Диагностикум от вируса на енцефалит, пренасян от кърлежи. Диагностикуми. Разписка, заявление. Луминесцентен серум от тиф

Съдържа висок титър на антитела срещу вируса на кърлежовия енцефалит. Получава се от кръвния серум на коне, хиперимунизирани с вируса на кърлежовия енцефалит. Използва се за спешна профилактика и лечение на пациенти с кърлежов енцефалит.

FSME-Булин. Човешки имуноглобулин срещу енцефалит, пренасян от кърлежи (Baxter AG, Австрия)

Съдържа антитела, които неутрализират вируса на кърлежовия енцефалит, стабилизатор - глицерин, без консервант. Използва се за спешна профилактика и лечение на пациенти с кърлежов енцефалит.

Диагностични лекарства

Серуми

Серум против шарка

Съдържа антитела срещу вируса на вариола. Използва се за идентифициране на вируса в реакции на неутрализация.

Флуоресцентен серум против бяс

Съдържа антитела срещу вируса на бяс, белязани с флуорохром. Използва се за търсене на патогена в RIF.

Специфичен серум срещу вируса на енцефалит, пренасян от кърлежи

Съдържа антитела срещу вируса на енцефалит, пренасян от кърлежи. Използва се за идентифициране на вируса в RTGA, RNGA и др.

Диагностикуми

Диагностика на едра шарка

Съдържа антигени на вируса на вариола. Използва се в серологичния диагностичен метод.

Диагностикум от вируса на енцефалит, пренасян от кърлежи

Съдържа антигена на вируса, приготвен от мозъка на мишки, заразени с вируса на кърлежовия енцефалит. Използва се за установяване на реакция при серологичен метод.

Тест система за откриване на антитела срещу ХИВ в ELISA

Съдържа специфичен HIV антиген и допълнителни съставки, необходими за ELISA. Използва се на първия етап от серологичната диагностика на HIV инфекцията.

Тестова система за имуноблотинг при диагностициране на HIV инфекция

Съдържа комплекс от ХИВ фракции (антигени), разделени чрез електрофореза: gp41, gp120, p24, p31 и др. Използва се като потвърждаващ тест в последния етап на серологичната диагностика на HIV инфекцията.

Примери за описание на имунобиологични препарати:

преципитиращ антраксен серум

КП:Серум

DN:В

ОТ:Фракция от кръвен серум на животни, хиперимунизирани с антигени на патоген на антракс, съдържащи преципитини

и т.н.:Експресна диагностика на патогена в тестовия материал

ref:За създаване на реакция на утаяване на пръстен

Луминесцентен серум от тиф

КП:Серум

DN:В

ОТ:Фракция от кръвен серум на животни, хиперимунизирани с антигени на причинителя на коремен тиф, съдържаща антитела, белязани с FITC

и т.н.:Бърза диагностика на коремен тиф

ref:За настройка на RIF.

Бактериофаг на чума

КП:бактериофаг

DN:бактериофаг

ОТ:Стерилен филтрат на фаголизата на бульонната култура на чумния агент

и т.н.:Бактериологичен диагностичен метод

ref:За стадиране на реакцията на повишаване на фаговия титър с цел откриване на чумния патоген в обекти на околната среда

Бактериофаг дизентеричен поливалентен в таблетки

С киселинноустойчиво покритие

КП:бактериофаг

DN:бактериофаг

ОТ:Стерилен филтрат от фаголизат от бульонна култура на фаголизати от Shigella dysentery Flexner и Sonne

и т.н.:Спешна профилактика и лечение на бактериална дизентерия

ref:устно

Лечение с ваксина срещу бруцела

КП:ваксина

° С:Убит от топлина Brucella abortusИ B. melitensis

и т.н.:За лечение на пациенти с остра, подостра и хронична бруцелоза

ref:Парентерално

Моноваксина против коклюш

КП:ваксина

DN: Ag

ОТ:Атенюирани щамове на магарешка кашлица

и т.н.:За създаване на активен изкуствен антимикробен имунитет

ref:Парентерално по епидемиологични показания

Руски имунизационен календар, 2002 г. 1

възраст	Име на ваксинацията
Новородени за първи път 12 часа	Първа ваксинация - хепатит В
Новородени 3-7 дни	Ваксинация - туберкулоза
1 месец	Втора ваксинация - хепатит В 2
3 месеца	Първа ваксинация - дифтерия, тетанус, магарешка кашлица и полиомиелит
4,5 месеца	Втора ваксинация - дифтерия, тетанус, магарешка кашлица, полиомиелит
6 месеца	Трета ваксинация - дифтерия, тетанус, магарешка кашлица, полиомиелит Трета ваксинация - хепатит В
12 месеца	Ваксинация - морбили, паротит, рубеола
18 месеца	Първа реваксинация - дифтерия, магарешка кашлица, тетанус, полиомиелит
20 месеца	Втора реваксинация - полиомиелит
6 години	Втора ваксинация - морбили, паротит, рубеола
7 години	Втора реваксинация - дифтерия и тетанус Първа реваксинация - туберкулоза 5
13годишен	Ваксинация срещу вирусен HBV Ваксинация срещу рубеола (момичета) 4
14 годишен	Трета реваксинация - дифтерия и тетанус Реваксинация - туберкулоза 6
16 години	Трета реваксинация - полиомиелит
възрастни	Реваксинация - дифтерия и тетанус на всеки 10 години след последната реваксинация

бележки:

1 Имунизацията в рамките на Националния имунизационен календар се извършва с ваксини от местно и чуждестранно производство, регистрирани и одобрени за употреба по предписания начин в съответствие с инструкциите за тяхното използване.

