Dirbtinis apvaisinimas. Kas yra apvaisinimas in vitro (IVF), visi privalumai ir trūkumai

In vitro apvaisinimas (iš lat. papildomai- lauke, lauke ir lat. korpusas- kūnas, tai yra apvaisinimas už kūno ribų, sut. IVF yra medicinos technologija, naudojama nevaisingumui gydyti. Sinonimai: „apvaisinimas in vitro“, „apvaisinimas in vitro“, „dirbtinis apvaisinimas“.

Metodas (IVF) pirmą kartą buvo panaudotas m Medicininė praktika 1978 m.. Procedūros esmė – iš moters kiaušidžių paimti brandžius kiaušinėlius, juos apvaisinti vyro (donoro) sperma, užauginti gautus embrionus specialioje aplinkoje už moters kūno ribų (inkubatoriuje) ir embrionus perkelti į gimda. Vaikai, gimę naudojant šį metodą, kasdieniame gyvenime dažnai vadinami „mėgintuvėlio“ vaikais, nes tos kiaušinėlio ir embriono vystymosi stadijos, kurios paprastai vyksta mėgintuvėlyje per pirmas 2-3 dienas po apvaisinimo, atliekant IVF, atsiranda dirbtinės sąlygos- „in vitro“.

IVF metodas – tai pagalbinių apvaisinimo technologijų (ART) metodai, taikomi tais atvejais, kai nevaisingumo gydymas atliekamas „pirmos eilės“ priemonėmis (ovuliacijos indukcija, intrauterinis apvaisinimas, chirurginis gydymas) neduoda rezultatų.

Kontraindikacijos IVF yra moters būklės, kai nėštumas ir gimdymas kelia grėsmę motinos ar vaiko sveikatai, būtent:

somatinės ir psichinė liga, kurios yra kontraindikacijos nėštumui ir gimdymui;
įgimtos gimdos ertmės deformacijos ar įgytos deformacijos, kai neįmanoma implantuoti embrionų ar nėštumas;
kiaušidžių navikai;
gerybiniai navikai gimdos, kurioms reikalingas chirurginis gydymas;
aštrus uždegiminės ligos bet kokia lokalizacija;
bet kokios vietos piktybiniai navikai, įskaitant istoriją.

Vyrams IVF kontraindikacijų nėra.

Pagrindiniai IVF reikalavimai Singapūre yra šie:

pora turi būti teisėtai susituokusi;
Moters amžius neturėtų viršyti 45 metų.

IVF programos etapai

IVF technologija atliekama specializuotose gydymo įstaigos ambulatorinio gydymo sąlygomis. Norint atlikti apvaisinimo mėgintuvėlyje procedūrą, būtina paimti kiaušinėlius, paimti spermą, atlikti apvaisinimą mėgintuvėlyje, užauginti embrioną ir įterpti embrioną į moters gimdos ertmę.

IVF gydymo tikslas – gauti didelis skaičius kiaušialąstes apvaisinimui mėgintuvėlyje (apvaisinimas ne moters organizme, dirbtinėmis sąlygomis) su vyro (ar donoro) sperma ir tokiu būdu gautų embrionų perkėlimui į moters gimdos ertmę. IVF gydymo ciklas trunka 15-30 dienų (priklausomai nuo protokolo tipo) ir susideda iš 4 iš eilės einančių etapų:

Kiaušinių priėmimas

Paprastai apvaisinimo mėgintuvėlyje metu jie bando gauti keletą kiaušinėlių, nes tai padidina nevaisingumo gydymo šiuo metodu efektyvumą. Kadangi normalu, kad moteris tokį turi mėnesinių ciklas Jei subręsta vienas kiaušinėlis, norint gauti kelis kiaušinėlius, atliekama vadinamoji „superovuliacijos stimuliavimo“ procedūra. Tam pacientui skiriamos hormoninės injekcijos
narkotikų. Stimuliacijai naudojamos folikulus stimuliuojančio hormono (FSH), liuteinizuojančio hormono (LH), žmogaus chorioninio gonadotropino (HCG) ir gonadotropiną atpalaiduojančio hormono (GnRH) blokatorių injekcijos. Įvesties tipų ir kiekių derinys hormoniniai vaistai vadinamas „stimuliacijos modeliu“. Yra kelios superovuliacijos skatinimo schemos, tačiau galutinis vaisto kiekis, vartojimo būdai ir trukmė parenkami kiekvienai moteriai individualiai. Priklausomai nuo schemos, superovuliacijos stimuliavimas trunka nuo 7 iki 50 dienų ir reikalauja po oda vaistai (kasdien injekcijos arba poodinės kapsulės).

Kiaušinių brendimo negalima tiesiogiai nustatyti neinvaziniais metodais. Todėl kiaušialąsčių brendimas netiesiogiai vertinamas pagal kiaušidžių folikulų augimą. Folikulų augimas stebimas naudojant prietaisus ultragarsinis tyrimas. Dominuojančiam folikului pasiekus tam tikrą dydį (16-20 mm), skiriama kiaušialąstės išėmimo procedūra – kiaušidžių folikulų punkcija. Folikulų punkcija atliekama taikant bendrąją (dažniau) arba vietinę (rečiau) nejautrą, adata pervedama transvaginaliai, adatos eiga stebima ultragarso aparatu. Punkcijos tikslas – folikulo turinio (folikulinio skysčio) aspiracija (siurbimas). Gautas skystis tiriamas naudojant mikroskopą kiaušiniams aptikti. Aptikti kiaušinėliai nuplaunami iš folikulų skysčio ir perkeliami į laboratorinį indą su auginimo terpe. Indai, kuriuose yra kiaušinėlių, dedami į inkubatorius, kuriuose jie laikomi iki apvaisinimo.

Paprastai hormoninių vaistų vartojimas ir folikulų punkcija nesukelia neigiamos reakcijos pacientas, tačiau kartais gali atsirasti komplikacijų. Superovuliacijos stimuliacijos komplikacija yra kiaušidžių hiperstimuliacijos sindromas (KHSS), kuris gali išsivystyti praėjus kelioms dienoms po stimuliacijos pabaigos. KHSS atsiranda, kai subręsta daug folikulų, kurie, virsdami geltonkūniu, išskiria. didelis skaičius estrogenų. At sunki eiga Dėl KHSS pacientą gali prireikti hospitalizuoti. Folikulo punkcijos komplikacija gali būti kiaušidžių hematoma.

Spermos priėmimas

Pacientas savarankiškai gauna spermą masturbacijos būdu. Galima naudoti nutrauktą santykį arba medicininį prezervatyvą be lubrikanto. Jei neįmanoma gauti spermos ejakuliacijos būdu, naudokite chirurginiai metodai: prielipo turinio aspiracija, sėklidžių biopsija ir tt Sperma paimama sutuoktinio folikulų punkcijos dieną. Jei punkcijos dieną spermos gauti neįmanoma, naudokite išankstinį spermos paėmimą, po to užšaldykite ir laikykite skystas azotas(kriokonservavimas). Prieš apvaisinant kiaušialąstę, spermatozoidai atskiriami nuo sėklinio skysčio. Norėdami tai padaryti, sperma pakartotinai centrifuguojama auginimo terpėje.

