IFA enzýmový imunotest. Čo znamená pozitívny výsledok ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)? Nepriama enzýmová imunoanalýza - štádiá

Z času na čas lekári predpisujú testy ELISA, že nie každý to vie. Dekódovanie ELISA má nasledujúci - enzýmový imunosorbentový test. Takýto krvný test pomáha pochopiť, ako telo bojuje s chorobami infekčného spektra a preukázať fázu ochorenia. Enzýmová imunoanalýza pomáha pri hodnotení ochrannej aktivity krvi, identifikácii imunodeficiencie pri patológiách spojených s infekciami, hormonálnymi problémami a podobne.

Krvný test ELISA pracuje s materiálom, ktorý sa odoberá zo žily. Okrem toho je na vyšetrenie k dispozícii obsah sklovca, tekutina z miechy, stery z močovej rúry alebo krčka maternice. Pre enzýmový imunosorbentový test (ELISA) u tehotných žien sa môže odobrať tekutina, ktorá obklopuje plod.

V tomto prípade sa krv priamo na ELISA môže kontrolovať pomocou rôznych techník. Existuje priama, nepriama cesta, súťaž a blokovanie. Keď je telo infikované nejakým patogénnym agensom, ktorý sa nazýva antigén, imunitný systém začne produkovať špecifické protilátky, napríklad proti hepatitíde. Tieto protilátky sú zamerané na „zaoberanie sa“ cudzími látkami. Čo sú protilátky? Ide o špeciálne proteíny, ktoré sa môžu viazať s antigénmi a vytvárať imunologické komplexy, ktoré sa nazývajú antigén-protilátka. Práve za detekciu týchto komplexov je zodpovedná diagnostika ELISA. Na detekciu antigénu sa do získanej vzorky krvi pridajú protilátky alebo sa vykoná opačný postup.

Pozitívny výsledok ELISA je založený na reakcii imunity a enzýmov. Pod vplyvom prvého sa viažu pôvodcovia infekcií a bunkových prvkov, druhý pomáha vizualizovať výsledok prvého. Imunitná odpoveď naznačuje protilátkové a antigénne väzby. V dôsledku tohto procesu sa vytvára imunitný komplex. Všetky bunky majú na svojom povrchu antigén. Imunitná bunka zachytí tú podozrivú a antigén, ktorý je fixovaný na povrchu, podstúpi porovnávaciu procedúru s informáciou, ktorá sa „nahrá“ do pamäte. Ak dôjde k zhode popisu, tak sa bunka vráti domov, ak nie, tak dôjde k spojeniu, za vznik ktorého je zodpovedná protilátka, ktorá je prichytená na povrchu.

Enzymatická reakcia medzitým umožňuje premenu látok na nové. Materiál je vystavený pôsobeniu enzýmu. V tomto prípade je enzymatický rozdiel poskytovaný rôznymi substrátmi. Produkt, ktorý sa stal dôsledkom tejto reakcie, sa posiela na stanovenie množstva patogénu, ktorého stanovenie je založené na hustote farby roztoku.

Vlastnosti metódy

Ak je potrebné diagnostikovať alergie, ochorenia vírusového pôvodu, predpisuje sa enzýmový imunosorbentový test. Existuje aj test ELISA na syfilis a množstvo iných infekcií, ktorých prenos sa vyskytuje pri nechránenom pohlavnom styku. Takáto diagnostika je v porovnaní s PCR čoraz populárnejšia. Faktom je, že PCR zahŕňa prácu s nátermi. Na rozdiel od PCR je možné výsledky ELISA získať krvnými testami.

Okrem toho je možné predpísať krvný test ELISA, keď je potrebné zistiť prítomnosť imunodeficiencie, diagnostikovať onkológiu, posúdiť účinnosť liečby, určiť hormonálnu hladinu a podstúpiť kombinované predoperačné vyšetrenie.

Ak porovnáte štúdie pomocou ELISA napríklad s PCR, môžete nájsť množstvo výhod. Hlavná vec je možnosť úplnej diagnostiky aj v najskorších štádiách vývoja. Okrem toho výsledky ELISA pomáhajú určiť konkrétne štádium ochorenia, na akej úrovni je jeho vývoj.

Analýza ELISA v porovnaní s PCR má vyššiu účinnosť, navyše sa môže použiť počas tehotenstva na detekciu STD. Osoba, ktorá prešla týmto testom, môže zistiť koncentráciu TSH v sére. Je veľmi dôležité skontrolovať, aká je reakcia štítnej žľazy, či nie sú v jej práci poruchy.

Ďalšími výhodami však majú aj polymerázovú reťazovú reakciu, rýchlosť výskumu, čo znamená rýchle výsledky. Presnosť výsledkov oceňujú aj lekári. Ak hovoríme o pohlavne prenosných chorobách, potom hladina dosahuje 98 percent, ako je to v prípade koncentrácie TSH.

