आईएफए विधि का क्या अर्थ है? इम्यूनोसे रक्त परीक्षण। vii. ऑप्टिकल घनत्व का मापन

आधुनिक चिकित्सा की प्रगति के साथ, रोगी में कुछ विकृति के संदेह के मामले में अधिक गहन निदान करना संभव है। प्रयोगशाला अनुसंधान के सूचनात्मक तरीकों में से एक एलिसा विश्लेषण बन गया है, जो शिरापरक रक्त के नमूने की विधि द्वारा किया जाता है। यानी मरीज के लिए सामान्य तौर पर कुछ भी नहीं बदलता है। लेकिन एलिसा प्रयोगशाला विश्लेषक एकत्रित जैव सामग्री के अध्ययन के लिए एक जटिल तकनीक का संचालन करता है। एलिसा विश्लेषण क्या हैं और निदान के रूप में एलिसा पद्धति का उपयोग करने की सूक्ष्मताएं क्या हैं, हम नीचे दी गई सामग्री को समझते हैं।

एक एंजाइम इम्युनोसे क्या है?

एंटीबॉडी का उत्पादन स्वयं एंटीजन द्वारा उकसाया जाता है, जो मानव शरीर में प्रवेश कर चुके हैं। शरीर के स्वास्थ्य के लिए "लड़ाई" में प्रवेश करते समय, एंटीबॉडी एंटीजन को चिह्नित करते हैं, जो कि रक्त की जांच करते समय प्रयोगशाला सहायक देखता है। यानी एकत्रित बायोमटेरियल में न केवल संक्रमण की उपस्थिति को ट्रैक करना संभव है, बल्कि शरीर के पूरी तरह से ठीक होने के बाद उसके निशान भी हैं।

इस प्रकार, एक रोगी को एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख निर्धारित करके, उपस्थित चिकित्सक संक्रमण की अवधि, इसकी प्रगति की डिग्री को ट्रैक कर सकता है, या किसी विशेष संक्रमण के लिए प्रतिरक्षा की उपस्थिति को प्रकट कर सकता है।

एलिसा निदान प्रक्रिया इस तरह दिखती है:

• एकत्रित शिरापरक रक्त को प्रयोगशाला में रक्त सीरम की स्थिति में लाया जाता है;
• फिर प्रयोगशाला सहायक कोशिकाओं के साथ एक विशेष ट्रे का उपयोग करता है, जिनमें से प्रत्येक में पहले से ही सभी आवश्यक एंटीजन होते हैं। यह केवल प्रत्येक कोशिका में रक्त सीरम गिराने और प्रतिजनों के प्रति इम्युनोग्लोबुलिन (एंटीबॉडी) की प्रतिक्रिया को ट्रैक करने के लिए पर्याप्त है। "वांछित" प्रतिक्रिया की उपस्थिति परीक्षण सामग्री के रंग में बदलाव से प्रमाणित होती है। भविष्य में, प्रयोगशाला सहायक जांच किए गए माध्यम के ऑप्टिकल घनत्व का अध्ययन करता है।

• एस्कारियासिस और एंटरोबियासिस (राउंडवॉर्म और पिनवॉर्म);
• त्रिचिनोसिस;
• तीव्र और जीर्ण रूपों में Opisthorchiasis;
• जिआर्डियासिस;
• अमीबायोसिस;
• टोक्सोप्लाज्मोसिस;
• किसी भी रूप में लीशमैनियासिस।

महत्वपूर्ण: एंजाइम इम्युनोसे गुणात्मक और मात्रात्मक दोनों हो सकते हैं। पहले मामले में, प्रयोगशाला सहायक केवल रक्त में वांछित पदार्थ की उपस्थिति की पुष्टि या खंडन करता है। दूसरे मामले में, विश्लेषण के परिणामस्वरूप, रोगी के शरीर में इसकी एकाग्रता का संकेत मिलता है।

विधि के नुकसान

इस निदान पद्धति के सभी लाभों के साथ, यह समझा जाना चाहिए कि एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख रोगी की बीमारी का कारण खोजने का एक तरीका नहीं है, बल्कि उपस्थित चिकित्सक द्वारा सुझाए गए निदान की पुष्टि करने का एक तरीका है। और चूंकि शोध काफी सस्ता नहीं है, इसलिए आपको इसे बुद्धिमानी से उपयोग करने की आवश्यकता है। इस मामले में, अध्ययन के परिणामों की व्याख्या केवल एक योग्य विशेषज्ञ द्वारा की जानी चाहिए।

परिणामों को डिकोड करना

संक्षिप्त नाम IFA को हल करने के बाद और यह क्या है ─ पता चला, यह परिणामों की व्याख्या के लिए आगे बढ़ने लायक है। यहां यह समझना जरूरी है कि यदि विश्लेषण गुणात्मक था, तो परिणाम सकारात्मक या नकारात्मक ही होगा। यही है, निदान या तो एक निश्चित निदान के बारे में डॉक्टर के संदेह की पुष्टि करता है, या उनका खंडन करता है। इस मामले में, फॉर्म में क्रमशः "+" या "-" प्रतीक होंगे।

महत्वपूर्ण: एक नकारात्मक परीक्षा परिणाम हमेशा संक्रमण की अनुपस्थिति का संकेत नहीं देता है। तथ्य यह है कि एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी संक्रमण के 14 दिनों के भीतर बन सकते हैं और यह संभावना है कि वे अभी तक नहीं बने हैं।

