположительные результаты теста ПСА (PSA). Обычно, тест ПСА (PSA) бывает ложноположительным в 4 – 10 % случаев, но иногда он достигает и 30 %! Другие заболевания, не относящиеся к предстательной железе, не могут давать положительные результаты теста ПСА (PSA).
Чувствительность теста ПСА (PSA) весьма высокая. Это связано с тем, что практически у всех больных с раком простаты уровень ПСА (PSA) повышен либо находится в пограничных пределах. Однако, положительный тест ПСА (PSA) не исключает других заболеваний, то есть специфичность данного заболевания низкая.
Мужские половые гормоны или андрогены, - специфические химические вещества, которые влияют на деятельность всех органов, систем и процессов в организме человека.
Тестостерон - основной мужской половой гормон, который присутствует как у мужчин, так и у женщин.
Значение и влияние тестостерона тяжело переоценить. В любом организме он должен быть: норма его для мужчин и женщин отличается, но без него здоровое половое развитие невозможно.
Связанный + свободный тестостерон = общий тестостерон
Общий тестостерон состоит из:
Общий тестостерон состоит из:
Основная часть главного мужского полового гормона - в связанном состоянии. Свободный и связанный с альбумином гормон биологически активен. ГСПГ же замедляет его действие.
Свободный тестостерон у мужчин - активная форма гормона. Его дефицит приводит к импотенции. Он определяет развитие вторичных половых признаков и половое влечение.
У мужчин чаще всего развивается дефицит гормона в активной форме. Он приводит к тому, что:
Как сдать анализ на тестостерон правильно
Чтобы сдать кровь на этот гормон и получить достоверные результаты, важно накануне не употреблять алкоголь и исключить курение. Что касается еды, то за 12 часов до сдачи анализа нельзя есть, а пить - только простую воду.
Анализы на ПЦР назначаются во многих случаях. Очевидно, что в современных условиях способна дать самый точный ответ – имеет ли пациент инфекционную составляющую в организме, или нет. Для использования ПЦР методики необходим биологический материал, который и забирается у пациента по назначению лечащего врача.
Как правильно сдавать мазок, анализы на ПЦР? Перед мазком нельзя подмываться, надо сходить в туалет за 3 часа до процедуры. Есть и другие тонкости.
Инфекционные ЗППП, гепатиты, мононуклеоз – все мы стараемся избегать этих заболеваний. Если появились сомнения, например, после незащищенного полового акта, не стоит «прятать голову в песок», лучше сходить к врачу и провериться. Скорее всего, доктор вас попросит сдать анализы на ПЦР.
Если расшифровать аббревиатуру ПЦР, то получится «полимерная цепная реакция». Это самый простой способ обнаружить инфекцию. Для анализов берут различные биологические материалы и проверяют их на наличие чужеродных ДНК, которые принадлежат возбудителям болезни. Благодаря этому анализу можно определить, что за болезнь у пациента, а также узнать количество вредных микроорганизмов, находящихся в организме человека.
Что показывают анализы на ПЦР? Результат анализа ПЦР может быть или отрицательным, т.е. никаких инфекций в организме нет, или положительным. Если он подтверждает наличие инфекции, то врач сможет точно сказать, какая именно инфекция присутствует и в каком количестве.
Какой именно биологический материал берут на анализ? Все зависит от того, какой диагноз хочет опровергнуть или подтвердить специалист. Если нужно диагностировать гепатит или ВИЧ, то берут анализ крови. При подозрении на мононуклеоз – мазок из зева. Чаще всего проверяют наличие половых инфекций, а для этого делается мазок из шейки матки, исследуются выделения из половых органов у женщин, берется мазок из мочеиспускательного канала у мужчин. Или же пациент сдает мочу.
Поговорим более подробно о том, как получить достоверный анализ ПЦР, как сдавать его.
Как мы уже говорили, врач может попросить сдать для исследования различный биологический материал, поэтому подготовка к процедуре зависит от того, на что именно вы проверяетесь.
Если специалист берет на анализ слюну, то перед процедурой нельзя есть и принимать лекарства как минимум 4 часа. Перед тем, как сдать анализ, наберите в рот кипяченой воды, чтобы прополоскать его.
Если доктор попросил сдать мочу, то нужно брать только утреннюю. Перед тем, как собрать мочу на анализ, необходимо тщательно подмыться. Чтобы материал был чистым, без посторонних примесей, женщинам во влагалище лучше вставить тампон, а мужчинам постараться оттянуть кожную складку. В контейнере должно быть не менее 50-60 мл мочи.
Если берут на анализ сперму у мужчин, то перед ее сдачей он должен воздерживаться от половых контактов как минимум 3 дня. Также в это время не стоит посещать сауну, принимать горячую ванну, употреблять спиртные напитки, есть острую пищу. Важно перед тем, как сдать анализ, как минимум 3 часа не ходить в туалет, т.е. воздержаться от мочеиспускания.
Если врач попросил сдать кровь, то это делается утром, натощак. Перед этим не стоит увлекаться жирной пищей и пить алкогольные напитки.