In vitro apvaisinimo

Tiesioginį IVF atlieka embriologai embriologijos laboratorijoje. Pats apvaisinimas atliekamas vienu iš dviejų būdų: 1) apvaisinimas in vitro; 2) intracitoplazminė spermos injekcija (ICSI, ICSI). Iš pradžių daugiau paprastu būdu spermatozoidų suspensija dedama į kiaušialąstes, kurios yra maistinėje terpėje. Vienam kiaušiniui spermatozoidų dedama 100–200 tūkst. Per 2-3 valandas vienas iš spermatozoidų prasiskverbia į kiaušinį ir taip jį apvaisina. Antruoju metodu (ICSI) sperma į kiaušialąstę įvedama „rankiniu būdu“, naudojant mikrochirurginius instrumentus. ICSI naudojamas, kai spermos kokybė labai prasta, kai apvaisinimo nepavyksta gauti net inde. Kai spermatozoidas prasiskverbia, kiaušinis laikomas embrionu. Sėkmingo apvaisinimo tikimybė yra 60-70%. Dirbtinėmis sąlygomis embrionai laikomi 2–5 dienas.

Embriono perkėlimas į gimdą

Embrionas į gimdą perkeliamas praėjus 2-5 dienoms po kiaušinėlio apvaisinimo. Procedūra nereikalauja anestezijos (skausmo malšinimo) ir atliekama ginekologinė kėdė per kelias minutes. Embrionas perkeliamas į gimdą specialiu elastiniu kateteriu per gimdos kaklelį. Šiuolaikinė IVF praktika tokia, kad dažniausiai perkeliami 2 embrionai.

Papildomos priemonės auginant embrionus

Embrionų auginimo metu gali būti atliekama papildoma laboratorinė veikla. Embrionų kriokonservavimas – gyvybingi embrionai užšaldomi ir laikomi skysto azoto temperatūroje. Tada embrionus galima atšildyti ir vėl perkelti į gimdą, kad būtų galima pastoti. Preimplantacija genetinė diagnostika(PGD) yra tam tikrų chromosomų ar tam tikrų genetinių patologijų buvimo embrione tyrimas prieš implantaciją. Taip pat šiuo metodu galima nustatyti embriono lytį.

Nėštumas naudojant IVF įvyksta 30-40% atvejų. Todėl pati procedūra vadinama bandymu. Yra keletas veiksnių, lemiančių IVF programos nesėkmę:

kai stimuliuojama ovuliacija, kiaušinėliai neauga;
priešlaikinė ovuliacija;
neįmanoma gauti kiaušinėlio punkcijos metu;
prasta gautų kiaušinių kokybė;
apvaisinimo trūkumas dėl spermos patologijos ir (arba) prastos kiaušinėlio kokybės;
kelių spermatozoidų gebėjimas prasiskverbti į kiaušinėlį;
embrioninių ląstelių dalijimosi trūkumas arba prastos kokybės embrionų susidarymas;
embrionų implantavimo (pritvirtinimo) gimdos ertmėje problemos.

Iš 20 pasitaikiusių nėštumų gimdymu baigiasi vidutiniškai 18. Įvedus embrionus, kartą per 3 dienas būtina stebėti hormonų kiekį kraujyje. Po 12 dienų atliekamas nėštumo testas. Kada daugiavaisis nėštumas Moters pageidavimu atliekama redukcija – pašalinami nereikalingi embrionai.

Gimdymas nėštumo metu po IVF nesiskiria nuo įprasto. Tais atvejais, kai nevaisingumo priežastis yra moters liga, gimdymas vyksta atsižvelgiant į konkrečią ligą ir tai nebeturi nieko bendro su apvaisinimo būdu.

Anot gydytojų, mėgintuvėlyje susilaukę vaikai niekuo nesiskiria nuo kitų. Tačiau yra nuomonė, kad tokie vaikai geriau mokosi, bet dažniau serga. Medikai mano, kad taip gali būti dėl per didelės geidžiamo vaiko globos.

Vos prieš kelis dešimtmečius nevaisingumo diagnozė iš tikrųjų reiškė mirties nuosprendį, o šeimos, kurios negalėjo susilaukti vaiko, galėjo tikėtis tik stebuklo. Šiandien dėl medicinos plėtros daugelis problemų tapo išsprendžiamos, net jei nevaisingumo priežastis negali būti gydoma vaistais ar chirurginiu būdu.

Pagalbos nevaisingų porų tai atvyko in vitro apvaisinimo(IVF) yra efektyviausia šiandien prieinama reprodukcinė technologija.

In vitro apvaisinimas, pažodžiui, yra kiaušialąstės apvaisinimas, kuris įvyksta už kūno ("papildomas") ("korpusas"). Šis bendras terminas turi sinonimus - „dirbtinis apvaisinimas“ arba „apvaisinimas in vitro“.

Galima laikyti, kad apvaisinimo in vitro atradimo istorija viduryje, kai mokslininkai pradėjo bandyti pritaikyti teorines žinias apie galima pastojimas in išorinė aplinka apie praktiką. Taigi, anglų tyrinėtojas 1966 m Robertas Edvardsas aprašė kiaušinėlio brendimo in vitro mechanizmą, už kurį gavo po 44 metų Nobelio premija. Tačiau pirmoji sėkminga IVF procedūra datuojama tik 1977 m. Tai atsitiko Didžiojoje Britanijoje, o 1978 metais gimė mergaitė, pastojusi mėgintuvėlyje. SSRS pirmasis mėgintuvėlio kūdikis gimė Maskvoje 1986 m.

Nors modernius požiūrius Nors apvaisinimo mėgintuvėlyje metodai savo veiksmingumą įrodė ne kartą, apie šią procedūrą vis dar sklando daugybė mitų. Dažniausiai tarp jų:

- vaikas skirsis nuo tų, kurie buvo pradėti natūraliai;

— IVF yra pavojingas organizmui;

— mėgintuvėlio kūdikiai yra silpnesni ir dažniau serga;

— IVF nėštumas visada yra daugiavaisis, o dvynių skaičius yra didesnis nei du;

— dirbtinis apvaisinimas reikalauja ilgo buvimo ligoninėje;

– procedūra labai brangi.

Tačiau praktiškai paaiškėja, kad visa tai yra ne kas kita, kaip spėlionės. Vaikas, gimęs po IVF, visiškai nesiskiria nuo kitų vaikų; nėštumas gali būti daugialypis, bet ne visada. Nesant komplikacijų (kurios yra retos), IVF atliekamas ambulatoriškai. Na, o finansines procedūros atlikimo ir pasiruošimo jai išlaidas šiandien padengė valstybė: nuo 2015 metų ji atliekama Rusijoje.

Kaip vyksta apvaisinimas in vitro?