Samozrejme, existujú určité nevýhody. V tomto prípade však hovoríme o nepriamych vlastnostiach testu. Hovoríme najmä o tom, že nemožno vylúčiť možné chyby v definícii noriem. Niekedy môže test, ktorý si urobilo úplne zdravé dievča, ukázať falošne pozitívny výsledok, v opačnom prípade negatívny. Klasifikácia metód psychologického výskumu však vo väčšine prípadov spája takéto nedostatky s nesprávnou prípravou alebo porušením techniky, s ktorou bol materiál odobratý.

Vlastnosti vykonávania

Pri analýze ELISA sa vo väčšine prípadov daruje krv. Pred darovaním krvi je dôležité vydržať najmenej osem hodín pôstu, vylúčiť príjem množstva liekov, ktoré ovplyvňujú výsledok testu. Hovoríme o antihistaminikách a hormonálnych liekoch, ktoré ovplyvňujú fungovanie štítnej žľazy. Okrem toho je potrebné vylúčiť alkohol aspoň na jeden deň. Pred darovaním krvi sa uistite, že aspoň hodinu nefajčíte. Skreslenie výsledku je možné aj pri užívaní omamných látok.

Predtým, než prejdeme k dekódovaniu, stojí za zmienku, aké metódy merania sa na takýto test používajú. Ako výsledok analýzy budú indikované Ig protilátky alebo imunoglobulíny. Sú chápané ako veľmi špecifické proteíny, o ktorých sa už diskutovalo. Za ich tvorbu sú zodpovedné B-lymfocyty, hneď ako sa do tela dostanú vírusy, baktérie alebo plesne. Existuje päť typov imunoglobulínov, ktoré sú označené latinskou abecedou.

Ich rozdiely sú spojené s rôznou molekulárnou formou a hmotnosťou. Majú rôzne polčasy rozpadu, rôznymi spôsobmi sa zúčastňujú alebo nezúčastňujú infekčných procesov. Časové rámce, v rámci ktorých ich možno zistiť od okamihu výskytu infekcie, sa tiež líšia.

Ak sú imunoglobulíny klasifikované na základe molekulovej hmotnosti, potom má IgM najvyššie indexy. Charakteristickým znakom tohto typu imunoglobulínov je neschopnosť prejsť cez placentárnu bariéru. Ak sa pri rozbore u novorodenca zistí IgM, hovoríme o prítomnosti infekcie u plodu.

Prevažná väčšina ľudskej krvi obsahuje imunoglobulíny IgG, najmenej IgE. Keď už hovoríme o práci v rámci infekčných procesov, osobitnú pozornosť treba venovať možnostiam A, M, G. IgE pôsobí ako marker alergickej reakcie. IgD sa nachádza iba v tkanivách lymfatických uzlín a mandlí. Je to dôležité z hľadiska vytvorenia lokálnej imunity.

Okrem toho sa v analýze stanovujú antigény. Sú chápané ako látky vysokomolekulárneho typu, ktoré sú známe svojim organickým pôvodom. Predovšetkým hovoríme o patogénoch infekčného a iného spektra. Okrem toho máme na mysli aj látky, ktoré signalizujú rôzne zmeny v bunkách, ktoré sú nevyhnutné pri rade chorôb. Je tiež indikovaný imunitný komplex, ktorý demonštruje komplex antigén-protilátka, ktorý sa podieľa na imunitnom procese.

Zvyčajne čas výroby závisí od konkrétneho laboratória, ktoré ste kontaktovali. Množstvo laboratórií je schopných poskytnúť výsledky do jedného až dvoch dní, iné vyžadujú týždeň. Oneskorenie môže byť spôsobené potrebou nahromadiť určité množstvo séra.

Vplyv na výsledky a dekódovanie

Napriek tomu, že ELISA je považovaná za jednu z najpresnejších overovacích metód, stále sa vyskytujú chyby. Postup pri odbere materiálu, nesprávna preprava a skladovanie materiálu môže ovplyvniť správnosť výsledkov. Užívanie liekov, ako je uvedené vyššie, prítomnosť skrytých chorôb. Metabolické poruchy alebo imunodeficiencia vám tiež neumožnia získať správne ukazovatele. Počas obdobia života do jedného roka môžu mať novorodenci tiež nie úplne správne ukazovatele. Je to spôsobené tým, že v tele sú prítomné materské protilátky.

Keď už hovoríme o dekódovaní, analytické formuláre používajú kladné alebo záporné znamienko, ktoré označuje výsledky výpočtu pre každú z tried imunoglobulínov. Nasledujúce sú pravdepodobné možnosti.

Neprítomnosť detegovaných IgG, IgA a IgM naznačuje úplné zotavenie. Negatívnym výsledkom pre také zložky ako IgM, IgA, IgG je nedostatok imunity voči infekcii.

