Стандартна форма на синовиалната течност. Изследване на синовиалната течност. Кога се назначава изследване на синовиалната течност?

Защо се прави анализ на синовиалната течност?

В условията на първична медицинска помощ данните за синовиалната течност (SF) могат да помогнат да се определи специалистът, към когото пациентът трябва да бъде насочен.

• Ако невъзпалителна СФ - на ортопеда.
• Ако е възпалително - на ревматолог.

Диагностична стойност на анализа на синовиалната течност

• Възпалителна или невъзпалителна патология
• Кристално възпаление или сепсис или влошаване
• Помощ при идентифициране на групи заболявания въз основа на броя на клетките и техния вид
• Определяне на вида на протезна недостатъчност
• прогнозна стойност
• Ортопедична интервенция
• Стадий на специфично заболяване
• Мониторинг на терапията. По-специално, отхвърлянето на терапията с моноклонални антитела.

На фиг. Фигури 1 и 2 отразяват алгоритъма за диагностициране на ставни заболявания въз основа на данните от анализа на синовиалната течност.

Патологичните промени в тъканите около болната става се отразяват в обема, клетъчния състав и наличието на твърди частици в SF. Различните по етиология възпалителни заболявания на ставите имат характерни клетъчни модели, които могат да бъдат разпознати и използвани при диагностицирането на определено заболяване или група заболявания (фиг. 1, 2). За да се идентифицират тези разлики, е необходимо правилно да се подбере и правилно съхранява SF, за да се сведат до минимум автолитичните промени и разграждането на характеристиката CL. EDTA се използва като антикоагулант. Съхранението при 4°C се понася добре от SF и дава отлични диагностични резултати. Практически адекватни резултати могат да бъдат получени до 48 часа след аспирацията, но по-дългото съхранение, дори при 4°C, обикновено позволява да се идентифицират само кристали и частици. По-голямата част от Cl претърпява лизиране.

Цитологичен анализ на синовиалната течност

Затлъстяването Cl може да бъде открито при анализа на SF при повечето пациенти със ставно заболяване, но най-често се наблюдава при възпалителен артрит при пациенти със серонегативни спондилоартропатии и при невъзпалителни ставни лезии, свързани с травма.

Този тип CL често се открива по време на анализ на течности на пациенти с вътреставен кръвоизлив или артрография, както и алергична реакция към инжектирани лекарства като изкуствена течност.

Изготвил: Токшекенова Б.С.

Съдържа се в кухината на ставата
синовиалната течност е
биологична среда, уникална в
биофизични, физико-химични
свойства и състав. Основи
фундаментални изследвания
са основани в средата на 19 век.
Германският изследовател Фрихс
(1846), който изучава химичното и
клетъчен състав на животинската синовиа.
Тези изследвания са разработени и
продължава в Неговите произведения (1865),
Steinberg (1874), O.E. Хаген-Торн
(1883) и др.

Благодарение на приложението
микроскопски, хистохимични,
ултраструктурни методи за изследване
успя да изучава модели
структурни и метаболитни процеси в
елементи на синовиалните стави. В края
1960-те - началото на 1970-те имаше
разбиране на синовиалната система
въз основа на общото развитие и
координация на синовиалната функция
мембрани, синовии и ставен хрущял.
SF е кръвен трансудат и
неговият състав има значително
подобна на плазмата, но различна от нея
по-малко протеини и
наличието на специфична
протеогликан - хиалуронова киселина
(GUK). Разлики в състава на протеина
плазмата и синовията се обясняват с бариера
свойства на синовиума
непроницаем за протеинови молекули
относително молекулно тегло повече от
160000
.

SC се образува от три
източници: съдържащи вода
кръвен трансудат, електролити,
протеини; продукти на секрецията
синовиални клетки на обвивката
черупков слой - HUK и
протеолитични ензими;
носете и сменяйте продукти
клетки и основно вещество
синовиална мембрана - в
основно протеогликани и
гликопротеини, постоянно
навлизане в ставната кухина
нормален процес
жизнена дейност.

Обикновено SF е представен от синовиални обвивки.

синовиоцити (34,2-37,8%),
хистиоцити (8,9-12,5%),
лимфоцити (37,4-42,6%),
моноцити (1,8-3,2%),
неутрофили (1,2-2,0)
некласифицирани клетки (8,3-10,1%).

Поради специфичните си физикохимични свойства и състав, SF изпълнява редица функции в ставите:

метаболитен (обмен),
бариера (защитна),
защитни (биомеханични).

Синовиална
течност от кухината
става се взема от
диагностични и
терапевтична цел чрез
пункция в
асептични условия
без предварително
локална анестезия, т.н
като новокаин
унищожава хроматина
клетъчни ядра.

Синовиалната течност се разпределя в 3 епруветки:

в епруветка с антикоагулант
цитологично изследване;
в суха епруветка за химико-микроскопски
проучване и подготовка на натив
подготовка за микроскопия в поляризиран
светлина;
в стерилна епруветка за бактериологично изследване
изследвания.

10.

Трябва да се направи анализ на синовиалната течност
възможно най-скоро след получаването му.
Фалшиви резултати могат да се получат, когато
забавяне на изследването с повече от 6 часа
в резултат на следните промени:
намаляване на броя на левкоцитите;
намаляване на броя на кристалите
(калциев пирофосфат дихидрат);
наличието на артефакти под формата на неоплазми
кристали.

11. Лабораторна практика

Стандартен лабораторен тест
синовиалната течност включва следните стъпки:
оценка на физическите свойства (обем, цвят, характер,
вискозитет, мътност, pH, муцинов съсирек);
цитологично изследване (преброяване на броя
клетки, микроскопия на нативни и оцветени
лекарство);
поляризационна микроскопия на натив
лекарство;
химичен анализ;
допълнителни изследвания (според показанията).

12. ФИЗИЧЕСКИ СВОЙСТВА

Обемът на синовиалната течност се оценява с помощта на градуирана тръба, цвят и
характер - визуално в пропусната светлина в сравнение с дестилирана вода.
Вискозитетът се определя с хемовискозиметър или по дължината на нишката, опъната зад стъклото
пръчка, след като е потопена в епруветка и изразена в произволни единици:
1 - висок вискозитет;
2 - умерен вискозитет;
3 - изключително нисък вискозитет (приближава вода).
За оценка на мътността се използва оценка:
1 точка - пълна прозрачност;
2 точки - лека мътност;
3 точки - мътност.
Муцинов съсирек се образува, когато синовиалната течност се смеси с оцетна киселина.
киселина.
В зависимост от състава на синовиалната течност, съсирекът може да бъде плътен или рехав.
За определяне на pH се използват диагностични ленти, обикновено използвани за
изследвания на урината. Този индикатор трябва да се определи веднага след получаване
синовиална течност (рН се променя по време на съхранение).

13. ЦИТОЛОГИЧНО ИЗСЛЕДВАНЕ

Броят на клетките е от голяма диагностична стойност.
синовиална течност, която се извършва съгласно общоприетите правила
(ръчно или автоматично). Обикновено цитозата е не повече от
100 клетки в 1 µl. Съхранение на синовиална течност за няколко
часа при стайна температура води до разрушаване на левкоцитите.
Микроскопско изследване се подлага както на нативни, така и на
цветен препарат. Техниката на приготвянето му е стандартна, препоръчителна
с помощта на цитоцентрофуга. Изследването на родния наркотик позволява
предварителна оценка на съдържанието на клетъчни елементи, идентифициране на рагоцити
и неклетъчни частици. В оцветения препарат се брои цитограмата
(синовиоцитограма) на 100-200 клетки, за предпочитане в 2-3 препарата.
Противно на добре познатото мнение, че клетките от тъканен произход в
синовиалната течност преобладава над образуваните елементи на кръвта,
често клетъчният състав на излива е представен главно от неутрофили
и лимфоцити.

14. Пункция на синовиална течност

15. Клинична и диагностична стойност

При патологията цветът на синовиалната течност се променя в зависимост от
естеството на ставния излив (серозен, хеморагичен, фибринозен,
смесени). С вторичен синовит на синовиалната течност
придобива кехлибарен цвят, а при ревматоиден и псориатичен
Цветът на артрита варира от жълто до зелено.
Жълто-зеленият цвят на синовиалната течност може да бъде
инфекциозни и подагрозни лезии на ставите. Със септик
или травматично увреждане на ставната синовиална течност
придобива кървав цвят с различна тежест. В
пигментиран вилозен-нодуларен синовит, ставен излив има
кафяво-червен цвят. Кремообразният характер на синовиума
течностите могат да придадат мазнини при вътреставни фрактури.
Златният оттенък на синовиалната течност се дължи на наличието на
холестерол.