In vitro apvaisinimas yra moderniausia pagalbinio apvaisinimo technologija, naudojama įvairioms nevaisingumo formoms gydyti

Klinikos, praktikuojančios reprodukcines technologijas, siūlo įvairias galimybes. Tačiau jie iš esmės skiriasi tik siūlomų paslaugų asortimentu ir papildomomis procedūromis bendroji esmė o veiksmų seka lieka nepakitusi. In vitro apvaisinimas atliekamas keliais etapais.

Pasiruošimas IVF. Šiame etape naudojant vaistai Stimuliuojama ovuliacija, kad reprodukcijos specialistai turėtų galimybę gauti subrendusių kiaušinėlių. Norėdami tai padaryti, pacientui suleidžiami hormoniniai vaistai - liuteinizuojantys ir folikulus stimuliuojantys hormonai, taip pat hCG. Jų įvedimo schema vadinama protokolu; Gydytojas pasirenka individualiai.
Kiaušinių ir spermos gavimas. Pirmuoju atveju folikulų punkcija atliekama kontroliuojant ultragarsu, antruoju – nepriklausoma masturbacija. Jei neįmanoma gauti kiaušialąstės iš pacientės ir spermos iš jos partnerio, naudojama donoro genetinė medžiaga. Pasiruošimas apvaisinimui in vitro baigiasi specialiu spermos ir kiaušialąsčių apdorojimu.
Iš tikrųjų pastojimas in vitro. Jis atliekamas naudojant vieną iš dviejų apvaisinimo in vitro metodų:

- spermatozoidų pridėjimas į kiaušinėlius, esančius išorinėje maistinėje terpėje (maždaug 1:100 000 greičiu);

— spermos injekcija rankiniu būdu į kiaušinėlį (ICSI). Šis metodas taikomas, jei spermatozoidų kokybė yra prasta ir pirmiausia reikia parinkti tinkamą spermatozoidą arba kritiškai sumažėjus jų judrumui.

Specialioje aplinkoje susidarę embrionai vystosi kontroliuojant reprodukcijos specialistams 2-5 dienas.

Embriono perkėlimas naudojant ploną kateterį. Procedūra trunka keletą minučių ir atliekama be anestezijos. Šiandien perkeliami du embrionai, o tai sumažina daugiavaisio nėštumo riziką.

Be pagrindinių IVF etapų, kai kurių programų pacientams siūlomos papildomos procedūros, kuriomis siekiama padidinti procedūros efektyvumą:

— perinti– embriono membranos išpjaustymas, dėl kurio padidėja implantacijos tikimybė;

— kriokonservavimas– išaugintų, bet neįsodintų embrionų užšaldymas, jei bandymas apvaisinti būtų nesėkmingas.

Atkreipkime dėmesį, kad reproduktologija ir toliau juda į priekį. Pavyzdžiui, Didžiojoje Britanijoje neseniai buvo leistas trijų tėvų apvaisinimas mėgintuvėlyje, todėl sumažėja rizika susirgti genetinėmis ligomis. Procedūra apima sveikos pacientės DNR persodinimą į kitos moters kiaušialąstę, kuri, savo ruožtu, implantuojama pirmoji.

Nėštumas po IVF

14 dieną po procedūros atliekamas hCG tyrimas nėštumui nustatyti. Remiantis statistika, apie 30% visų IVF procedūrų būna sėkmingos. Visais kitais atvejais pacientai turi bandyti pakartotinai dirbtinis apvaisinimas.

Pirmą kartą po procedūros skiriama hormoninė parama. Be to, rekomenduojamas švelnus režimas:

- ramybė;

- reikia vengti sunkių daiktų kėlimo;

- geriau atsisakyti reikšmingo fizinė veikla;

— subalansuota mityba;

- seksualinis poilsis;

- reikia vengti virusų ir bakterinės infekcijos, stengtis išvengti lėtinių ligų paūmėjimo.

Priešingu atveju nėštumas po dirbtinio apvaisinimo niekuo nesiskiria nuo to, kuris atsiranda natūraliai. Visą jo trukmę bus svarbios standartinės medicininės rekomendacijos.

VIDEO Apvaisinimo in vitro technika

Indikacijos ir kontraindikacijos apvaisinimui in vitro

Ne kiekvienas atvejis, kai neįmanoma pastoti, nurodomas IVF procedūra. Mes išvardijame pagrindinius, kurie tampa dirbtinio apvaisinimo indikacijomis:

Moteriškas veiksnys:

- kiaušintakių patologijos (anatominės ir funkciniai pokyčiai);

- nesugebėjimas išleisti kiaušinėlio;

- endometriozė (su kai kuriais pažeidimų vietos variantais, kai jie neleidžia kiaušinėliui patekti į vamzdelį);

- kiaušidžių nebuvimas;

- gimdos patologijos (gimdos nebuvimas arba jos struktūros sutrikimai);

- nevaisingumas nežinomos kilmės.

Taip pat skaitykite:

1. Vyriškas faktorius:

- spermos trūkumas (azoospermija);

— kritiškai silpnas spermatozoidų judrumas;

— patologinių spermatozoidų vyravimas;

Neįmanoma nepaminėti kontraindikacijų in vitro apvaisinimui:

- potencialių motinų psichinės ligos;

- gimdos deformacijos, dėl kurių nėštumas tampa neįmanomas;

- gerybiniai kiaušidžių ir gimdos navikai;

- bet kokios uždegiminės ligos ūminis laikotarpis;

— piktybiniai navikai(ir anamnezėje).

In vitro apvaisinimo problemos

Hormoninė hiperstimuliacija dėl neteisingai parinkto vaistų vartojimo režimo yra dažniausia komplikacija ruošiantis IVF.

Kaip minėta, su pačiu IVF susijusios komplikacijos yra retos; dažniausia iš jų – hiperstimuliacija, kurią sukelia netinkamai parinkus hormoninius vaistus. Galimas tokio nėštumo persileidimas, bet ne dažniau nei natūraliai įvykusio nėštumo nutraukimas. Kitaip tariant, persileidimas abiem atvejais gali įvykti dėl hormonų disbalanso, infekcijos, traumos – nepriklausomai nuo to, kaip įvyko nėštumas.

Ilgą laiką daugiavaisio nėštumo problema po dirbtinio apvaisinimo buvo ypač aktuali, nes į gimdą buvo perkelta iki penkių embrionų. Tačiau šiandien mums pavyko tai išspręsti: ačiū šiuolaikinės technologijos padidėjo embriono implantacijos tikimybė, todėl perkėlimui naudojami du embrionai.

Galiausiai, trečioji problema yra etinio pobūdžio. Visos pasaulio religijos turi dviprasmišką požiūrį į IVF. Pavyzdžiui, ortodoksijoje dirbtinis apvaisinimas leidžiamas, jei buvo panaudota vyro genetinė medžiaga. Neigiamas Stačiatikių bažnyčia kalba apie spermos donorystę ir surogatinių motinų naudojimą.