Kombinácia pozitívneho a negatívneho výsledku pre IgG, IgA v kombinácii s pozitívnym IgM naznačuje prítomnosť akútnej infekcie v tele. Pozitívny výsledok IgG v kombinácii s negatívnymi hodnotami IgA a IgM zodpovedá obdobiu po očkovaní alebo získaniu imunity v dôsledku infekcie.

Kombinácia pozitívneho alebo negatívneho výsledku IgG, IgA a negatívneho výsledku IgM indikuje prítomnosť infekcie v jej chronickom priebehu. Pozitívny výsledok pre tri zložky: IgG, IgM, IgA znamená exacerbáciu infekcie, ktorá bola v chronickej forme. Okrem priameho objasnenia tried protilátok v rámci dekódovania analýzy ELISA dostáva lekár informácie o ich kvantitatívnych ukazovateľoch. Je dôležité zdôrazniť, že za dekódovanie by mal byť zodpovedný ošetrujúci lekár. Faktom je, že kombinácia niektorých komponentov mu môže dať predstavu o falošnom výsledku, čo povedie k druhému testu. V tomto prípade je samodešifrovanie zbytočné.

ELISA alebo enzýmová imunoanalýza sa vzťahuje na sérologické štúdie a je určená na detekciu a diagnostiku patologických mikroorganizmov v krvnom sére.

Rôzne triedy imunoglobulínov na baktérie: IgM- s akútnym patologickým procesom a IgG v štádiu zotavovania, ktoré v niektorých prípadoch pretrvávajú počas celého života.

Pomocou enzýmového imunotestu sa zisťujú choroby rôznej etiológie:

ELISA je tiež indikovaná na diagnostiku syfilisu pri potvrdení pozitívnych výsledkov metódou RV a umožňuje sledovať účinnosť liečby v patologickom procese.

Enzýmovo viazaný imunosorbentový test je predpísaný podľa indikácií (ak existuje podozrenie na infekciu mikroorganizmami), je povinný počas tehotenstva a pred chirurgickým zákrokom identifikovať prenos rôznych baktérií.

Procedúra rozboru sa vykonáva ráno nalačno, materiál (krv) sa odoberá zo žily. Výsledky diagnostickej štúdie sa pripravujú do 10 dní.

ELISA pozitívny

Pozitívny výsledok testu ELISA je potvrdený prítomnosťou imunoglobulínov IgG a IgM. Odhalené krvné titre IgM vždy indikuje ochorenie v progresívnom štádiu tieto protilátky u zdravého človeka chýbajú.

A IgG naznačuje predchádzajúcu infekciu alebo prenos patogénnych mikroorganizmov, z ktorých niektoré sú považované za malé množstvá v rámci normálneho rozsahu. Napríklad baktérie streptokoky a stafylokoky sú prítomné v každom ľudskom tele.

syfilis

Protilátky IgM v syfilise sa detegujú od 2 týždňov po infekcii a naznačujú prítomnosť primárnej, sekundárnej alebo vrodenej epizódy, pri liečbe zmiznú asi po šiestich mesiacoch, pri absencii terapie - po 18 mesiacoch. Ak sú súčasne zistené oba typy imunoglobulínov, syfilis je potvrdený v akútnej fáze. Uzdravení ľudia IgG protilátky proti syfilisu zostať v sére po celý život.

Vírusová hepatitída

IgM až vírusové hepatitídy sa často zisťujú ešte v inkubačnej dobe ochorenia, skôr ako sa objavia prvé prejavy a pretrvávajú v priebehu ochorenia, po vyliečení sa nezistia. Výnimkou je vírusová hepatitída C, pri ktorej sa IgM nachádzajú v aktívnom aj latentnom alebo chronickom štádiu.

IgG protilátky proti hepatitíde A môžu byť prítomné aj u zdravých ľudí, čo je spôsobené prekonanou infekciou alebo znížením imunity a prítomnosť IgG proti hepatitíde B, C a D u zdravých ľudí nie je pozorovaná.

CMVI

CMVI je rozšírená takmer všade a nepredstavuje hrozbu pre verejné zdravie. Má však smrteľné následky nebezpečenstvo pre novorodenca a plod s vnútromaternicovou infekciou.

Detekcia IgM protilátok proti cytomegalovírusu indikuje primárnu infekciu alebo aktiváciu latentnej fázy. Titre IgG pretrvávajú u zotavených ľudí 10 rokov.

Herpes

Protilátky proti herpes vírusu u zdravých ľudí normálne chýbajú. Obsah IgM označuje akútnu fázu ochorenia, IgG - latentný (v tomto prípade je osoba nosičom infekcie). Pri obsahu IgG až po herpes by ste mali vedieť, že vírus je schopný kedykoľvek sa aktivovať od latentného štádia až po progresívny.

