Imunski test encimov IFA. Kaj pomeni pozitiven rezultat ELISA (encimsko vezanega imunosorbentnega testa)? Imunski test posrednih encimov - stopnje izvajanja

Občasno zdravniki predpišejo teste ELISA, ki tega ne vedo vsi. Dekodiranje ELISA ima naslednje - encimsko vezan imunosorbentni test. Takšen krvni test pomaga razumeti, kako se telo bori proti boleznim nalezljivega spektra, in pokazati fazo bolezni. Imunski test encimov pomaga pri ocenjevanju zaščitne aktivnosti krvi, ugotavljanju imunske pomanjkljivosti pri patologijah, povezanih z okužbami, hormonskimi težavami itd.

Krvni test ELISA deluje z materialom, vzetim iz vene. Poleg tega so za pregled na voljo vsebina steklastega telesa, tekočina iz hrbtenjače, brisi iz sečnice ali cervikalnega kanala. Za encimsko vezan imunosorbentni test (ELISA) pri nosečnicah lahko vzamete tekočino, ki obdaja plod.

V tem primeru je mogoče neposredno z uporabo različnih tehnik preveriti kri neposredno za ELISA. Obstaja neposreden, posreden način, konkurenca in blokiranje. Ko je telo okuženo s kakšnim patogenim povzročiteljem, ki se imenuje antigen, začne imunski sistem proizvajati specifična protitelesa, na primer proti hepatitisu. Ta protitelesa so zasnovana za "obravnavo" s tujimi povzročitelji. Kaj so protitelesa? To so posebni proteini, ki se lahko vežejo z antigeni in tvorijo imunološke komplekse, ki se imenujejo antigen-protitelo. Za odkrivanje teh kompleksov je odgovorna diagnostika ELISA. Za odkrivanje antigena se v pridobljeni vzorec krvi dodajo protitelesa ali pa se izvede obratni postopek.

Pozitiven rezultat ELISA temelji na reakciji imunosti in encimov. Pod vplivom prvega se povzročitelji okužb in celični elementi vežejo, drugi pomaga vizualizirati rezultat prvega. Imunski odziv kaže na protitelesna in antigenska povezovanja. Kot rezultat tega procesa nastane imunski kompleks. Vse celice imajo na površini antigen. Imunska celica ujame sumljivo in antigen, ki je pritrjen na površini, opravi postopek primerjave z informacijami, ki so "naložene" v pomnilnik. Če pride do naključja opisa, se celica vrne domov, če ne, potem pride do povezave, za nastanek katere je odgovorno protitelo, ki je pritrjeno na površino.

Encimska reakcija medtem omogoča, da se snovi spremenijo v nove. Material je izpostavljen encimu. V tem primeru encimsko razliko zagotavljajo različni substrati. Produkt, ki je postal posledica te reakcije, se pošlje za določitev količine patogena, katerega določitev temelji na gostoti barve raztopine.

Značilnosti metode

Encimski imunosorbentni test je predpisan, kadar je treba diagnosticirati alergije, bolezni virusnega izvora. Obstaja tudi test ELISA za sifilis in številne druge okužbe, katerih prenos se pojavi med nezaščitenim spolnim odnosom. Takšne diagnostike postajajo vse bolj priljubljene v primerjavi s PCR. Dejstvo je, da PCR vključuje delo z brisi. Za razliko od PCR lahko rezultate ELISA dobimo s krvnimi preiskavami.

Poleg tega se lahko krvni test z ELISA predpiše, kadar je treba ugotoviti prisotnost imunske pomanjkljivosti, diagnosticirati onkologijo, oceniti, kako učinkovito je zdravljenje, določiti raven hormonov in opraviti predoperativni pregled v kombinaciji.

Če primerjate študije z ELISA, na primer s PCR, lahko odkrijete številne prednosti. Glavna stvar je možnost popolne diagnoze tudi v najzgodnejših fazah razvoja. Poleg tega rezultati ELISA pomagajo določiti specifično stopnjo bolezni, na kateri stopnji je njen razvoj.

Analiza ELISA v primerjavi s PCR ima večjo učinkovitost, poleg tega pa jo je mogoče med nosečnostjo odkriti za odkrivanje spolno prenosljivih bolezni. Oseba, ki je opravila ta test, lahko ugotovi koncentracijo TSH v serumu. Zelo pomembno je preveriti, kakšna je reakcija ščitnice, ali obstajajo okvare pri njenem delu.

Dodatne prednosti pa imajo tudi verižno reakcijo s polimerazo, je hitrost raziskovanja, kar pomeni hitre rezultate. Zdravniki cenijo tudi točnost rezultatov. Če govorimo o spolno prenosljivih boleznih, potem raven doseže 98 odstotkov, kar velja za koncentracijo TSH.