In vitro apvaisinimas (iš lot. extra – išorėje, išorėje ir lot. korpusas – kūnas, tai yra apvaisinimas už kūno ribų, sutrumpintas IVF) yra pagalbinio apvaisinimo technologija, naudojama nevaisingumo atvejais. Sinonimai: „apvaisinimas in vitro“, „apvaisinimas in vitro“, „dirbtinis apvaisinimas“, in Anglų kalbažymimas santrumpa IVF (in vitro fertilisation).Ši technologija leidžia moterims pačiais beviltiškiausiais atvejais tapti motinomis. IVF atliekamas visose išsivysčiusiose pasaulio šalyse ir kasmet gimsta keli tūkstančiai „mėgintuvėlių kūdikių“. Tikintiesiems, tarp kurių yra ir bevaikų, visai pagrįstai kyla klausimas: ar šis metodas priimtinas stačiatikių bažnyčios požiūriu? Pabandykime suprasti, kaip vyksta IVF ir kokias pasekmes jis sukelia.

Šiek tiek istorijos

IVF metu kiaušinėlis pašalinamas iš moters kūno ir dirbtinai apvaisinamas „in vitro“ sąlygomis („in vitro“), gautas embrionas laikomas inkubatoriuje, kuriame vystosi 2-5 dienas, po to embrionas apvaisinamas. perkeliami į gimdos ertmę tolimesniam vystymuisi.

Tai pirmas kartas, kai tai pasisekė medicinos technologijos buvo naudojamas JK 1977 m., todėl 1978 m. gimė Louise Brown, pirmasis asmuo, „suaugęs in vitro“. Pirmasis vaikas (mergaitė), pradėtas per IVF Sovietų Sąjungoje, gimė 1986 m. vasario mėn. Procedūra atlikta Maskvoje, Motinos ir vaiko sveikatos centre, iškviestame šiandien Mokslo centras akušerija, ginekologija ir perinatologija (NC AGiP). Kiek vėliau, Leningrade tais pačiais 1986 m., gimė berniukas Kirilas. Prieš šiuos įvykius buvo pradėti rimti tyrimai, kurie Sovietų Sąjungoje pradėti kryptingai vykdyti 1965 m. Šiuo metu buvo sukurta ankstyvosios embriogenezės grupė, kuri 1973 metais išaugo į eksperimentinės embriologijos laboratoriją (vad. prof. B. Leonovas). 1994 metais šioje laboratorijoje gimė daugiau nei 1,5 tūkst. 1990 metais mūsų planetoje buvo per 20 tūkstančių vaikų, pastojusių in vitro. 2010 metais – apie 4 mln.. Didžiausią intensyvumą IVF procedūra pasiekia Izraelyje, kur 1 mln. gyventojų per metus tenka 3400 IVF procedūrų.

Indikacijos:
Indikacijos IVF procedūrai yra įvairių formų vyriškas ir moterų nevaisingumas. Remiantis Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministerijos įsakymu N67, IVF indikacija yra „nevaisingumas, kurio negalima gydyti arba tikimybė jį įveikti IVF pagalba yra didesnė nei taikant kitus metodus. Nesant kontraindikacijų, IVF gali būti atliekamas susituokusios poros (nesusituokusios moters) prašymu dėl bet kokios formos nevaisingumo“.

Kontraindikacijos: Kontraindikacijos IVF yra moters būklės, kai nėštumas ir gimdymas kelia grėsmę motinos ar vaiko sveikatai, būtent:

somatinės ir psichinės ligos, kurios yra kontraindikacijos nėštumui ir gimdymui;
įgimtos gimdos ertmės deformacijos ar įgytos deformacijos, kai neįmanoma implantuoti embrionų ar nėštumas;
kiaušidžių navikai;
gerybiniai gimdos navikai, kuriems reikalingas chirurginis gydymas;
bet kokios lokalizacijos ūminės uždegiminės ligos;
bet kokios vietos piktybiniai navikai, įskaitant istoriją.

Vyrams IVF kontraindikacijų nėra.

Technologijos

IVF technologija atliekama specializuotose gydymo įstaigose ambulatorinio gydymo sąlygomis. Norint atlikti apvaisinimo mėgintuvėlyje procedūrą, būtina paimti kiaušinėlius, paimti spermą, atlikti apvaisinimą mėgintuvėlyje, užauginti embrioną ir įterpti embrioną į moters gimdos ertmę.

Paprastai apvaisinimo mėgintuvėlyje metu jie bando gauti keletą kiaušinėlių, nes tai padidina nevaisingumo gydymo šiuo metodu efektyvumą. Kadangi per vieną menstruacinį ciklą moteris paprastai subrandina vieną kiaušinėlį, kelių kiaušinėlių gavimui atliekama vadinamoji „superovuliacijos stimuliavimo“ procedūra. Tam pacientui skiriamos hormoninių vaistų injekcijos.

Kiaušinių brendimo negalima tiesiogiai nustatyti neinvaziniais metodais. Todėl kiaušialąsčių brendimas netiesiogiai vertinamas pagal kiaušidžių folikulų augimą. Folikulų augimas stebimas naudojant ultragarso aparatus. Pasiekus dominuojantis folikulas tam tikro dydžio (16-20 mm), skiriama kiaušinėlių paėmimo procedūra - kiaušidžių folikulų punkcija. Folikulų punkcija atliekama taikant bendrąją (dažniau) arba vietinę (rečiau) nejautrą, adata pervedama transvaginaliai, adatos eiga stebima ultragarso aparatu. Punkcijos tikslas – folikulo turinio (folikulinio skysčio) aspiracija (siurbimas). Gautas skystis tiriamas naudojant mikroskopą kiaušiniams aptikti.

Aptikti kiaušinėliai nuplaunami iš folikulų skysčio ir perkeliami į laboratorinį indą su auginimo terpe. Petri lėkštelės arba kultūros lėkštelės naudojamos kaip laboratoriniai stikliniai indai. Indai, kuriuose yra kiaušinėlių, dedami į inkubatorius, kuriuose jie laikomi iki apvaisinimo.

Paprastai hormoninių vaistų vartojimas ir folikulų punkcija nesukelia neigiamų paciento reakcijų, tačiau kartais gali atsirasti komplikacijų. Superovuliacijos stimuliacijos komplikacija yra kiaušidžių hiperstimuliacijos sindromas (KHSS), kuris gali išsivystyti praėjus kelioms dienoms po stimuliacijos pabaigos. KHSS atsiranda, kai subręsta daug folikulų, kurie, virsdami geltonkūniu, išskiria didelį kiekį estrogenų. Sunkiais KHSS atvejais pacientą gali prireikti hospitalizuoti. Folikulo punkcijos komplikacija gali būti kiaušidžių hematoma.