Kiahne

Pri ovčích kiahňach a 2 roky po vyliečení zostávajú imunoglobulíny triedy IgM v krvi. Normálne zdraví ľudia nemajú protilátky proti ovčím kiahňam.

Choroby spôsobené stafylokokmi a streptokokmi

Všetci ľudia majú imunoglobulíny na stafylokoky a streptokoky. Preto je možné diagnostikovať patologický proces spôsobený týmito skupinami baktérií vykonaním dvojitého enzýmového imunosorbentného testu. Ak dôjde k zvýšeniu titrov pri opakovanom teste ELISA (jeden týždeň po prvom), potom sa analýza považuje za potvrdenú.

Chlamydia

Pozitívny výsledok na chlamýdie sa preukazuje identifikáciou IgM s názvom 1:8 a vyššie a trieda IgG - 1:64 a vyššie, ktoré sa v priebehu ochorenia zvyšujú a dosahujú vysoké hodnoty. Napríklad u detí s chlamýdiovou pneumóniou stúpa titer na 1:2000 - 1:4000. Prítomnosť IgM indikuje aktivitu chlamýdií, nejaký čas po infekcii sa v krvi zisťujú IgG globulíny.

Negatívny enzýmový imunosorbentový test je dokázaný napr nedostatok IgM protilátok... Stanovené IgG nie sú vo všetkých prípadoch považované za potvrdenie diagnostickej štúdie, často pretrvávajú niekoľko rokov po infekcii, niekedy aj celý život.

Po syfilise, infekčnej mononukleóze, imunoglobulínoch IgG pretrvávať počas celého života a stanovujú sa v krvnom sére. Mikroorganizmy CMVI, osýpky, rubeola, toxoplazmóza zostávajú 10 rokov.

Titre amébózy trvajú niekoľko mesiacov až niekoľko rokov. Protilátky proti baktériám stafylokokom a streptokokom sú stanovené absolútne u všetkých ľudí v malých množstvách.

Vo vyššie uvedených prípadoch nám detekcia IgG imunoglobulínov po prekonaných ochoreniach umožňuje považovať výsledky ELISA za negatívne.

Norma počas tehotenstva

V prvom trimestri tehotenstva každá žena absolvuje kompletné vyšetrenie tela, ktoré zahŕňa enzýmový imunotest.

Výskum toxoplazmózy, CMVI, chlamýdií, herpesu typu 2 (genitálny), rubeoly, ureaplazmy a mykoplazmy je povinný, pretože tieto ochorenia predstavujú vážnu hrozbu pre vývoj plodu. Sú schopní preniknúť do tela dieťaťa a obísť placentárnu bariéru.

A v celom rozsahu predstavujú osobitné nebezpečenstvo prvý trimester tehotenstva a takmer vždy vedú k intrauterinná smrť plodu a spontánny potrat.

Problémom vyššie uvedených ochorení je, že sa často vyskytujú v asymptomatickom štádiu, bez viditeľných klinických prejavov a možno ich zistiť len pomocou enzýmovej imunoanalýzy.

Dobré výsledky testu možno povedať, ak sa v sére nezistia mikroorganizmy. Stanovené IgG naznačujú prenos vírusov a vyžadujú neustále sledovanie ženy, aby sa v prípade náhlej exacerbácie zabezpečila včasná liečba. IgM pozitívne signalizuje progresívny patologický proces a vyžaduje okamžitú elimináciu patogénu.

Odhalenie titulov IgG na rubeolu označuje predchádzajúce ochorenie a je normou počas tehotenstva. IgG na CMVI tiež nepredstavujú osobitnú hrozbu pre plod, nie je však vylúčená možnosť exacerbácie (frekvencia prejavov približne 1-2%).

Osobitnou hrozbou je prítomnosť IgG pre vírus herpes simplex typu 2 alebo genitálny (HSV2), pretože riziko exacerbácie sa výrazne zvyšuje počas pôrodu. V gestačnom období sa frekvencia prejavov akútnej fázy vyskytuje v 0,9% prípadov. Porážka plodu herpes vírusom počas prechodu pohlavného traktu sa vyskytuje v 40% prípadov a je smrteľná v 50%.

Pri prenesenej toxoplazmóze môže IgM pretrvávať až 2 roky po liečbe. Riziko infekcie plodu je v tomto prípade 17% v prvom trimestri a zvyšuje sa na 60% v treťom trimestri, pretože hlavná cesta infekcie je transplacentárna. Identifikované IgG na toxoplazmózu mnohí odborníci to zvyknú hodnotiť ako negatívny výsledok, ktorý prakticky neohrozuje priebeh tehotenstva.

Infekcia vírusom ľudskej imunodeficiencie je vážna diagnóza. Diagnostické chyby môžu mať katastrofálne následky. Test ELISA na HIV je najdostupnejšou výskumnou metódou, ale nie vo všetkých prípadoch je informatívna.