Seveda obstajajo nekatere pomanjkljivosti. Vendar v tem primeru govorimo o posrednih značilnostih testa. Zlasti govorimo o dejstvu, da je nemogoče izključiti morebitne napake pri opredelitvi norm. Včasih lahko test, ki ga je opravilo popolnoma zdravo dekle, pokaže lažno pozitiven rezultat ali negativen v nasprotnem primeru. Vendar klasifikacija psiholoških raziskovalnih metod v večini primerov povezuje takšne pomanjkljivosti z nepravilno pripravo ali kršitvijo tehnike, s katero je bilo gradivo vzeto.

Značilnosti izvedbe

Z analizo ELISA se v večini primerov krvodaja. Pred darovanjem krvi je pomembno, da vzdržite vsaj osem ur posta, da izključite vnos številnih zdravil, ki vplivajo na rezultat testa. Govorimo o antihistaminikih in hormonskih zdravilih, ki vplivajo na delovanje ščitnice. Poleg tega je treba alkohol izključiti vsaj en dan. Pred darovanjem krvi se prepričajte, da ne kadite vsaj eno uro. Izkrivljanje rezultata je možno tudi pri jemanju narkotičnih snovi.

Preden preidemo na dešifriranje, velja omeniti, katere merilne metode se uporabljajo za tak preskus. Kot rezultat analize bodo navedena protitelesa Ig ali imunoglobulini. Razumemo jih kot tiste zelo specifične beljakovine, o katerih smo že razpravljali. B-limfociti so odgovorni za njihovo proizvodnjo, takoj ko virusi, bakterije ali glive vstopijo v telo. Obstaja pet vrst imunoglobulinov, označenih z latinsko abecedo.

Njihove razlike so povezane z različno molekularno obliko in težo. Imajo drugačno razpolovno dobo, na različne načine sodelujejo ali ne sodelujejo v infekcijskih procesih. Tudi časovni okvir, v katerem jih je mogoče odkriti od trenutka okužbe, se razlikuje.

Če so imunoglobulini razvrščeni na podlagi molekulske mase kot osnove, potem ima IgM najvišje indekse. Značilnost te vrste imunoglobulinov je nezmožnost prehajanja skozi placentno pregrado. Če pri analizi novorojenčka odkrijemo IgM, govorimo o prisotnosti okužbe pri plodu.

Velika večina človeške krvi vsebuje imunoglobuline IgG, najmanj pa IgE. Ko govorimo o delu v okviru nalezljivih procesov, je treba posebno pozornost nameniti možnostim A, M, G. IgE deluje kot označevalec alergijske reakcije. IgD najdemo le v tkivih bezgavk in tonzil. To je pomembno pri ustvarjanju lokalne imunitete.

Poleg tega se v analizi določijo antigeni. Razumemo jih kot snovi z visoko molekulsko maso, ki so znane po svojem organskem izvoru. Zlasti govorimo o povzročiteljih infekcijskega in drugega spektra. Poleg tega mislimo tudi na snovi, ki signalizirajo različne spremembe v celicah, ki so neizogibne pri številnih boleznih. Naveden je tudi imunski kompleks, ki dokazuje kompleks antigen-protitelo, ki sodeluje v imunskem procesu.

Običajno je čas izdelave odvisen od določenega laboratorija, s katerim ste se obrnili. Številni laboratoriji lahko dajo rezultate v enem ali dveh dneh, drugi potrebujejo teden dni. Zamude so lahko posledica potrebe po kopičenju določene količine seruma.

Vpliv na rezultate in dekodiranje

Kljub temu, da ELISA velja za eno najbolj natančnih metod preverjanja, se napake še vedno pojavljajo. Postopek odvzema materiala, nepravilnega transporta in skladiščenja materiala lahko vpliva na pravilnost rezultatov. Jemanje zdravil, kot je navedeno zgoraj, prisotnost skritih bolezni. Presnovne motnje ali imunska pomanjkljivost vam prav tako ne bodo omogočile pravilnih kazalcev. V obdobju življenja do enega leta imajo lahko novorojenčki tudi ne povsem pravilne kazalnike. To je posledica dejstva, da so v telesu prisotna materinska protitelesa.

Ko govorimo o dekodiranju, obrazci za analizo uporabljajo pozitiven ali negativen predznak, ki označuje rezultate izračuna za vsak razred imunoglobulinov. Spodaj so verjetne možnosti.

Odsotnost odkritih IgG, IgA in IgM kaže na popolno okrevanje. Negativen rezultat za komponente, kot so IgM, IgA, IgG, je pomanjkanje imunosti proti okužbam.