2 Деца, родени от майки носители на вируса на хепатит В или болни от хепатит В през 3-ти триместър на бременността, се ваксинират по схема 0-1-2-12 месеца.

3 Ваксинацията срещу хепатит В на 13-годишна възраст се извършва преди неваксиниран или е получил само една ваксинация.

4 Ваксинация срещу рубеола се дава на момичета на 13-годишна възраст, които не са били ваксинирани преди това или са получили само една ваксинация.

5 БЦЖ реваксинация на 7-годишна възраст се извършва за туберкулин-отрицателни деца, които не са заразени с Mycobacterium tuberculosis.

6 БЦЖ реваксинация на 14-годишна възраст се извършва за туберкулин-отрицателни деца, които не са заразени с Mycobacterium tuberculosis и които не са получили ваксинация на 7-годишна възраст.

7 Профилактичните ваксини, използвани в рамките на Националния календар (с изключение на БЦЖ), могат да се прилагат едновременно (или с интервал от 1 месец) с различни спринцовки в различни части на тялото.

8 В случай на нарушаване на крайния срок за започване на ваксинациите, последните се извършват съгласно схемите, предвидени в този календар и инструкции за употреба на лекарства.

Библиографски списък

1. Ръководство за извънкласна работа на учениците по имунологични препарати: учеб. надбавка / Л.А. Леванова, В.А. Громова, И.Е. Филипова, Е.В. Сурикова, Л.П. Осипова, Ю.В. Захарова, В.П. Ковтун, Т.Е. Гаранина. - Кемерово: KemGMA, 2010 - 107 с.

2. Ръководство за практически упражнения по медицинска микробиология, вирусология и имунология” / Под редакцията на акад. на Руската академия на медицинските науки О.В. Бухарин. М.: Медицина; Уралски клон на Руската академия на науките, 2002 - 340 стр.

3. Наръчник за употребата на бактериални и вирусни препарати (под редакцията на S.G. Dzagurov и F.F. Rezepov). – М.: Медицина, 1975.

4. Борисов, Л.Б. Ръководство за лабораторни изследвания по медицинска микробиология, вирусология и имунология: Proc. надбавка. / Л.Б. Борисов, Б.Н. Козмин-Соколов, И.С. Фрейдлин. – М.: Медицина, 1993. – 240 с.

5. Клинична и имунологична ефикасност на имунобиологичните препарати: (справочник) T.I. Абакумов и др., изд. М.П. Костинова и Н.А. Озерецки - М .: Миклош, 2008 - 256 с.

Изобретението се отнася до областта на медицината и ветеринарната медицина. Методът включва ултразвуково третиране на вирус-съдържаща суспензия от различни, включително страстни, щамове на вируса на кърлежовия енцефалит. В същото време те се третират с ултразвук с честота 22 kHz за 1 минута, като тази процедура се повтаря три пъти с интервал от 2 минути, като се използва апаратът UZDN-1 или UZDN-A. Методът позволява да се повиши диагностичната ефективност на полученото лекарство, което се изразява в повишаване на титрите на антитела, открити в кръвните серуми на пациенти, диагностични увеличения на титрите на антитела в теста за инхибиране на хемаглутинацията и надеждността на честотата на потвърждаване клиничната диагноза "кърлежов енцефалит" до 33%. Изобретението може да се използва при производството на диагностични препарати и за подобряване на ефективността на серологичната диагностика на енцефалит, пренасян от кърлежи. 1 z.p. f-ly, 4 таб.

Изобретението се отнася до медицината и ветеринарната медицина, а именно до вирусологията, и може да се използва при производството на диагностични препарати и за подобряване на ефективността на серологичната диагностика на вирусни инфекции, по-специално на енцефалит, пренасян от кърлежи (TBE).

Известен метод за получаване на диагностикум BE, характеризиращ се с това, че за да се повиши специфичната активност на диагностикума, се използва страстен щам на вируса BE 4072 и за инактивиране на вируса към получения вирус-съдържащ се добавя бетапропиолактон суспензия до 0,1% концентрация и се инкубира в продължение на 24 часа при температура 4°C, а след центрофугиране, инактивирането продължава още 3 дни (виж AS No. 1378112 A1, A61K 39/12, G01N 33/53, 1987 / Kokorev BC , Мансуров П.Г., Злобин В.И., Субботина Л.С., Гайдамович С.Я., Мельникова Е.Е./ Заявление № 4044449/28-13 от 11 февруари 1986 г.).

Недостатъкът на този метод за получаване на антиген е включването в процеса на високоактивен химически реагент бетапропиолактон, който влияе негативно върху антигенните детерминанти на вируса по време на инактивиране на инфекциозната активност. В тази връзка качеството на антигенните препарати, дори когато се използват запалени варианти на вируса, се намалява.