ELISA - enzýmová imunoanalýza. Účelom metódy ELISA je detekcia protilátok proti vírusu imunodeficiencie v biologickom materiáli. Pomocou tejto metódy je možné sledovať v kvapaline prítomnosť nie samotných vírusov, ale iba protilátok produkovaných v reakcii na ich prítomnosť. Enzýmová imunoanalýza je široko používaná v diagnostike STD. Pomáha identifikovať sexuálne prenosné infekcie.

Existuje niekoľko typov ELISA: priama verzia, nepriama verzia, sendvičová metóda. V každom prípade je technika založená na stanovení prítomnosti protilátok, ktoré slúžia ako indikátor prieniku cudzieho agens. Na identifikáciu týchto "značiek" sa biologická zložka ošetrí enzýmami.

Enzýmová imunoanalýza deteguje protilátky s presnosťou 96 - 98%, chyba je nevýznamná. Je to 2-4%.

ELISA - metóda na diagnostiku HIV

ELISA test na HIV je prvou fázou diagnózy. Antigény vírusu imunodeficiencie sú proteíny p24, p15, p17, p31 a glykoproteíny gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Na detekciu vírusového proteínu sa odoberie vzorka krvi zo žily. Vzorka nasmerovaná na krvný test pomocou ELISA sa spracuje s činidlami pre enzýmovú imunoanalýzu. Sérum sa izoluje z krvi. Ak sa počas štúdie zistia, znamená to, že vírus je už prítomný v krvi.

Krv sa podáva striktne na prázdny žalúdok. 2 dni pred analýzou sa neodporúča jesť mastné jedlá a konzumovať alkohol. Do 14 dní by ste mali prestať užívať antivírusové lieky.

Výhody metódy:

• relatívne nízke náklady;
• vysoká stabilita činidiel;
• vysoká citlivosť;
• krátke trvanie;
• minimálny vplyv ľudského faktora.

Moderné testovacie systémy ELISA sú vyrábané podľa svetových štandardov. To zlepšuje presnosť metódy.

Enzýmová imunoanalýza nie vždy poskytuje spoľahlivé výsledky. Po vstupe vírusu do krvného obehu začína latentné (latentné) štádium vývoja. Obdobie, dokedy sa vírusy začnú množiť a protilátky sa ešte nevytvoria, sa nazýva „čas séronegatívneho okna“. V tejto fáze je zbytočné robiť ELISA. Ak sa infekcia vyskytla, výsledok bude. Ako rýchlo sa vírus deteguje, závisí od toho, koľko nebezpečných buniek sa dostalo do tela. Pri nechránenom pohlavnom styku alebo kontaminovanej transfúzii krvi bude toto obdobie minimálne.

Pre vysokú spoľahlivosť testu ELISA na HIV sa štúdia uskutočňuje trikrát. Podmienky ELISA pre vírus ľudskej imunodeficiencie:

• 6 týždňov po pravdepodobnom kontakte,
• za 3 mesiace,
• o šesť mesiacov neskôr.

4-generačná ELISA na HIV je najinformatívnejšia metóda v počiatočných štádiách infekcie. Môže sa vykonať už 1 mesiac po údajnej infekcii. Test je v porovnaní s analógom 3. generácie nákladný. Preto sa v štátnych zdravotníckych zariadeniach používa ako doplnková diagnostická metóda. Bezplatne sa vykonáva test 3. Ak na základe jeho výsledkov nie je možné dať jednoznačnú odpoveď, pacient je odoslaný na 4-generačný test ELISA.

Dôležité! Po infikovaní sa človek stáva nákazlivým. Pre ostatných je nebezpečný, aj keď o svojej diagnóze ešte nevie!

Ak test ELISA deteguje protilátky proti antigénom HIV, sú potrebné ďalšie štúdie. Tie obsahujú. Spoľahlivosť tejto metódy je 80%. Pomocou PCR sa vyšetruje krv, sperma a vaginálny výtok. Biologická tekutina sa rozloží v lekárskom reaktore a potom sa podrobí pôsobeniu enzýmov. V dôsledku toho sa získajú údaje o koncentrácii buniek HIV v kvapalnom médiu. Kvôli veľkej chybe (20%) s pozitívnym výsledkom sa vykoná dodatočný imunitný blot.

Ďalšou fázou diagnostiky je Combo test (alebo imunitný blotting). Ide o vysoko citlivú štúdiu (98% istota), ktorá sa vykonáva, ak sú výsledky ELISA po 6 mesiacoch nejednoznačné.

Interpretácia výsledkov ELISA

Doba dešifrovania je 24 až 48 hodín. Ak potrebujete urýchlene získať informácie (vyžaduje sa chirurgický zákrok), dešifrovanie sa vykoná do 2 hodín. Provinčné lekárske strediská nemajú vždy potrebné reagencie. Vzorka sa odoberie na mieste ošetrenia, následne sa prevezie do krajského centra. Za takýchto okolností možno výsledok nájsť za 1 až 2 týždne.