16. Мътност

характерен за ревматоиден, псориатичен
или септичен артрит. Синовиален вискозитет
течността намалява при ревматизъм,
ревматоиден, подагрозен и псориатичен
артрит, болест на Райтер, артроза,
анкилозиращ спондилит, в по-малка степен
степен - с посттравматичен артрит.
Свободният муцинов съсирек винаги показва
наличието на възпалителен процес в ставата
(ревматоиден артрит и други заболявания),
обаче има и по-добри
индикатори.

17. Промяна в pH

синовиалната течност няма фундаментална диагностика
стойности, стойността му намалява с възпаление. Под микроскопия
от естественото лекарство могат да бъдат открити неклетъчни частици -
екзогенни (растителни тръни, фрагменти от изкуствени кристали,
компоненти за ендопротеза, лекарствени суспензии) и
ендогенни (фрагменти от хрущял, менисци, връзки, кристали)
Компоненти. Появата на ендопротезни компоненти в синовиалната
течност е прогностичен признак за развитието на неговата нестабилност.
Сред ендогенните компоненти на синовиалната течност, най-важният
елемент, който има фундаментална клинична диагностика
стойност, - кристали на натриев урат и калциев пирофосфат. V
синовиалната течност могат да бъдат открити амилоидни тела, капки
неутрална мазнина, кристали холестерол, калций, хематоидин.

18. Цитоза

Един от най-чувствителните диагностични критерии,
да се направи разлика между възпалителни и невъзпалителни
заболявания и оценка на динамиката на патологичния процес.
Характерно е увеличаването на броя на левкоцитите в синовиалната течност
за острия период на всеки възпалителен артрит (например в
при пристъп на подагра броят на левкоцитите достига 60x106 клетки в 1
µl). Умерена цитоза се отбелязва при псевдоподагра, синдром на Reiter,
псориатичен артрит. Инфекциозен (бактериален) артрит
цитозата обикновено е по-висока (50x103 клетки в 1 µl), в такива проби
растеж на микрофлората. Малка цитоза (по-малко от 1-2x103 клетки в 1 µl,
предимно неутрофили) е характерен за "механични"
ставни лезии, включително за микрокристален артрит.

19.

При ревматоиден артрит съдържанието на гранулоцити
достига 90%, а броят на лимфоцитите намалява по-малко от
10%. Тези промени са по-изразени при серопозитивните
вариант на ревматоиден артрит. С токсично-алергичен синовит, синовиална форма
туберкулоза или паранеопластичен артрит в
синовиалната течност е доминирана от мононуклеарни клетки.
Характерно е наличието на рагоцити в значителен брой
за ревматоиден артрит. Самотните рагоцити могат
възникват с други ставни лезии
(септичен артрит и възпалителни артропатии). LE клетките се намират в синовиалната течност при
системен лупус еритематозус при около 50% от пациентите.
Атипични клетки в синовиалната течност
се записва сравнително рядко.

20. Бактериоскопия

има само спомагателна и често много ограничена стойност,
тъй като ако се подозира микробната природа на възпалението
изисква се стандартно бактериологично изследване. но
микроскопия на намазка от синовиална течност може да бъде
открити гонококи при гонококов артрит. Наличие в намазки
грам-положителни коки, обединени в клъстери, позволява
предполага стафилококова етиология на инфекцията. други
причинители на инфекциозен артрит могат да бъдат стрептококи,
грам отрицателни пръчици. С гъбичен артрит (кандидоза,
аспергилоза) в синовиалната течност се открива мицелът на гъбичките.
Нивото на протеин в синовиалната течност се повишава леко с
дегенеративни заболявания и посттравматичен артрит. | Повече ▼
се наблюдава изразено повишаване на съдържанието на общия протеин с
възпалителни заболявания (например ревматоиден артрит
- до 70 g / l), често това променя и качествения му състав

21. Ниво на глюкоза.

Това е по-специфичен, но по-малко чувствителен индикатор.
възпалителни промени в ставата, като нива на глюкоза
в синовиалната течност е значително намалена с
възпалителни артропатии. Ето защо през последните
години за експресна диагностика на гнойни (септични)
артрит определя нивото на лактат в синовиалната
течности. Промени в състава на синовиалната течност
позволяват да се установи възпалителния характер на заболяването,
което води до образуване на ставен излив. Неутрофилна
левкоцитоза, повишаване на концентрацията на протеин и лактат, както и
намаляване на нивата на глюкозата - важни признаци
възпалителен процес в ставата. Имунологични
методи също така позволяват да се разграничат възпалителните и
невъзпалителни ставни заболявания. Автоантитела
се появяват в синовиалната течност по-рано, отколкото в плазмата
кръв.

22.

Съдържание на протеин в синовиалната течност
забележимо по-малко, отколкото в кръвта и е (1020 g / l). С остеоартрит и посттравматичен
артрит, значително увеличение на протеина не е
е намерен. За възпалителна артропатия
ниво на протеин в синовиалната течност
се повишава над 20 g/l. Заедно с това можете
отбелязват повишаване на нивото на лактат дехидрогеназа,
индикатори за остра фаза при възпалителни
ставни заболявания (обикновено С-реактивни
катерица).

Анализ на синовиалната течност- лабораторно изследване на излив, натрупан в ставната кухина. Процедурата за вземане на ставна течност за анализ се нарича.

Ставата е изградена от две (или повече) кости, покрити в точката на контакт с хрущяла. Отвън е увит в здрава и стегната синовиална торба, подсилена с връзки и сухожилия. Вътрешността на синовиалната торбичка е облицована с клетки, които произвеждат синовиална течност. синовиалната течностзапълва всички кухини и пукнатини в ставата.

Благодарение на ставите тялото може да се движи като цяло, а ставната течност придава плавност на движенията.

Анализ на ставна/синовиална течност tкато важен при диагностицирането на заболявания на ставите, както и общ тест на урината за откриване на бъбречна патология или общ кръвен тест при диагностициране на анемия.

Синовиалната течност е

синовиална или ставна течностили синовиална- Това е вискозна ненютонова течност, разположена в кухината на всички стави. По консистенция е подобен на яйчен белтък (оттук и латинското му име) и химически подобен на плазмата.

Ставната течност е 20 пъти по-гъста от кръвта!

Съединение

• произвеждат фибробласти в синовиума хиалуронова киселина, (общо количество 3-4 mg/l)
• лубрицин(протеогликан 4) - смазва и улеснява плъзгането на ставните повърхности
• интерстициална течност - филтрирана кръвна плазма
• ензими - протеинази и колагенази
• протеини - някои идват от кръвта, други се синтезират директно от синовиалната мембрана
• , и други компоненти
• клетки - минималният брой и единични за отстраняване на микробите и стареещите клетки на синовиалната мембрана в процеса на износване на ставите

Функции

ставна течносте плаващ лубрикант между хрущяла в ставата. Става по-плътен при активно движение и по-тънък в покой. Поема и намалява силата на удара при бягане и скачане. Доставя хранителни вещества на хрущяла и премахва метаболитните продукти.

Бързо реагира на всички промени в ставата, действайки като индикатор за патологичния процес.

Показания

Лабораторното изследване на ставната течност е необходимо за диагностициране на ставни заболявания с неизвестен произход, особено за диференциална диагноза на септичен и подагрозен артрит, остър моноартрит.

Симптоми-индикации за ставна пункция и анализ на синовиалната течност:

• ставен излив
• остра или хронична куцота
• ръката или крака не изпълняват функцията на опора поради болка в ставата
• комбинация с треска, деформация на ставите, зачервяване и подуване
• значителен

Артроцентеза

Артроцентезаили пункция става- това е процедура за отстраняване на течност от ставната кухина за последващ лабораторен анализ или с цел лечение - намаляване на напрежението и болката, прилагане на лекарства.

Артроцентеза с артрография – в ставата се инжектира контрастно вещество и се правят поредица от рентгенови снимки. Един от вариантите за диагностично използване на артроцентеза. Заменен от по-информативни CT и MRI.

Артроцентезата практически няма противопоказания. Относителна пречка за пункция е инфекция на кожата на мястото на бъдещата пункция, продължаващо кървене в ставата, общо сериозно състояние. Хнай-често се пробива колянната става, след това при намаляването й се пробиват рамото, лакътя, китката, глезена, темпорамандибуларните стави.

Не е необходима специална подготовка. Препоръчително е да се въздържате от хранене 8-10 часа преди процедурата.

Преди пункция на ставата е необходимо да информирате лекаря за наличието на алергия към каквито и да е лекарства, особено локални анестетици и йод. Когато приемате лекарства за разреждане на кръвта (аспирин, клопидогрел, варфарин), може да се наложи те да бъдат отменени за няколко дни преди манипулацията. Ако е необходимо, предварително направете, анализирайте и.

производителност

Кожата на мястото на бъдещата пункция се дезинфекцира и анестезира. Лекарят вкарва голяма пункционна игла през кожата и синовиалната мембрана в ставната кухина.Съвместната течност се аспирира в стерилна спринцовка.

Процедурата продължава няколко минути, след което върху мястото на пункцията се поставя превръзка под налягане.