Известен е и метод, който се състои във факта, че жадни варианти на вируса - щамове 4072 или 3745 се използват като източник на антиген на TBE вируса, а инактивирането на инфекциозната активност се извършва с метилглиоксал в концентрация 0,1 -0,05% при 4-8°C за 24 – 72 часа /28-13, от 05.11.1982 г.).

Недостатъкът на този метод е подобен на този, описан по-горе. Освен това и в двата случая времето за получаване на антигенния препарат и цената на неговото производство се увеличават при недостатъчно висока ефективност и чувствителност на препаратите.

Известен е и метод за производство на ваксина, при производството на който инактивирането на вируса в културалната течност се извършва чрез облъчване, докато кобалт-60 се използва като източник на гама излъчвател в доза 15-20 kGy за 2 часа при температура 19-21 ° C (виж патент RF № 2181295, A61K 39/12, 39/245, публикуван на 20 април 2002 г., бюлетин № 11).

Основният недостатък на този метод са специалните условия на обработка, които изискват радиационна защита и специално обучен висококвалифициран персонал.

Известен е и метод за повишаване на антигенността и имуногенността на биоматериал чрез излагането му на лазерно лъчение с дължина на вълната от 9 до 11 μm и плътност на мощността 0,1-1,0 kW/cm 2, извършено върху струя от суспензия от биоматериал с диаметър 0,5-15 mm, скорост на струята от 0,05 m/s до 10 m/s (виж RF патент № 2209085, A61K 41/00, 39/00. Публикуван на 27.07.2003 г. Бюл. № 21) .

При добри резултати от такава обработка, известна сложност на процеса на лазерна обработка е необходимостта от лазерни инсталации, които изискват специални съоръжения и допълнителни мерки за защита на придружителите, което оскъпява получаването на лекарства.

Целта на изобретението е да се изключат токсичните химични реагенти от технологичния цикъл за получаване на диагноза за енцефалит, пренасян от кърлежи, и в същото време да се повиши чувствителността и специфичността на диагностиките, като се намали времето и разходите за получаване на лекарството с разширяването на обхвата от диагностикуми, по-специално енцефалит, пренасян от кърлежи, свръхчувствителност.

Проблемът се решава от факта, че при приготвяне на препарат за обработка на суспензия, съдържаща вирус, той се излага на ултразвуково лъчение (US) с честота 22 kHz за 1 минута, като тази процедура се повтаря три пъти с интервал от 2 минути , докато ултразвуковото лечение се извършва на устройства от типа UZDN-1 или UZDN-A с помощта на универсален излъчвател при 22 kHz, а пробите от кръвен серум на пациенти с енцефалит, пренасян от кърлежи, се подлагат на антиинхибиторно лечение с каолин при pH 7,4 , а като щамове на вируса на кърлежовия енцефалит се използват за предпочитане: референтен щам Sof'in, avid щамове 4072 и 3445, non-avid щам 80, като обработката се извършва при средна температура 25-30° ° С.

Методът се извършва по следния начин.

Подготовка на антиген:

Употреба: 1. Авторски вирусен щам EC 4072 /Kokorev B.C. Мельникова Е.Е., Колотинов С.В. и др./, депозиран в СТБ под № 633. Щам 4072 е изолиран през 1966 г. от кръвта на пациента, силно чувствителен към неутрализиращия ефект на специфични антитела (според резултатите от крос-кинетична RTGA), авид, който се различава от референтния щам Sof'in;

2. Авторски щам на вируса КЕ 3745 /Колотвинов С.В., Кокорев В.С., Мельникова Е.Е. и др./, депозиран в СТБ под № 636. неутрализиращо действие на специфични антитела, авиден;

3. Авторски щам на вируса KE 80 /Kokorev B.C., Melnikova E.E., Kolotvinov S.V. и др./, депозиран в СТБ под № 634. Щамът е изолиран от кърлежи Ixodes persulcatus, не е много чувствителен към неутрализиращия ефект на специфични антитела, е невидим;

4. Референтен щам Sof'in на вируса TBE, получен от GKV на Института по вирусология. D.I.Ivanovsky RAMS.

Хемаглутиниращите антигени на тези вируси се получават по метода на екстракция с боратна сол с третиране с протамин сулфат. За целта се приготвя 10 или 20% суспензия от мозъка на новородени бели мишки в боратен буферен разтвор рН 9,0-9,3 на студено, центрофугира се на студено в продължение на 1 час при 10 000 rpm. Към супернатантната течност се добавя разтвор на протамин сулфат с подходяща концентрация в количество от 0,1 обем, т.е. добавете 1 ml разтвор на протамин сулфат на 10 ml. Разтвор на протамин сулфат се приготвя във физиологичен разтвор в концентрация 50 mg/ml или 25 mg/ml съответно за 20% и 10% мозъчна суспензия. Сместа се поставя за 30 минути в ледена баня, като се разбърква от време на време и след това се центрофугира за 15 минути при 2500 rpm на студено. Бистрият супернатант е антигенът.

Приготвяне на серумна проба.