Výsledok enzýmového imunotestu môže byť pozitívny alebo negatívny; nie sú žiadne iné možnosti.

Aj keď bol výsledok pri primárnom a opakovanom teste ELISA pozitívny, pacient nemôže byť rozpoznaný ako infikovaný HIV. Môže nastať chyba. Dôvody falošne pozitívneho výsledku:

• chronické choroby;
• dlhodobé infekčné choroby;
• tehotenstva.

Preto by mal byť výsledok analýzy objasnený dodatočným výskumom.

Ak sa pri vykonávaní imunoblotingu na HIV (reaktívny) osoba považuje za infikovanú HIV, čo znamená, že je zdravá.

Bunky vírusu sa časom prispôsobia predpísaným liekom. Na kontrolu sa test ELISA periodicky opakuje.

Niekedy Western blot ukáže falošne negatívny výsledok. Je extrémne zriedkavé pre vírus imunodeficiencie počas 6 mesiacov (alebo viac). To je možné, ak sa do krvného obehu dostal malý počet vírusových buniek. V 0,5 % z celkového počtu prípadov je možné diagnostikovať infekciu až po roku. V 99,5% sa do šiestich mesiacov po infekcii pri vykonávaní ELISA získa spoľahlivý výsledok.

Dokonca aj pri vysoko presných štúdiách stále existuje 2% chybovosť. Netreba zabúdať ani na ľudský faktor. Aby sa eliminovala možnosť chyby, test je možné vykonať v 2 rôznych inštitúciách.

Na stanovenie úrovne obsahu takých biologicky aktívnych látok, ako sú imunologické komplexy, je potrebná špeciálna laboratórna štúdia. Ak máte podozrenie na hematologické, infekčné alebo autoimunitné ochorenie, odborníci predpisujú krvný test na ELISA. V priebehu článku zvážime, čo to je, ako sa na to pripraviť, čo ukazuje a ako to sami dešifrovať.

Čo je to za výskum - krvný test na ELISA? Skratka znamená enzýmovú imunoanalýzu, počas ktorej sa stanovuje kvantitatívny a kvalitatívny obsah rôznych biologicky aktívnych látok, ako aj protilátok a antigénov v biologickom materiáli.

Čo sa používa v enzýmovom imunosorbentnom teste krvi:

• cerebrospinálna tekutina;
• hlien močovej trubice, krčka maternice;
• plodová voda;
• obsah sklovca.

Na diagnostiku pohlavne prenosných chorôb, infekčných a onkologických procesov, alergických reakcií, porúch endokrinného a reprodukčného systému, autoimunitných a imunodeficitných ochorení, ako aj na posúdenie rizika vzniku niektorých obličiek je predpísaný enzýmový imunosorbentový test.

Krvný test na ELISA počas tehotenstva je predpísaný na účely včasnej detekcie, porúch vývoja v počiatočných štádiách a kontroly ich dynamiky. Analýza ELISA vám navyše umožňuje kontrolovať hladinu protilátok, ktoré môžu vyvolať rozvoj závažných neurologických porúch u dieťaťa, čím sa zabráni rozvoju komplikácií nielen počas tehotenstva, ale aj počas pôrodu.

Umožňuje v predstihu reagovať na zistené problémy a výrazne zlepšiť zdravotný stav matky samotnej aj jej dieťatka.

Výhody ELISA krvi zahŕňajú:

• vysoký (až 90%) stupeň citlivosti;
• možnosť včasnej diagnózy so súčasným určením štádia ochorenia;
• nízke náklady na činidlá a následne dostupnosť;
• minimálne množstvo materiálu na výskum;
• minimálne podmienky prijatia;
• možnosť dlhodobého skladovania činidiel;
• schopnosť kontrolovať dynamiku vývoja patologického procesu.

Testovacie systémy

Nevýhody enzýmovej imunoanalýzy:

• nie je možné špecifikovať pôvodcu ochorenia, v laboratóriu sa prijíma iba imunitná odpoveď naň
• možnosť získať falošný výsledok (vo veľmi zriedkavých prípadoch, najmä počas obdobia tehotenstva).

Príprava

Princíp tohto typu krvného testu je založený na tvorbe špecifických protilátok v ľudskom tele, keď doň vstupujú antigény, teda cudzie agens, ktoré spôsobujú rozvoj konkrétneho ochorenia. V dôsledku ich vzájomného pôsobenia vznikajú komplexy "antigén - protilátka", ktoré sú predmetom výskumu pri realizácii enzýmového imunotestu.

V tomto ohľade, aby sa neovplyvnili tieto komplexy, a teda spoľahlivosť získaných výsledkov, analýza krvi a iného biologického materiálu na ELISA vyžaduje určitú prípravu.