Спринцовката със синовиалната течност незабавно се изпраща в лабораторията за анализ. По-рядко те се изсипват в епруветка с антитромбоцитно средство (хепарин).

Ако планирате да изследвате глюкозата в синовиалната течност, тогава се взема кръвна проба преди артроцентеза, за да се определи нивото на гликемия.

Усложнения

• ставната инфекция е изключително рядка, рискът е по-висок при многократни пункции
• кървене в ставата
• болка, увреждане на хрущяли или нерви, разкъсан лигамент

Синовиалната течност е нормална

Има много малко синовиална течност. В колянната става от 0,5 до 4 ml, а в раменната става - до 3 ml. Той е светложълт, прозрачен, вискозен, без примеси.

Какво изследват?

• физични свойства- количество, цвят, прозрачност, вискозитет, pH (киселинност)
• химични параметри- глюкоза, пикочна киселина,
• микроскопия на оцветена намазка- общо количество, синовиална течност, атипични клетки
• микроскопия в поляризационен микроскоп- за откриване на кристали
• Микроскопия на намазка по Грами бактериално засяваневърху хранителни среди - за идентифициране на патогена и определяне на неговата чувствителност към антибиотици

Образуването на муцинов съсирек в оцетна киселина не се тества. Тестът не е информативен.

Освен това в ставната течност се изследват комплемент, ензими, имуноглобулини, хормони.

Факторите на комплемента са повишени при ревматоиден артрит и системен лупус еритематозус.

Физически свойства

Нормална синовиална течност прозрачен, светло сламен цвят. При възпаление придобива различни нюанси на мътно жълто и зелено. Мръсно бял цвят е характерен за кристално-индуцираната артропатия. Червено, кафяво и оранжево показват кървене в ставата с различни давностни срокове, което се случва с нарушение на кръвосъсирването, травми, неоплазми, туберкулозен артрит, лечение с антикоагуланти.

Колкото по-активно е възпалението в ставата, толкова по-малко е прозрачността.

За определяне вискозитетиглата се потапя в капка синовиална течност и се отстранява. Нормално дължината на образуваната нишка на пипчето е повече от 5 см. При възпаление е по-малко от 5 см.

Вискозитетът остава в рамките на нормалните граници при травматичен артрит, системен лупус еритематозус, остеоартрит и пигментиран вилонодуларен синовит. Намалява остра ревматична треска, ревматоиден артрит, подагра, пиогенен и туберкулозен артрит.

оризови тела- това е разрушена ставна мембрана, покрита със съсиреци от фибрин, случва се при ревматоиден артрит.

Синовиалната течност се коагулира, ако съдържа, която е паднала при пункция или предишно нараняване. Съсиреците пречат на преброяването на клетките, така че ставната течност се излива в епруветка с хепарин.

pH (киселинността) намалява с възпаление.

Химичен анализ

Здравата синовиална течност не съдържа протеинис високо молекулно тегло (фибриноген, алфа- и бета-2-макроглобулини), а общото количество протеин е 10-30 g / l (или една трета от нивото в кръвта).

Причини за повишен протеин: болест на Бехтерев, артрит, артропатия при болест на Crohn и улцерозен колит, подагра, псориатичен артрит, синдром на Reiter.

Оценете ниво глюкозав синовията е възможно само ако има данни за концентрацията му в кръвта. Поради тази причина артроцентезата се извършва във вакуум, след вземане на кръвна проба.

Нормалната синовиална течност съдържа 0,5 mmol/l по-малко глюкоза от кръвта. Инфекциозните заболявания на ставите намаляват глюкозата с 1,1-5,5 mmol / l в сравнение с кръвта.

Ниво пикочна киселинав синовиалната течност 356-475 µmol/l, нараства при подагра.

Млечната киселина (лактат) се изследва рядко, нормално до 2,7 mmol/l, а при септичен артрит се повишава до 55,5 mmol/l.

лактат дехидрогераза (LDH) се повишава при ревматоиден артрит, инфекциозен артрит, подагра.

Микроскопия

При гледане на намазка под микроскоп се преброяват броят и видът на клетките и кристалите в ставната течност.

Наличност кристалив ставната течност се проверява под поляризационен микроскоп. Обикновено не са.

Видове кристали в синовиалната течност при заболявания

• натриев урат - подагра
• калциев пирофосфат - псевдоподагра
• кортикостероиди - след инжектиране на стероиди в ставната кухина
• холестерол - остеоартрит и ревматоиден артрит
• хидроксиапатит - калциращ периартрит, остеоартрит, възпалителен артрит

Микробиологични изследвания

Bakposev синовиалната течност се извършва веднага след вземане на материала.

Интерпретация на резултата

Резултатите от теста на синовиалната течност са групирани, както следва:

• нормално- всички показатели са в рамките на нормалното
• възпалителен
• не възпалителен
• септична
• хеморагичен

Невъзпалителна синовиална течност

• остеоартрит и дегенеративни ставни заболявания
• травматичен артрит
• хронична подагра или псевдоподагра
• склеродермия
• полимиозит
• системен лупус еритематозус
• нодуларна еритема
• невропатична артропатия (състава на Шарко), като например при захарен диабет
• сърповидно-клетъчна анемия
• хемохроматоза
• акромегалия
• амилоидоза

Възпалителна ставна течност

• ревматоиден артрит
• реактивен артрит
• псориатичен артрит
• остра ревматична треска
• остра подагра или псевдоподагра
• склеродермия
• полимиозит
• системен лупус еритематозус
• анкилозиращ спондилит
• възпалително заболяване на червата
• вирусна, гъбична, бактериална инфекция в ставите, лаймска болест
• остър пристъп на подагра

Септични промени

• гнойна бактериална инфекция
• септичен артрит

Хеморагична ставна течност

• нараняване
• тумори
• хемофилия и други коагулопатии - повишено кървене поради дефицит на един от факторите на кръвосъсирването
• тежък дефицит на витамин С (скорбут)
• Синдром на Ehlers-Danlos
• невропатична артропатия

Пункция на ставите и анализ на синовиалната течностПоследна промяна: 1 декември 2017 г. от Мария Бодян

Стандартизирана аналитична технология за клиничен лабораторен анализ на синовиална течност.

1. Цел на изследването

Технологията "Клиничен лабораторен анализ на синовиалната течност" се извършва за диагностициране на заболявания на ставите, както и за наблюдение на хода на заболяването и ефективността на лечението.

Изследването на синовиалната течност е от голямо значение за:

Всички служители трябва да спазват инструкциите и правилата за безопасност, посочени в листовете с технически данни за електрическите устройства, използвани в технологията (фотометри, микроскопи, центрофуги); персоналът, работещ с реактиви, трябва да бъде обучен за работа с тях, да използва лични предпазни средства и да спазва правилата за лична хигиена.

За предотвратяване на пожари е необходимо да се спазват правилата за пожарна безопасност в съответствие с действащите разпоредби.

По този начин е необходимо стриктно да се спазват всички точки от инструкциите за безопасност, пожарна безопасност и биологична безопасност.

2.3 Условия за прилагане на технологията за клинично-лабораторен анализ на синовиалната течност и функционално предназначение

Клиничният лабораторен анализ на синовиалната течност се извършва в клинично-диагностични лаборатории на специализирани амбулаторни и болнични здравни заведения (ревматологични и артрологични центрове).

Функционална цел на услугата: извършва се с цел диагностициране на ставни заболявания, проследяване на хода и прогресията на заболяването и ефективността на лечението.

2.4 Материални ресурси, необходими за прилагане на технологията: инструменти, измервателни уреди, лабораторно оборудване

2.4.1. Бинокулярен микроскоп с потапяне и вграден осветител.

2.4.2 Поляризиращ микроскоп.

2.4.3. Лабораторна центрофуга (с охлаждане: 5-8 °C).

Пелетите от синовиалната течност трябва да се приготвят с центрофуги, работещи при 1000 rpm. Когато използвате центрофуга, трябва стриктно да се спазват инструкциите на производителя.

2.4.4. Контракалкулатор за изчисляване на формулата на левкоцитната кръв (за изчисляване на синовиални цитограми).

2.4.5. Поставка за епруветки.

2.4.6. Контейнери и кювети за оцветяване и фиксиране на намазки.

2.4.7. Устройство за сушене на намазки.

2.4.8. Стъклени (пластмасови) изделия.

2.4.8.1. Центрофужни епруветки (10 ml).

За макроскопско изследване на SF е по-добре да използвате прозрачни стъклени тръби. За центрофугиране на SF се използват пластмасови центрофужни епруветки, които трябва да имат конична форма за концентриране на утайката, градуировка за определяне на количеството синовиална течност, получена при пункция на ставата, и затворени с капаци за намаляване на риска от разпръскване. Епруветките трябва да са химически чисти и етикетирани за правилна идентификация на пациента. Възможно е използването на вакуумни епруветки.