Jei neįmanoma gauti kiaušialąsčių iš paciento (nėra kiaušidžių, menopauzė ir pan.), galima naudoti donoro kiaušinėlius (tai yra kitos moters kiaušialąstes). Kiaušialąsčių donoru gali būti nesavanaudiškas donoras (giminaitis, draugas) arba apmokamas donoras. Darbo su kiaušialąsčių donoru sąlygas reglamentuoja Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministerijos įsakymas N67

Jei vyro spermos panaudoti neįmanoma (dėl medicininių priežasčių) arba pacientas neturi lytinio partnerio, galima naudoti donoro spermą. Naudoti donoro spermą reikalingas privalomas rašytinis sutuoktinio sutikimas ir reglamentuojamas Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministerijos įsakymu N67. Pagal šį įsakymą donoro sperma naudojama ne anksčiau kaip po 6 mėnesių laikymo užšaldyta, kad būtų gauti duomenys apie nebuvimą. užkrečiamos ligos iš spermos donoro.

Tiesioginį IVF atlieka embriologai embriologijos laboratorijoje. Pats tręšimas atliekamas vienu iš dviejų būdų:

1) apvaisinimas in vitro;

2) intracitoplazminė spermos injekcija (ICSI, ICSI).

Pirmuoju, paprastesniu būdu, į maistinėje terpėje esančius kiaušinėlius dedama spermatozoidų suspensija. Vienam kiaušiniui spermatozoidų dedama 100–200 tūkst. Per 2-3 valandas vienas iš spermatozoidų prasiskverbia į kiaušinį ir taip jį apvaisina. Antruoju metodu (ICSI) sperma į kiaušialąstę įvedama „rankiniu būdu“, naudojant mikrochirurginius instrumentus. ICSI naudojamas, kai spermos kokybė labai prasta, kai apvaisinimo nepavyksta gauti net inde.

Kai spermatozoidas prasiskverbia, kiaušinis laikomas embrionu. Sėkmingo apvaisinimo tikimybė yra 60-70%. Dirbtinėmis sąlygomis embrionai laikomi 2–6 dienas

Embrionas į gimdą perkeliamas praėjus 2-5 dienoms po kiaušinėlio apvaisinimo. Procedūra nereikalauja anestezijos (skausmo malšinimo) ir atliekama ant ginekologinės kėdės per kelias minutes. Embrionas perkeliamas į gimdą specialiu elastiniu kateteriu per gimdos kaklelį. Remiantis Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministerijos įsakymu Nr.67, siekiant išvengti daugiavaisio nėštumo, į gimdos ertmę nerekomenduojama perkelti daugiau nei 4 embrionus. Šiuolaikinė IVF praktika Rusijoje yra tokia, kad dažniausiai perkeliami 2 embrionai.

Apvaisinimo in vitro (IVF) efektyvumas paprastai yra apie 30–35%. Vertė gali skirtis priklausomai nuo amžiaus, nevaisingumo priežasčių, gydytojų kvalifikacijos ir klinikos lygio (dėl to, kad materialinė ir techninė įranga yra nemenka). Iš 20 pasitaikiusių nėštumų gimdymu baigiasi vidutiniškai 18. Įvedus embrionus, kartą per 3 dienas būtina stebėti hormonų kiekį kraujyje. Po 12 dienų atliekamas nėštumo testas.

Esant daugiavaisiui nėštumui, moters pageidavimu, atliekamas sumažinimas – pašalinami nereikalingi embrionai. Sumažinimas atliekamas nuo 5 iki 13 savaičių, geriausias laikotarpis yra 8 ir 9 savaitės. Savo reikšme redukcija yra tas pats, kas abortas, tik su juo sunaikinami ne visi susilaukę vaikai, o vienas ar keli, o vienas, du ar (rečiau trys) lieka gyventi ir vystytis.

Iki 6 savaičių redukcija atliekama vakuuminiu aspiratoriumi, kuris įkišamas į gimdos ertmę iki „nepageidaujamo“ embriono ir išsiurbiamas. 7-8 savaičių laikotarpiu specialia adata invaginiškai prasiskverbia į embriono krūtinės ertmę ir suleidžiamas kalcio chloridas, po kurio kūdikis miršta ir jo kūnas ištirpsta. Laikotarpiais nuo 9 iki 13 savaičių mažinimo priemonė išlieka lygiai tokia pati adata, tik ji įduriama per nėščiosios pilvą. Šis metodas laikomas patogiausiu ir saugiausiu likusiems vaisiams ir pačiai moteriai.

Gimdymas

Gydytojų teigimu, in vitro pastoti vaikai niekuo nesiskiria nuo kitų. Nepaisant to, yra nuomonė, kad tokie vaikai geriau mokosi, bet yra daug impulsyvesni ir dažniau serga. Kai kurie gydytojai mano, kad taip gali būti dėl per didelės geidžiamo vaiko globos.

Bažnyčios nuomonė

Rusijos stačiatikių bažnyčia oficialiame dokumente „Socialinės koncepcijos pagrindai“ (2000 m.) įvairių problemų bioetika, kuri apima nevaisingumo įveikimo klausimus. Moraliai priimtini nevaisingumo įveikimo būdai apima „dirbtinį apvaisinimą vyro reprodukcinėmis ląstelėmis, nes tai nepažeidžia santuokos vientisumo ir iš esmės nesiskiria nuo natūralus pastojimas ir atsiranda santuokinių santykių kontekste“.

Bažnyčia nepritaria tokioms in vitro apvaisinimo galimybėms, kai naudojama donoro sperma, donoro kiaušialąstės ar surogatinė motina: „Donorinės medžiagos naudojimas griauna šeimos santykių pagrindus, nes suponuoja, kad vaikas, be „socialinių“, taip pat turi vadinamuosius biologinius tėvus. „Surogacija“, tai yra apvaisinto kiaušinėlio nešiojimas moteriai, kuri po gimdymo grąžina vaiką „klientams“, yra nenatūralu ir morališkai nepriimtina...“ Bažnyčia taip pat prieštarauja toms IVF galimybėms, kurios gali sąmoningai baigtis didelis kiekis embrionų, nei reikia pernešimui į gimdą: „Stačiatikių požiūriu, bet koks apvaisinimas in vitro (iš kūno) susijęs su „perteklinių“ embrionų paėmimu, išsaugojimu ir tyčiniu sunaikinimu, taip pat yra morališkai nepriimtinas. Moralinis aborto vertinimas, kurį smerkia Bažnyčia, yra pagrįstas žmogaus orumo pripažinimu net užuomazgoje. Būtent sumažinimo procedūra verčia pasakyti „ne“ IVF, nes gyvų embrionų sunaikinimas laikomas žmogžudyste.

Bažnyčia taip pat atkreipia dėmesį į tai, kad: „Reprodukcinių metodų naudojimas už Dievo palaimintos šeimos ribų tampa ateizmo forma, vykdoma prisidengiant žmogaus autonomijos ir neteisingai suprastos asmens laisvės apsauga“.

Tiesioginį IVF atlieka embriologai embriologijos laboratorijoje. Pats tręšimas atliekamas vienu iš dviejų būdų:

1) apvaisinimas in vitro;

2) intracitoplazminė spermos injekcija (ICSI, ICSI).