Taktiež 14 dní pred očakávaným vyšetrením je pozastavená špecifická liečba a ukončené používanie antibakteriálnych, antivírusových liekov.

Krv na test ELISA sa daruje zo žily. Bezprostredne pred odberom krvi treba obmedziť fyzickú aktivitu, vyvarovať sa fajčenia a pitia alkoholických nápojov.

Existuje niekoľko metód a metód enzýmovej imunoanalýzy: priama a nepriama, kompetitívna a blokujúca.

Základom vyšetrenia krvi (akéhokoľvek iného biologického materiálu) na ELISA je algoritmus spočívajúci v realizácii dvoch reakcií - imunitnej a enzymatickej.

Počas prvej sa patologické agens viažu na ochranné prvky buniek biologického materiálu odobraného na výskum. Vytvára sa imunitný komplex antigén-protilátka. Vyzerá to takto. Antigény sú prítomné na povrchu absolútne všetkých buniek.

Keď cudzie bunky vstúpia do tela, zachytia ich imunitné bunky (na ktorých povrchoch sa nachádzajú protilátky), ktoré porovnávajú údaje o antigénoch z povrchu novoprichádzajúcich buniek s informáciami uloženými vo vlastnej „pamäti“. V prípade nesúladu týchto údajov sa zapnú ochranné funkcie tela, ktoré spočívajú vo vytvorení imunitného komplexu.

Potom sa uskutoční enzymatická reakcia, ktorá vizualizuje výsledky predchádzajúcej reakcie. Jeho princíp je založený na premene látky z jednej látky na druhú. Pre každý typ ELISA materiálu, ktorý vzniká pri imunitnej reakcii, existuje určitý enzým, ktorého úpravou sa určuje koncentrácia cudzorodého činidla (podľa intenzity zafarbenia roztoku).

Dešifrovanie

Vďaka krvnému testu na ELISA laboratórni asistenti určujú A, G a M. Pozitívny výsledok pri štúdiu krvi (iných biologických surovín) na ELISA umožňuje nielen diagnostikovať, ale aj štádium ochorenia, ako napr. ako aj charakter jeho priebehu (akútny alebo chronický).

Tieto imunoglobulíny sa v prítomnosti patologického procesu v tele pacienta tvoria v rôznych obdobiach ochorenia:

• Imunoglobulíny M, IgM- sa tvoria päť dní po nástupe ochorenia a zostávajú v krvi 1,5 mesiaca, potom zmiznú. Detekcia IgM indikuje prítomnosť akútneho primárneho patologického procesu v tele a potrebu zvýšenej terapeutickej intervencie.
• Imunoglobulíny G, IgG- vyskytujú sa štyri týždne po infekcii, ich prítomnosť v tele sa dá zistiť v priebehu niekoľkých mesiacov. Detekcia IgG indikuje anamnézu osoby s predchádzajúcim ochorením. Zvýšenie ich obsahu môže tiež naznačovať opätovnú infekciu.
• Imunoglobulíny A, IgA- sa objavia v čase infekcie a sú prítomné v tele štyri týždne. Zníženie ich obsahu naznačuje začiatok zotavenia. Výskyt v analýzach opäť po tom, čo osoba podstúpila liečbu a zotavila sa, naznačuje prechod choroby na chronickú formu. Súčasná detekcia IgA a IgG vo výsledkoch ELISA tiež naznačuje prítomnosť chronického procesu v tele.

Treba tiež poznamenať, že súčasná prítomnosť IgG a IgM v analýzach naznačuje, že chronický proces sa zhoršil a pacient musí začať liečbu. Ak sa počas vyšetrenia nezistil žiadny z imunoglobulínov, znamená to, že neexistuje žiadna imunitná odpoveď.

Na komplexné posúdenie stavu tela (najmä jeho ochranných funkcií) je predpísaný enzýmový imunosorbentový test (ELISA). Krvný test ELISA sa vykonáva na diagnostiku infekčných, autoimunitných, hematologických patológií, primárnych a sekundárnych imunodeficiencií. V tomto článku navrhujeme podrobnejšie zvážiť, čo je krvný test ELISA, ako aj aké sú indikácie na jeho vykonanie.

Indikácie na predpisovanie krvného testu pomocou ELISA a princíp jeho pôsobenia

Ako sme už uviedli, krvný test ELISA je laboratórny test, ktorým sa stanovujú antigény alebo protilátky vo vzorke krvi. Táto analýza sa používa na zistenie hladiny hormónov, imunologických komplexov a imunoglobulínov. Na úspešné absolvovanie analýzy ELISA existujú nasledujúce indikácie:

• Diagnóza alergií.
• Diagnostika chorôb vírusového pôvodu - vírus Epstein-Barr, herpes, hepatitída, cytomegalovírus.
• Diagnostika pohlavne prenosných infekcií - mykoplazma, ureaplazma, syfilis, Trichomonas, chlamýdie.
• Definícia imunodeficiencie.
• Diagnostika onkologických patológií.
• Hodnotenie účinnosti terapie.
• Stanovenie hladín hormónov.
• Predoperačné komplexné vyšetrenie.