2.4.8.2. Камерата на Горяев.

2.4.8.3. Предмети и покривни стъкла за микроскопия на нативния препарат.

Предметно стъкло (за предпочитане с матирано поле за маркиране, размери 26 x 76 x 1,1 mm.) за микроскопиране на оцветения препарат.

Предметно стъкло със шлифован ръб (размер 26 х 76 х 1,1 мм.) или пластмасова шпатула за приготвяне на намазка.

2.4.8.4. Пипети за прехвърляне на синовиална течност. Пластмасови пипети на Пастьор с фини връхчета с балон понастоящем се използват за стандартизиране на обема на капката на пелетата и намаляване на риска от биологични опасности, свързани с ресуспендиране или трансфер на синовиална течност. Те трябва да са сухи и химически чисти.

2.4.8.5 Стъклени пръчки.

2.5 Реагенти

2.5.1 Разтвори на багрилни фиксатори и други необходими реагенти за приготвяне на оцветени намазки (виж GOST R Цитологично изследване на пунктат на костния мозък);

2.5.2 разтвор на оцетна киселина 5%;

2.5.3 EDTA (дикалциева или динатриева сол).

2.5.4. ализарин червен разтвор 2%.

2.6 Други консумативи

2.6.1. Гумени ръкавици.

2.6.2. Дезинфектанти.

3. Характеристика на техниката за изпълнение на технологията за изследване на синовиалната течност

3.1 Получаване на проби от синовиална течност

За правилното провеждане на преданалитичния етап е необходимо да се спазват изискванията на стандарта GOST R 53079.4-2008. .

Пункцията на ставата се извършва от клиницист.

Правилата за съхранение и транспортиране на проби от синовиална течност са посочени в

Приложение А.

При пункция на ставата SF се събира в стерилни центрофужни епруветки (2-3 или повече, в зависимост от полученото количество SF) и незабавно се пренася в клинично-диагностичната лаборатория. Една от епруветките (или повече, в зависимост от броя на получените епруветки) се изпраща в микробиологичната лаборатория (отдел) за микробиологични изследвания, а останалите се използват за провеждане на клинично лабораторно изследване на SF (определяне на физикохимичните свойства и микроскопско изследване на нативни и оцветени с лазурно-еозин препарати с броене на синовиоцитограма, преброяване на клетъчни елементи в 1 μl (цитоза), както и извършване на биохимични и имунологични изследвания. Биохимичните и имунологични изследвания се извършват в супернатанта след центрофугиране на SF, а утайката се използва за търсене на кристали в нативния препарат с помощта на поляризационен микроскоп, както и за преброяване на синовиоцитограма в оцветена намазка. За да преброите клетките, можете да съберете SF в епруветка, съдържаща антикоагулант (динатриев или дикалиев EDTA), специален вакуум Налични са епруветки с K2EDTA, които могат да се използват за вземане на SF.

Ако има подходящи индикации (подозрения за наличие на неоплазмени клетки), оцветената намазка се изпраща в цитологичната лаборатория.

3.2 Идентификация на пробата

Следната информация трябва да бъде включена в направлението за изследване: фамилия и инициали на пациента, възраст или дата на раждане, пол, отделение на лечебното заведение и отделение (в болницата), номер на медицинската карта (идентификационен номер), диагноза, дата и час на вземане на пробата от синовиалната течност, часът на доставка на пробата в лабораторията. Всички индикатори, които трябва да бъдат определени, трябва да бъдат изброени. Ако е необходимо, посочете лекарствата, инжектирани в пробитата става.

Немаркирани или неправилно етикетирани проби не са подходящи за изследване и трябва да бъдат уведомени на клинициста, който поръчва теста.

3.3 Приемане на проба

Тъй като точността на резултатите от изследването на синовиалната течност до голяма степен зависи от качеството на доставената проба, е необходимо стриктно да се спазват правилата за съхранение и транспортиране на синовиалната течност (Приложение А).

След като пробата от синовиалната течност бъде доставена в лабораторията, лабораторният служител, който получава материала, трябва да провери правилността на насочването за анализ, етикетирането на съдовете (кодът или фамилията на пациента и другите данни трябва да са идентични с данните, посочени в формуляр за препоръка) и регистрирайте получения материал.

Синовиалната течност, събрана в епруветка с K2 EDTA, също трябва да се изследва в рамките на 30 минути, а при съхранение в хладилник (температура 3-50C) - не по-късно от 24 часа (само за изследване на оцветени намазки).

ЗАБЕЛЕЖКА ─ Дългосрочното съхранение на супернатанта SF е разрешено при -70°C за биохимични и имунологични изследвания.

Отлагането на анализа и използването на охлаждане на пробата са отбелязани в листа за отговори.

Пробите трябва да бъдат доведени до стайна температура преди тестване.

3.4 Макроскопска оценка и изследване на физикохимичните свойства на синовиалната течност

3.4.1 Количеството синовиална течност обикновено варира от 0,2 до 2,0 ml (в зависимост от размера на ставата). При различни заболявания на ставите количеството SF може да достигне 100 ml или повече.

3.4.2. Цвят на синовиалната течност.

Цветът на синовиалната течност е нормален - светло жълт

ЗАБЕЛЕЖКА Светложълта или жълта синовиална течност се наблюдава при дегенеративно ставно заболяване; кървави - с травматичен артрит; възпалителни заболявания на ставите (ревматоиден артрит (RA), реактивен артрит (ReA), анкилозиращ спондилит, псориатичен артрит) се характеризират с различни нюанси на жълто и кафяво (светло жълто, жълто, лимонено, светлокафяво, кафяво, кехлибарено или оранжево) ; при подагра се наблюдава светложълт, зеленикаво-жълт, млечно-бял, млечно-жълт, розово-бял цвят на SF; с пирофосфатен артрит и хондрокалциноза - жълто или млечно жълто, със септичен артрит - сиво-жълто, зеленикаво-жълто или кърваво.

3.4.3. прозрачност на синовиалната течност.

Нормалната синовиална течност е напълно прозрачна. Мътността обикновено се дължи на увеличаване на броя на клетъчните елементи, наличието на кристали или микроорганизми.

Оценка за прозрачност.

Има 4 степени на прозрачност: прозрачен, полупрозрачен, умерено облачен и интензивно мътен.

Забележка – при дегенеративни ставни заболявания (остеоартроза) SF е прозрачен и полупрозрачен; при възпалителни заболявания (РА, серонегативен артрит, подагра, пирофосфатен артрит) - полупрозрачен, умерено мътен или интензивно мътен; със септичен артрит - интензивно мътен, плътен.

3.4.4. Наличие на утайка.

Обикновено няма утайка в SF. Появява се само при патология и като правило представлява фрагменти от клетъчни мембрани, фибринови нишки, тъканни фрагменти в резултат на разрушаването на хрущяла и синовиалната мембрана, както и кристали.

ЗАБЕЛЕЖКА ─ При дегенеративни заболявания на ставите се открива аморфна утайка в SF при амилоидоза. При възпалителни заболявания на ставите почти винаги се открива утайка. В СФ на пациенти с РА, особено често при деца с ювенилен РА, може да се наблюдава гранулирана утайка, наподобяваща оризови зърна или „оризови тела“, образувани от микроскопични фрагменти от наситена с фибрин некротична синовиална мембрана. Такава утайка може да е индикатор за високата възпалителна активност на процеса.

3.4.5. вискозитет

Най-важната характеристика на SF, която го отличава от другите биологични течности, е наличието на хиалуронова киселина, полимер с високо молекулно тегло. Именно хиалуроновата киселина с висок вискозитет осигурява основно изпълнението на основните функции на SF. Съществува пряка връзка между съдържанието, молекулното тегло на хиалуроновата киселина и вискозитета на течността.

Методи за определяне на вискозитета.

Количествените характеристики на вискозитета на течността се определят с помощта на вискозиметър.

При рутинни изследвания обикновено се използва методът на стъклената пръчка:

стъклената пръчка се спуска в SF и след това се отстранява. Вискозитетът се оценява по дължината на муциновите нишки, има три степени на вискозитет:

с дължина на конеца над 5 см - висок вискозитет, до 5 см - среден, по-малко от 1 см - нисък.

Възможно е да се изрази вискозитет в точкови единици: 1 - висок, 2 - среден, 3 - нисък. Обикновено вискозитетът на течността е висок.

Интензитетът на вискозитета зависи от концентрацията на кристалите, степента на полимеризация на хиалуроновата киселина и температурата.

Забележка ─ Използването на инструментални методи, използващи различни вискозиметри, изисква (освен наличността на устройството) редица допълнителни операции и следователно значителна инвестиция на време, без да дава никаква принципно нова информация в сравнение с наличните лабораторни изследвания.

4.4.6. Определяне на плътността на муциновия съсирек в синовиалната течност.