Kai spermatozoidas prasiskverbia, kiaušinis laikomas embrionu. Sėkmingo apvaisinimo tikimybė yra 60-70%. Dirbtinėmis sąlygomis embrionai laikomi 2–6 dienas. Tam naudojami vadinamieji CO 2 inkubatoriai - spintos, kuriose palaikoma 37°C temperatūra, o CO 2 kiekis atmosferoje yra 5-6%. Embrionai (o prieš tai kiaušinėliai) inkubatoriuose tiesiogiai laikomi plastikiniuose induose (Petri lėkštelėse, Nunk lėkštelėse, lėkštelėse ir kt.) su auginimo terpe. Embrionų auginimo terpėje yra pagrindiniai fiziologiniai jonai (Na +, K +, Ca 2+, Mg 2+, Cl-, CO 3- ir kt.), energetiniai substratai (gliukozė, piruvatas, laktatas), aminorūgštys, dažnai vitaminai ir serumo baltymai. Inkubacijos metu žmogaus embrionas praktiškai nepadidėja (pirmas 4 dienas jo dydis yra 0,1 mm, 5 dieną - 0,15-0,2 mm), tačiau jį sudarančių ląstelių skaičius padidėja daug kartų (1 diena). - 1 ląstelė; 2 dienos - 4 ląstelės; 3 dienos - 8 ląstelės; 4 dienos - nuo 10 iki 20 ląstelių, 5 dienos - nuo 40 iki 200 ląstelių). Embrionas į gimdą perkeliamas praėjus 2-5 dienoms po kiaušinėlio apvaisinimo. Procedūra nereikalauja anestezijos (skausmo malšinimo) ir atliekama ant ginekologinės kėdės per kelias minutes. Embrionas perkeliamas į gimdą specialiu elastiniu kateteriu per gimdos kaklelį. Remiantis Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministerijos įsakymu Nr.67, siekiant išvengti daugiavaisio nėštumo, į gimdos ertmę nerekomenduojama perkelti daugiau nei 4 embrionus. Šiuolaikinė IVF praktika Rusijoje yra tokia, kad dažniausiai perkeliami 2 embrionai. Jei vaisiaus pagimdyti neįmanoma, pacientas gali pasitelkti surogatinę motiną.

Išvada

Šiandien klinikos užšaldo (kriokonservuoja) žmogaus lytines ląsteles (spermatozą, kiaušialąstes) ir įvairių vystymosi stadijų embrionus, gautus IVF programose. Likę embrionai po perkėlimo „šviežiame“ (ty stimuliuotame) cikle užšaldomi tik gera kokybė, nes vėliau jie saugiai išgyvens atitirpę.

Spermos užšaldymas naudojamas šiais atvejais: vėžio ligos vyrams, siekiant užtikrinti spermos atsargas prieš chemoterapijos pradžią ir po to užšaldyto mėginio panaudojimą sveikiems palikuonims gauti, netikrumas dėl partnerio buvimo renkant spermą IVF – tai situacija, būdinga ne- miesto ligoniai, donorystė, planuojamos atidėtos tėvystės atvejais. Galbūt dėl pastebimo sumažėjimo vyrų vaisingumas, bus populiarinamas jaunų vyrų spermos saugojimas būsimam naudojimui.

Kiaušinių šaldymas naudojamas tais atvejais, kai stimuliacija nerekomenduojama arba draudžiama (pavyzdžiui, vėžys ir kitos ligos) arba šiuo laikotarpiu neįmanoma apvaisinti ląstelių. Subrendęs oocitas (moteriška ląstelė) yra labai trapus dėl didelis dydis, skysto turinio ir chromosomų išsidėstymo ir yra lengvai pažeidžiamas šaldymo/atšildymo procedūrų metu. Gimstamumas po apvaisinimo ir šaldytų-atšildytų kiaušialąsčių apvaisinimo siekia 3-4 proc. Kriokonservavimo pagalba išsprendžiama pastojimo ir nevaisingumo problema. Be daugelio vyrų ir moterų nevaisingumo formų gydymo, ART taip pat naudojamas sprendžiant fundamentaliosios biologijos ir medicinos problemas. Naudodami nereikalaujančius implantuoti embrionus, tiria apvaisinimo ir embriono vystymosi mechanizmus, genetinį embriogenezės reguliavimą, preimplantacinės diagnostikos galimybes. paveldimos ligos ir kitos problemos. Pacientas savarankiškai gauna spermą masturbacijos būdu. Galima naudoti nutrauktą santykį arba medicininį prezervatyvą be lubrikanto. Jei spermos gauti ejakuliacijos būdu neįmanoma, naudojami chirurginiai metodai: prielipo turinio aspiracija, sėklidžių biopsija ir kt. Sperma gaunama sutuoktinio folikulų punkcijos dieną. Jei punkcijos dieną spermos gauti neįmanoma, naudojamas išankstinis spermos paėmimas, po to užšaldoma ir laikoma skystame azote. Prieš apvaisinant kiaušialąstę, spermatozoidai nuplaunami iš sėklinio skysčio ir panaudojami specialius metodus paryškinti aukščiausios kokybės.

Jei vyro spermos panaudoti neįmanoma arba pacientas neturi lytinio partnerio, galima naudoti donoro spermą. Naudoti donoro spermą reikalingas privalomas rašytinis sutuoktinio sutikimas ir reglamentuojamas Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministerijos įsakymu N107N. Pagal šią tvarką donoro sperma naudojama po 6 mėnesių karantino, t.y. po 6 mėnesių šaldymo laikymo ir pakartotinio donoro tyrimo, patvirtinančio, kad infekcinių ligų nėra.

Dirbtinis apvaisinimas - nevaisingumo gydymo metodų rinkinys, įskaitant apvaisinimą dirbtinis apvaisinimas(vyro ar donoro spermos įvedimas į moters lytinius organus) ir apvaisinimas mėgintuvėlyje, po kurio susmulkinti embrionai persodinami į gimdos ertmę. IN pastaraisiais metais kuria moteriškų ir vyriškų lytinių ląstelių persodinimo į kiaušintakio spindį metodą.

Dirbtinis apvaisinimas (apvaisinimas). Priklausomai nuo spermos įvedimo būdo, išskiriami makšties, intracervikiniai ir intrauteriniai dirbtinio apvaisinimo būdai. Makšties metodas( spermos injekcija į atgal makšties skliautas) naudojami retai; tai paprasčiausias, bet mažiausiai veiksmingas, nes makšties turinys gali neigiamai paveikti spermą. Intracervikinis metodas (spermos suleidimas į gimdos kaklelio kanalą) taip pat nėra pakankamai efektyvus dėl galimybės gimdos kaklelio gleivėse susidaryti antisperminiams antikūnams. Veiksmingiausias intrauterinis metodas yra spermos įvedimas į gimdos ertmę. Tačiau kai antisperminių antikūnų titras gimdos kaklelio gleivėse yra didesnis nei 1:32, jų randama ir gimdos ertmėje; tokiais atvejais prieš spermos injekciją būtina nespecifinė desensibilizuojanti terapija.