यदि एक मात्रात्मक विश्लेषण किया जाता है, तो एंटीबॉडी के प्रकार, उनकी मात्रा और गतिविधि का चरण यहां निर्धारित किया जाता है। विशेष रूप से, इस तरह के निदान के साथ, एंटीबॉडी (इम्युनोग्लोबुलिन) आईजीजी और आईजीएम निर्धारित किए जाते हैं, जो संक्रमण की प्रगति के विभिन्न अवधियों में बनते हैं। इस मामले में सबसे आम परिणाम हैं:

• उन्नत आईजीएम और आईजीजी की पूर्ण अनुपस्थिति। यह तस्वीर हाल के संक्रमण और पैथोलॉजी के तीव्र चरण को इंगित करती है।
• दोनों प्रकार के इम्युनोग्लोबुलिन (IgM और IgG) की गतिविधि में वृद्धि। वह संक्रामक प्रक्रिया के लंबे समय से चले आ रहे और पुराने पाठ्यक्रम के बारे में बात करता है।
• आईजीजी गतिविधि और आईजीएम की पूर्ण अनुपस्थिति। संक्रमण कम से कम छह महीने पहले हुआ था और अब यह वायरस लंबी अवधि में है।
• IgG और IgA एंटीबॉडी की कमी। परिणाम अपरिभाषित है।
• IgM, IgA और IgG एंटीबॉडी का अभाव। किसी विशेष संक्रमण के लिए प्रतिरक्षा की कमी को इंगित करता है।
• आईजीजी, आईजीएम और आईजीए एंटीबॉडी की गतिविधि पुरानी प्रक्रिया के तेज होने का संकेत देती है।

एंटीबॉडी के प्रकारों की पहचान करने के अलावा, फॉर्म के एक विशेष कॉलम में प्रयोगशाला सहायक रक्त की मात्रा पर उनकी संख्या को इंगित करता है। याद रखें, एलिसा विधि क्या है, यह समझने के बाद, परिणामों की व्याख्या स्वयं न करें। प्राप्त परिणामों की व्याख्या केवल उपस्थित चिकित्सक द्वारा सटीकता के साथ की जा सकती है, जो रोगी की नैदानिक ​​तस्वीर के आधार पर निर्मित कथित निदान पर निर्भर करता है।

हमारे समय के नैदानिक ​​​​तरीके विशेष परीक्षणों का उपयोग करके प्रयोगशाला में किसी विशेष बीमारी की पहचान करना संभव बनाते हैं। इनमें से एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख है, जिसकी बदौलत प्रारंभिक निदान की पुष्टि की जा सकती है।

एलिसा प्रतिरक्षा और हार्मोनल व्यवधानों के साथ-साथ ऑन्कोलॉजिकल प्रक्रियाओं से जुड़े विकारों का पता लगाने के लिए सबसे प्रभावी और आधुनिक तरीकों में से एक है। रक्त परीक्षण के दौरान, शरीर में संक्रमण होने पर बनने वाले रक्त में एंटीबॉडी का पता लगाया जा सकता है। इस सूक्ष्मता को देखते हुए, इसके विकास के प्रारंभिक चरण में भी रोग का पता लगाया जा सकता है।

तकनीक का आधार क्या है

एलिसा विश्लेषण के परिणाम एंजाइमों के लिए रासायनिक प्रतिक्रियाओं को प्राप्त करने पर आधारित होते हैं जो एंटीबॉडी को पहचानने के लिए विशेष पहचान चिह्न के रूप में कार्य करते हैं। नतीजतन, इम्यूनोकेमिकल प्रतिक्रियाओं के दौरान, एंटीबॉडी कुछ एंटीजन के साथ बातचीत करना शुरू कर देते हैं। यह सब इस बात पर जोर देने का आधार देता है कि एलिसा के लिए रक्तदान करते समय गलत परिणाम न्यूनतम होते हैं।

अध्ययन आपको प्रतिरक्षा कोशिकाओं की संख्या, उनके गुणों के साथ-साथ आवश्यक एंटीबॉडी की उपस्थिति का निर्धारण करने की अनुमति देता है

समाधान के रंग का पता चलने पर सकारात्मक परिणाम पर विचार किया जाता है। रंग संकेत देता है कि एंटीजन एंटीबॉडी के साथ बातचीत करते हैं। अगर ऐसा कुछ नहीं होता है, तो परिणाम नकारात्मक होता है।

विषय

आधुनिक निदान अत्यधिक संवेदनशील प्रयोगशाला परीक्षणों के बिना पूर्ण नहीं है। पहले, रोग के कारण को स्थापित करने और संक्रमण के प्रेरक एजेंट का पता लगाने के लिए, डॉक्टरों ने विभिन्न सूक्ष्म बहुस्तरीय अध्ययन किए। आज, प्रारंभिक निदान का खंडन या पुष्टि करने के लिए, आपको एक एकल परीक्षण करने की आवश्यकता है - एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा)। यह प्रयोगशाला अध्ययन मानव स्वास्थ्य की स्थिति का आकलन करने और हेमटोलॉजिकल, ऑन्कोलॉजिकल, ऑटोइम्यून, संक्रामक विकृति का निदान करने में मदद करता है।

एक एंजाइम इम्युनोसे क्या है

एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख रोग के प्रतिजनों, रोगजनकों के प्रति एंटीबॉडी और रोग के वायरस की उपस्थिति के लिए रक्त का एक आधुनिक प्रयोगशाला परीक्षण है। एलिसा विधि डॉक्टर को रोग के एटियलजि की पहचान करने, उसके चरण, उत्पत्ति की आयु, मनुष्यों के लिए खतरे के स्तर का निर्धारण करने और उपचार के लिए आवश्यक समायोजन करने में मदद करती है। दूसरों की तुलना में अधिक बार, एंजाइम इम्युनोसे समूह एम और जी के एंटीबॉडी की उपस्थिति की जांच करते हैं। वे क्या हैं?