Хиалуроновата киселина в SF съществува в комплекс с протеини, известни като муцин. Определението за муцинов съсирек е от голяма диагностична стойност при възпалителни заболявания. Тестът за муцин в синовиалната течност корелира добре с вискозитета.

Методи за изследване на плътността на муцинов съсирек.

Принципът на метода: когато оцетната киселина е изложена на SF, се образува муцинов съсирек.

Напредък на дефиницията:

Капка SF се добавя към епруветка, съдържаща 3 ml 5% разтвор на оцетна киселина (CH3COOH). Разклатете енергично съдържанието на епруветката за 1 минута, образува се утайка. Има 4 степени на плътност на утайката: плътна (утайката изглежда като плътна буца), умерено плътна (вид разклонена, но неразчупена структура), умерено рохкава и рохкава - повече или по-малко се разпада на малки частици. Образуването на плътен муцинов съсирек показва значително съдържание на муцин.

Обикновено утайката е плътна.

Забележка 1 ─ При невъзпалителна артропатия муциновият съсирек обикновено е плътен или умерено плътен При възпалителни заболявания на ставите - умерено ронлив и ронлив.

ЗАБЕЛЕЖКА 2. Определянето на вискозитета и плътността на муциновия съсирек е от съществено значение за разграничаването на „невъзпалителни“ и възпалителни процеси в ставата. Тези методи могат да бъдат взаимно контролиращи: показателите на единия метод стриктно съответстват на тези на другия. Висок вискозитет съответства на плътен, среден - до умерено плътен, нисък - на умерено рехав и рехав муцинов съсирек.

3.5 Микроскопско изследване на синовиалната течност

3.5.1.Изисквания за проба от синовиална течност за микроскопско изследване.

Преди да проведе микроскопско изследване, лекарят трябва да има информация за времето на получаване на синовиалната течност и резултатите от оценката на физикохимичните свойства.

В момента се произвеждат вакуумни тръби, съдържащи антикоагулант (K2EDTA) за приемане на биологични течности, който също е консервант за клетъчните елементи и не влияе на тяхната морфология.

Забележка 1─ Синовиалната течност, стабилизирана с K2EDTA, не може да се използва за откриване на рагоцити.

Има три вида микроскопско изследване:

преброяване на клетки в нативната синовиална течност в горяевската камера (цитоза), изследване на нативния препарат и препарата, оцветен с лазур-еозин с изчисляване на синовиоцитограмата.

3.5.2 Преброяване на броя на клетъчните елементи в 1 µl синовиална течност в камерата на Горяев (определяне на цитозата).

Напредък на изследването.:

Изследването се провежда в нативна или стабилизирана K2EDTA синовиална течност.

Изсипете 0,4 ml изотоничен или хипотоничен разтвор на NaCl в епруветка.

Филтрирайте суспензията и съхранявайте в хладилник в бутилка от тъмно стъкло. Непосредствено преди изследването филтрирайте необходимото количество багрило през милипоров филтър.

Смесете 20 µl багрило с равен обем SF или утайка, получена след центрофугиране. По-добре е да се приготви самороден препарат и микроскопски в поляризационен микроскоп: кристали с яйцевидна форма, 2-3 микрона в диаметър, наситен червен цвят с розов ореол.

ЗАБЕЛЕЖКА 4 Тези кристали се намират при хидроксиапатитна артропатия.

В синовиалната течност могат да се открият и кристали на калциев оксалат, холестерол, липиди, Charcot-Leiden и др.

ЗАБЕЛЕЖКА 5 Кристалите на калциев оксалат (C2CaO4 H2O) обикновено са с кубична форма, но могат да образуват безцветни, блестящи, силно пречупващи кристали с различни размери под формата на октаедри или правоъгълници, наподобяващи пощенски пликове. Понякога има кристали от калциев оксалат, закръглени и пресечени, наподобяващи пясъчен часовник, гимнастически тежести или лъкове (C2CaO4 2H2O). Тези кристали могат да бъдат фагоцитирани от полиморфонуклеарни левкоцити (неутрофили).

ЗАБЕЛЕЖКА 6 Течните кристали от липиди са показани в тъмно поле като черни малтийски кръстове, разделящи всяка липидна капка на четири бели лъскави сегмента. Капките неутрална мазнина нямат ефекта на двулъчево пречупване на светлината.

Холестеролът, натриевият оксалат и течните липидни кристали не са специфични за някое конкретно ставно заболяване и могат да се появят при различни артропатии, отразяващи метаболитно нарушение.

ЗАБЕЛЕЖКА 7 Амилоидни бучки могат да бъдат намерени в SF. Това са безцветни образувания със заоблена форма, слоеста структура, наподобяваща рязане на дърво, с характерен блясък. Те се идентифицират в нативни препарати при увеличение х400, както и при потапяне при х1000 увеличение. Амилоидът може да бъде открит в естествен SF, оцветен с конго червено. Полученият препарат може да се види както в светлинен, така и в поляризационен микроскоп.

Амилоидните бучки се откриват при заболявания, свързани с амилоидна артропатия.

Кристали хематоидин.

Кристалите на хематоидина се образуват при разграждането на хемоглобина в хематоми без кислород. Това са леко удължени диаманти и/или златисто жълти игли. Кристалите на хематоидина са добре различими както в нативни, така и в оцветени с лазурно еозин препарати. Тъй като тези кристали обикновено са доста малки в SF, се препоръчва микроскопско изследване на естествените препарати чрез потапяне. Във фокуса на възпалението тези кристали могат да бъдат фагоцитирани от макрофаги или разположени на повърхността на клетъчните елементи.

ЗАБЕЛЕЖКА 8 В случай на травма и вътреставно кървене в ставната кухина се създават условия, при които могат да се образуват кристали на хематоидин.

Кристали Шарко-Лайден.

Кристалите на Charcot-Leyden са оформени като игла на компас или диамант, рязко удължен по дължина. Обикновено кристалите на Charcot-Leiden се намират на фона на детрит или в комбинация с голям брой еозинофили и се образуват по време на разпадането на еозинофилите от еозинофилна грануларност, тези кристали могат да бъдат открити в SF на пациенти, страдащи от алергичен синовит.

Лечебни кристали

стероиди. Вътреставните инжекции на стероидни лекарства водят до кристализацията им вътре в ставите, където те могат да продължат до 10 седмици. Откриването на тези кристали по време на микроскопско изследване на нативни препарати и последващо неправилно диференциране може да доведе до погрешни заключения.

Неклетъчни и некристални елементи в SF.

В SF могат да бъдат открити фрагменти от хрущял и увредени връзки. Фрагменти от хрущял в нативния препарат могат да бъдат разпознати по характерния им копринен блясък. Намерени са и фрагменти от хрущял, съдържащи клъстери от хондроцити и фрагменти от менискуса, които са представени от вълнообразни колагенови влакна, а също и хондроцити; фрагменти от връзки са представени от дълги тънки фибрили и успоредни нишки колаген

ЗАБЕЛЕЖКА 9 Най-често се появява в SF след нараняване на коляното.

ЗАБЕЛЕЖКА 10 Въпреки високата чувствителност на метода на поляризационна микроскопия, при използването му са възможни сериозни грешки, които обикновено възникват поради недостатъчната разделителна способност на конкретен микроскоп, наличието на чужди кристалоподобни примеси и увреждане на предметното или покривно стъкло. . Микроскопистът трябва да е наясно с възможността за смущения и да е запознат с принципите на разпознаване на кристали.

3.5.5. Микроскопско изследване на препарати от синовиална течност, оцветени с лазур-еозин (с преброяване на синовиоцитограма).

Приготвяне на SF намазки и методи за тяхното оцветяване (раздел 5.5.2).

Клетъчен състав на синовиалната течност (синовиоцитограма).

Определянето на клетъчния състав на SF е най-важният етап от неговото изследване, което позволява изясняване на диагнозата, определяне на степента на възпалителна активност на процеса и прогноза. Определянето на количественото разпределение на клетките (синовиоцитограма) е най-важният индикатор за диференциалната диагноза на ставните заболявания. Изчисляването на процента клетки се извършва по същия начин като изчисляването на формулата на левкоцитната кръв. (100 клетки в намазка се преброяват и се изчислява процентът на всеки тип клетка).

Нормално в SF преобладават клетки от тъканен произход (синовиоцити и хистиоцити) - до 65%. Лимфоцитите съставляват около 30%, а моноцитите и неутрофилите - 1-2%.

Кръвни клетки в SF.

Неутрофили (полиморфонуклеарни левкоцити).

Неутрофилите са 1,5-2 пъти по-големи от еритроцит, в диаметър (14-16 микрона). Съотношението на ядрото и цитоплазмата се измества към ядрото. Цитоплазмата е люляк на цвят, изпълнена с фина, прашна зърнест, която има цвета на клетъчното ядро. Ядрата се състоят от 3-4 сегмента, с ясно разделение на оксихроматин и основен хроматин. При дистрофия броят на сегментите в неутрофилите се увеличава рязко до 5-7 (хиперсегментация). По време на апоптоза в неутрофила, фрагменти от ядрото се сливат в една или две хиперхромни хомогенни, безструктурни маси с правилна кръгла форма.