Отстраняването на серумни инхибитори с каолин при рН 9,0 и отстраняването на нормалните серумни аглутинини се извършват съгласно общоприетия метод. Обработката на проби от кръвен серум със суспензия от каолин при рН 7,4 се извършва, както следва. Към 0,2 ml от тестовата проба се добавят 0,8 ml боратен буферен разтвор с pH 7,4 и 1 ml 25% суспензия от каолин, приготвена в боратен буферен разтвор с pH 7,4. Получената смес се разклаща в продължение на 25 минути и след това се центрофугира при 1000 rpm за 30 минути. 2 капки (0,05 ml) измити гъши еритроцити (за отстраняване на нормалните серумни аглутинини) се добавят към супернатанта и се разклаща периодично в продължение на 25 минути. Супернатантата, получена след многократно центрофугиране, се регулира до рН 9.0 с разтвор на NaOH.

Нова предложена операция - Лечение на антигенен препарат - диагностикум с ултразвук.

Обработката на антигенния препарат с ултразвук се извършва на апарат UZDN-1 или UZDN-A (изходна мощност 400 W) при честота 22 kHz за 1 min, като тази процедура се повтаря три пъти с интервал от 2 min, при температура на околната среда 25-30°C. Обработеният материал се центрофугира при 12 000 rpm за 15 минути.

Технологични параметри на предложения метод за ултразвукова обработка: ултразвукова честота 22 kHz; време за обработка на ултразвук - в рамките на 1 минута; повторяемостта на ултразвукова обработка - 3 цикъла, среднотемпературни и режими на центрофугиране след ултразвук - се определят и обосновават практически в лабораторията въз основа на резултатите от множество изследвания, като се вземат предвид анализите и прегледа на наличните източници, проведени в лабораторията на трансмисивни вирусни инфекции и енцефалит, пренасян от кърлежи на FGUN „Екатеринбургски научно-изследователски институт по вирусни инфекции“ и лаборатории на Катедрата по микробиология и вирусология на FGOU VPO „Уралска държавна селскостопанска академия“, Екатеринбург.

Пример 1. Съгласно предложения метод, хемаглутиниращи антигени се получават от референтния щам Sofyin и щам Avid 4072, които се използват при изследване на сдвоени проби от кръвни серуми от пациенти с енцефалит, пренасян от кърлежи.

Третирането на вирус-съдържащи суспензии с ултразвук променя не само и не толкова тяхната хемаглутинационна активност (титрите на хемаглутинин като правило се увеличават 2 пъти), а активността в теста за инхибиране на хемаглутинацията (HITA): броят на т.нар. серонегативните тестове са намалени, увеличаването на титрите на антителата е по-високо, отколкото при употребата на неозвучено лекарство (Таблица 1 и Таблица 2), което е неочевиден ефект от предложения метод с ултразвукова обработка на лекарството вместо въвеждане на химически консерванти - стабилизатори.

Така от таблици 1 и 2 може да се види, че при използване на ултразвукови антигени, диагностичната стойност на RTHA се увеличава, а именно: честотата на потвърждаване на клиничната диагноза "енцефалит, пренасян от кърлежи" се увеличава с 33% с 2-4- кратно увеличение на титъра на антителата в сравнение с реакцията, доставена с необработен ултразвуков диагностикум.

маса 1
Изследване на кръвни серумни проби на пациенти с ЕК в RTGA с диагностика от референтния щам Sof'in, лекуван с ултразвук
	Титри на антихемаглутинин в RTHA с ултразвукова диагностика от щам Sof'in
Сурова дрога	преработена ехографска подготовка
4501	1	1:20	1:320
2	1:20	1:1280
X-s	1	1:160	1:320
2	1:160	1:640
аз-ев	1	1:80	1:160
2	1:80	1:320
4512	1	1:20	1:40
2	1:40	1:80
4271	1	1:160	1:320
2	1:320	1:1280

таблица 2
Изследване на кръвни серумни проби на пациенти с ЕК в RTHA с диагноза от щам Avid 4072, лекувани с ултразвук
Сдвоени проби от кръвни серуми на пациенти	Титри на антихемаглутинин в RTGA с ултразвукова диагностика от щам 4072
Сурова дрога	преработена ехографска подготовка
4501	1	1:320	1:320
2	1:640	1:1280
X-s	1	1:640	1:640
2	1:640	1:1280

Пример 2. Диагностикуми, приготвени по подобен начин, се използват в RTGA при изследване на проби от кръвен серум, подложени на предварителна анти-инхибиторна обработка с каолин при рН 7,4. Диагностичното увеличение на титрите на антителата се увеличава с 8-32 пъти (Таблица 3).

Разработените и използвани в диагностичната практика препарати и методи позволяват своевременно и почти във всеки случай да се потвърди клиничната диагноза на кърлежовия енцефалит без използването на скъпи и оскъдни серологични изследвания.

Таблица 3
Зависимост на резултатите от RTGA от метода на антиинхибиторно лечение на кръвния серум на пациента и ултразвуково лечение на хемаглутиниращия антиген на TBE вируса (щам Sof'in)
№ сдвоена серумна проба	pH на средата по време на анти-инхибиторно третиране на серума	Титри на антихемаглутинини в реакция с диагностикум
суров	обработено с ултразвук
4968	1		1:40	1:80
2	9,0	1:40	1:80
1		1:20	1:40
2	7,4	1:320	1:1280
4569	1		0	1:20
2	9,0	1:40	1:40
1		1:10	1:20
2	74	1:40	1:160

Пример 3. Съгласно предложения метод с използване на ултразвукова обработка при определени параметри, беше обработен хемаглутиниращият антиген на TBE вируса от неавидния щам 80. Това явление (неочевиден ефект) е разкрито за първи път в историята на изследване на авидността на вирусните и бактериалните антигени на практика и според наличните източници.