Princíp enzýmovej imunoanalýzy je založený na krvnom teste na prítomnosť imunoglobulínov (bielkoviny špecifických protilátok). Imunoglobulíny sú produkované imunitným systémom, keď antigény (cudzie mikroorganizmy) vstupujú do ľudského tela. Tieto imunitné molekuly sa viažu na rôzne infekčné agens a neutralizujú ich. Dôležitým rozlišovacím znakom imunoglobulínov je ich špecifickosť. Vďaka týmto vlastnostiam môžu vytvárať komplex antigén-protilátka väzbou na špecifický antigén. Pri vykonávaní krvného testu ELISA sa kvantitatívne a kvalitatívne stanovuje tento komplex.

Pre túto štúdiu sa často používa ľudská krv. Ako materiál na analýzu sa však môže odobrať obsah sklovca, plodová voda, cerebrospinálny mok. Pacientovi sa zvyčajne odoberie vzorka krvi z lakťovej žily. Krv sa odporúča darovať nalačno (od posledného jedla by malo uplynúť aspoň 12 hodín). Ak pacient užíva lieky, je potrebné o tom informovať lekára, pretože niektoré z nich môžu ovplyvniť výsledok testu. Taktiež spoľahlivosť výsledkov testov je ovplyvnená užívaním drog a alkoholu.

Dešifrovanie krvného testu na ELISA

Formulár pre túto analýzu zvyčajne uvádza negatívny (-) alebo pozitívny (+) výsledok výpočtu každej triedy imunoglobulínov.

Navrhujeme zvážiť interpretáciu pravdepodobného dekódovania krvného testu pre ELISA.

• IgG, IgA sa nezistia a výsledok je negatívny IgM - úplné uzdravenie.
• Výsledok IgM, IgA, IgG je negatívny - neexistuje imunita voči infekcii.
• IgG, IgA pozitívne a negatívne a IgM pozitívne - akútna infekcia.
• Pozitívny výsledok IgG a negatívny výsledok IgA a IgM - postvakcinačná alebo postinfekčná imunita.
• Pozitívne alebo negatívne IgG, IgA a negatívne IgM - chronická infekcia.
• Výsledok IgG, IgM, IgA je pozitívny - exacerbácia chronickej infekčnej patológie.

V enzýmovom imunosorbentnom teste krvi sú okrem objasnenia tried protilátok uvedené ich kvantitatívne ukazovatele v dekódovaní. Ich obšírne vysvetlenie však poskytuje len ošetrujúci lekár.

Výhody a nevýhody tejto štúdie

• Relatívne nízke náklady.
• Pohodlie v práci.
• Možnosť diagnostiky v počiatočnom štádiu údajnej choroby.
• Relatívne vysoká presnosť získaných údajov.
• Krátky čas potrebný na získanie výsledku výskumu.
• Schopnosť sledovať dynamiku vývoja infekčného procesu v tele.
• Vysoká úroveň zjednotenia, ktorá umožňuje vykonávať hromadné prieskumy.
• Automatizácia všetkých etáp výskumu.

Nevýhodou krvného testu ELISA je to, že v pomerne zriedkavých prípadoch môže poskytnúť falošne pozitívne alebo falošne negatívne výsledky. Pri vykonávaní štúdie môže byť príčinou falošných výsledkov u pacienta okrem technických chýb aj reumatoidný faktor, prítomnosť chronických ochorení (pri ktorých sa vytvárajú protilátky), príjem určitých liekov, metabolické poruchy.

• Giardiáza
• Ascariáza.
• Cysticerkóza.
• Amébóza.
• Trichinelóza - štúdia sa vykonáva viac ako raz, 4-12 týždňov po infekcii sa stanoví maximálna hladina protilátok.
• Tenióza.
• Opisthorchiáza - vykonajte diferenciálnu diagnostiku medzi akútnymi a chronickými formami ochorenia.
• Toxoplazmóza.
• Fasciolóza - v akútnom štádiu ochorenia sa zisťuje prítomnosť protilátok.
• Kožná alebo viscerálna leishmanióza.

Môžeme teda zhrnúť: je potrebné absolvovať test ELISA na parazity na identifikáciu antigénov (odpadové produkty parazitov a ich samotná prítomnosť), ako aj protilátok (imunoglobulíny). Špecifickosť tejto výskumnej metódy pri určovaní parazitov podľa štatistických údajov je asi 90 %. Vďaka tejto analýze môže lekár presne určiť typ parazitov, ich celkový počet a tiež sledovať dynamiku vývoja patologických procesov v dôsledku hladiny protilátok.