При нормална SF броят на неутрофилите не надвишава 1-2% във формулата.

ЗАБЕЛЕЖКА 1 При ревматоиден артрит броят на неутрофилите достига 90%, а броят на лимфоцитите пада до 10%. Подобна картина се наблюдава при анкилозиращ спондилит. При възпалителни заболявания и вътреставни кръвоизливи неутрофилите съставляват 60-80% във формулата SF и повече от 95% при септична артропатия.

Лимфоцити.

Тези клетки са с диаметър до 12 микрона. Съотношението на цитоплазмата и ядрото се измества към ядрото (9:1). Ядрото има грубо натрупана структура, базофилната цитоплазма обгражда ядрото с тесен ръб, понякога се вижда зона на просветление около ядрото.

При нормална SF броят на лимфоцитите варира от 8 до 30%.

ЗАБЕЛЕЖКА 2 При възпалителни заболявания преобладават неутрофилите, докато при дегенеративните заболявания преобладават лимфоцитите. При дегенеративни заболявания на ставите и травматичен артрит в SF съдържанието на лимфоцити достига 85%. Лимфоцитите преобладават във формулата и при токсико-алергичен синовит и синовиална форма на туберкулоза. При артрит с вирусна етиология, например, причинен от вируса HTLV-1, се появяват атипични лимфоцити, чийто брой достига 20%.

Моноцити.

ЗАБЕЛЕЖКА 3 Моноцитите се намират при различни ставни артропатии, включително вирусен артрит и моноцитен артрит, както и при увреждане на имплантни протези.

В допълнение към тези клетки в SF (при патология), други кръвни клетки могат да бъдат открити в малко количество: еозинофили, базофили, плазмени клетки.

Бележка 4 – Еозинофилите са изключително редки в SF, идентични с еозинофилите в периферната кръв.

Бележка 5 – Базофилите се откриват в малък брой при възпалителен артрит, серонегативна артропатия, невъзпалителни артропатии, свързани с травма.

ЗАБЕЛЕЖКА 6 Плазматични клетки се намират в SF при възпалителни артропатии. Откриването на плазмени клетки е типично, по-специално, за ревматоиден артрит, т.е. за продължителен, бавен възпалителен процес.

Тъканни клетки в SF.

синовиоцити.

Тези клетки принадлежат към еднослойния сплескан епител, покриващ синовиалните мембрани на ставите. По своята морфология те са идентични с мезотелните клетки. Синовиацити - епителни клетки с диаметър 18-25 микрона, с различно ядрено/цитоплазмено съотношение. Те съдържат централно или ексцентрично разположени ядра с кръгла или овална форма, дребна бучка или примкова структура, заобиколени от широк ръб от базофилна цитоплазма, понякога с "навивка" по периферията. Цитоплазмата в перинуклеарната зона на някои синовиоцити съдържа фини зърна. Синовиоцитите се откъсват от повърхността на синовиалната мембрана на ставата и се намират в SF при артропатии. Синовиалните клетки могат да съдържат 2 или повече ядра (многоядрени).

Има три вида синовиоцити:

тип А - макрофагни синовиоцити, способни на фагоцитоза;

тип В - синовиални фибробласти, способни да синтезират и секретират хиалуронова киселина;

тип AB - преходни форми на клетки, които съчетават тези две свойства.

Хистиоцити.

Тъканните макрофаги са клетки с микронен размер със закръглено или моноцитоидно компактно ядро, заобиколено от финозърнеста или негрануларна цитоплазма.

ЗАБЕЛЕЖКА 7 Хистиоцитите винаги присъстват в SF по време на възпалителни процеси.

ЗАБЕЛЕЖКА 8 В SF могат да се намерят многоядрени клетки, които са синовиоцити или плазмени клетки и имат същото значение като мононуклеарните варианти на тези клетки.

ЗАБЕЛЕЖКА 9. Откриването на LE-клетки, съдържащи включвания от хомогенизиран ядрен материал в цитоплазмата в SF, за разлика от периферната кръв, не е пряка индикация за SLE. Въпреки това, комбинацията от LE клетки с голям брой лимфоцити в SF дава възможност да се подозира наличието на SLE при пациент.

ЗАБЕЛЕЖКА 10 – Клетки в митоза.

Митотичните фигури нямат диагностична стойност. Синовиоцитите в състояние на делене потвърждават процеса на пролиферация на клетки, облицоващи ставната торба.

недиференцирани клетки.

Недиференцирани клетки се наблюдават в почти всички синовиограми.

В тънки, добре направени намазки от SF, фиксирани с фиксатори или фиксатори на багрила и оцветени с лазур-еозин, всички клетъчни елементи са податливи на диференциация. Само в дебели намазки, приготвени от неопитна ръка на лаборант от вискозен, хиперклетъчен и преди това неразреден SF, се срещат клетки, които не могат да бъдат диференцирани. Това могат да бъдат всякакви клетъчни елементи - както тъкани, така и кръвни. В такива препарати е почти невъзможно да се открият кристали и микроорганизми.

4. Регистрация на резултатите от анализа на синовиалната течност

Всеки служител в лабораторията трябва да използва едни и същи формуляри (формуляри на резултатите от теста), за да докладва резултатите. Формулярът трябва да съдържа името на лабораторията и медицинската организация; информация за пациента, достатъчна за идентифицирането му; името на биологичния материал и всички изследвани параметри; дата на получаване на пробата и, ако е приложимо, час на получаване; резултати от изследвания; референтни интервали; името и подписа на служителя, извършил изследването. Процедурата за издаване на резултатите трябва да се определя от инструкцията, одобрена от ръководителя на медицинската организация

5. Осигуряване на качеството на работата на технологията за анализ на синовиалната течност

5.1. Програми за осигуряване на качеството

Програмите за осигуряване на качество включват последователно наблюдение на всеки аспект от процедурата, за да се гарантират достатъчни възможности за диагностика и проследяване на пациента. Програмите за осигуряване на качеството трябва да включват всички етапи на работа и да установяват връзки между всички компоненти на процеса (пациент, лаборатория, клиницист). Контролът е необходим и на етапите на вземане на проби, съхранение, доставка, ръчна обработка, регистрация и издаване на документи. Техническата компетентност на персонала, непрекъснатото продължаване на обучението също трябва да бъдат контролирани. За успешното изпълнение на всички контролни дейности е необходимо да се спазват правилата, определени в стандарта GOST R ISO 15189 -2006. .

5.2. Записване на мерките за контрол

Регистрацията на контрола трябва да се извършва на всички нива: преданалитично, аналитично и следаналитично, като за всеки етап трябва да бъдат разработени и документирани правила за провеждане на всички процедури.

Трябва да се разработи формуляр за заявка за тест за клиницистите, включително датата на назначаване и вземане на проба, информация за идентификация на пациента, диагноза, информация за лекарства или диагностични процедури, ако те могат да повлияят на резултатите от изследването.

Техниката за вземане на проби от SF трябва да бъде стандартизирана и подробно описана в съответните инструкции за лекари и медицински сестри от хирургичното отделение, извършващи ставни пункции.

Инструкциите за доставка на пробите трябва да включват условията и сроковете за съхранение на пробите и правилата за безопасно транспортиране.

За персонала на лабораторията трябва да бъдат определени критерии за приемане и отказ за приемане на проби, изисквания за регистрация на проби, работа, етикетиране и съхранение на проби преди анализа. Аналитичният етап се извършва в съответствие с изследователските методи. На пост-аналитичния етап е необходимо да се разработят правила за оценка на приемливостта на резултатите от анализа, които трябва да включват оценка на лекарствената интерференция, сравнение на резултатите с референтен интервал и проверка на точността на регистрацията. Формулярът за издаване на резултати трябва да бъде одобрен от институцията и съгласуван с лечебните отделения.

5.3. Инструкции за използваните лабораторни методи

Методиката за процеса на извършване на лабораторни изследвания трябва да бъде документирана и достъпна на работното място. Методиката следва да се основава на указания или други документи, одобрени по предписания начин. Тя трябва да включва критерии за приемане или отхвърляне на проби от SF (като се вземе предвид продължителността на съхранението на пробата след вземане на проби, достатъчно количество SF за изследване); референтни интервали; начин на регистриране на резултатите; предпазни мерки, свързани с биологичната опасност на изпитвания материал; причини за фалшиво положителни и фалшиво отрицателни резултати.

5.4. Контрол на качеството на микроскопските изследвания.

При разработване на изисквания за аналитичната надеждност на визуалния метод, резултатите от изследването на проби от биоматериали, произведени от изследовател с богат опит във визуалното изследване на изображения, правилното откриване и класификация на изследваните компоненти на биоматериали, трябва да се използват като насока.