Предложеният метод с ултразвуково третиране на лекарството при посочените параметри дава възможност за използване на почти всеки щам на вируса на TBE за диагностични цели без трудоемко търсене на естествени страстни варианти на патогена, което е новост на метода.

Таблица 4
Влияние на ултразвуковата обработка върху активността на антигенен препарат от страстен и неавиден вариант на вируса на кърлежовия енцефалит в реакция с антитела
TBE вирусен щам	3745 /жаден/	80 /неестетично/
антигенно лекарство	суров	обработено с ултразвук	суров	обработено с ултразвук
Резултатът от RTGA с имунен заешки серум към щама Sof'in	1:1280	1:2560	1:320	1:2560

При ултразвуково излагане на вируси с посочените параметри се откъсват или освобождават големи макромолекулни комплекси, които при по-нататъшно сондиране се „разхлабват“ с излагане на по-голям брой активни антигенни групи (демаскиране или дескриниране на антигенни детерминанти). Възможно е ултразвуковата обработка на вирус-съдържащи субстрати също да повиши ефективността на ваксинните препарати, ако имуногенното и превантивно действие на последните се определя от активността на същите антигенни детерминанти, както при изготвянето на диагностика на енцефалит, пренасян от кърлежи. .

Предложеният метод за получаване на диагностика на кърлежовия енцефалит може да намери широко практическо и научно приложение в медицината и ветеринарната медицина, разширявайки обхвата на необходимите ефективни диагностики на кърлежовия енцефалит с минимални разходи за труд и използване на общо оборудване.

ИСК

1. Метод за получаване на диагностика на енцефалит, пренасян от кърлежи, включващ приготвяне на вирус-съдържаща суспензия в буферен разтвор на студено, антиинхибиторно третиране с каолин, центрофугиране и отделяне на супернатанта, последвано от физическо въздействие върху за неговото активиране, характеризиращо се с това, че вирусосъдържащата суспензия от щамове на вируса на кърлежовия енцефалит се третира с ултразвук с честота 22 kHz за 1 мин, като процедурата се повтаря три пъти с интервал от 2 мин., докато ултразвуковата обработка на суспензията, съдържаща вирус, се извършва на устройства UZDN-1 или UZDN-A с помощта на универсален емитер при температура на суспензията 25-30 ° C.

2. Метод за получаване на диагностика на енцефалит, пренасян от кърлежи, съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че като щамове на вируса на кърлежовия енцефалит се използват: референтен щам Sofin, avid щамове 4072 и 3445, non-avid щам 80 .

Приготвя се от мозъци на мишки, заразени с изолиран вирус, който е претърпял 1-2 пасажа при мишки. Използва се за настройка на RSK.

Инактивирана културална ваксина срещу енцефалит, пренасян от кърлежи

Стерилен културен специфичен антиген на вируса на енцефалит, пренасян от кърлежи, инактивиран с формалин. Използва се за профилактика на енцефалит сред населението и лабораторния персонал в природни огнища по епидемиологични показания.

Имуноглобулин срещу енцефалит, пренасян от кърлежи

Съдържа висок титър на специфични антивирусни антитела, които се извличат от кръвния серум на коне, хиперимунизирани с вируса на кърлежовия енцефалит. Този имуноглобулин се използва за лечение и профилактика на енцефалит, пренасян от кърлежи.

Суха ваксина срещу бяс Fermi

Произвежда се от мозъка на млади овце, заразени с фиксиран вирус на бяс, характеризиращ се с намалена вирулентност. Вирусът в мозъчната суспензия се инактивира с 1% разтвор на фенол и се лиофилизира. След такова третиране в препарата остават по-малко от 10LD50 жив вирус. Ваксината се прилага на лица, ухапани от болни или съмнителни животни за бяс. Ваксинациите се извършват съгласно специални инструкции. Имунитетът след ваксинация се развива след 2 седмици и продължава 6 месеца.

Имуноглобулин срещу бяс

Получава се чрез хиперимунизация на коне с фиксиран вирус на бяс. Прилага се не по-късно от 72 часа след ухапване от животно в комбинация с ваксина против бяс. Лекарството неутрализира вируса на бяс и предотвратява постваксиналния енцефалит.

Диагностична имиуноензимна тестова система за откриване на антитела срещу ХИВ

Тестовата система включва вирусен антиген, адсорбиран върху твърдофазен носител (полистиролови плочи с ямки); антитела срещу човешки имуноглобулини, конюгирани с пероксидаза от хрян; субстрат с индикатор за откриване на пероксидазната активност. Използва се за серодиагностика на СПИН.

Азидотимидин (ретровирин)

ефективно лечение на пациенти с HIV инфекция; синтетично лекарство - инхибитор на обратната транскриптаза и синтеза на провирусна ДНК. Той е структурен аналог на тимидина.