जब एक रोगजनक सूक्ष्मजीव रक्तप्रवाह में प्रवेश करता है, तो प्रतिरक्षा प्रणाली एंटीबॉडी (इम्युनोग्लोबुलिन) की रिहाई के रूप में एक सुरक्षात्मक प्रतिक्रिया शुरू करती है। ये पदार्थ कोशिका से बंधते हैं और प्रकट करते हैं कि यह शरीर का अंग है या बाहर से आया है। यदि सिस्टम ने स्थापित किया है कि सूक्ष्मजीव विदेशी है, तो रोगजनक वायरस से लड़ने के लिए एंटीबॉडी की संख्या बढ़ जाती है। इम्युनोग्लोबुलिन (आईजी) कई प्रकार के होते हैं: कुछ संक्रमण की अवधि के दौरान प्रकट होते हैं, अन्य जीवन भर बने रहते हैं, मजबूत प्रतिरक्षा विकसित करते हैं। दवा में एंटीबॉडी नामित हैं: ए, डी, ई, एम, जी।

एलिसा द्वारा रक्त की जांच की जाती है, हालांकि अन्य प्रकार के एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख होते हैं। एक नियम के रूप में, वे लिए गए द्रव के प्रकार में भिन्न होते हैं, जिसके आधार पर संरचना का आगे अध्ययन किया जाता है और एंटीजन की उपस्थिति निर्धारित की जाती है। इस मामले में, मानव रक्त और अन्य तरल पदार्थ दोनों को शोध के लिए लिया जाता है:

• कांच के शरीर की सामग्री;
• ग्रीवा नहर और मूत्रमार्ग से बलगम;
• भ्रूण अवरण द्रव;
• धब्बा;
• मस्तिष्कमेरु द्रव।

• एलर्जी;
• प्रतिरक्षा की कमी;
• वायरल मूल की बीमारियां (हेपेटाइटिस, दाद, एपस्टीन-बार वायरस, साइटोमेगालोवायरस);
• यौन संचारित रोग एसटीडी (यूरियाप्लाज्मा, सिफलिस, ट्राइकोमोनास, क्लैमाइडिया, मायकोप्लाज्मा);
• जिगर की बीमारी;
• neurosyphilis (केंद्रीय तंत्रिका तंत्र का संक्रमण (केंद्रीय तंत्रिका तंत्र))।

एक एलिसा रक्त परीक्षण अक्सर हार्मोन के स्तर को निर्धारित करने और उपचार की गुणवत्ता का आकलन करने के लिए एक प्रीऑपरेटिव जटिल परीक्षा के दौरान किया जाता है। प्राप्त आंकड़ों की उच्च सटीकता डॉक्टर को स्वास्थ्य की स्थिति की विस्तृत तस्वीर का अंदाजा लगाने में मदद करती है। इसी समय, परिणाम थोड़े समय में प्राप्त होते हैं, जिससे रोग के विकास की गतिशीलता को ट्रैक करना संभव हो जाता है।

विधि लाभ

रक्त एलिसा विधि का निर्विवाद लाभ इसकी उच्च संवेदनशीलता है, अर्थात। कम सांद्रता पर भी वांछित पदार्थ को निर्धारित करने की क्षमता; और विशिष्टता, जिसका अर्थ है कि निदान सटीक है। इसके अलावा, एलिसा द्वारा रक्त सीरम के अध्ययन के निम्नलिखित लाभ हैं:

नुकसान

एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख का मुख्य नुकसान यह है कि एक अध्ययन करते समय, डॉक्टर को रोग की प्रकृति के बारे में पहले से ही एक धारणा बना लेनी चाहिए। संक्रामक रोगों का निदान करते समय, गलती से रोगज़नक़ का पता लगाना और इसके प्रतिरक्षी गुणों को स्थापित करना असंभव है। परीक्षण केवल रोगी के रक्त में एंटीबॉडी की उपस्थिति को इंगित करने में सक्षम है, अप्रत्यक्ष रूप से एक हानिकारक सूक्ष्मजीव की उपस्थिति का संकेत देता है।

इसके अलावा, यदि तकनीक का उल्लंघन किया जाता है या अनुचित तैयारी की जाती है, तो विश्लेषण गलत सकारात्मक या गलत नकारात्मक परिणाम दिखा सकता है। सीरम एलिसा का अध्ययन एक सटीक, लेकिन साथ ही महंगा तरीका है, इसलिए चरम मामलों में इसका परामर्श लेना चाहिए। परिणामों की व्याख्या पर केवल एक योग्य विशेषज्ञ द्वारा ही भरोसा किया जाना चाहिए।

तैयारी

डॉक्टर की सिफारिशों का पालन करते हुए एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख की जानी चाहिए। अनुसंधान के परिणाम अक्सर विभिन्न बाहरी कारकों से प्रभावित होते हैं। IFA की तैयारी के लिए बुनियादी नियम:

• शिरापरक रक्त को खाली पेट सख्ती से दान किया जाना चाहिए (आम तौर पर, अंतिम भोजन अध्ययन से 12 घंटे पहले होना चाहिए);
• यह आवश्यक है, विश्लेषण की पूर्व संध्या पर, किसी भी दवा के सेवन को बाहर करने के लिए (यदि रोगी एंटीहिस्टामाइन (एंटीएलर्जिक) दवाएं ले रहा है, तो आपको डॉक्टर से परामर्श करना चाहिए कि एलिसा की शुरुआत से कितने समय पहले उन्हें रद्द कर दिया जाना चाहिए) ;
• आपको परीक्षा से पहले धूम्रपान या मादक पेय नहीं पीना चाहिए, क्योंकि यह परिणाम को नकारात्मक रूप से प्रभावित करेगा;
• विश्लेषण से पहले आपको निश्चित रूप से कुछ नींद लेनी चाहिए;
• किसी भी शारीरिक गतिविधि, तनाव कारकों को बाहर रखा जाना चाहिए;
• महिला प्रजनन प्रणाली में अधिकांश हार्मोन के निदान के लिए मासिक धर्म चक्र के कुछ दिनों में रक्त के नमूने की आवश्यकता होगी।

कैसे

एंजाइम इम्युनोसे के लिए, रोगी क्यूबिटल नस से रक्त को खाली पेट सख्ती से लेता है। रोगी को रोग की उपस्थिति और ली गई दवाओं के बारे में डॉक्टर को पहले से सूचित करना चाहिए ताकि अध्ययन के परिणाम विकृत न हों। एक नियम के रूप में, एलिसा से 16 दिन पहले सभी दवाएं बंद कर दी जानी चाहिए। प्रक्रिया के दौरान संवेदनाएं जैव रासायनिक परीक्षण के दौरान रक्त लेने के समान होती हैं।

सामग्री को एक प्रयोगशाला में भेजा जाता है, जहां रक्त से एंटीबॉडी युक्त सीरम को अलग किया जाता है। परिणामी संरचना को एंटीजन के साथ एक टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है। ये विभिन्न प्रकार की एलर्जी (दूध, ऊन, पराग, खट्टे फल), वायरल और संक्रामक रोगों के रोगजनकों और अन्य हो सकते हैं। प्रतिक्रिया प्राप्त करने के बाद, सभी अवशिष्ट सीरम को त्याग दिया जाता है। विशेष संकेतकों का उपयोग करते हुए, विशेषज्ञ एंटीबॉडी की मात्रा निर्धारित करते हैं। एलिसा लीड समय प्रयोगशाला पर निर्भर करता है। एक नियम के रूप में, अध्ययन के परिणाम दो दिनों से एक सप्ताह तक की अवधि में प्रदान किए जा सकते हैं।.

एलिसा डिकोडिंग

एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) शरीर में एंटीबॉडी की उपस्थिति को निर्धारित करने में मदद करता है। इम्युनोग्लोबुलिन के कई वर्ग हैं:

1. आईजीएम. संक्रमण के बाद सबसे पहले दिखाई देते हैं। इन एंटीबॉडी की उपस्थिति किसी भी स्थिति में रोग की शुरुआत का संकेत देती है, क्योंकि एक स्वस्थ व्यक्ति के पास यह वर्ग नहीं होता है। आमतौर पर, IgM इम्युनोग्लोबुलिन रक्त में लगभग 6 सप्ताह तक मौजूद रहते हैं।
2. आईजीए. श्लेष्म झिल्ली में बड़ी मात्रा में एंटीबॉडी पाए जाते हैं, जो शरीर को रोगजनक रोगाणुओं के प्रवेश से बचाते हैं। यदि रोगी के पास यह वर्ग है, तो रोग से अधिक तीव्रता से लड़ना आवश्यक है। आखिरकार, इम्युनोग्लोबुलिन ए केवल पुरानी बीमारी में ही प्रकट होता है। IgA का गायब होना संक्रमण के विनाश का संकेत देता है।
3. आईजीजी इस वर्ग के इम्युनोग्लोबुलिन इंगित करते हैं कि एक व्यक्ति या तो संक्रमण का वाहक है, या पहले से ही एक बीमारी से पीड़ित है। ये एंटीबॉडी संक्रमण के एक महीने बाद आईजीएम के बाद बनते हैं। क्लास जी इम्युनोग्लोबुलिन शरीर में 5-6 साल तक मौजूद रह सकते हैं, इसे बीमारी की पुनरावृत्ति से बचाते हैं, और सिफलिस में, ऐसे एंटीबॉडी जीवन के लिए पाए जाते हैं।

बचपन में (1.5 वर्ष तक) एलिसा परीक्षण करते समय, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि बच्चे के रक्त में संक्रमण के लिए मां के आईजीजी एंटीबॉडी होते हैं। हालांकि इसका मतलब यह नहीं है कि बच्चा बीमार है, बल्कि यह तथ्य आदर्श है। वर्ग एम की उपस्थिति अंतर्गर्भाशयी या जन्म के संक्रमण के बाद प्राप्त होने का संकेत देती है, क्योंकि प्लेसेंटा के जरिए मां के आईजीएम एंटीबॉडी बच्चे के शरीर में प्रवेश नहीं कर पाते हैं। 3 वर्गों के एंटीबॉडी की उपस्थिति या अनुपस्थिति के संभावित संयोजनों का डिकोडिंग तालिका में प्रस्तुत किया गया है:

एलिसा परिणामों की व्याख्या एक योग्य चिकित्सक द्वारा की जानी चाहिए।... एक नियम के रूप में, (+) विश्लेषण के सकारात्मक परिणाम को इंगित करता है, और (-) - एक नकारात्मक। परिणाम, जो किसी पदार्थ की अनुपस्थिति या उपस्थिति को दर्शाता है, गुणात्मक कहलाता है। कभी-कभी यह एक मात्रात्मक द्वारा पूरक होता है, जो शरीर में विभिन्न पदार्थों की संख्या प्रदर्शित करता है। अक्सर परीक्षण प्रणाली का अपना संदर्भ (सहसंबद्ध) मान होता है। ऐसे संकेतकों से अधिक का अर्थ है रोगी में विकृति की उपस्थिति।

मतभेद

एंजाइम इम्युनोसे के लिए कोई कार्डिनल contraindications की पहचान नहीं की गई है। कभी-कभी गर्भावस्था के दौरान, जब रोगी के रक्त में हार्मोन में निरंतर परिवर्तन होता है, तो अधिक विश्वसनीय परिणाम के लिए कई बार विश्लेषण करना आवश्यक हो सकता है। निम्नलिखित के बाद उपयोग के लिए नैदानिक ​​​​विधि की अनुशंसा नहीं की जाती है:

• सर्जिकल हस्तक्षेप;
• हेमोलिसिस (लाल रक्त कोशिकाओं का विनाश);
• रक्त - आधान;
• जैविक सामग्री का पंचर या बायोप्सी लेना।

एक एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख की कीमत

एलिसा अध्ययन की लागत चिकित्सा संस्थान की नीति, विश्लेषण के प्रकार और निर्धारित किए जा रहे प्रतिजन पर निर्भर करती है। इन कारकों के आधार पर, अभिकर्मक किट की कीमत की गणना की जाती है और अध्ययन की जटिलता स्थापित की जाती है। एक नियम के रूप में, एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख एक सार्वजनिक रूप से उपलब्ध प्रक्रिया है, विधि की औसत लागत 300 से 2000 रूबल तक भिन्न होती है। मॉस्को में एक एंजाइम इम्युनोसे के लिए अनुमानित मूल्य तालिका में प्रस्तुत किए गए हैं:

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प्रतिरक्षाविज्ञानी परिसरों जैसे जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों की सामग्री के स्तर को निर्धारित करने के लिए, एक विशेष प्रयोगशाला अध्ययन की आवश्यकता होती है। यदि आपको हेमटोलॉजिकल, संक्रामक या ऑटोइम्यून बीमारी का संदेह है, तो विशेषज्ञ एलिसा के लिए रक्त परीक्षण की सलाह देते हैं। लेख के दौरान, हम विचार करेंगे कि यह क्या है, इसकी तैयारी कैसे करें, यह क्या दिखाता है और इसे स्वयं कैसे समझा जाए।

यह किस तरह का शोध है - एलिसा के लिए एक रक्त परीक्षण? संक्षिप्त नाम एक एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख के लिए है, जिसके दौरान विभिन्न जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों की मात्रात्मक और गुणात्मक सामग्री, साथ ही एक जैविक सामग्री में एंटीबॉडी और एंटीजन निर्धारित किए जाते हैं।

रक्त के एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख में क्या प्रयोग किया जाता है:

• मस्तिष्कमेरु द्रव;
• मूत्रमार्ग का बलगम, ग्रीवा नहर;
• भ्रूण अवरण द्रव;
• कांच के शरीर की सामग्री।

एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख यौन संचारित रोगों, संक्रामक और ऑन्कोलॉजिकल प्रक्रियाओं, एलर्जी प्रतिक्रियाओं, अंतःस्रावी और प्रजनन प्रणालियों में विकारों, ऑटोइम्यून और इम्युनोडेफिशिएंसी रोगों के निदान के साथ-साथ कुछ गुर्दे के विकास के जोखिम का आकलन करने के लिए निर्धारित है।

गर्भावस्था के दौरान एलिसा के लिए एक रक्त परीक्षण प्रारंभिक अवस्था में विकास संबंधी विकारों का शीघ्र पता लगाने और उनकी गतिशीलता के नियंत्रण के उद्देश्य से निर्धारित किया जाता है। इसके अलावा, एलिसा विश्लेषण आपको एंटीबॉडी के स्तर को नियंत्रित करने की अनुमति देता है जो एक बच्चे में गंभीर न्यूरोलॉजिकल विकारों के विकास को भड़का सकता है, जिससे न केवल गर्भावस्था के दौरान, बल्कि बच्चे के जन्म के दौरान भी जटिलताओं के विकास को रोका जा सकता है।

यह पहचानी गई समस्याओं पर पहले से प्रतिक्रिया करना संभव बनाता है और स्वयं और उसके बच्चे दोनों के स्वास्थ्य में काफी सुधार करता है।

एलिसा रक्त के लाभों में शामिल हैं:

• संवेदनशीलता की उच्च (90% तक) डिग्री;
• रोग के चरण के एक साथ निर्धारण के साथ, शीघ्र निदान की संभावना;
• अभिकर्मकों की कम लागत, और, परिणामस्वरूप, उपलब्धता;
• अनुसंधान के लिए सामग्री की न्यूनतम राशि;
• प्राप्ति की न्यूनतम शर्तें;
• अभिकर्मकों के दीर्घकालिक भंडारण की संभावना;
• रोग प्रक्रिया के विकास की गतिशीलता को नियंत्रित करने की क्षमता।

टेस्ट सिस्टम

एंजाइम इम्युनोसे के विपक्ष:

• रोग के प्रेरक एजेंट को निर्दिष्ट करना असंभव है, प्रयोगशाला में केवल इसके प्रति प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्राप्त होती है
• एक गलत परिणाम प्राप्त करने की संभावना (बहुत दुर्लभ मामलों में, मुख्य रूप से गर्भ की अवधि के दौरान)।

तैयारी

इस प्रकार के रक्त परीक्षण का सिद्धांत मानव शरीर में विशिष्ट एंटीबॉडी के गठन पर आधारित होता है जब एंटीजन इसमें प्रवेश करते हैं, अर्थात विदेशी एजेंट जो किसी विशेष बीमारी के विकास का कारण बनते हैं। उनकी बातचीत के परिणामस्वरूप, "एंटीजन-एंटीबॉडी" कॉम्प्लेक्स बनते हैं, जो एंजाइम इम्युनोसे के कार्यान्वयन में अनुसंधान के अधीन होते हैं।

इस संबंध में, इन परिसरों को प्रभावित नहीं करने के लिए और, तदनुसार, प्राप्त परिणामों की विश्वसनीयता, एलिसा के लिए रक्त और अन्य जैविक सामग्री के विश्लेषण के लिए कुछ तैयारी की आवश्यकता होती है।

इसके अलावा, अपेक्षित परीक्षा से 14 दिन पहले, विशिष्ट उपचार को निलंबित कर दिया जाता है और जीवाणुरोधी, एंटीवायरल दवाओं का उपयोग बंद कर दिया जाता है।

एलिसा के लिए रक्त एक नस से दान किया जाता है। रक्त के नमूने लेने से ठीक पहले, शारीरिक गतिविधि सीमित होनी चाहिए, साथ ही धूम्रपान और मादक पेय पीने से बचना चाहिए।

एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख के कई तरीके और तरीके हैं: प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष, प्रतिस्पर्धी और अवरुद्ध।

एलिसा पर रक्त (कोई अन्य जैविक सामग्री) की जांच के केंद्र में एक एल्गोरिथ्म है जिसमें दो प्रतिक्रियाओं का कार्यान्वयन शामिल है - प्रतिरक्षा और एंजाइमेटिक।

पहले के दौरान, पैथोलॉजिकल एजेंट अनुसंधान के लिए ली गई जैविक सामग्री की कोशिकाओं के सुरक्षात्मक तत्वों को बांधते हैं। एक एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिरक्षा परिसर बनता है। यह इस तरह दिख रहा है। एंटीजन बिल्कुल सभी कोशिकाओं की सतह पर मौजूद होते हैं।

जब विदेशी कोशिकाएं शरीर में प्रवेश करती हैं, तो वे प्रतिरक्षा कोशिकाओं (जिनकी सतहों पर एंटीबॉडी स्थित होती हैं) द्वारा कब्जा कर लिया जाता है, जो अपनी "स्मृति" में संग्रहीत जानकारी के साथ नई आने वाली कोशिकाओं की सतह से एंटीजन के डेटा की तुलना करती हैं। इन आंकड़ों के बेमेल होने की स्थिति में, शरीर के सुरक्षात्मक कार्य चालू हो जाते हैं, जिसमें एक प्रतिरक्षा परिसर का निर्माण होता है।

इसके बाद, एक एंजाइमी प्रतिक्रिया की जाती है, जो पिछली प्रतिक्रिया के परिणामों की कल्पना करती है। इसका सिद्धांत किसी पदार्थ के एक से दूसरे में परिवर्तन पर आधारित है। प्रत्येक प्रकार की एलिसा सामग्री के लिए जो प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के दौरान बनती है, एक निश्चित एंजाइम होता है, जिसके साथ उपचार का उपयोग एक विदेशी एजेंट की एकाग्रता (समाधान के धुंधला होने की तीव्रता के अनुसार) को निर्धारित करने के लिए किया जाता है।

डिक्रिप्शन

एलिसा के लिए एक रक्त परीक्षण के लिए धन्यवाद, प्रयोगशाला सहायक ए, जी और एम निर्धारित करते हैं। एलिसा के लिए रक्त (अन्य जैविक कच्चे माल) के अध्ययन में एक सकारात्मक परिणाम न केवल निदान करना संभव बनाता है, बल्कि रोग का चरण भी, जैसा कि साथ ही इसके पाठ्यक्रम की प्रकृति (तीव्र या जीर्ण)।

ये इम्युनोग्लोबुलिन, रोगी के शरीर में एक रोग प्रक्रिया की उपस्थिति में, रोग के विभिन्न अवधियों में बनते हैं:

• इम्युनोग्लोबुलिन एम, आईजीएम- रोग की शुरुआत के पांच दिन बाद बनते हैं और 1.5 महीने तक खून में रहते हैं, जिसके बाद वे गायब हो जाते हैं। आईजीएम का पता लगाना शरीर में एक तीव्र प्राथमिक रोग प्रक्रिया की उपस्थिति और उन्नत चिकित्सीय हस्तक्षेप की आवश्यकता को इंगित करता है।
• इम्युनोग्लोबुलिन जी, आईजीजी- संक्रमण के चार सप्ताह बाद होते हैं, शरीर में उनकी उपस्थिति का पता कई महीनों में लगाया जा सकता है। आईजीजी का पता लगाना किसी व्यक्ति की पिछली बीमारी के इतिहास को इंगित करता है। उनकी सामग्री में वृद्धि भी पुन: संक्रमण का संकेत दे सकती है।
• इम्युनोग्लोबुलिन ए, आईजीए- संक्रमण के समय प्रकट होते हैं और चार सप्ताह तक शरीर में मौजूद रहते हैं। उनकी सामग्री में कमी पुनर्प्राप्ति की शुरुआत को इंगित करती है। किसी व्यक्ति के उपचार के एक कोर्स से गुजरने और ठीक होने के बाद फिर से विश्लेषण में प्रकट होना बीमारी के जीर्ण रूप में संक्रमण का संकेत देता है। एलिसा परिणामों में IgA और IgG का एक साथ पता लगाना भी शरीर में एक पुरानी प्रक्रिया की उपस्थिति को इंगित करता है।

यह भी ध्यान दिया जाना चाहिए कि विश्लेषण में आईजीजी और आईजीएम की एक साथ उपस्थिति इंगित करती है कि पुरानी प्रक्रिया खराब हो गई है, और रोगी को उपचार शुरू करने की आवश्यकता है। यदि परीक्षा के दौरान किसी भी इम्युनोग्लोबुलिन का पता नहीं चला, तो इसका मतलब है कि कोई प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया नहीं है।

मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस संक्रमण एक गंभीर निदान है। नैदानिक ​​त्रुटियों के विनाशकारी परिणाम हो सकते हैं। एचआईवी के लिए एलिसा परीक्षण सबसे सुलभ शोध पद्धति है, लेकिन सभी मामलों में यह जानकारीपूर्ण नहीं है।

एलिसा - एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख। एलिसा पद्धति का उद्देश्य जैविक सामग्री में इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाना है। विधि की मदद से, तरल में उपस्थिति को स्वयं वायरस के नहीं, बल्कि उनकी उपस्थिति के जवाब में उत्पादित एंटीबॉडीज को ट्रैक करना संभव है। एसटीडी के निदान में एंजाइम इम्युनोसे का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। यह यौन संचारित संक्रमणों की पहचान करने में मदद करता है।

एलिसा के कई प्रकार हैं: प्रत्यक्ष संस्करण, अप्रत्यक्ष संस्करण, सैंडविच विधि। किसी भी मामले में, तकनीक एंटीबॉडी की उपस्थिति का निर्धारण करने पर आधारित है, जो एक विदेशी एजेंट के प्रवेश के संकेतक के रूप में कार्य करती है। इन "निशान" की पहचान करने के लिए, जैविक घटक को एंजाइमों के साथ व्यवहार किया जाता है।

एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख 96 - 98% की सटीकता के साथ एंटीबॉडी का पता लगाते हैं, त्रुटि नगण्य है। यह 2 - 4% है।

एलिसा - एचआईवी के निदान के लिए एक विधि

एचआईवी के लिए एलिसा परीक्षण निदान का पहला चरण है। इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस के एंटीजन प्रोटीन p24, p15, p17, p31 और ग्लाइकोप्रोटीन gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160 हैं।

वायरल प्रोटीन का पता लगाने के लिए एक नस से रक्त का नमूना लिया जाता है। एलिसा द्वारा रक्त परीक्षण के लिए निर्देशित एक नमूने को एंजाइम इम्यूनोएसे अभिकर्मकों के साथ इलाज किया जाता है। सीरम को रक्त से अलग किया जाता है। यदि अध्ययन के दौरान वे पाए जाते हैं, तो इसका मतलब है कि रक्त में वायरस पहले से मौजूद है।

खून खाली पेट सख्ती से दिया जाता है। विश्लेषण से 2 दिन पहले वसायुक्त खाद्य पदार्थ खाने और शराब का सेवन करने की अनुशंसा नहीं की जाती है। आपको 14 दिनों में एंटीवायरल ड्रग्स लेना बंद कर देना चाहिए।

विधि के लाभ:

• अपेक्षाकृत कम लागत;
• अभिकर्मकों की उच्च स्थिरता;
• उच्च संवेदनशील;
• कुछ समय;
• मानव कारक का न्यूनतम प्रभाव।

आधुनिक एलिसा परीक्षण प्रणाली विश्व मानकों के अनुसार निर्मित की जाती है। यह विधि की सटीकता में सुधार करता है।

एंजाइम इम्युनोसे हमेशा विश्वसनीय परिणाम नहीं देता है। जब वायरस रक्तप्रवाह में प्रवेश करता है, तो विकास का एक गुप्त (अव्यक्त) चरण शुरू होता है। जब तक वायरस गुणा करना शुरू नहीं करते हैं और एंटीबॉडी अभी तक नहीं बनते हैं, तब तक की अवधि को "सेरोनगेटिव विंडो टाइम" कहा जाता है। इस स्तर पर एलिसा करना व्यर्थ है। यदि संक्रमण हुआ है, तो परिणाम होगा। वायरस कितनी जल्दी खुद को पहचान लेता है यह इस बात पर निर्भर करता है कि शरीर में कितनी खतरनाक कोशिकाएं प्रवेश कर चुकी हैं। असुरक्षित संभोग या दूषित रक्त आधान के साथ, यह अवधि न्यूनतम होगी।