5.5. Непрекъснато обучение на специалисти

За да се гарантира качеството на анализа, квалификацията на персонала трябва да бъде съобразена със сложността на провежданото изследване. Целият лабораторен персонал трябва периодично (веднъж на всеки пет години) да преминава обучение по цикли за усъвършенстване, които се провеждат от медицински образователни институции, които имат съответния лиценз. Всеки специалист трябва да се занимава със самообразование. Лабораторията трябва да разполага с актуална литература за използване, включително периодични издания за лабораторна диагностика и атласи. Лабораторните специалисти трябва да участват в конференции и семинари.

6. Изисквания към режима на труд и почивка, хранителен режим и ограничения при подготовката на пациента

За персонала, извършващ вземането на проби, трябва да се разработи инструкция, съдържаща освен процедурата за вземане на проби и условията за подготовка на пациента. Особено важно е влиянието на лекарствата, например въвеждането на стероидни хормони в ставата, които могат да кристализират (Приложение А.2).

7. Разходи за труд за внедряване на технологията на клинично-лабораторен анализ на синовиална течност

Таблица 1 - Разходи за труд в УЕТ за внедряване на технологията "Клиничен лабораторен анализ на синовиална течност"

Сервизен код	Вид обучение	Разходи за труд в UET
Специалист със средно образование	Доктор по клинична лабораторна диагностика, биолог
	Клиничен лабораторен анализ на синовиалната течност
	Регистрация (предварителна и окончателна: получен материал, паспортни данни на пациенти, резултати от изследвания и др.), ръчна или на компютър.
	Оценка на физичните свойства на охлаждащата течност, измерване на количеството
	Определяне на вискозитета на течността
	Определяне на образуването на муцинов съсирек
	Получаване на утайка от SF чрез центрофугиране и приготвяне на препарати от утайката (за микроскопско изследване).
	Преброяване на клетъчни елементи на SF в камерата на Горяев
	Микроскопско изследване на нативното лекарство
	Микроскопско изследване на препарата, оцветен с лазурно-еозин с изчисляване на процента клетки.

ПРИЛОЖЕНИЕ А

(справка)

Събиране на проби от SF, условия за съхранение и доставка (преданалитичен етап)

A.1 Въведение

Пункция на ставите се извършва от клиницисти.

Преданалитичният етап се извършва в медицинското отделение и след доставката на биоматериала в лабораторията, в самата лаборатория. Клиницистите подготвят заявления за изследване. В заявлението трябва да се посочи пълното име на пациента, пол, възраст или година на раждане, начинът за получаване на биоматериала, ставата, която ще се пункция, времето на пункцията, броят на епруветките, пълни с SF, нативни и с K2 EDTA. Трябва да се посочи клиничната диагноза и лекарствата, които влияят на анализа. Отсъствието в реда на диагнозата или приеманите от пациента лекарства, които влияят на резултатите, може да доведе до неправилна интерпретация на резултатите и грешка в диагнозата. Медицинският персонал на отделението отговаря за подготовката на пациента, спешната доставка на епруветки с SF в клинично-диагностичната лаборатория.

Продължаването на преданалитичния етап в лабораторията се състои в приемане и регистриране на входящия биоматериал, съхраняването му при необходимост до изследването, обработка и подготовка за изследването.

Съставянето на заявление за анализи от клиницисти е много важен момент, тъй като правилната диагноза до голяма степен зависи от правилно попълненото заявление.

A.2 Подготовка на пациента

Подготовката на пациента за пункция на ставите трябва да бъде стандартизирана.

Стероидите, инжектирани в ставната капсула, могат да кристализират и да попречат на диагностицирането на патологичния процес или да доведат до погрешна диагноза, така че интраартикуларната стероидна инжекция трябва да бъде отменена най-малко 5-7 дни преди пункцията на ставата. Ако въвеждането на стероиди в ставната торба не може да бъде отменено предварително, клиницистът трябва да отбележи въвеждането на тези лекарства в заявлението за изследване. В заявлението, в допълнение към паспортните данни на пациента, трябва да се отбележи коя става е пробита, трябва да се посочи броят на епруветките, пълни с SF, времето на пункцията и клиничната диагноза, поне на ниво диагностика предположение.

A.3 Съхранение и доставка.

За общ анализ SF обикновено се доставя в лабораторията веднага след пункцията. Извършва се изследване на нативен препарат, приготвен от нестабилизиран SF за откриване на рагоцити и кристали, както и за определяне на цитоза. Оцветената намазка може да се изследва чрез съхраняване на епруветка с SF, стабилизиран с K2 EDTA, в хладилник при температура +3-+50C за 24 часа.

Допуска се дългосрочно съхранение на SF при температура от -70 ° C; тези проби се използват за биохимични и имунологични изследвания.

ЗАБЕЛЕЖКА ─ Понастоящем специални вакуумни тръби и контейнери за еднократна употреба за събиране на биологични течности от 100 ml се произвеждат от нечуплив материал без реагенти, с K2EDTA или други директиви.

Библиография

1.Захарова синовиална течност. В: Ревматология. Национални водачи. Изд. Академик на Руската академия на медицинските науки и академик на Руската академия на медицинските науки. М., "ГЕОТАР-Медиа", 2008, с. 62-66.

2. Инструкции за мерки за предотвратяване разпространението на инфекциозни заболявания при работа в клинично-диагностични лаборатории на лечебни заведения, Москва, 1991 г.

3. Правила за събиране, съхранение и обезвреждане на отпадъци от лечебни заведения. SanPiN 2.1.1.728-99., Москва, 1999 г

4. ГОСТ R ISO 52095 -2:2003) Изисквания за безопасност.

5. GOST R 53079.4-2008 Медицински лабораторни технологии. Осигуряване на качеството на клиничните лабораторни изследвания. Част 4 Правила за провеждане на преданалитичния етап на клиничните лабораторни изследвания.

6. ГОСТ R ISO 15189 -2006 Медицински лаборатории. Конкретни изисквания за качество и компетентност.

Проектът на стандартизирана технология е изготвен от:

, (ВМА на името на И. М. Сеченов), (Научноизследователски институт по ревматология на Руската академия на медицинските науки), (RMAPE), (RCSC на името на Руската академия на медицинските науки), (поликлиника № 000 на Москва).

Изследването на синовиалната течност с анализ на нейните физически свойства и описание на клетъчните елементи се извършва с цел диагностициране на различни ставни патологии и наблюдение на текущото лечение. Манипулацията е доста болезнена, но е необходимо пациентите с лезии с неизвестен произход да изключат инфекциозен фактор като причина за неразположение. Извършва се амбулаторно по метода на пункция (пункция) на ставата с по-нататъшно извличане на съдържанието. Не причинява усложнения, с изключение на краткотраен дискомфорт и подуване.

Синовиумът е вискозна, прозрачна или леко жълтеникава субстанция, която запълва вътрешната кухина на ставата. Той играе ролята на вътреставно смазване, предотвратява триенето на главите на костите и тяхното ранно износване, подобрява подвижността на ставите, служи като амортисьор и осигурява трофика на хиалиновата субстанция.

Обикновено количеството на синовиалния ексудат не надвишава 2-5 ml. Но при различни травматични, инфекциозни и асептични лезии се наблюдава появата на "излив" - прекомерно количество вътреставна течност.

Основните причини, които могат да провокират такова състояние, включват:

• артрит, включително подагра;
• бурсит;
• синовит;
• хемартроза;
• дисекция остеохондрит;
• гонартроза;
• ревматизъм;
• киста на Бейкър;
• вирусни инфекции;
• тумори;
• псевдоподагра;
• наранявания на ставните кости, увреждане на менискуса на коляното.

Натрупването на ексудат може да бъде предизвикано от проникването на патогенни бактерии в синовиалната кухина от външната среда в резултат на травма или чрез кръв и лимфа от съседни огнища на възпаление.

Симптомите на натрупване на ставен ексудат са:

• болка по време на движение или при опит за огъване на крайник;
• подуване на засегнатата става;
• локална хиперемия и повишаване на локалната температура.

Всички тези признаци сочат само патологични промени в артикулацията. За да се определи точно причината за тяхното възникване, са необходими редица диагностични мерки, една от които е пункция на ставите.

Кога се назначава изследване на синовиалната течност?

Основната индикация за артроцентеза е неясна етиология на ставната болка. При необходимост може да възникне и необходимост от изследване за разграничаване на артрит и артроза или за проследяване на ефективността на предписаната терапия.

Основните показания за изследване на синовията се считат за болка и подуване на ставата.

Много важен диагностичен момент е изключването на инфекциозното начало, тъй като навременното откриване и лечение на заболяването до голяма степен определя изхода от неразположението.