Диагностични, профилактични и терапевтични лекарства

Рикетсиалните антигени сухи корпускуларни

Суспензия на убита рикетсия, отгледана в пилешки ембрион и добре пречистена от примеси, се използва за създаване на реакции на аглутинация, RPHA и RSK.

Рикетсиални антигени сухо разтворими

Получава се от суспензия на рикетсия чрез екстракция и третиране с етер. Използва се за настройка на RSK и RPGA Суха жива комбинирана ваксина срещу коремен тиф E (ZhKSV-E). Смес от жива култура на Rickettsia Provaceca (ваксинален щам E), отгледана в пилешки ембрион с разтворим антиген на вирулентен щам на Rickettsia Provaceca. Използва се за активна имунизация срещу тиф. Антибиотици: при рецидивираща треска - пеницилин, тетрациклин, хлорамфеникол; с рикетсиоза - тетрациклин, хлорамфеникол.

Гонококов антиген

За определяне на RSK се използва суспензия на убитата култура на гонокок.

Гонококова ваксина

Суспензия на гонококи, убити чрез нагряване, се използва за ваксинотерапия на хронична гонорея, както и за "провокация" при диагностицирането на това заболяване. Антибиотици: пеницилин, тетрациклин, канамицин и др.

Тест система за серодиагностика на хепатит В

Стандартен HBs антиген и съответен специфичен антисерум.

Имуноглобулин нормален човешки. Получава се от човешка кръв (донорска, плацентарна) чрез фракциониране. Използва се за профилактика и лечение на вирусен хепатит.

Туберкулин сух пречистен

Получава се от филтрат на бульонната култура на микобактерии чрез добавяне на химикали, утаяващи протеини, последвано от пречистване и лиофилизация. Използва се за определяне на кожни алергични тестове.

BCG ваксина

На живо; замразена култура на апатогенен щам на микобактерия туберкулоза, получена от френските учени Калмет и Герен. Използва се интрадермално за активна специфична профилактика на туберкулоза. Антибиотици и химиотерапевтични лекарства: стрептомицин, PASK, производни на GINK (тубазид, фтивазид, метазид и др.), рифампицин, циклосерин, канамицин, етионамид и др. При лечението на пациенти лекарствата обикновено се комбинират, като се има предвид чувствителността на Mykobacterium tubercobacterium към тях и клиничните характеристики на заболяването.

ДИАГНОСТИКА(на гръцки, diagnostikos, способен да разпознава) - суспензии от неутрализирани микроорганизми, използвани като антигени за серологични реакции. Опасност при работа с живи култури, тяхната способност за вариабилност и наличието на широки антигенни комуникации се използват D. - целесъобразни са по-стандартни и хомогенни препарати, съдържащи определени антигенни компоненти.

С помощта на D. в реакциите на аглутинация, пасивна (непряка) хемаглутинация (RPHA) и др. се откриват специфични антитела в серумите на хора и животни с цел поставяне на диагноза и изследване на имунното състояние на организма.

D. се използва особено широко при лабораторни изследвания за чревни инфекции. Въпреки това, общата антигенна структура на чревните бактерии определя наличието на кръстосани реакции и изисква диференцирано откриване на антитела. За тази цел се извършва селективно потискане на отделните антигени: с помощта на фенол или формалин се потиска О-аглутинацията, както предполагат Felix и Olitsky (A. Felix, L. Olitzki, 1928). Въздействие с алкохол по метода на Виен и Зонтаг или нагряване по Кауфман се получават О-диагностици с инактивиран флагеларен антиген. Още по-обещаващо е използването на монодиагностици, чийто принцип е разработен от F. G. Bernhof (1944). Тези препарати съдържат само един антигенен компонент и взаимодействат само с определени специфични антитела.

Показана е възможността за запазване на свойствата на бактериалните D. чрез тяхната лиофилизация (вж.).

D., използвани за серодиагностика на различни инфекции, са принципно сходни, но някои видове от тези лекарства имат определени специфики.

Общоприето е, че RPHA е по-чувствителна и специфична от бактериалната аглутинация. Като антигени в RPHA се използват формализирани еритроцити, сенсибилизирани с антигени, получени по методите на Boivin и Westphal.

Възможно е също да се използва еритроцит D. за откриване на антиген в тъкани, секрети на пациенти, екстракти от различни вещества и др. В тези случаи се използват еритроцити, сенсибилизирани с антитела – „антитяло диагностикуми”.

Вирусните D. се използват главно в реакцията на свързване на комплемента (RCC), RTGA и реакциите на неутрализация. Те се приготвят от съдържащи вирус културни течности, третирани (инактивирани) по различни начини.

Кратко описание на основните Д. и обхвата на тяхното приложение са представени в таблицата.

Има и експериментални препарати, използвани в научната работа: еритроцитни колидиагностикуми, дифтериен еритроцит D., хемаглутиниращи антигени на вируси на паротит, хемаглутиниращ антиген на морбили и др.