Kombinacija pozitivnega in negativnega rezultata za IgG, IgA v kombinaciji s pozitivnim IgM kaže na prisotnost akutne okužbe v telesu. Pozitiven rezultat IgG v kombinaciji z negativnimi vrednostmi za IgA in IgM ustreza obdobju po cepljenju ali pridobitvi imunosti zaradi okužbe.

Kombinacija pozitivnega ali negativnega rezultata IgG, IgA in negativnega rezultata IgM kaže na prisotnost okužbe v njenem kroničnem poteku. Pozitiven rezultat za tri komponente: IgG, IgM, IgA pomeni poslabšanje okužbe, ki je bila v kronični obliki. Poleg neposrednega pojasnjevanja razredov protiteles v okviru dešifriranja analize ELISA zdravnik prejme informacije o njihovih količinskih kazalnikih. Pomembno je poudariti, da mora biti za dekodiranje odgovoren lečeči zdravnik. Dejstvo je, da mu kombinacija nekaterih sestavin lahko da idejo o napačnem rezultatu, kar bo pripeljalo do drugega testa. V tem primeru je samošifriranje neuporabno.

ELISA ali encimsko vezan imunosorbentni test se nanaša na serološke študije in je namenjen odkrivanju in diagnosticiranju patoloških mikroorganizmov v krvnem serumu.

Različno razredi imunoglobulinov za bakterije: IgM- z akutnim patološkim procesom in IgG v fazi okrevanja, ki v nekaterih primerih vztrajajo vse življenje.

Z encimskim imunskim testom se odkrijejo bolezni različnih etiologij:

ELISA je indicirana tudi za diagnosticiranje sifilisa pri potrditvi pozitivnih rezultatov z metodo RV in omogoča sledenje učinkovitosti zdravljenja v patološkem procesu.

Encimski imunosorbentni test je predpisan glede na indikacije (če obstaja sum okužbe z mikroorganizmi), je med nosečnostjo in pred operacijo obvezen za identifikacijo prenosa različnih bakterij.

Postopek analize se izvaja zjutraj na tešče, material (kri) se vzame iz vene. Rezultati diagnostične študije so pripravljeni v 10 dneh.

ELISA pozitivna

Pozitiven rezultat ELISA potrjuje prisotnost imunoglobulinov IgG in IgM. Odkriti krvni titri IgM vedno kaže na bolezen v progresivni fazi teh protiteles pri zdravi osebi ni.

In IgG kaže na prejšnjo okužbo ali prenos patogenih mikroorganizmov, od katerih se nekateri upoštevajo v majhnih količinah v mejah normale. Na primer, bakterije streptokoki in stafilokoki so prisotne v vsakem človeškem telesu.

Sifilis

Protitelesa IgM pri sifilisu se odkrijejo 2 tedna po okužbi in kažejo na prisotnost primarne, sekundarne ali prirojene epizode, z zdravljenjem izginejo po približno šestih mesecih, v odsotnosti terapije - po 18 mesecih. Če se hkrati odkrijeta obe vrsti imunoglobulinov, se v akutni fazi potrdi sifilis. Okrevani ljudje Protitelesa IgG proti sifilisu ostanejo v serumu vse življenje.

Virusni hepatitis

IgM do virusnega hepatitisa se pogosto odkrijejo celo v inkubacijskem obdobju bolezni, preden se pojavijo prve manifestacije in vztrajajo med potekom bolezni, po ozdravitvi pa jih ne odkrijejo. Izjema je virusni hepatitis C, pri katerem je IgM tako v aktivni kot v latentni ali kronični fazi.

Protitelesa IgG proti hepatitisu A so lahko prisotna tudi pri zdravih ljudeh, kar je posledica predhodne okužbe ali zmanjšanja imunosti, prisotnost IgG proti hepatitisom B, C in D pri zdravih ljudeh pa ne opazimo.

CMVI

CMVI je razširjen skoraj povsod in ne predstavlja grožnje za javno zdravje. Vendar pa nosi usodno nevarnost za novorojenčka in plod z intrauterino okužbo.

Odkrivanje protiteles IgM proti citomegalovirusu kaže na primarno okužbo ali aktivacijo latentne faze. Titri IgG pri ozdravljenih ljudeh vztrajajo 10 let.

Herpes

Protitelesa proti virusu herpesa pri zdravih ljudeh običajno niso prisotna. Vsebnost IgM označuje akutno fazo bolezni, IgG - latentno (v tem primeru je oseba nosilec okužbe). Z vsebnostjo IgG v herpesu morate vedeti, da se virus lahko kadar koli aktivira iz latentne stopnje v progresivno.