एचआईवी के लिए एलिसा की उच्च विश्वसनीयता के लिए, अध्ययन तीन बार किया जाता है। मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस के लिए एलिसा की शर्तें:

• संभावित संपर्क के 6 सप्ताह बाद,
• 3 महीने में,
• छह महीने बाद।

एचआईवी के लिए 4-पीढ़ी का एलिसा संक्रमण के शुरुआती चरणों में सबसे अधिक जानकारीपूर्ण तरीका है। यह कथित संक्रमण के 1 महीने बाद तक किया जा सकता है। तीसरी पीढ़ी के एनालॉग की तुलना में परीक्षण महंगा है। इसलिए, राज्य चिकित्सा संस्थानों में, इसका उपयोग अतिरिक्त निदान पद्धति के रूप में किया जाता है। परीक्षण 3 नि: शुल्क किया जाता है। यदि, इसके परिणामों के आधार पर, एक स्पष्ट उत्तर देना असंभव है, तो रोगी को 4-पीढ़ी के एलिसा के लिए संदर्भित किया जाता है।

जरूरी!एक बार संक्रमित होने के बाद, एक व्यक्ति संक्रामक हो जाता है। वह दूसरों के लिए खतरनाक है, तब भी जब उसे अपने निदान के बारे में पता नहीं है!

यदि एलिसा एचआईवी प्रतिजनों के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाता है, तो अतिरिक्त अध्ययन आवश्यक हैं। इसमे शामिल है। इस पद्धति की विश्वसनीयता 80% है। पीसीआर की मदद से रक्त, वीर्य और योनि स्राव की जांच की जाती है। एक मेडिकल रिएक्टर में जैविक द्रव को तोड़ दिया जाता है, फिर एंजाइमों के साथ उपचार के अधीन किया जाता है। नतीजतन, एक तरल माध्यम में एचआईवी कोशिकाओं की एकाग्रता क्या है, इस पर डेटा प्राप्त किया जाता है। बड़ी त्रुटि (20%) के कारण, सकारात्मक परिणाम के साथ, एक अतिरिक्त प्रतिरक्षा धब्बा किया जाता है।

निदान का अगला चरण कॉम्बो परीक्षण (या प्रतिरक्षा सोख्ता) है। यह एक अत्यधिक संवेदनशील अध्ययन (98% निश्चितता) है, जो 6 महीने के बाद एलिसा के परिणाम अस्पष्ट होने पर किया जाता है।

एलिसा परिणामों की व्याख्या

डिक्रिप्शन का समय 24 से 48 घंटे है। यदि आपको तत्काल जानकारी प्राप्त करने की आवश्यकता है (सर्जिकल हस्तक्षेप की आवश्यकता है), तो 2 घंटे में डिक्रिप्शन किया जाता है। प्रांतीय चिकित्सा केंद्रों में हमेशा आवश्यक अभिकर्मक नहीं होते हैं। उपचार के स्थान पर नमूना लिया जाता है, फिर इसे क्षेत्रीय केंद्र में स्थानांतरित कर दिया जाता है। ऐसे में परिणाम 1 से 2 सप्ताह में मिल सकता है।

एंजाइम इम्युनोसे का परिणाम सकारात्मक या नकारात्मक हो सकता है; यहां कोई दूसरे विकल्प नहीं।

प्राथमिक और बार-बार होने वाले एलिसा के परिणाम सकारात्मक होने पर भी, रोगी को एचआईवी संक्रमित के रूप में नहीं पहचाना जा सकता है। कोई त्रुटि हो सकती है। गलत सकारात्मक परिणाम के कारण:

• जीर्ण रोग;
• दीर्घकालिक संक्रामक रोग;
• गर्भावस्था।

इसलिए, विश्लेषण के परिणाम को अतिरिक्त शोध द्वारा स्पष्ट किया जाना चाहिए।

यदि, एचआईवी (प्रतिक्रियाशील) के लिए इम्युनोब्लॉटिंग करते समय, किसी व्यक्ति को एचआईवी संक्रमित माना जाता है, जिसका अर्थ है कि वह स्वस्थ है।

वायरस की कोशिकाएं समय के साथ निर्धारित दवाओं के अनुकूल हो जाती हैं। नियंत्रित करने के लिए, एलिसा परीक्षण समय-समय पर दोहराया जाता है।

कभी-कभी पश्चिमी धब्बा गलत नकारात्मक परिणाम दिखाएगा। यह 6 महीने (या अधिक) के लिए एक इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस के लिए अत्यंत दुर्लभ है। यह तभी संभव है जब कम संख्या में वायरस कोशिकाएं रक्तप्रवाह में प्रवेश कर गई हों। कुल मामलों के 0.5% मामलों में एक वर्ष के बाद ही संक्रमण का निदान संभव है। 99.5% में, संक्रमण के छह महीने के भीतर, एलिसा करते समय, एक विश्वसनीय परिणाम प्राप्त होगा।

अत्यधिक सटीक अध्ययनों के बावजूद, अभी भी 2% त्रुटि दर है। हमें मानवीय कारक के बारे में नहीं भूलना चाहिए। त्रुटि की संभावना को समाप्त करने के लिए 2 अलग-अलग संस्थानों में परीक्षण किया जा सकता है।