Dirbtinis apvaisinimas vyro sperma atliekamas pagal šias indikacijas: iš vyro pusės - šlaplė, ejakuliacijos stoka, oligospermija su normalia spermos sandara ir judrumu; iš moters pusės - anatominiai gimdos kaklelio pokyčiai, kurių negalima gydyti, antisperminių antikūnų buvimas gimdos kaklelio gleivėse. Kontraindikacijos moterims: ūminės ir lėtinės uždegiminės lytinių organų ligos, tikrosios gimdos kaklelio erozijos ir pseudoerozijos.

Prieš apvaisinimą būtina ištirti vyro spermą, neįtraukti tuboperitonealinės ir gimdos priežastys nevaisingumas . Siekiant nustatyti ovuliacijos laiką ir buvimą Geltonkūnis atlikti bandymus funkcinė diagnostika(cm. Ginekologinė apžiūra ), nustatyti liuteinizuojančio hormono ir progesterono kiekį kraujyje. Naudojant ultragarsą, nustatomas dominuojančio folikulo skersmuo (žr. Kiaušidės ).

Procedūra atliekama laikantis aseptikos taisyklių, kai moteris sėdi ginekologinėje kėdėje. Vyro sperma, gauta masturbacijos metu, susilaikius nuo lytinių santykių mažiausiai 3 dienas, sutraukiama į plastikinį 1 talpos švirkštą. ml. Prie švirkšto tvirtinamas polietileno kateteris (galima naudoti poraktinį kateterį), kuris, nefiksuojant gimdos kaklelio, įvedamas į gimdos kaklelio kanalą arba į gimdos ertmę už vidinės os. Spermos kiekis 0,4 mlįkišamas į gimdos kaklelio kanalą arba į gimdos ertmę. Norint išlaikyti spermą, ant gimdos kaklelio uždedamas dangtelis, dažniausiai naudojamas tam kontracepcija ; moteris guli padėtyje 30 min .

Su sutrikusia liuteine faze mėnesinių ciklas po dirbtinio apvaisinimo rekomenduojama skirti geltonkūnio vystymąsi skatinančių vaistų (chorioninio gonadotropino 750 TV į raumenis 11, 13, 15, 17, 19 ir 21 ciklo dienomis). Esant pailgėjusiai menstruacinio ciklo folikulinei fazei, skatinamas folikulų brendimas ir ovuliacija (geriausia ultragarsu kontroliuojant dominuojančio folikulo skersmenį). Šiuo tikslu klomifeno citratas (klostilbegitas) skiriamas 50-100 mg per burną nuo 5 iki 9 menstruacinio ciklo dienos ir 12 menstruacinio ciklo dieną į raumenis suleisti 3000-4500 TV žmogaus chorioninio gonadotropino. Privaloma stebėjimo po dirbtinio apvaisinimo sąlyga yra bazinės (tiesiosios žarnos) temperatūros matavimas arba žmogaus chorioninio gonadotropino b-subvieneto nustatymas kraujyje, siekiant ankstyva diagnostika nėštumas.

Dirbtinis apvaisinimas donoro sperma atliekamas vyro azoospermijos atveju ( absoliutus skaitymas), taip pat esant vyro oligo- ir astenospermijai kartu su morfologiniais spermos pakitimais, imunologiniu konfliktu dėl Rh faktoriaus, kurio negalima gydyti, paveldimos genetiškai nulemtos vyro šeimos ligos (santykinės indikacijos). Kontraindikacijos tokios pat kaip ir apvaisinant vyro sperma.

Dirbtinis apvaisinimas donoro sperma atliekamas gavus abiejų sutuoktinių sutikimą. Donoras turi būti jaunesnis nei 36 metų, fiziškai ir psichiškai sveikas, neturintis paveldimų ligų ar raidos sutrikimų, o pirmos eilės giminaičiams turi būti ne daugiau kaip vienas vaisiaus mirties ar savaiminio persileidimo atvejis. Privaloma atlikti Wasserman testą ir ŽIV infekcijos testą. Renkantis donorą, įvertinama Rh ir kraujo grupė, fenotipas, įsk. kūno sudėjimą, ūgį, plaukų ir akių spalvą. Dovanotojas įsipareigoja niekada neieškoti savo biologinių palikuonių, siekdamas jiems kelti kokių nors reikalavimų.

Prieš apvaisinimą būtina atlikti vietinių antisperminių antikūnų prieš donoro spermą tyrimą ir spermos gebėjimo prasiskverbti į donoro spermą tyrimą. gimdos kaklelio gleivės. Maždaug 1/3 moterų, kurios anksčiau buvo apvaisintos donoro sperma, susidaro vietiniai antisperminiai antikūnai; jų nustatymas yra spermos injekcijos į gimdą indikacija.

Gimtoji arba konservuota sperma gali būti naudojama apvaisinimui donoro sperma. Labiausiai paplitęs spermos konservavimo būdas yra kriokonservavimas skystame azote, kuris leidžia sukurti spermos banką ir jį ilgai laikyti. Pagal V.I. rekomenduotą metodą. Grishchenko ir kt. (1986), spermatozoidai užšaldomi subklaviniame kateteryje, kuriame yra daugiakomponentis konservantas. Tai sumažina temperatūros gradientą ir sukuria palankias sąlygas spermos išsaugojimui ir išlikimui. Apvaisinimas atliekamas naudojant tą patį kateterį, o tai labai supaprastina procedūrą. Spermos įvedimo į moters lytinius organus technika, ovuliacijos skatinimo būdas ir geltonkūnis yra tokie patys kaip ir apvaisinimo vyro sperma. To paties donoro sperma turėtų būti naudojama tris menstruacijų ciklus iš eilės.

Nėštumo dažnis po apvaisinimo vyro ar donoro sperma yra maždaug toks pat ir, įvairių autorių duomenimis, siekia 30-70 proc. Moterys, kurios pastoja po dirbtinio apvaisinimo, turi būti prižiūrimos akušerio-ginekologo gimdymo klinikoje, o taip pat nėščios moterys, kurių pasunkėjęs akušerijos istorija. Nėštumo ir gimdymo eiga nesiskiria nuo normalios pastojimo metu, vaisiaus vystymosi anomalijų pasitaiko ne dažniau nei populiacijoje.

In vitro apvaisinimas, po kurio seka embriono perkėlimas ir gimdos ertmė- vienas iš šiuolaikiniai metodai moterų nevaisingumo gydymas. Pasaulyje yra per 5 tūkstančius vaikų, kurie gimė po to, kai moteris buvo apvaisinta šiuo metodu.

Jo taikymas buvo pasiektas tam tikros sėkmės, tačiau dėl būtinybės naudoti brangius aparatus ir įrangą vaistai Daugiausia importuojama produkcija SSRS, ji steigiama tik didelėse mokslinių tyrimų ir klinikinėse įstaigose.