Norice

Pri noricah in 2 leti po ozdravitvi ostanejo imunoglobulini razreda IgM v krvi. Običajno zdravi ljudje nimajo protiteles proti noricam.

Bolezni, ki jih povzročajo stafilokoki in streptokoki

Vsi ljudje imajo imunoglobuline proti stafilokokom in streptokokom. Zato je mogoče diagnosticirati patološki proces, ki ga povzročajo te skupine bakterij, z izvedbo dvojnega imunosorbenskega testa, povezanega z encimi. Če pride do povečanja titrov s ponavljajočo se ELISA (en teden po prvem), se šteje, da je analiza potrjena.

Klamidija

Pozitiven rezultat na klamidijo dokazuje identifikacija IgM z naslovom 1: 8 in več ter razred IgG - 1:64 in višje, ki se med potekom bolezni povečujejo in dosegajo visoke vrednosti. Na primer pri otrocih s klamidijsko pljučnico se titri dvignejo na 1: 2000 - 1: 4000. Prisotnost IgM kaže na aktivnost klamidije, nekaj časa po okužbi se v krvi odkrijejo globulini IgG.

Negativni encimsko vezan imunosorbentni test dokazuje pomanjkanje protiteles IgM... Določeni IgG se v vseh primerih ne štejejo za potrditev diagnostične študije; pogosto trajajo več let po okužbi, včasih celo za življenje.

Po sifilisu, infekcijski mononukleozi, imunoglobulini IgG vztrajajo vse življenje in se določijo v krvnem serumu. Mikroorganizmi CMVI, ošpice, rdečke, toksoplazmoza ostanejo 10 let.

Titri za amoebiasis trajajo od nekaj mesecev do nekaj let. Protitelesa proti bakterijam stafilokoka in streptokoka se določijo pri vseh ljudeh v majhnih količinah.

V zgornjih primerih nam odkrivanje imunoglobulinov IgG po preteklih boleznih omogoča, da rezultate ELISA ocenimo kot negativne.

Norma med nosečnostjo

V prvem trimesečju nosečnosti vsaka ženska opravi popoln pregled telesa, ki vključuje encimsko vezan imunosorbentni test.

Študije o toksoplazmozi, CMVI, klamidiji, herpesu tipa 2 (genitalnem), rdečkah, ureaplazmi in mikoplazmi so obvezne, saj te bolezni resno ogrožajo razvoj ploda. Sposobni so prodreti v otrokovo telo, mimo placentne pregrade.

In vseskozi predstavljajo posebno nevarnost prvo trimesečje nosečnosti in skoraj vedno vodijo do intrauterina smrt ploda in spontani splav.

Težava z zgornjimi boleznimi je v tem, da se pogosto pojavljajo v asimptomatski fazi, brez vidnih kliničnih manifestacij, odkrijejo pa jih lahko le z encimskim imunskim testom.

Dobre rezultate testa lahko rečemo, če v serumu ne odkrijemo mikroorganizmov. Določeni IgG kažejo na prenos virusov in zahtevajo stalno spremljanje ženske, da se zagotovi pravočasno zdravljenje za nenadno poslabšanje. IgM pozitiven signalizira progresivni patološki proces in zahteva takojšnjo odstranitev patogena.

Razkrivanje naslovov IgG za rdečke označuje prejšnjo bolezen in je norma med nosečnostjo. IgG na CMVI prav tako ne predstavljajo posebne grožnje za plod, vendar ni izključena možnost poslabšanja (pogostost manifestacije, približno 1-2%).

Posebna grožnja je prisotnost IgG pri virusu herpes simpleksa tipa 2 ali genitalijah (HSV2), saj se tveganje za poslabšanje med porodom znatno poveča. V gestacijskem obdobju se pogostost manifestacije akutne faze pojavi v 0,9% primerov. Poraz ploda z virusom herpesa med prehodom genitalnega trakta se pojavi v 40% primerov in je v 50% usoden.

S preneseno toksoplazmozo lahko IgM vztraja do 2 leti po zdravljenju. Tveganje za okužbo ploda je v tem primeru 17% v prvem trimesečju in se do tretjega poveča na 60%, saj je glavna pot okužbe transplacentarna. Identificirano IgG do toksoplazmoze mnogi strokovnjaki ga ponavadi ocenjujejo kot negativen rezultat, ki praktično ne ogroža poteka nosečnosti.

Okužba z virusom človeške imunske pomanjkljivosti je resna diagnoza. Diagnostične napake lahko povzročijo katastrofalne posledice. Test ELISA na HIV je najbolj dostopna raziskovalna metoda, ni pa v vseh primerih informativna.