Таблица. Кратко описание на основните диагностикуми и целта на тяхното приложение

Диагностикуми	кратко описание на	Цел на приложението (с помощта на серума на субекта)
Бактериални диагностикуми
Диагностикуми от бактерии от чревното семейство: Shigella Flexner, Sonne, Newcastle; салмонела коремен тиф (OH, O), паратиф A и B, cholera suis, typhimurium, enteritidis	Микробна суспензия (3 милиарда микробни тела в 1 ml), инактивирана с 0,4-0,5% разтвор на формалин	Изявление на реакцията на аглутинация за уточняване на клин, диагноза на заболяване
Salmonella O-diagnosticums (2, 4, 7, 8, 9 и 3, 10)	Микробна суспензия, съдържаща частичен О-антиген (3 милиарда микробни тела в 1 ml), получена от избрани щамове, инактивирана с 15% разтвор на глицерол	Изявление на реакцията на аглутинация за откриване на О-антитела при салмонелоза
Salmonella H-monodiagnosticums (a, b, c, d, eh, c, k, lv, gm, p, st и антигени от втора фаза - 1, 2, 5, 6, 7)	Микробна суспензия, съдържаща компонентите на флагеларния антиген от 1-ва и 2-ра фаза (3 милиарда микробни тела в 1 ml), получена от избрани щамове, инактивирана с 0,5% разтвор на формалин	Създаване на реакция на аглутинация за откриване на Н-антитела за диагностични цели и за установяване на анамнеза за заболяването
Vi diagnosticum	Микробна суспензия (3 милиарда микробни тела в 1 ml) от щамове, съдържащи фактор Vi, третирана с 0,4% разтвор на формалин и 0,6% разтвор на калциев хлорид	Изявление на реакцията на аглутинация за откриване на бактерионосител на тиф
Бруцела единична диагностика	Суспензия на Brucella в 12% разтвор на готварска сол, оцветена в синьо и инактивирана с 0,5% разтвор на фенол	Изявление на реакцията на аглутинация (реакция на Райт и реакция на Хъдълсън за идентифициране на заразени хора и животни - вижте Бруцелоза, методи за изследване)
Tularemia diagnosticum	Микробна суспензия (25 милиарда микробни тела в 1 ml) от ваксиналния щам, инактивирана с 0,5% разтвор на формалин	Задаване на реакция на аглутинация при спадане на обема върху стъкло за серодиагностика и изследване на имунното състояние на ваксинираните
Диагностика на лептоспироза	Лиофилизирана микробна суспензия от 11 щама от най-често срещаните серотипове	Изявление на RSK за потвърждение на клин, диагноза на заболяване
Рикетсиални диагностикуми	Корпускуларни антигени - суспензия от рикетсия, отгледана в жълтъчните торбички на пилешки ембриони или белодробен рикетсиален материал от заразени гризачи, третирани с етер, целит или диференциално центрофугиране	Изявление на реакцията на аглутинация за диференциална диагноза на рикетсиоза
Диагностика на еритроцитите
Диагностикуми за еритроцити от Shigella Flexner - Sonne	Формализирани еритроцити, сенсибилизирани с антигени на Boivin, Westphal и др.	Изявление на RPHA за изясняване на клиновата „диагноза на дизентерия
Еритроцитна Salmonella Vi diagnosticum	Формализирани еритроцити, сенсибилизирани с пречистен Vi антиген	Изявление на RPHA за откриване на бактерионосител на тиф
Erythrocyte Salmonella O-diagnosticums (1, 2, 12; 1, 4, 12; 6, 7; 6, 8; 1, 9, 12; 3, 10 и комплекс)	1% суспензия от формализирани еритроцити, сенсибилизирани с антигени на Boivin, Westphal и др.	Изявление на RPHA за изясняване на клиновата „диагноза на заболяването
Диагностикум на лиофилизирана туларемия на еритроцитите	Формализирани лиофилизирани еритроцити, сенсибилизирани с антиген на туларемия	Изявление на RPHA за изясняване на клиниката., Диагностика на туларемия, както и неутрализиране на антитела за откриване на: антиген
Вирусни диагностикуми
антиген на ваксиния вирус	Сух препарат от жив вирус на ваксина, култивиран върху хорион-алантоисната мембрана на пилешки ембриони	Декларация на RPHA за откриване на антихемаглутинини при пациенти и ваксинирани
аденовирус специфичен антиген	Получава се чрез култивиране на вирус тип 6 в култура от трансплантируеми A-1 клетки (антиген, общ за всички аденовируси)	Изявление на RSK за откриване на комплемент-фиксиращи антитела в серума на пациенти
Диагностика на кърлежов енцефалит и етиологично подобни заболявания		Изявление на RSK и RTGA за уточняване на клин, диагноза на заболяване
Орнитозен антиген	Сух препарат от сварени, съдържащи вирус жълтъчни торбички на пилешки ембриони, екстрахирани с етер, утаени с ацетон и инактивирани с мертиолат	Декларация на RSC за диагностика на орнитоза при хора, птици и животни
Influenza diagnosticum суха	Алантоична течност от развиващи се пилешки ембриони, заразени с един от щамовете на грипния вирус тип А, В или С, инактивиран с формалин, мертиолат. Поради вариабилността на антигенната структура на грипния вирус се осигуряват чести промени в производствените щамове.	Становище на RTGA за изясняване на клиниката., Диагностика на заболяването
Parainfluenza diagnosticum тип 1, 2, 3 за RTHA, сух	Културална течност (човешки ембрионални бъбреци), съдържаща един от щамовете на параинфлуенца вирус, третиран с tween-80, етер и мертиолат	Изявление на RTGA за уточняване на клин, диагноза на заболяване