Indikacijos: absoliutus kiaušintakis (būklė po dvišalės tubektomijos); obstrukcija arba abiejų kiaušintakių praeinamumo sunkumas, nesant anksčiau atlikto chirurginio ar ilgalaikio (daugiau nei 5 metų) konservatyvaus gydymo poveikio, nevaisingumas, kurio genezė atlikus pilną klinikinį tyrimą (įskaitant hormoninį, endoskopinį, imunologinį). ) lieka neaišku; vyro spermos nevaisingumas (esant neveiksmingam homologiniam apvaisinimui).

Sąlygos: visiškai išsaugotas funkcinis gimdos gebėjimas implantuoti embrioną ir nėštumą; kontraindikacijų nėštumui ir gimdymui nebuvimas (dėl somatinių, psichinių, genetinės ligos moterys); išsaugotas gebėjimas tinkamai reaguoti į egzogeninę ar endogeninę ovuliacijos stimuliaciją, neoplazmų nebuvimą, uždegiminius ir anatominius dubens organų pokyčius.

Kontraindikacijos: išvardytų būklių nebuvimas,

taip pat moters amžius virš 40 metų.

Metodas susideda iš 5 etapų: 1) superovuliacijos (daugybinės ovuliacijos) stimuliavimas; 2) kiaušinėlių aspiracija, 3) kiaušinėlių apvaisinimas; 4) apvaisintų kiaušinėlių auginimas, 5) sutrintų embrionų perkėlimas į gimdą.

Metodo sėkmė labai priklauso nuo kiaušialąsčių, gautų pradūrus priešovuliacinius folikulus, skaičiaus ir į gimdą perkeltų embrionų skaičiaus. Šiuo atžvilgiu būtina stimuliuoti superovuliaciją kartu skiriant antiestrogenus (klomifeno citratą) ir gonadotropinus (pergonalinį, žmogaus chorioninį gonadotropiną). B.V. Leonovas ir jo kolegos sukūrė tokias superovuliacijos stimuliavimo schemas: pirmoji schema yra geriamasis klomifeno citratas, 50-150 mg per dieną nuo 2 ar 3 menstruacinio ciklo dienos 5 dienas ir pergoniškai 75-150 vienetų į raumenis 3, 5, 7 ciklo dienomis, o vėliau kasdien, kol dominuojantis folikulas pasieks 16-18 skersmenį. mm; antroji schema - pergonalinis 75-150 vienetų į raumenis nuo 2 menstruacinio ciklo dienos kasdien, kol dominuojantis folikulas pasiekia 16-18 skersmenį mm. 24-48 m h folikului pasiekus nurodytą dydį, į raumenis suleidžiama 5000 - 10 000 vienetų žmogaus chorioninio gonadotropino. Autorių teigimu, naudojant šias superovuliacijos stimuliavimo schemas susidaro iki 20 folikulų, iš kurių galima gauti iki 60 kiaušinėlių.

Superovuliacijos stimuliavimo metu moteris yra nuolat dinamiškai stebima: kasdien atliekamas ultragarsinis tyrimas su folikulų skersmens matavimu, estradiolio ir liuteinizuojančio hormono nustatymas kraujyje.

Priešovuliacinių folikulų punkcija atliekama po 34–36 m h po žmogaus chorioninio gonadotropino vartojimo. Anksčiau ji buvo atliekama transabdominaliniu būdu, o pastaraisiais metais atliekama per makštį, kontroliuojant makšties ultragarso jutiklius, o tai, palyginti su pirmuoju metodu, žymiai palengvina folikulų vizualizavimą ir sumažina komplikacijų (sužalojimų) dažnį. dubens organai ir dideli indai). Be to, transvaginalinė folikulų punkcija leidžia aspiruoti kiaušinėlius net ir esant stipriam sukibimui pilvo ertmė. Šio metodo įdiegimas leido atlikti apvaisinimą mėgintuvėlyje ambulatoriškai.

Kiaušinėliai dedami į specialų termostatą, į kurį perkeliami ir spermatozoidai, gauti išplovus vyro spermą ir atskyrus sėklų plazmą centrifugavimo būdu. Į vieną kiaušinėlį dedama 200-300 tūkst. Susmulkintų kiaušinių auginimo procesas vykdomas specialioje aplinkoje esant 37° temperatūrai, absoliučiai drėgmei, 5 % anglies dvideginio, užtikrinančio optimalų pH lygį. Esant 4 ar daugiau blastomerų stadijai, susmulkinti embrionai dedami į specialų plastikinį kateterį ir per gimdos kaklelio kanalą įvedami į gimdos ertmę (į jos dugno sritį) minimaliu tūriu (0.

05 ml) maistinė terpė.

Po embriono transplantacijos atliekamas dinaminis žmogaus chorioninio gonadotropino b-subvieneto nustatymas kraujyje, kuris padeda nustatyti nėštumo pradžią 7-9 dieną po transplantacijos. Nėštumo metu moteris nuolat stebi akušeris-ginekologas nėščiųjų klinika, kaip ir nėščios moterys, turinčios apsunkintą akušerijos istoriją.

Metodo veiksmingumas didėja tobulinant įrangą ir vaistus, skatinančius ovuliaciją. Metodo nesėkmės gali atsirasti dėl daugelio priežasčių, tarp kurių pagrindinės yra nesėkmingas embriono perkėlimas į gimdą, hiperstimuliuoto folikulo vietoje susidariusio geltonkūnio disfunkcija, endometriumo pokyčiai dėl antiestrogenų vartojimas, embriono ir endometriumo brandos laipsnio sinchronijos trūkumas.

Dažnis Negimdinis nėštumas taikant šį metodą, įvairių autorių teigimu, tai yra 2-10%, persileidimų dažnis siekia 40%. Santykinai dažniau nei populiacijoje stebima vaisiaus mirtis gimdymo metu. Šios komplikacijos nėra šio metodo pasekmė, bet neabejotinai susijusios su moters amžiumi ir buvimu patologiniai pokyčiai jų dauginimosi sistema. Gimę vaikai vystosi normaliai. Turimi pastebėjimai apie greitesnius intelektualinius ir fizinis vystymasisšie vaikai akivaizdžiai susiję su specialios sąlygos jų gyvenimą ir auklėjimą.

Moteriškų ir vyriškų lytinių ląstelių persodinimas į kiaušintakio spindį atliekami naudojant tefloninį kateterį ir plastikinį zondą kaip laidininką, kurie per gimdos ertmę įvedami į kiaušintakio ampulės spindį, kontroliuojant ultragarsu naudojant makšties jutiklį. Kiaušiniai (ne mažiau kaip trys) ir 200-600 tūkstančių spermatozoidų suleidžiami per kateterį su švirkštu per 50 ml maistinė terpė. Šiuo atveju tręšimas įvyksta kiaušintakis, kuris yra daug fiziologiškesnis nei in vitro. Metodas laikomas gana perspektyviu gydant neaiškios kilmės nevaisingumą, kai kurių riebalinio audinio formų nevaisingumą, taip pat nevaisingumą, sukeltą sutrikusios spermatogenezės vyrams. Būtina jo naudojimo sąlyga yra kiaušintakių praeinamumas.