ELISA - encimsko vezan imunosorbentni test. Namen metode ELISA je odkriti protitelesa proti virusu imunske pomanjkljivosti v biološkem materialu. S pomočjo metode je mogoče slediti prisotnosti v tekočini ne samih virusov, ampak le protiteles, ki nastanejo kot odziv na njihovo prisotnost. Encimski imunski test se pogosto uporablja pri diagnosticiranju spolno prenosljivih bolezni. Pomaga pri prepoznavanju spolno prenosljivih okužb.

Obstaja več vrst ELISA: neposredna različica, posredna različica, sendvič metoda. Vsekakor tehnika temelji na ugotavljanju prisotnosti protiteles, ki služijo kot pokazatelj prodiranja tujega sredstva. Za prepoznavanje teh "oznak" biološko komponento obdelamo z encimi.

Encimski imunosorbentni test odkrije protitelesa z natančnostjo 96 - 98%, napaka je zanemarljiva. To je 2-4%.

ELISA - metoda za diagnosticiranje HIV

Test ELISA na HIV je prva stopnja diagnoze. Antigeni virusa imunske pomanjkljivosti so proteini p24, p15, p17, p31 in glikoproteini gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Za odkrivanje virusnega proteina se iz vene odvzame vzorec krvi. Vzorec, usmerjen v krvni test z ELISA, se obdela z reagenti za encimske imunske teste. Serum je izoliran iz krvi. Če jih med študijo odkrijejo, to pomeni, da je virus že prisoten v krvi.

Krv se daje strogo na prazen želodec. 2 dni pred analizo ni priporočljivo jesti mastne hrane in piti alkohola. V 14 dneh morate prenehati jemati protivirusna zdravila.

Prednosti metode:

• relativno nizki stroški;
• visoka stabilnost reagentov;
• visoka občutljivost;
• kratko trajanje;
• minimalni vpliv človeškega faktorja.

Sodobni preskusni sistemi ELISA so izdelani po svetovnih standardih. To izboljša natančnost metode.

Imunski test encimov ne daje vedno zanesljivih rezultatov. Ko virus vstopi v krvni obtok, se začne latentna (latentna) stopnja razvoja. Obdobje, dokler se virusi niso začeli množiti in protitelesa še niso nastala, se imenuje "čas seronegativnega okna". Na tej stopnji je nesmiselno izvajati ELISA. Če je prišlo do okužbe, bo rezultat. Kako hitro se bo virus odkril, je odvisno od tega, koliko nevarnih celic je vstopilo v telo. Pri nezaščitenem spolnem odnosu ali kontaminirani transfuziji krvi bo to obdobje minimalno.

Za visoko zanesljivost ELISA za HIV se študija izvede trikrat. Pogoji ELISA za virus humane imunske pomanjkljivosti:

• 6 tednov po verjetnem stiku,
• v 3 mesecih,
• šest mesecev kasneje.

ELISA 4 generacije za HIV je najbolj informativna metoda v zgodnjih fazah okužbe. Lahko se izvede že 1 mesec po domnevni okužbi. Test je drag v primerjavi z analogom tretje generacije. Zato se v državnih zdravstvenih ustanovah uporablja kot dodatna diagnostična metoda. Test 3 se izvede brezplačno. Če na podlagi njegovih rezultatov ni mogoče dati nedvoumnega odgovora, se bolnik napoti na ELISA 4 generacije.

Pomembno! Ko se okuži, postane oseba nalezljiva. Nevaren je za druge, tudi če še ne ve za svojo diagnozo!

Če ELISA odkrije protitelesa proti antigenom HIV, so potrebne dodatne študije. Tej vključujejo. Zanesljivost te metode je 80%. S pomočjo PCR se pregleda kri, seme in izcedek iz nožnice. Biološko tekočino razgradijo v medicinskem reaktorju, nato obdelajo z encimi. Posledično se pridobijo podatki o tem, kakšna je koncentracija celic HIV v tekočem mediju. Zaradi velike napake (20%) se s pozitivnim rezultatom izvede dodatna imunska blotnja.

Naslednja stopnja diagnoze je Combo test (ali imunski blot). To je zelo občutljiva študija (98 -odstotna gotovost), ki se izvede, če so rezultati ELISA po 6 mesecih dvoumni.

Interpretacija rezultatov ELISA

Dešifriranje traja od 24 do 48 ur. Če morate nujno dobiti informacije (potreben je kirurški poseg), se dešifriranje izvede v 2 urah. Pokrajinski zdravstveni centri nimajo vedno potrebnih reagentov. Vzorec se odvzame na kraju zdravljenja, nato pa se prenese v regionalni center. V takih okoliščinah je rezultat mogoče najti v 1 do 2 tednih.