Библиография:Зуев А. С. Бактериален ви-диагностик за откриване на хронични носители на тифоидни бактерии, Журн, микр., епид и имуно., № 2, с. 51, 1959, библиогр.; Зуев А. С., Новоселова А. И. и Ликина И. В. Разработване на метод за производство на O-diagnosticums и H-monodiagnosticums и тяхното използване в серодиагностиката на салмонелоза, пак там, № 3, с. 42, 1956; Имунология и профилактика на чревни инфекции, изд. С. И. Диденко, с. 180, М., 1962; Каралник Б. В. Еритроцитни диагностикуми, М., 1976; Насоки за микробиологична диагностика на инфекциозни заболявания, изд. К. И. Матвеева, с. 172, Москва, 1973; Суботина Ю. Л. и др. Серологична диагностика на салмонелоза и антигенни връзки при реакции с еритроцитни и бактериални О-диагностици, Журн, микро, епид и имуно., № 3, с. 19, 1970, библиогр.

Л. Б. Богоявленская.

За диагностични целикогато се открият антитела в кръвния серум на пациенти, реконвалесценти и бактерионосители, се използват серологични тестове.

За такива реакцииизползват се диагностикуми - препарати, съдържащи суспензия от неутрализирани микроорганизми или определени антигени.

Необходимостта от използване на диагностикуми за серологични реакции е свързана не само с тяхното явно предимство пред живите култури от микроби (безопасност при работа), но и защото са щамове на микроорганизми с висока чувствителност към антитела и способност да запазват антигенни свойства за дълго време. избрани за изготвяне на диагностикуми.

За дезактивиране на микроорганизмипри приготвянето на диагностикуми най-често се използват химикали, особено формалинът, който е най-добрият консервант. Убитите от топлина микроби запазват антигенните си свойства по-лошо и се използват рядко.

При серологични реакции(реакции на аглутинация, реакции на пасивна хемаглутинация, реакции на свързване на комплемента, реакции на инхибиране на хемаглутинация) се използват за откриване на специфични антитела: бактериални, еритроцитни и вирусни диагностикуми.

Бактериални диагностикумиможе да съдържа инактивирана микробна суспензия или отделни антигенни компоненти на бактерии: O, H или Vi антигени и се използват в реакции на аглутинация.

Диагностика на еритроцититеса еритроцити (третирани с танин или формалин) с антигени, извлечени от адсорбирани върху тях бактерии и се използват в RPHA (реакция на пасивна хемаглутинация). В случаите, когато RPGA се използва за откриване на антиген в секретите на пациентите, в тъканите и т.н., се използват "диагностици на антитела", т.е. еритроцити, сенсибилизирани с антитела.

Вирусни диагностикуми- препарати, съдържащи инактивирани вирус-съдържащи течности (културни, от пилешки ембриони или от животни, заразени със съответния вирус), се използват в CSC (реакция на свързване на комплемента), реакция на инхибиране на хемаглутинация (HITA) и реакция на неутрализация.

Понастоящемв лабораториите се използват следните диагностични тестове.

1. Бактериална диагностика на салмонела коремен тиф. Използва се в реакцията на аглутинация за откриване на антитела в серума на пациентите.

2. Salmonella O-diagnosticums съдържат O-антигени от различни групи Salmonella (инактивирани с 15% разтвор на глицерол). Използват се за откриване на О-антитела при инфекции със Salmonella в реакцията на аглутинация със серума на пациентите.

3. Salmonella H-monodiagnosticums. Използват се в реакцията на аглутинация за определяне на заболяването в миналото (реакция на анамнестична аглутинация) и по-рядко за диагностични цели.

4. Vi - тифозен диагностикум. Използва се в реакцията на аглутинация при откриване на тифозен бактерионосител.

5. Единична диагностика на бруцелоза - суспензия от бруцела (фенол-инактивирана), оцветена с метиленово синьо. Използва се за определяне на антитела в кръвните серуми на хора и животни с бруцелоза в тестовете за аглутинация на Райт и Хедълсън.

6. Erythrocyte Salmonella O-diagnosticum - суспензия от еритроцити с адсорбирани върху тях O-антигени от различни групи Salmonella. Използва се за определяне на RPHA със серума на пациента при изясняване на клиничната диагноза на инфекция със Salmonella.

7. Еритроцитен Vi-diagnosticum - еритроцити, сенсибилизирани с пречистен Vi-антиген на S. typhi, използван в RPGA за откриване на тифоиден бактерионосител.

8. Influenza diagnosticum е алантоична течност от пилешки ембриони, заразени с грипния вирус (тип A, B) и инактивирани с мертиолат или формалин. Диагностиците са необходими при поставяне на RTHA със сдвоени серуми на пациенти за изясняване на клиничната диагноза и циркулиращия тип грипен вирус.

9. Вирусът на кърлежовия енцефалит Diagnosticum се получава от суспензия на мозъка на бели мишки, заразени с вируса на кърлежовия енцефалит. Суспензията се центрофугира (за избистряне) и се инактивира с химикали.

Diagnosticum се използва в RTGA и RSK със серума на пациентите при диагностициране на заболяването.