Характеристики на диагностиката на синовиалната течност

Важно условие за получаване на надеждни резултати от изследванията е стандартизирането на технологиите за обработка на лабораторни анализи. За съжаление, днес не е необходимо да се говори за единни методи за изследване на ставния ексудат. Няма общи принципи за организиране на контрол върху качеството на диагностиката. Поради това толкова често се наблюдава променливостта на резултатите от изследването на синовиалната течност.

Може би новата Litos-система ще помогне да се стигне до единна диагностична технология. Цялостното изследване на целия организъм ви позволява да получите пълна картина на заболяването, а не набор от индивидуални, понякога трудни за интерпретиране, резултати. В допълнение, техниката е в състояние да открие нарушения в предклиничния стадий и да наблюдава патологичния процес в развитието.

Процедура за изследване

Артроцентезата трябва да бъде предшествана от специфична подготовка на пациента. Кортикостероидите, инжектирани в ставната кухина, могат да кристализират и да доведат до погрешно тълкуване на анализа. Поради това хормоналните инжекции се спират седмица преди пункцията.

Ако е невъзможно да се отмени лечението със стероиди, лекарят отбелязва това в картата на пациента, като посочва в коя става и колко лекарството е инжектирано.

Техниката на аспирация не е сложна и е описана подробно в много медицински инструкции. Манипулацията се извършва в лечебната зала на клиника или болница при спазване на всички препоръки за асептика. Кожата в зоната на интервенция се третира с антисептик, подсушава се и се пробива с игла 18 калибър, поставя се на спринцовка от 10 ml.

Въвеждането на локална анестезия при приемане на пунктат обикновено не се използва, тъй като разтвор на новокаин или друго анестетично лекарство може да изкриви диагностичните резултати. За цитологично изследване ексудатът се взема с антикоагулант.

Визуален анализ на синовиалната течност

След като сте получили пункция, можете визуално да оцените нейните физико-химични параметри и да определите какъв процес протича в ставната кухина. Обърнете внимание на цвета, прозрачността и консистенцията на течността. Освен това ексудатът се изпраща за химическо изследване, но общият клиничен анализ ни позволява да направим предположения за възпалителния или невъзпалителния ход на заболяването.

Основни параметри на изследването

Физическите свойства на ставния ексудат се оценяват в пропусната светлина. Прозрачността се сравнява по отношение на дестилираната вода, вискозитетът се изследва по дължината на муциновия съсирек - нормално той не трябва да бъде по-къс от 3 cm.

При здрав човек 1/3 от ставния ексудат се състои от протеини и хиалорунат, в него няма остатъци от фибрин. Може да съдържа епителни клетки и левкоцити (<200 в 1 мкл) и нейтрофилы <25%).

Сила на звука

Обикновено обемът на синовиума не надвишава 4 ml, колянната става съдържа до 5 ml ексудат. При увреждане на ставите обемът на течността може да се увеличи до 25 ml.

Цвят

При възпалителни лезии здравият цвят на синовиума се променя в зависимост от вида на заболяването и може да стане зелен, сив, ярко жълт, мътен бял, розов. Червеният и кафяв оттенък на точката показва кръвоизлив в ставата, по-често в резултат на нараняване.

Прозрачност

Изследването на прозрачността също помага да се посочи предварителна диагноза. Външни включвания, суспензии или обща мътност показват висока концентрация на клетки, наличие на липиди или кристали.

вискозитет

Изследването на плътността се извършва чрез изливане от спринцовка в съд или чрез нанасяне на капка пунктат върху стъклена плоча.

Има 3 вида плътност:

• ниска - с дължина на муциновата нишка ≤1 cm;
• нормално - влакното се разтяга до 3 см;
• високо - дължината на мукозния ексудат ≥ 3 cm.

Степента на вискозитет зависи от насищането на синовиума с хиалуронова киселина. По време на възпалителния процес пропускливостта на ставната мембрана се увеличава и съдържанието се разрежда с плазма.

примеси

Кръвта в точката се появява в резултат на травма, вилзонодуларен синовит, остър артрит или при хора, страдащи от хемофилия.

Освен това в ексудата могат да присъстват и други чужди включвания. Например за ревматоидния артрит са типични свободно плаващи оризови тела - фрагменти от рехави фибринови нишки.

цитоза

Цитологичното изследване на ексудат се извършва в преброителна камера. Клетъчното съдържание на синовиума е представено от епитела на ставната капсула и левкоцитите. Последният не трябва да бъде повече от 600 в mm 3.

При умерено възпаление левкоцитозата се повишава до 2000 в 1 μl, при тежко възпаление може да достигне 76 000 в mm 3. Септичният артрит се характеризира с увеличаване на броя на белите кръвни клетки до 100 000. Броят на неутрофилите също се увеличава – до 90%.

Бактериологични изследвания

Ако се подозира бактериална причина, точката се подлага на бактериоскопско изследване. За да направите това, капка течност се поставя върху стъклена плоча и се оцветява по метода на Грам и Зийл-Нийлсен.

В готовите намазки могат да се появят спирохети, пръчици на Кох, диплококи, стрептококи или стафилококи. За изолиране и установяване на вида на патогена се извършва бактериологично изследване. Анализът помага да се идентифицира чувствителността на патогена към конкретна група антибиотици и да се предпише етиотропно лечение.

Поляризираща микроскопия за откриване на кристали

Този вид изследване е необходимо за откриване и идентифициране на кристали, съдържащи се в ставната течност. Само урати и соли на калциевия пирофосфат обаче имат диагностична стойност за ревматолога.

Кристалите на пикочната киселина изглеждат като дълги, тънки шипове.

Първите са под формата на остри игли и са симптом на подагра, вторите наподобяват къси пръчки или ромбове и се срещат при псевдоподагра.

Как да диагностицираме заболяване според резултатите от изследването

Развитието на възпалителен фокус в ставата води до мигновена промяна в състава на синовиалната течност. Освен това някои заболявания имат много характерни и лесно разпознаваеми отклонения, които са приложими в диференциалната диагноза.

Нека комбинираме всички аномалии на физични и химични параметри и тяхната интерпретация в сравнителна таблица.

Вид на заболяването	Цветът и прозрачността на течността	вискозитет	Нивото на левкоцитите, в mm3 / неутрофили, %	Наличие на кристали	Наличие на бактерии
Травматичен артрит	Мръсно жълто, мътен, с кръвни съсиреци	Високо	2000/30	Не	Не
Септичен артрит	Сиво-зелено или кърваво	Ниска	>80000/90	Не	да
туберкулозен артрит	Облачно, жълто	Ниска	26000/55	Не	да
Инфекциозен полиартрит	Жълто-зелено, облачно	Ниска	15000/65	Не	Не
ревматоиден артрит	Облачно, жълто	Ниска	10000/60	Не	Не
Подагра, псевдоподагра	Млечен мръсен цвят	Ниска	13000/60	да	Не
Травматична артроза, остеоартрит	сламено жълто	Високо		Не	Не

За окончателната диагноза, в допълнение към изследването на синовиалната течност, са необходими и други данни, а именно: лабораторни изследвания на кръв и урина, резултати от инструментални изследвания. Само сравнението на всички резултати ще даде клинична картина на заболяването като цяло.

Цената за общ клиничен преглед на ставната течност не надвишава 1 000 рубли. Микробиологичният анализ ще струва 800-900 рубли, изследването на поляризатора - 1500 рубли.

Лечение на излишната синовиална течност

На първия етап от терапията те най-често прибягват до пункция на ставата, за да отстранят излишния ексудат и да почистят синовиалната кухина. След това се прилага антимикробно средство, за да се предотврати инфекция.

По време на периода на лечение е необходимо да се намали натоварването на засегнатия крайник. За тези цели се използват бинтове или фиксиращи превръзки, понякога се прилага шина. Направете това след аспирация, носете устройството поне една седмица.

За намаляване на риска от усложнения се предписват лекарства. Той включва следните групи лекарства:

• НСПВС в таблетки и мехлеми - Диклофенак, Индометацин, Найз, Ибупрофен;

• имуностимулиращи и възстановяващи средства - Activanad-N, Vitamax, Crpanol, FiBS;
• калциеви препарати.

С инфекциозния характер на заболяването се предписват антимикробни лекарства с широк спектър на влияние: Кларитромицин, Амоксиклав, Азитромицин. Подагрозният артрит се нуждае от допълнителна основна терапия с урикопресанти и урикозурици.

Ако говорим за хронично натрупване на ексудат с постоянни екзацербации, тогава всички тези мерки трябва да бъдат доживотни.

За да се избегне нов рецидив, на пациента се препоръчва да спазва диета, да предпазва ставата от нараняване и хипотермия, да се занимава с упражнения и редовно да се подлага на курс на физиотерапия.

Заключение

Изследването на синовиалната течност трябва да се вземе много сериозно - подобен проблем може да е признак на тежки ставни патологии. И следователно всяко любителско изпълнение и използването на народни рецепти в този случай не е подходящо и опасно. Всички действия трябва да бъдат съгласувани с лекаря и да се извършват само под негов контрол.