Rezultat imunskega testa encimov je lahko pozitiven ali negativen; drugih možnosti ni

Tudi če je bil rezultat pozitiven pri primarni in ponavljajoči se ELISA, bolnika ni mogoče prepoznati kot okuženega s HIV. Lahko pride do napake. Razlogi za lažno pozitiven rezultat:

• kronične bolezni;
• dolgotrajne nalezljive bolezni;
• nosečnost.

Zato je treba rezultat analize pojasniti z dodatnimi raziskavami.

Če se pri imunoblotingu za HIV (reaktivno) šteje, da je oseba okužena s HIV, kar pomeni, da je zdrava.

Celice virusa se sčasoma prilagodijo predpisanim zdravilom. Za nadzor se preskus ELISA občasno ponovi.

Včasih imunobloting pokaže lažno negativen rezultat. Izjemno redko je virus imunske pomanjkljivosti 6 mesecev (ali več). To je mogoče, če je v krvni obtok vstopilo majhno število virusnih celic. V 0,5% skupnega števila primerov je okužbo mogoče diagnosticirati šele po enem letu. Pri 99,5%bolnikov bo v šestih mesecih po okužbi pri izvajanju ELISA dosežen zanesljiv rezultat.

Tudi pri zelo natančnih študijah je še vedno 2 -odstotna stopnja napak. Ne smemo pozabiti na človeški faktor. Da bi odpravili možnost napak, lahko preskus izvedemo v 2 različnih ustanovah.

Za določitev ravni vsebnosti takšnih biološko aktivnih snovi, kot so imunološki kompleksi, je potrebna posebna laboratorijska študija. Če sumite na hematološko, nalezljivo ali avtoimunsko bolezen, strokovnjaki predpišejo krvni test za ELISA. V članku bomo preučili, kaj je to, kako se nanj pripraviti, kaj kaže in kako ga sami razvozlati.

Kakšna raziskava je to - krvni test za ELISA? Kratica pomeni encimsko vezan imunosorbentni test, med katerim se določi količinska in kakovostna vsebnost različnih biološko aktivnih snovi, pa tudi protiteles in antigenov v biološkem materialu.

Kaj se uporablja za encimski imunski test krvi:

• cerebrospinalna tekočina;
• sluz sečnice, cervikalni kanal;
• amnijska tekočina;
• vsebino steklastega telesa.

Za diagnosticiranje spolno prenosljivih bolezni, nalezljivih in onkoloških procesov, alergijskih reakcij, motenj v endokrinem in reproduktivnem sistemu, avtoimunskih in imunsko pomanjkljivih bolezni ter za oceno tveganja za razvoj nekaterih ledvic je predpisan encimsko vezan imunosorbentni test.

Krvni test za ELISA med nosečnostjo je predpisan za zgodnje odkrivanje, razvojne motnje v začetnih fazah in nadzor njihove dinamike. Poleg tega vam analiza ELISA omogoča nadzor ravni protiteles, ki lahko pri otroku izzovejo razvoj hudih nevroloških motenj, s čimer se prepreči razvoj zapletov ne le med nosečnostjo, ampak tudi med porodom.

Omogoča vnaprej odziv na ugotovljene težave in znatno izboljšanje zdravja tako matere kot njenega otroka.

Prednosti ELISA v krvi vključujejo:

• visoka (do 90%) stopnja občutljivosti;
• možnost zgodnje diagnoze s hkratno določitvijo stopnje bolezni;
• nizki stroški reagentov in posledično razpoložljivost;
• minimalna količina materiala za raziskave;
• minimalni pogoji prejema;
• možnost dolgotrajnega skladiščenja reagentov;
• sposobnost nadzora dinamike razvoja patološkega procesa.

Preskusni sistemi

Slabosti encimskega imunskega testa:

• nemogoče je določiti povzročitelja bolezni, v laboratoriju se prejema le imunski odziv nanj
• možnost pridobivanja napačnega rezultata (v zelo redkih primerih, predvsem v obdobju brejosti).

Priprava

Načelo tovrstnega krvnega testa temelji na tvorbi specifičnih protiteles v človeškem telesu, ko vanj vstopijo antigeni, torej tuji povzročitelji, ki povzročajo razvoj določene bolezni. Zaradi njihove interakcije nastanejo kompleksi "antigen - protitelo", ki so podvrženi raziskavam pri izvajanju imunskega testa encimov.

V zvezi s tem je za analizo krvi in ​​drugega biološkega materiala za ELISA potrebna priprava, da ne bi vplivali na te komplekse in s tem na zanesljivost dobljenih rezultatov.

14 dni pred domnevnim pregledom se posebno zdravljenje prekine in uporaba antibakterijskih, protivirusnih zdravil preneha.

Krv za ELISA se daje iz vene. Neposredno pred odvzemom krvi je treba omejiti telesno aktivnost, izogibati pa se je treba tudi kajenju in pitju alkoholnih pijač.

Obstaja več metod in metod imunskega testa encimov: neposredna in posredna metoda, konkurenčna in blokirajoča metoda.

V središču pregleda krvi (katerega koli drugega biološkega materiala) na ELISA je algoritem, sestavljen iz izvajanja dveh reakcij - imunske in encimske.

Med prvim se patološki dejavniki vežejo na zaščitne elemente celic biološkega materiala, vzetega za raziskave. Nastane imunski kompleks antigen-protitelo. Izgleda takole. Antigeni so prisotni na površini absolutno vseh celic.

Ko tuje celice vstopijo v telo, jih ujamejo imunske celice (na katerih površinah se nahajajo protitelesa), ki primerjajo podatke o antigenih s površine na novo prispelih celic z informacijami, shranjenimi v njihovem "spominu". V primeru neskladja teh podatkov se vklopijo zaščitne funkcije telesa, ki so sestavljene iz tvorbe imunskega kompleksa.

Nato se izvede encimska reakcija, ki prikaže rezultate prejšnje reakcije. Njegovo načelo temelji na preoblikovanju snovi iz ene v drugo. Za vsako vrsto materiala ELISA, ki nastane med imunsko reakcijo, obstaja določen encim, katerega obdelava se uporablja za določanje koncentracije tujega sredstva (glede na intenzivnost barve raztopine).

Dešifriranje

Zahvaljujoč pregledu krvi za ELISA laboratorijski sodelavci določijo A, G in M. Pozitiven rezultat pri pregledu krvi (drugih bioloških surovin) za ELISA omogoča ne le diagnosticiranje, ampak tudi stopnjo bolezni, pa tudi naravo njegovega poteka (akutnega ali kroničnega).

Ti imunoglobulini se v prisotnosti patološkega procesa v bolnikovem telesu tvorijo v različnih obdobjih bolezni:

• Imunoglobulini M, IgM- nastanejo pet dni po začetku bolezni in ostanejo v krvi 1,5 meseca, nato izginejo. Odkrivanje IgM kaže na prisotnost akutnega primarnega patološkega procesa v telesu in potrebo po okrepljenem terapevtskem posegu.
• Imunoglobulini G, IgG- se pojavijo štiri tedne po okužbi, njihovo prisotnost v telesu je mogoče zaznati več mesecev. Odkrivanje IgG kaže na anamnezo predhodne bolezni osebe. Povečanje njihove vsebnosti lahko kaže tudi na ponovno okužbo.
• Imunoglobulini A, IgA- se pojavijo v času okužbe in so v telesu prisotni štiri tedne. Zmanjšanje njihove vsebine kaže na začetek okrevanja. Ponovni nastop v analizah, potem ko je oseba opravila potek zdravljenja in ozdravela, kaže na prehod bolezni v kronično obliko. Sočasno odkrivanje IgA in IgG v rezultatih ELISA kaže tudi na prisotnost kroničnega procesa v telesu.

Prav tako je treba opozoriti, da hkratna prisotnost IgG in IgM v testih kaže, da se je kronični proces poslabšal, zato mora bolnik začeti zdravljenje. Če med pregledom niso odkrili nobenega imunoglobulina, to pomeni, da imunskega odziva ni.

Za celovito oceno stanja telesa (zlasti njegovih zaščitnih funkcij) je predpisan encimsko vezan imunosorbentni test (ELISA). Krvni test ELISA se izvaja za diagnosticiranje nalezljivih, avtoimunskih, hematoloških patologij, primarnih in sekundarnih imunskih pomanjkljivosti. V tem članku predlagamo, da podrobneje preučimo, kaj je krvni test ELISA in kakšne so indikacije za njegovo izvajanje.

Indikacije za predpisovanje krvnega testa z ELISA in načelo njegovega delovanja

Kot smo že omenili, je krvni test ELISA laboratorijski test, s katerim se določijo antigeni ali protitelesa v vzorcu krvi. Ta analiza se uporablja za odkrivanje ravni hormonov, imunoloških kompleksov in imunoglobulinov. Za opravljanje analize ELISA obstajajo naslednji znaki:

• Diagnoza alergij.
• Diagnoza bolezni virusnega izvora - virus Epstein -Barr, herpes, hepatitis, citomegalovirus.
• Diagnostika spolno prenosljivih okužb - mikoplazma, ureaplazma, sifilis, trihomonas, klamidija.
• Opredelitev imunske pomanjkljivosti.
• Diagnoza onkoloških patologij.
• Vrednotenje učinkovitosti terapije.
• Določanje ravni hormonov.
• Predoperativni celovit pregled.

Načelo delovanja encimsko vezanega imunosorbentnega testa temelji na krvnem testu na prisotnost imunoglobulinov (specifičnih proteinov protiteles). Imunoglobuline proizvaja imunski sistem, ko antigeni (tuji mikroorganizmi) vstopijo v človeško telo. Te imunske molekule se vežejo in nevtralizirajo različne povzročitelje bolezni. Pomembna značilnost imunoglobulinov je njihova specifičnost. Zaradi teh lastnosti lahko tvorijo kompleks antigen-protitelo z vezavo na specifičen antigen. Med izvajanjem krvne preiskave ELISA se ta kompleks določi količinsko in kvalitativno.

Za to študijo se pogosto uporablja človeška kri. Kot material za analizo pa lahko vzamemo vsebino steklastega telesa, plodovnice, cerebrospinalne tekočine. Običajno se odvzame vzorec krvi iz pacientove kubitalne vene. Priporoča se darovanje krvi na prazen želodec (od zadnjega obroka mora preteči najmanj 12 ur). Če bolnik jemlje zdravila, je treba o tem obvestiti zdravnika, saj lahko nekatera od njih vplivajo na rezultat testa. Na zanesljivost rezultatov testov vpliva tudi uporaba drog in alkohola.

Dešifriranje krvnega testa za ELISA

Obrazec za to analizo običajno označuje negativen (-) ali pozitiven (+) rezultat izračuna vsakega razreda imunoglobulinov.

Predlagamo, da razmislite o interpretaciji verjetne razlage krvnega testa za ELISA.

• IgG, IgA niso zaznani in rezultat IgM je negativen - popolno okrevanje.
• Rezultat IgM, IgA, IgG je negativen - imunost na okužbo ni.
• IgG, IgA pozitivni in negativni ter IgM pozitivni - akutna okužba.
• Pozitiven rezultat IgG in negativen rezultat IgA in IgM-imunost po cepljenju ali po infekciji.
• Pozitivni ali negativni IgG, IgA in negativni IgM - kronična okužba.
• Rezultat IgG, IgM, IgA je pozitiven - poslabšanje kronične nalezljive patologije.

Pri encimsko vezanem krvnem testu krvi, poleg razjasnitve razredov protiteles, so v dekodiranju navedeni tudi njihovi količinski kazalniki. Vendar njihovo obsežno razlago poda le zdravnik.

Prednosti in slabosti te študije

• Relativno nizki stroški.
• Udobje pri delu.
• Možnost diagnoze v zgodnji fazi domnevne bolezni.
• Relativno visoka natančnost pridobljenih podatkov.
• Kratek čas, potreben za pridobitev rezultatov raziskave.
• Sposobnost sledenja dinamiki razvoja nalezljivega procesa v telesu.
• Visoka stopnja poenotenja, ki omogoča izvajanje množičnih raziskav.
• Avtomatizacija vseh faz raziskav.

Pomanjkljivost krvnega testa ELISA je, da lahko v zelo redkih primerih da lažno pozitivne ali lažno negativne rezultate. Tudi pri izvajanju študije je lahko poleg tehničnih napak vzrok za lažne rezultate pri pacientu revmatoidni faktor, prisotnost kroničnih bolezni (pri katerih nastajajo protitelesa), jemanje določenih zdravil, presnovne motnje.

• Giardiasis.
• Ascariasis.
• Cisticerkoza.
• Amebijaza.
• Trihineloza - študija se izvede več kot enkrat, 4-12 tednov po okužbi se določi najvišja raven protiteles.
• Tenioza.
• Opisthorchiasis - izvaja diferencialno diagnozo med akutno in kronično obliko bolezni.
• Toksoplazmoza.
• Fascioliasis - v akutni fazi bolezni se ugotovi prisotnost protiteles.
• Kožna ali visceralna lišmanioza.

Tako lahko povzamemo: potrebno je opraviti test ELISA na parazite, da se identificirajo antigeni (odpadni produkti parazitov in njihova prisotnost), pa tudi protitelesa (imunoglobulini). Specifičnost te raziskovalne metode pri določanju parazitov po statističnih podatkih je približno 90%. Zahvaljujoč tej analizi lahko zdravnik natančno določi vrsto parazitov, njihovo skupno število in tudi sledi dinamiki razvoja patoloških procesov zaradi ravni protiteles.